【医药健康】艾滋病实验室检测新技术精选文档.ppt

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1、目的方法监测感染检测抗体检测(EIA/PA/RT)检测策略窗口期检测抗原检测,核酸检测pooling RT-PCR诊断感染诊断WB检测策略近期感染诊断STARSH方法治疗评价CD4/CD8测定流氏仪检测显微镜法病毒载量测定NASBA,b-DNA,RT-PCR耐药性检测基因型,表型,窗口期检测抗原检测核酸检测Pooling RT-PCR方法,窗口期的范围定义依据时间长度抗体检测3-6个月新的EIA试剂可以缩短至14-21天抗原检测1-2周第四代抗原抗体检测试剂可以使窗口期比第三代抗体试剂缩短4-5天核酸检测5-11天,抗原检测P24试剂盒,第四代EIA试剂(1997年在欧洲正式批准用于血液筛查)

2、每一个HIV粒子含有1200个p24抗原分子=0.048fg每一个HIV粒子含有2个RNA拷贝,如果病毒载量测定结果为400拷贝/ml,即等于有2.4X105个分子=0.0096pg p24抗原/ml,800拷贝/ml,即等于有4.8X105个分子=0.019pg p24抗原/ml目前最敏感的抗原检测试剂盒的检测阈值为0.01pg/ml抗原在血清抗体阳转前2-18天既可以检测到,样本(血清/浆)中的p24抗原包括游离的抗原和病毒粒子中的抗原EIA测定的抗原浓度(F):病毒RNA拷贝数推算的抗原浓度(A)=0.16:2900样本号EIA(Cutoff)EIA(pg/ml)RNA拷贝/mlp24p

3、g/mlF/A13.1 0.1 1,4000.033.124.7 0.16 37000.091.8345 1.5 11000.03564320 11 800001.95.6568 2.3 400000.962.4622 0.73 1900004.50.16样本经过预处理,破碎病毒粒子后将有利于p24抗原的检测,病毒RNA检测第一次病毒学症高峰时间大约在感染后4-11天病毒RNA检测方法:NASBA,RT-PCR,b-DNA在高度怀疑有原发感染时,且经抗体检测之后抗体检测阴性或不确定,有高危行为史或暴露史,特别是伴有相应的临床表现时,用核酸检测进行辅助诊断。早期诊断应用:个体检测、血液筛查、性病

4、门诊病人筛查、PMTCT,Pooling RT-PCR由于核酸检测的成本很高,方法费时,不可能作为血液筛查的方法,目前在欧洲用pooled血液的方法进行核酸检测,其敏感性取决于pooped样本大小及检测的预值(用特殊的RT-PCR试剂盒检测,以提高敏感性)。可能低于抗原检测,但在个体献血者核酸检测可能比抗原检测更具成本效益。,1473份样本处理过程,新近感染检测抗体检测EIA,PA,RTWB试验阴性抗原检测/核酸检测阳性STARSH新近感染,STARHS法1998年开始,美国Janssen RS等专家推出一种新的实验室方法用于新感染病例的监测,即敏感的酶联免疫检测法(3A11)和非敏感的酶联免

5、疫检测法(3A11LS):原理:利用感染早期抗体滴度低的特征,以敏感ELISA试剂(3A11)和非敏感ELISA试剂(3A11-LS)对经过一定程度稀释的同一样品进行测定,3A11检测呈阳性而3A11LS检测呈阴性反应者为新发感染,与以往感染的病例区分开来,可以确切地估测新感染人数。近几年,该方法已在一些国家得到了应用,为这些国家制定艾滋病预防控制策略提供了准确和重要的技术支持。,检测新发或新近HIV感染的目的,l无须耗时并昂贵的前瞻性队列研究来识别早期感染。l由单一的患病样本来估计人群发病率。l以新发感染的个体为研究或干预对象。l识别早期感染以进行早期治疗和临床关怀l评估预防措施和目标l监测

