实验7 探究影响酶活性的因素.doc
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1、实验7酶经典实验(补充)实例1(高效性):比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率P78一实验原理:鲜肝提取液中含有过氧化氢酶,过氧化氢酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。经计算,质量分数为3.5%的FeCl3溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液相比,每滴FeCl3溶液中的Fe3+数,大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的25万倍。二、方法步骤:步骤注意问题解释取4支洁净试管,编号,分别加入2mL H2O2溶液1.不让H2O2接触皮肤1.H2O2有一定的腐蚀性将2号试管放在900C左右的水浴中加热,观察气泡冒出情况,与1号对照2号试管比1号试管放出的气泡多。这一现象说明加热能促进过氧化氢的分解
2、,提高反应速率。向3号、4号试管内分别滴入2滴FeCl3溶液和2滴肝脏研磨液,观察气泡产生情况2.不可用同一支滴管3.肝脏研磨液必须是新鲜的4.肝脏在制成研磨液2.由于酶具有高效性,若滴入的FeCl3溶液中混有少量的过氧化氢酶,会影响实验准确性3.因为过氧化氢酶是蛋白质,放置过久,可受细菌作用而分解,使肝脏组织中酶分子数减少,活性降低4.研磨可破坏肝细胞结构,使细胞内的酶释放出来,增加酶与底物的接触面积2-3min后,将点燃的卫生香分别放入3号和4号试管内液面的上方,观察复燃情况5.放卫生香时,动作要快,不要插到气泡中5.现象:3号试管产生气泡稍多而小,冒泡时间长,卫生香复燃;4号试管产生气泡
3、极多而大,冒泡时间短,卫生香猛烈复燃(避免卫生香因潮湿而熄灭)实例2:下面是验证唾液淀粉酶专一性的实验设计。已知: 滴加斐林试剂水浴后若出现砖红色沉淀,证明还原糖的存在; 唾液淀粉酶将淀粉水解成麦芽糖,但不能水解蔗糖成为葡萄糖和果糖。麦芽糖、果糖、葡萄糖具有还原性,淀粉和蔗糖不具有还原性。加入物质试管号12341%淀粉溶液(滴)442%蔗糖溶液(滴)44稀释的唾液(滴)1蒸馏水(滴)11恒温处理15min37373737斐林试剂(滴)1111沸水浴(min)3333砖红色沉淀+ 表中的3号试管和4号试管各留下了一处空白,你认为3号试管的空白处的处理应是_,4号试管的空白处的处理应是_,其理由是
4、 _ 。 实验中1号和2号试管起_作用。 实验结果说明_号试管内有还原性糖的存在。 本实验中保持试管温度为37的理由是_。答 加入1滴唾液;不加水;保证每试管有等量的物质,从而证明实验结果的差异是由唾液淀粉酶的作用引起的 对照 3 唾液淀粉酶在37左右时催化效率最高实验7探究影响酶活性的因素(B1C5S1,P78、P83)一实验目的:1探究不同温度和PH对过氧化氢酶活性的影响。 2培养实验设计能力。二、实验假设:1.不同温度会影响酶的活性; 2.不同PH会影响酶的活性。探究性实验程序 1.提出问题2.作出假设3.设计实验(包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格)4.实施
5、实验分析与结论表达与交流。实例3:温度对酶活性的影响一)实验目的:1初步学会探索温度对酶活性的影响的方法。2探索淀粉酶在不同温度下催化淀粉水解的情况。二)实验原理:1淀粉遇碘后,形成紫蓝色的复合物。2淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖(淀粉水解过程中,不同阶段的中间产物遇碘后,会呈现红褐色或红棕色。)麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。注:市售a-淀粉酶的最适温度约600C操作注意问题解释取3支试管,编上号,然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液另取3支试管,编上号,然后分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成3组,分别放入热水(约600C)、沸水和冰块中,维持各自的温度5min在
