蔬菜农药残留检测毕业论文.doc

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1、 编号 云南农业职业技术学院毕业论文论文题目 蔬菜农药残留检测 学 生 系 部 畜牧兽医系 系部名称 检测教研室 专业年级 指导教师 职 称 讲师 专 业 2013年 10 月 10 日论蔬菜农药残留检测的发展应用摘要：农业产业化的发展使蔬菜的生产越来越依赖于农药。我国农药在蔬菜中的用量居高不下，而这些物质的不合理使用必将导致蔬菜中的农药残留超标，影响消费者食用安全。农药残留超标也会影响蔬菜的贸易，我国对农药残留问题高度重视，对各种农副产品中农药残留都规定了越来越严格的限量标准。目前农药残留快速检测方法种类繁多，究其原理来说主要分为两大类：生化测定法和色谱检测法。其中生化测定法中的酶抑制率法由

2、于具有快速、灵敏、操作简便、成本低廉等特点，被列为国家推荐标准方法（GB/T 5009.199-2003），已成为对果蔬中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留进行现场快速定性初筛检测的主流技术之一，得到了越来越广泛的应用，本文将对其中快速检测作具体说明关键词：蔬菜 农药 农药残留 检测方法 目录第一章、 蔬菜的认识11.1蔬菜的分类11.2蔬菜的营养11.3蔬菜的其他功能2第二章、蔬菜农药的简介3第三章、蔬菜农药残留检测4第四章、蔬菜农药残留检测方法54.1农药残留的生物检测54.2农药残留的化学检测54.3.农药残留的生化检测54.4.速测法6第五章、 蔬菜农药残留检测引用标准7第六章、 蔬菜农药残

3、留检测具体实验设计8参考文献9第一章、 蔬菜的认识1.1 蔬菜的分类有机蔬菜：有机蔬菜是指来自于有机农业生产体系，根据国际有机农业的生产技术标准生产出来的，经独立的有机食品认证机构认证允许使用有机食品标志的蔬菜。有机蔬菜在整个的生产过程中都必须按照有机农业的生产方式进行，也就是在整个生产过程中必须严格遵循有机食品的生产技术标准，即生产过程中完全不使用农药、化肥、生长调节剂等化学物质，不使用基因工程技术，同时还必须经过独立的有机食品认证机构全过程的质量控制和审查。所以有机蔬菜的生产必须按照有机食品的生产环境质量要求和生产技术规范来生产，以保证它的无污染、低能耗和高质量的特点。绿色蔬菜：按照绿色食

4、品的概念，绿色蔬菜是指遵循可持续发展的原则，在产地生态环境良好的前提下，按照特定的质量标准体系生产，并经专门机构认定，允许使用绿色食品标志的无污染的安全、优质、营养类蔬菜的总称。无公害蔬菜：所谓无公害蔬菜是指蔬菜中有害物质（如农药残留、重金属、亚硝酸盐等）的含量，控制在国家规定的允许范围内，人们食用后对人体健康不造成危害的蔬菜。指产地生态环境清洁，按照特定的技术操作规程生产，将有害物含量控制在规定标准内，并由授权部门审定批准，允许使用无公害标志的食品。适合我国当前的农业生产发展水平和国内消费者的需求，对于多数生产者来说，达到这一要求不是很难。当代农产品生产需要由普通农产品发展到无公害农产品，再

5、发展至绿色食品或有机食品，绿色食品跨接在无公害食品和有机食品之间，无公害食品是绿色食品发展的初级阶段，有机食品是质量更高的绿色食品。1.2蔬菜的营养蔬菜的营养物质主要包含蛋白质、矿物质、维生素等，这些物质的含量越高，蔬菜的营养价值也越高。此外，蔬菜中的水分和膳食纤维的含量也是重要的营养品质指标。 通常，水分含量高、膳食纤维少的蔬菜鲜嫩度较好，其食用价值也较高。但从保健的角度来看，膳食纤维也是一种必不可少的营养素。蔬菜的营养素不可低估，1990年国际粮农组织统计人体必需的维生素C的90%、维生素A的60%均来自蔬菜，可见蔬菜对人类健康的贡献之巨大。此外，蔬菜中还有多种植物化学物质是被公认的对人体