6、亚型和药物抵抗株的传播l找出适合疫苗实验的高危人群,TARHS:新发HIV血清转换的血清检测运算法则,暴露 HIV+AIDS(1)敏感性试验+(2)STARHS试验 _+在同一时间应用两种不同试验分析血样来检测新发感染(1)敏感性试验(EIA)血清转换早期即可出现阳性(2)非敏感性试验(改调的EIA:STARHS)血清转换晚期才可出现阳性新发感染血清转换=EIA+&STARHS-,STARHS试验的窗口期,暴露 EIA+Detuned EIA+AIDS 窗口期=从EIA+到detuned的EIA+之间的时间 在血清转换者有所不同,依赖于HIV的亚型和试验 Organo Tekniaka,对亚型

7、B,估计值为:90 3.3个月 75 4.0 50 5.1 25 6.4 10 8.2,STARHS的应用条件,非AIDS病人AIDS病人有很低的抗体水平,象血清阳转非HAART治疗HAART治疗病人有很低的抗体水平,象血清阳转,抗体检测策略监测:初筛-复合-确认策略 EIA-EIA替代策略诊断:初筛-复合-确认策略 EIA-EIA-PA/RT替代策略(VCT),WHO和UNAIDS推荐的利用几种快速检测方法,在HIV流行率不同的地区针对不同的目的而进行的HIV诊断方法目的 流行率 策略血液筛查 任何情况下 1监测 10 110 2诊断 征兆/症状 30 1 30 2诊断 症状 10 2 10

8、 3策略1:用一种筛选试剂。出现阳性反应时可被认为是HIV阳性。策略2:用两种筛选试剂。如果第一次检测出现阳性反应则用第二种试剂重复,两种试剂检测结果均出现阳性反应时可被认为是HIV阳性。策略3:用三种筛选试剂。三种试剂检测结果均为阳性时才可被认为是HIV阳性。,诊断替代策略1、HIV感染高流行地区的高危人群2、EIA-1+EIA-2+,且2次检测S/CO大于等于63、在2检测结果的基础上+高特异性试剂检测+,衷心感谢参与本课题的研究人员和研究生参比室工作人员:强来英,肖瑶,张桂云,裴丽健,张辉研究生/进修生:张棋,左合拉,刘波,冯基刚,西医学是最近三四百年来建立在解剖学、生物学及现代科学技术

9、基础上、发展起来的一门以“解剖人、肉体人”为概念的、新兴的现代医学科学理论体系。主要采用科学实验方法，从宏观到微观，直至目前的分子基因层次水平，发展极为迅速，超过其它任何一门医学科学，成为世界医学史上的主流。可见中西医学，一个是以“功能人”为概念的独特的哲学医学理论体系，一个是以“解剖人、肉体人”为概念的新兴的现代医学科学理论体系，二者都不是以完整人为研究对象的科学，从理论讲二者都不是科学的，势必影响各自发展。事实也证明这一切，中医长期停滞不前、疗效也不确实。西医尽管发展到目前的基因分子层次，但疾病发病率居高不下，对绝大部分疾病发病原因认识不清、发病机理弄不明白，治疗受到制约，在小小SARS、

10、禽流感面前竟束手无策，在糖尿病、癌症、心脑血管疾病、尿毒症等相当多疾病面前更是不得不求助或借助中医治疗。一个是疗效不确实，一个是有些甚至相当多疾病无法治疗，这就是中西医学结合的缘由。然而，由于二者是两套理论、两股道上跑的车，风马牛不相及，从理论上讲就没有结合的可能，只是形式上的融合罢了。故出现西医对治疗不了的疾病只好求助中医，而中医则往往采用西医诊断中医治疗，以及中西治疗法一块用的局面。至于循证医学、比较医学、后现代医学、行为医学等所谓“医学”，都称不上一门独立的医学科学，关于这一点在灵魂医学有关章节中将有相关点评。现今医学分为传统医学、基于“生物-医学模式”近代发展起来的西医，20世纪西医又