6、同一组不能用不同温度处理淀粉溶液和酶溶液防止混合时,由于两种溶液的温度不同而使混合后温度发生变化,反应温度不是操作者所要控制的温度,影响实验结果。分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中,摇匀后,维持各自的温度5min保持各自温度时间不能太短淀粉酶催化淀粉水解需要一定时间在3支试管中各滴入1-2滴碘液,摇匀后观察这3支试管中溶液颜色变化并记录碘液不能滴加太多防止影响实验现象的观察用表格的形式显示实验步骤序号加入试剂或处理方法试管ABCabc1可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL/新鲜淀粉酶溶液/1mL1mL1mL2保温5min600C1000C00C600C1000C00C3将a液加入到A试管,
7、b液加入到B试管,c液加入到C试管中,摇匀4保温5min600C1000C00C5滴入碘液,摇匀2滴2滴2滴6观察现象并记录实例4:PH值对酶活性的影响操作步骤:用表格开式显示实验步骤:(注意操作顺序不能错)序号加入试剂或处理方法试管1231注入新鲜的淀粉酶溶液1mL1mL1mL2注入蒸馏水1mL/3注入氢氧化钠溶液/1mL/4注入盐酸/1mL5注入可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL6600C水浴保温5min7加入斐林试剂,边加边振荡2mL2mL2mL8水浴加热煮沸1min9观察3支试管中溶液颜色变化变记录疑问?1.在淀粉酶分解淀粉和蔗糖的实验中鉴定试剂只能用斐林试剂而不能用碘液?1.淀粉、蔗糖
8、和斐林试剂沸水浴都无砖红色沉淀,淀粉、蔗糖的水解产物和斐林试剂沸水浴都有砖红色沉淀,所以斐林试剂检测,只要有砖红色沉淀就是发生水解的试管。所以用斐林试剂检测既能确定淀粉有无水解,又能确定蔗糖有无水解。2.因蔗糖和蔗糖的水解产物和碘液都不变蓝,所以用碘液不能确定蔗糖有无水解。2.在pH对酶活性影响实验中鉴定试剂只能用斐林试剂而不能用碘液?因在碘和碱反应生成NaIO,这样影响了对实验结果的观察。3.在温度影响酶的实验中鉴定试剂只能用碘液而不能用斐林试剂?因为用斐林试剂需水浴加热,两次加热,不是单变量了,也会对酶的活性产生影响,使实验验结果不可靠实例5:离子对酶活性的影响(10海南卷)22(12分)
9、为探究NaCl和CuSO4对唾液淀粉酶活性的影响,某同学进行了实验,实验步骤和结果见表。请回答:试管编号实验步骤12341%NaCl溶液(mL)11% CuSO4溶液(mL)11% Na2SO4溶液(mL)1蒸馏水(mL)1pH6.8缓冲液(mL)11111%淀粉溶液(mL)1111唾液淀粉酶溶液(mL)1111各试管放入37恒温水浴保温适宜时间取出试管,加入1%碘溶液0.1mL观察结果无色深蓝色浅蓝色(1)实验中加入缓冲液的作用是。(2)分析实验结果可知:对酶活性有影响的离子是,其中对酶活性有抑制作用的离子是,对酶活性有促进作用的离子是。(3)该实验中设置4号试管的目的是;设置3号试管的目的
10、是。(4)上述实验中若用斐林试剂代替碘溶液进行检测,14号试管中的颜色依次是、。根据上述实验结果,在操作过程中,保温之前不能加入斐林试剂,其原因是。22(12分)(1)维持反应液中pH的稳定(其他合理答案也给分)(1分)(2)Cl-和Cu2+(2分)Cu2+(1分)Cl-(1分)(3)对照确定Na+ 和SO42对唾液淀粉酶催化活性是否有影响(其他合理答案也给分)(每空1分,共2分)(4)深砖红色无砖红色(或蓝色)浅砖红色浅砖红色(其他合理答案也给分)斐林试剂中有Cu2+,其可抑制唾液淀粉酶的活性(每空1分,共5分)练习(评价修正型)1. (07山东淄博)(9分)甲、乙、丙三位同学,围绕酶的特性
11、,设计了如下实验,请运用你所学的知识,指出三位同学实验设计中存在的问题并提出修正方案。(示例:某同学做唾液淀粉酶水解淀粉的实验:取一支试管,先加入2mL淀粉糊,然后再加入1mL唾液,放在水温37的烧杯内,一段时间后,向试管内滴加2滴碘液,结果不变蓝,说明唾液淀粉酶能够水解淀粉。缺乏对照,应再取1支试管,加入1mL清水代替唾液,基余条件都相同,起对照作用)(1)甲同学探究酶的高效性:取一支试管,加入2mLH2O2,再加2滴新鲜土豆研磨液,观察到产生大量气泡,用带火星的卫生香检测,卫生香猛烈燃烧,说明酶的催化作用具有高效性。(2分)(2)乙同学探究不同的酶其所需的pH条件不同:取12支试管并编号1
