正常人群NK细胞上FcγRIIIa基因多态性分析(论文资料)课件.ppt

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1、1,正常人群NK细胞上FcRIIIa基因多态性分析,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,内容,背景目的方法结果讨论结论,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,相关帮助,需要相关抗体试剂的可以访问Fantibody全球抗体搜索引擎:http:/fantibody全球抗体搜索引擎是一个供公共检索的抗体数据库，其抗体信息数据来源于全球范围的研究机构与商业公司。该引擎由商品化抗体数据库与抗体应用评价数据库两部分组成，以帮助研究者更高效的寻找并评估该抗体的性能。全球抗体搜索引擎是继基因与蛋白数据库之后更为复杂的

2、应用型检索平台需要相关的实验室仪器设备、生物试剂、医疗器械、制药设备、医药原料、体外诊断试剂及耗材与技术服务信息的，可以访问探生网http:/进行咨询，期待您的加入,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,背景,肿瘤是严重危害人类生命健康的一类疾病，攻克肿瘤一直是我们迫切希望解决的问题。肿瘤特异性单克隆抗体出现给肿瘤治疗带来了新的希望,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,背景,抗体依赖细胞介导的细胞毒性(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC

3、)被证明是单克隆抗体临床治疗肿瘤的重要机制和手段。IgG型抗体首先通过抗原结合部位与靶细胞（肿瘤细胞）结合，再由效应细胞上的FcR识别其Fc段，介导ADCC作用,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,背景,FcR分为三类：FcRI(CD64)、FcRII(CD32)以及FcRIII(CD16)。FcRIII又分为两类：FcRa是一种跨膜糖蛋白，表达于单核细胞、吞噬细胞、NK细胞及选择性T细胞上；FcRb是一种糖肌醇磷脂蛋白(GPI-锚蛋白)，只表达于中性粒细胞和IFN诱导的嗜酸性粒细胞上,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引

4、擎，您身边的抗体专家!,背景,Ravetch等最先报道在FcRIIIa近膜Ig样区核苷酸位点559处存在多态性位点。在核苷酸位点559处核苷酸发生鸟嘌呤(G)一胸腺嘧啶(T)点突变后，由其转录合成的受体蛋白内第158位缬氨酸(valine，V)被苯丙氨酸(phenylalanine，F)所取代。这导致FcRIIIa有三种基因型：FcRIIIla-158F/F，FcRIIIa-158V/V及FcRIIIa-158V/F,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,背景,诸多文献报道FcRIIIa基因多态性与肿瘤病人预后相关。于单克隆抗体治疗的肿瘤病人中，F

5、cRIIIa-158V/V的病人预后较V/F及F/F基因型病人好。这可能与其跟治疗性单克隆抗体的Fc段结合相关，由不同的亲和力导致 治疗性单克隆抗体介导的ADCC强度不同。,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,目的,确定FcRIIIa的基因多态性在正常及肿瘤人群中的分布，以了解人群对肿瘤特异性单抗可能疗效反应的分布规律。,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,方法,标本来源 正常健康人群外周血：用含肝素抗凝管收集健康志愿者外周血，标本量为23ml，共43份。,本文由探生科技技术人员提供,Fantibo

6、dy全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,方法,技术路线,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,方法,1.按说明书提取外周血基因组DNA。2.nest-PCR外侧反应经35个PCR循环(95 45S,64 45S,72 30S)，扩增产物长度248 bp；内侧反应经35个PCR循环(95 45S,65 45S,72 30S)，扩增产物长度94 bp。3.Nla内切酶酶切 8ul PCR产物于37酶切过夜。酶切产物经15PAGE电泳分离，银染显色。,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,结果,本文由探生科

7、技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,结果,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,结果,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,讨论,本研究检测结果显示在健康人群中FcRIIIa的基因多态性以V/F型最多，而V/V型次之，F/F型最少，这与国内文献报道（47例健康者中V/F型38例，V/V型7例，F/F型2例）一致。本研究中未检测出F/F型，可能与样本量较少有关。,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,讨论,但本研究与国外报道

8、的基因型分布（以V/F型及F/F型较多，而V/V型最少）有差异，这可能与地域及种族差异，遗传环境等因素有关。,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,讨论,FcRIIIa三种基因型的NK细胞与IgG的亲和力顺序为V/VV/FF/F。治疗性单克隆抗体介导的不同基因型的NK细胞的ADCC强度不同，对肿瘤细胞的杀伤存在差异，从而取得不同的预后。我国以FcRIIIa-158F/F分布最少，可推测出大部分人对单抗治疗的预后较好。,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,结论,FcRIIIa基因多态性在中国健康人群中的分布以FcRIIIa-158V/F最多，FcRIIIa-158V/V次之，FcRIIIa-158F/F最少。,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,