11、发展到“社会-心理-生物医学”（df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr）或综合医学模式，后基因组时代系统生物学的兴起，（45传染病q566丙肝964jo乙肝28jgsx甲肝gh）形成了系统医学在全球的迅速发展，成为继传统医学、西医学之后中、西医学汇通的未来医学。当代中国医学类专业比较优秀的学校有北京大学、（4f肿瘤fbb癌症yuw3胃癌d65io肠癌.f2tr肺癌65ff）华中科技大学、郑州大学等学校。（df肺25s血液f369血小板t5172红血球gdf55m白血球fd2）中医即中国传统医药学，是形成于数千年前的中国，是建立在人们与疾病长期斗争的经验总结及阴阳五行、八纲脏腑辨证基础上

12、，运用朴素辩证法及思辨推理方法，认识机体、自然、疾病三者关系，发展起来的（45传染病q566丙肝964jo乙肝28jgsx甲肝gh）一门以“功能人”包括功能脏器为概念的独特的医学哲学理论体系。（df4肺炎88gdg青霉素d25f肝炎df6）在治疗上，除了药物外，还有针灸、推拿气功、（df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr）耳针等特殊疗法，它是世界传统医学中最完善的一种医学理论体系。它为人类尤其为中国人民（4f肿瘤fbb癌症yuw3胃癌d65io肠癌.f2tr肺癌65ff）健康和民族繁衍做出了巨大贡献。（df肺25s血液f369血小板t5172红血球gdf55m白血球fd2）西医学是最近

13、三四百年来建立在解剖学、生物学及现代科学技术基础上、发展起来的一门以“解剖人、肉体人”为概念的、新兴的现代医学科学理论体系。主要采用科学实验方法，从宏观到微观，直至目前的分子基因层次水平，发展极为迅速，超过其它任何一门医学科学，成为世界医学史上的主流。可见中西医学，一个是以“功能人”为概念的独特的哲学医学理论体系，一个是以“解剖人、肉体人”为概念的新兴的现代医学科学理论体系，二者都不是以完整人为研究对象的科学，从理论讲二者都不是科学的，势必影响各自发展。事实也证明这一切，（df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr）中医长期停滞不前、（df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr）疗效也

14、不确实。西医尽管发展到目前的基因分子层次，但疾病发病率居高不下，对绝大部分疾病发病原因认识不清、发病机理弄不明白，治疗受到制约，在小小SARS、禽流感面前竟束手无策，在糖尿病、癌症、心脑血管疾病、尿毒症等相当多疾病面前更是不得不求助或借助中医治疗。一个是疗效不确实，一个是有些甚至相当多疾病无法治疗，这就是中西医学结合的缘由。然而，由于二者是两套理论、两股道上跑的车（df肺25s血液f369血小板t5172红血球gdf55m白血球fd2），风马牛不相及，从理论上讲就没有结合的可能，只是形式上的融合罢了。（df4肺炎88gdg青霉素d25f肝炎df6）故出现西医对治疗不了的疾病只好求助中医，而中医

15、则往往采用西医诊断中医治疗，以及中西治疗法一块用的局面。（df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr）至于（45传染病q566丙肝964jo乙肝28jgsx甲肝gh）循证医学、比较医学、后现代医学、行为医学等所谓“医学”，都称不上一门独立的医学科学，关于这一点在灵魂医学有关章节中将有相关点评。总之，目前以中西医学为主的世界各种医学科学都存在不完整性的瑕疵，即都是以不完整的人为研究对象的医学科学，故不能解决目前存在于中西医学甚至人文社会科学史上一切疑难模糊问题，成为阻碍医学科学前进的羁绊。的确，要解决目前存在于中西医学甚至人文社会科学上一切疑难模糊问题，显然已完全超出了中（df肺25s血液f