12、12,各加入2mL蛋清液,调节各试管的pH,分别等于112;同时向12支试管内加入胃蛋白酶和胰蛋白酶;放在37左右的大烧杯内一段时间;用双缩脲试剂检验试管中的蛋白质存在情况。(3分)(3)丙同学探究温度影响酶的活性:取6支试管编号,A,A1、B,B1、C,C1。在6支试管中都加入等量的淀粉溶液和等量淀粉酶溶液。A,A1试管放放60水中,B,B1试管放入100水中,C,C1试管放入冰水中,维持5分钟。取出后各加入等量的碘液,观察(4分) 2.(1)乏对照。应再取一支试管,滴加2滴FeCl3溶液,其余条件都相同,观察到产生的气泡较少(2分)(2)存在两个变量。(1分)应在12支试管中,只加胃蛋白酶
13、(胰蛋白酶),再取12支试管,只加胰蛋白酶(胃蛋白酶)(2分)(3)实验步骤混乱。(1分)应取6支试管编号,A,A1、B,B1、C,C1。在A、B、C试管中都加入等量的淀粉溶液中,在A1、B1、C1试管中都加入等量淀粉酶溶液。A,A1试管放入60水中,B,B1试管放入100水中,C,C1试管放入冰水中,维持5分钟。分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液,摇匀后,维持各自温度5分钟。序号项 目试管1试管21新鲜唾液1mL1 mL2可溶性淀粉溶液2 mL2 mL337水浴5min5min41mol/L盐酸1 mL 51mol/L NaOH 1 mL6碘液2滴2滴7结果均不变蓝色2. 某同学为探究
14、pH对酶活性的影响,设计了如下表中的方法步骤。下列评价中不合理的是( )A. 缺少正常pH的对照组 B. 新鲜唾液没有再作稀释 C. 检验结果的试剂选择不恰当 D. 实验操作步骤的安排不合理2.解析A.缺少加蒸馏水对照组;C. 应选用斐林试剂、D.序号4、5应放在2、之前,否则酶会与淀粉先反应。1. (09理综1卷 32)(11分)已知2H2O2=2H2O+O2 , 可以通过观察放映过程中O2的生成速度(即气泡从溶液中释放的速度)来判断H2O2分解反应的速度。请用所给的实验材料和用具设计实验,使其能同时验证过氧化氢酶具有催化作用和高效性。要求写出实验步骤,预测实验结果,得出结论,并回答问题。
15、实验材料与用具:适宜浓度的H2O2溶液,蒸馏水,3.5%FeCL3溶液,0.01%牛过氧化氢酶溶液,恒温水浴锅,试管。 (1)实验步骤:(2)实验结果预测及结论:整个实验中不同处理的试管中O2的释放速度从快到慢依次是 。由此得出的结论是 。(3)如果仅将实验中的恒温水浴改为800C,重做上述实验,O2释放的速度最快的是 ,原因是 。答案:1.(1)取3支试管,各加入等量 且 适量的H2O2溶液,放入37恒温水浴锅中保温适当时间分别向上述3支试管加入等量且适量的蒸馏水、FeCl3溶液和过氧化氢酶溶液观察各管中释放气泡的快慢(2)加酶溶液的试管、加FeCl3溶液的试管、加蒸馏水的试管,酶具有催化作
16、用和高效性(3)加FeCl3溶液的试管1.【解析】该题要同时验证酶具有催化作用和高效性,因此应遵循对照性原则、科学性原则和单一变量原则。将恒温水浴改为80,重做上述实验,由于过氧化氢酶因高温变性而失去了活性,因此释放O2最快的是加FeCl3溶液的试管。第1节降低化学反应活化能的酶(实验与知识相结合)一酶的作用和本质1. (07广州一模)7下列图中,表示有酶催化的反应曲线,表示没有酶催化的反应曲线,E表示酶降低的活化能。正确的图解是2. 下列有关酶的叙述,正确的是() 是有分泌功能细胞产生的 有的从食物获得,有的在体内转化而来 凡是活细胞,都能产生酶 酶几乎都是蛋白质有的酶是蛋白质,有的是固醇
17、酶在代谢中有多种功能酶只是起催化作用 在新陈代谢和生殖发育中起调控作用A B C D3. (07广州)17某种酶是由419个氨基酸形成的蛋白质。科学家利用生物技术做出5种不同长度的该酶的片段,并分别测定其活性如图所示,请分析该酶具有活性的部分最可能是下列哪一片段? A第196号氨基酸到第419号氨基酸 B第1号氨基酸到第43号氨基酸C第44号氨基酸到第196号氨基酸 D第197号氨基酸到第302号氨基酸XYZLMB酶D酶A酶C酶E酶4. 右图是某生物体内合成某种物质的途径的示意图。现将缺乏途径中必须的某种酶的微生物置于含X的培养基中生长,发现微生物体内有大量的M和L,但没有Z。那么控制哪种酶的
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