6、健康有益的成分，如类胡萝卜素、二丙烯化合物、甲基硫化合物等，许多蔬菜还含有独特的微量元素，对人体具有特殊的保健功效，如西红柿中的番茄红素、洋葱中的前列腺素等。1.3蔬菜的其他功能食用、美容、瘦身、防癌 （1）蔬菜是人体矿物质的来源。蔬菜中含有的主要矿物质是钙、铁、磷等。如菠菜、芹菜、卷心菜、白菜、胡萝卜等含有丰富的铁盐；洋葱、丝瓜、茄子等到含有较多的磷；绿叶蔬菜含有丰富的钙；海带、紫菜还含有丰富的碘。 （2）中和胃酸。在人体胃中，由于吃肉、米、麦等到食物消化后往往会发生酸性反应，这就需要蔬菜或水果来中和。一般蔬菜和水果属碱性食品，而一般高蛋白食品属酸性食品，多吃蔬菜有利于维持体内酸碱平衡。 （

7、3）其它作用：蔬菜含有丰富的纤维素，有利于促进肠胃蠕动，可以起到促进消化和预防便秘的作用。蔬菜还含有各种芳香油和有机酸，如生姜、大蒜、洋葱、大葱、辣椒、茄香、香菜等都含有各种挥发性芳香物质，使蔬菜又增加了许多特殊的风味。第二章、蔬菜农药简介蔬菜农药可以用来杀灭昆虫、真菌和其他危害蔬菜生长的生物。 最早使用的蔬菜农药有滴滴涕、六六六等，它们能大量消灭害虫。但它们的稳定性好，能在环境中长期存在，并在动植物及人体中不断积累，为此被淘汰。 后来改用有机磷农药，如敌敌畏等，替代最初的农药。 然而它们的毒性太大，对人畜的危害很大。近年来，一批高效低毒的农药出现，现在人们已经找到了具有专一性的农药，即激素类

8、农药。蔬菜农药广义的定义是指用于预防、消灭或者控制危害蔬菜的病、虫、草和其他有害生物以及有目的地调节植物、昆虫生长的化学合成或者来源于生物、其他天然物质的一种物质或者几种物质的混合物及其制剂。 根据原料来源可分为有机农药、无机农药、植物性农药、微生物农药。此外，还有昆虫激素。根据加工剂型可分为粉剂、可湿性粉剂、可溶性粉剂、乳剂、乳油、浓乳剂、乳膏、糊剂、胶体剂、熏烟剂、熏蒸剂、烟雾剂、油剂、颗粒剂和微粒剂等。大多数是液体或固体，少数是气体。最年来，随着人们生活水平的提高，对蔬菜需求量的增加，促使部分菜农增加对农药的食用，蔬菜农药残留问题愈来愈严重。第三章、蔬菜农药残留检测3.1 蔬菜农药残留随

9、着栽培技术的不断进步，蔬菜的生长期已越来越短，而随着环境污染的加剧，蔬菜的病虫害也越来越重，绝大部分蔬菜需要连续多次放药后才能成熟上市。农药污染较重的有叶类蔬菜，其中韭菜、油菜受到的污染比例最大。茄 、果类蔬菜如青椒、番茄等，嫩荚类蔬菜如豆角等，鳞茎类蔬菜如葱、蒜、洋葱等，农药的污染相对较小。但有的比较大。3.2蔬菜农药残留危害农药残留是指农药使用后残存于环境、生物体和食品中的农药母体、衍生物、代谢物、降解物和杂质的总称。造成蔬菜农药残留量超标的主要是一些国家禁止在蔬菜生产中使用的有机磷农药和氨基甲酸酯类农药，如甲胺磷、氧化乐果、甲拌磷、对硫磷、甲基对硫磷等。食用含有大量高毒、剧毒农药残留引起

10、的食物会导致人、畜急性中毒事故。长期食用农药残留超标的农副产品，虽然不会导致急性中毒，但可能引起人和动物的慢性中毒，导致疾病的发生，诱发癌症，甚至影响到下一代。3.3蔬菜农药残留检测随着农业产业化的发展，农产品的生产越来越依赖于农药、抗生素和激素等外源物质。我国农药在蔬菜上的用量居高不下，而这些物质的不合理使用必将导致农产品中的农药残留超标，影响消费者食用安全，严重时会造成消费者致病、发育不正常，甚至直接导致中毒死亡。农药残留超标也会影响蔬菜的贸易。第四章、 蔬菜农药残留检测方法 农药残留检测方法大致可分为三大类：生物测定法、化学分析法、兼生物及化学的免疫分析法和生化检测法。4.1农药残留的生