16、369血小板t5172红血球gdf55m白血球fd2）西医学所涉及的范畴，我们必须跳出中西医学的理论框架，建立起一个新的医学理论体系-东方医学和西方医学（即西医）的融合形成现代系统医学。该体系所涉及的一切问题不管从广度上，还是从深度上，（df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr）都应该远远超过现有的中西医学理论，并将现有中西医学理论纳入自己的理论框架范围之内。为了肩负起这一历史使命，原创人生、医学理论体系（4f肿瘤fbb癌症yuw3胃癌d65io肠癌.f2tr肺癌65ff）灵魂医学 soul medicine应运而生，她不但从宏观上或战略上圆满解释并解决了存在于人类医学及人文社会科学史上

17、的一切疑难模糊问题，而且还能够使人们得以启迪人生（45传染病q566丙肝964jo乙肝28jgsx甲肝gh），不得不重新认识人类自身、不得不重新认识人类赖以生存的这个多维世界。（df4肺炎88gdg青霉素d25f肝炎df6）医学化验医学定义（medicine），是处理人健康定义中人的生理处于良好状态相关问题的一种科学，以治疗预防生理疾病和提高人体生理机体健康为目的（df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr）狭义的医学只（df肺25s血液f369血小板t5172红血球gdf55m白血球fd2）是疾病的治疗和机体有效功能的极限恢复，广义的医学还包括中国养生学和由此衍生的西方的营养学。现在世界

18、上医学主要有西方微观西医学和东方宏观中医学两大系统体系。（45传染病q566丙肝964jo乙肝28jgsx甲肝gh）医学的科学性在与应用基础医学的理论不断完善和实践的验证，（df4肺炎88gdg青霉素d25f肝炎df6）例如生化、生理、微生物学、解剖、病理学、药理学、统计学、流行病学，中医学及中医技能等，来治疗疾病与促进健康。虽然东西方由于思维方式的不同导致研究人体健康与外界联系及病理机制的宏观微观顺序不同，但在不远的将来中西医实践的丰富经验的积累和理论的（df肺25s血液f369血小板t5172红血球gdf55m白血球fd2）形成必将诞生新的医学-人类医学。不同于现代医学，（df高血压958

19、心脏病983u6糖尿病87fr）不同于传统中医，金水医学诞生了，金水医学是以驱除病理，恢复生理为主张的全新医学，走出了人类医学的误区，（4f肿瘤fbb癌症yuw3胃癌d65io肠癌.f2tr肺癌65ff）治疗疾病的特色鲜明，不论是任何疾病都能做到从危为安，由重到轻的恢复办法。金水医学认识到人体是生命体，（df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr）生命体有自己的强大的生理自我愈合功能，帮助生命体恢复自主作用才是治疗疾病的根本。针对当今现代文明病，现代疑难病，现代慢性病，亚健康，一体多病，取得了巨大的成功，治疗法则为“胃肠洁，气血流，玄府开，营卫昌”人生命体运动符合自然节律，最终达到人体生理

20、增强，消灭疾病的目的。编辑本段医学的分类 医学研究医学可分为现代医学（df肺25s血液f369血小板t5172红血球gdf55m白血球fd2）（即通常说的西医学）和传统医学（包括中医学、藏医学、蒙医学等）多种医学体系。（45传染病q566丙肝964jo乙肝28jgsx甲肝gh）不同地区和民族都有相应的一些医学体系，宗旨和目的不相同。印度传统医学系统也被认为很发达。（df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr）研究领域大方向包括基础医学、临床医学、检验医学、预防医学、保健医学、康复医学等。（df4肺炎88gdg青霉素d25f肝炎df6）基础医学包括：医学生物数学,医学生物化学,医学生物物理学