11、物检测 利用指示生物的生理生化反应来判断农药残留及其污染情况，该方法一般作为引起中毒农产品现场检测。4.2农药残留的化学检测 用于农药残留的化学检测方法有分光光度法、极谱法、原子吸收光谱法、薄层层析法、气相色谱法、液相色谱法、同位素标记法、核磁共振波谱法、色质联用法等，这些分析方法有的灵敏度不高，有的需要昂贵的仪器，还有的需要特殊的设备。4.3农药残留的生化检测 有机磷与氨基甲酸酯农药共为神经系统乙酰胆碱脂酶抑制物，因此可以利用农药靶标酶-乙酰胆用碱酯酶（AChE）受抑制的程度来检测有机磷和氨基甲酸酯类农药。该方法具有快速方便、前处理简单、无需仪器或仪器相对简单，适用于现场的定性和半定量测定，

12、目前已开发出了相应的各种速测卡和速测仪。我国现阶段的农药残留快速检测就是用了该方法，已上升为农业部行业标准，标准号为NY/T448-2001,名称为蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法，但方法只能用于测定有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂，其灵敏度和所使用的酶、显色反应时间和温度密切相关，经酶法检测出阳性后，需用标准仪器检验方法进一步检测，以鉴定残留农药品种及准确残留量。4.3.1农药残留的免疫分析法 有放射性免疫分析、酶免疫分析、多组份分析物免疫分析、免疫传感器分析等，因为免疫法成品试剂盒依赖从国外进口，没有大范围推广使用。4.4速测法 由农药残留生化检测法开发的速测卡法（酶抑制显色纸片法

13、）和速测仪法（酶抑制分光光度法），前者在80年代在省级部门小范围使用过，后被后者取代。目前我省广泛使用农药残留检测方法主要有两大类色谱检测法和速测仪法。色谱检测法用作农残定量分析，可为农药残留执法提供依据，主要分布在省级相关部门，部分地州也具有一定的检测能力。速测仪法只能作农残定性分析，但它具有短时间能够检测大量样本、检测成本低，对于检测人员技术水平要求低，易于在基层推广等特点，是目前我国控制高毒农药残留的一种有效方法，也是目前国内和我省应用最为广泛的农药残留快速检测方法。广泛用于蔬菜、水果生产基地和批发市场等，主要用来防止有机磷和氨基甲酸酯类农药残留严重超标的蔬菜和水果流入市场。 4.4.1

14、有机磷农药和氨基甲酸酯农药的作用机理 有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫神经中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酶的活性，造成神经传导介质乙酰胆碱的积累，影响正常传导，使昆虫中毒致死。如果有有机磷农药存在，有机磷农药就与胆碱酯梅结合，胆碱酯酶就不能分解乙酰胆碱为乙酸和胆碱，造成乙酰胆碱在神经肌接头和体内其它部位的过量积聚，引起一系列神经中毒症状。4.4.2乙酰胆碱酯酶抑制法（酶法）的作用原理 从生物化学的角度看，有机磷农药和氨基甲酸酯农药与乙酰胆碱是竞争性作用于胆碱酯酶的，即胆碱酯酶可以与乙酰胆碱结合，催化乙酰胆碱生成乙酰和胆碱，另一方面，如果胆碱酯酶与有机磷农药结合，就阻断了反应的进行。根据这个原理

15、，就可以利用胆碱酯酶的催化反应的抑制法，设计一种通过颜色变化的直观的检测方法，来快速检测有机磷农药和氨基甲酸酯农药的残留情况。因此，生物化学法（酶法）就是利用某种酶受影响的程度来反映农产品中农药残留量。 4.4.3速测仪法（酶抑制分光光度法）方法原理 乙酰胆碱酯酶水解后，水解产物可与显色剂反应产生颜色，有机磷和氨基甲酸酯类农药可以抑制乙酰胆碱酯酶的活性，使这种酶不能被水解，从而无显色反应。在溶液中加入乙酰胆碱酯酶和显色剂，用此判断有机磷和氨基甲酸酯类农药残留是否存在。在溶液中反应后，用分光光度计测定吸光值随时间的变化，计算出抑制率，以此判断蔬菜中含有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的情况。具体的检测