21、,人体解剖学,医学细胞生物学,人体生理学,人体组织学,人体胚胎学,医学遗传学,人体免疫学,医学寄生虫学,医学微生物学,医学病毒学,人体病理学,病理生理学,药理学,医学实验动物学,医学心理学,生物医学工程学,医学信息学,急救学,护病学,新中心法则。临床医学包括：临床诊断学 实验诊断学.影像诊断学+放射诊断学+超声诊断学（45传染病q566丙肝964jo乙肝28jgsx甲肝gh）+核医诊断学*临床治疗学 职能治疗学 化学治疗学 生物治疗学 血液治疗学 组织器官治疗学 饮食治疗学 物理治疗学（4f肿瘤fbb癌症yuw3胃癌d65io肠癌.f2tr肺癌65ff）语言治疗学 心理治疗学 内科学 外科学

22、泌尿科学 妇产科学（df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr）儿科学 老年医学 眼科学 耳鼻喉科学 口腔医学 传染病学 皮肤医学 神经医学 精神病学 肿瘤医学 急诊医学 麻醉学 护理学 家庭医学 性医学 临终关怀学（df肺25s血液f369血小板t5172红血球gdf55m白血球fd2）康复医学 保健医学 听力学。编辑本段医学的起源 手术治疗中、西医学的起源大致相同。主要包括：救护、求食的本能行为。如动物受伤会舐其伤口、遇热会避入水中，人与动物一样有着本能救护。（df4肺炎88gdg青霉素d25f肝炎df6）人类的求食本能在寻找食物时，逐渐发现了葱、姜、蒜、粳米、薏米等虽为食物（45传染

23、病q566丙肝964jo乙肝28jgsx甲肝gh）或调味品，却具有治病作用；生活经验创造了医学。先古人类通过劳动制造出利器，从而产生了砭石、骨针等医疗器具，逐渐掌握了运用工具治疗疾病的经验。与此同时，人们发现活动肢体（df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr）可以舒筋活络，强身健体，“导引术”、“五禽戏”的形成，也是古代人们积累生活经验后产生的保健养生观；医、巫的合与分。由于原始人受制于智力尚未开化，对自然界的变化以及宇宙间的一切反常现象，心存恐惧，难以做科学、合理的解释，（df肺25s血液f369血小板t5172红血球gdf55m白血球fd2）因而误以为有超自然的力量主宰其中。故巫、医

24、合流曾是中、西医学共有的一段历史。在中医学的历史进程中，“祝由”术沿袭数千年，属于元明临床“十三”科之一，但以医学为目的的解剖可追溯到公元11年（4f肿瘤fbb癌症yuw3胃癌d65io肠癌.f2tr肺癌65ff）(西汉王莽新朝三年)，是中国古老的实证医学萌芽。由于儒、释、道三教合流所形成的中国文化格局，“重道轻器”（45传染病q566丙肝964jo乙肝28jgsx甲肝gh）衍生出的务虚倾向，重体悟而疏实证，必然缺少逻辑推理，致使中国的实证医学成就在日后难以与西方医学同日而语。古埃及医师运用念咒、画符和草药治病，前二者就是巫医。（df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr）西医在古希腊时期

25、就开始医巫分家，亚里士多德曾详细描述了动物的内脏和器官，古希腊医学最高成就的代表人物希波克拉底将唯物主义哲学运用于医学之中，在论圣病中说：“被人们称为神圣的疾病(指癫痫和一些精神患者)，在我看来一点也不比其他病症更神、更圣，与其他任何疾病一样起源于自然的原因。只因这些病症状奇异，而人们对它们又一无所知，充满疑惑，故而将其原因和性质归之于神灵。”亚里士多德所创立的唯物主义医学体系，加快了医学科学化的进程；（df4肺炎88gdg青霉素d25f肝炎df6）（df肺25s血液f369血小板t5172红血球gdf55m白血球fd2）轴心时代中、西医学的峰巅之作。雅斯贝而斯曾说：“如果历史有一个轴心，那么我们就必须将这轴心作为一系列对全部人类都有意义的事件，发生于公元前800至200年间的这种精神历程似乎构成了这样一个轴心。,医学健康系列精品课件,本文档下载后可以修改编辑，欢迎下载收藏。,