16、步骤为：4.4.4速测仪法（酶抑制分光光度法）使用过程中应注意的几个问题 1、速测仪法的优缺点： 优点：在于简单方便，快捷、成本低廉。整个检测过程只需30分钟左右，它可以作为传统仪器分析方法的有益补充，针对市场、农场蔬菜农药残留量进行快速筛选监测，保证上市蔬菜食用的相对安全性。缺点：酶试剂易失活，导致反应不稳定，检测结果误差较大，重复性不好，实际应用中的确认率大约为60%70%左右；存在检测盲区，只能检测有机磷和氨基甲酸酯两类农药，不能检测有机氯类、菊酯和其它类别的剧毒农药；不适合检测葱蒜类、香菜、韭菜、番茄、胡萝卜、茭白、蘑菇、花椒等14种容易出现假阳性的农产品；需要对检测人员进行专门培训，

17、否则将会对出现的问题无法正确处理或判断，得出错误的结果。 2、速测仪法（酶抑制分光光度法）使用过程中应注意的几个问题 2.1检测室温度在20-30之间时，使用改进后的酶，此时不用放在3738保温箱中培养，可以直接在室温下培养，22左右培养20分钟，25以上培养15分钟，一旦室温低于20，必须进3738保温箱培养。 2.2上表步骤中，加入提取试剂混合后不用倒出上层清液，直接在原器皿中静置3-5分钟。 2.3上表步骤中，用圆底小试管代替仪器配置的平底小试管，方便在样本混合器上混合。2.4上表到步骤中，于待测液中加入底物混合后，要快速转移到比色杯中进行比色，否则容易影响检测结果。 2.5速测仪法是使

18、用分光光度计测定待测液吸光值随时间的变化而计算检测结果的，因此保持比色杯的清洁也是一个减少检测误差的环节。经摸索，我们发现用热水浸泡和用洗衣粉清洗比色杯比较容易洗干净。第五章、蔬菜农药残留检测引用标准 本标准引用下列标准，下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T5009.38-1996 蔬菜中多菌灵残留量的测定GB/T14970-1994 蔬菜中噻嗪酮残留量的测定GB/T14973-1994 蔬菜中粉锈宁残留量的测定GB/T16340-1996 蔬菜中灭幼脲残留量

19、的测定GB/T17331-1998 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药多种残留量的测定GB/T17332-1998 蔬菜中有机氯和拟除虫菊酯类农药多种残留量的测定第六章、蔬菜农药残留检测具实验设计实验目的:对本论文中的快速检测方法做进一步实际认识测定原理：利用乙酰胆碱酯酶对在有机磷或氨基甲酸酯类具有高度的敏感而引起的变化来测定蔬菜中是否具有超量的有机磷或氨基甲酸酯类农药残留。检测材料：农药速测卡。检测步骤： a）叶菜类表面农药残留的检测1）用超声波清洗器或干净的纸和水清洗菜叶上的灰尘和杂物。2）在洗净的菜叶上滴2滴洗脱液，用另一片菜叶在滴液处轻轻磨擦。3）取一片速测卡，将涂有洗脱液的菜叶上出的菜汁

20、轻轻地涂在白色药片上。静置10min，使农药与白色药片反应。4）将速测卡向内对折，用手指捏紧，使白色药片和红色药片紧密接触，3min后打开，观察结果。5）白色药片变兰色为阴性反应，说明农药残留符合卫生标准；若白色不变或显淡兰色则为阳性反应，说明有过量农药残留，超过卫生标准规定。备注：本实验为实际操作，实验地为昆明富民县散旦乡，实验操作人为张少姝。参考文献1 张明明.蔬菜安全市场准入审查指南蔬菜.中国标准出版社.2004.1362 蒋要政.农药安全大典、现状及发展对策. 农产品质量安全出版社.2001.58-613 董亮.监督与选择.蔬菜社会出版社.2004.164 蜀黍.蔬菜残留检测与认证.中国计量学院出版社.2006.2205 百度.