绞股蓝皂甙的提取研究毕业论文.doc
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1、绞股蓝皂甙的提取研究摘 要本文主要研究绞股蓝皂甙的提取工艺,采用单因素法及正交设计法,以绞股蓝皂甙提取量为参考指标,对影响绞股蓝皂甙提取工艺的因素进行优选,结果表明,绞股蓝皂甙的最佳提取工艺为:浸提温度为100,浸提时间为1.5h2.0h,浸提溶剂量为50倍。关键词:绞股蓝皂甙;提取工艺;单因素法;正交设计目 录引言. 41材料与方法.41.1实验材料 .41.2实验试剂.51.3实验仪器.51.4绞股蓝皂甙的提取研究.51.5绞股蓝皂甙含量的测定 51.5.1预处理 51.5.2样品液的配制 51.5.3标准液的配制 61.5.4结果计算 61.6 实验分析方法 61.6.1. 单因素法61
2、.6.2. 正交设计法72结果72.1单因素法分析对绞股蓝皂甙得率的影响.72.1.1浸提时间对绞股蓝皂甙得率的影响. 72.1.2浸提温度对绞股蓝皂甙得率的影响 82.1.3浸提溶剂量对绞股蓝皂甙得率的影响. 82.2正交设计法分析绞股蓝皂甙的最适提取条件 .93 讨论 . 103.1绞股蓝干样与鲜样的选择103.2标准品的选择 . 103.3最大波长的选择 . 103.4净化方法的选择 . 103.5绞股蓝皂甙提取温度的选择 103.6 绞股蓝皂甙提取时间的选择 104结论.115参考文献. 12引 言绞股蓝 (Oynostemma pentaphyllum(Thunb)makino) 系
3、葫芦科绞股蓝属多年生草本植物,绞股蓝在长江以南的地区均有分布,野生资源丰富。它的医疗和保健价值已有研究报道。在临床上除普遍用作防癌药物外 ,对白细胞减少症 、高血脂症及胃溃疡、肝炎等均有确切疗效。系统药理学和临床试验也证明:绞股蓝中含有独特的生物活性物质,其主要有效成分为人参皂甙、黄酮类物质、多糖以及多种氨基酸和微量元素1。因此,已有以绞股蓝为原料研制各种保健品的报道。有些产品(如饮料、医药品和食品添加剂等)需要先浸提。绞股蓝总皂苷片作为药品已经上市多年,用于高脂血症,见有心悸气短、胸闷肢麻、眩晕头痛、健忘耳鸣、自汗乏力或脘腹胀满等心脾气虚、痰阻血瘀者。所以绞股蓝皂甙,可以有效的调节儿童生理机
4、能、增强肌体免疫力、清除激素类药物副作用、抗癌、抗疲劳、抗缺氧、抗热、抗衰老、促进细胞新陈代谢,强壮补矗等作用。对大脑中枢有良好的镇静、兴奋双向调节作用及白嫩肌肤等功能且无毒副作用,无三致作用,是目前医药及保健品行业大量需要的原料2-4。为了最大限度提取并保持绞股蓝的有效成分,保证绞股蓝药材资源的充分利用,提高经济效益,本文以绞股蓝为材料,设置浸提温度、浸提时间、浸提溶剂量3个因素,采用单因素法和正交实验设计,研究提取绞股蓝皂甙保健成分的最佳浸提条件,从而使绞股蓝的有效成分能得到充分利用。此工艺提取物质质量好,生产成本低,提取速度快,其中所含的保健因子适合应用于各类保健品中5,6。1 材料与方
5、法1.1实验材料 绞股蓝,浙江缙云1.2实验试剂香兰素冰醋酸溶液:称取5g香兰素,加冰已酸溶解并定溶至100ml高氯酸:分析纯 天津市鑫源化工厂 20060902人参皂甙Re粉:中国药品生物制品检定所PT大孔树脂:南开大学试剂厂人参皂甙Re标准溶液:精确称取人参皂甙Re标准品0.020g,用甲醇溶解并定容至10.0 ml:即每毫升含人参皂甙Re2.0m g冰醋酸:分析纯 国药集团化学试剂有限公司 200709111.3实验仪器双联打浆机,型号 MDJ真空浸提灌,型号SLG-500电热鼓风干燥箱, 型号DGF-5AB20目细度的滤布, 夹层锅, 型号100L恒温水浴锅,浙江海宁新华医疗器械厂,型
6、号HHS-2大孔树脂预柱,江苏省江阴第二医疗器械厂,型号DT 微量进样管,宁波市镇海玻璃仪器厂电子天平,余姚市金诺天平仪器有限公司,型号JT721分光光度计,上海精密科学仪器有限公司,型号16C141.4绞股蓝皂甙的提取 称取1g绞股蓝样品放入高型烧杯加入50ml水盖上表面皿温度控制在100提取过程中每 5 min搅拌1次水提1.5h左右浸提后用滤纸过滤定容至100 ml。1.5绞股蓝皂甙含量的测定步骤1.5.1预处理用25ml纯化水洗柱,洗液弃去(水洗) 用25ml70的酒精洗柱,洗液弃去(酒精洗)再用25ml纯化水洗柱,洗液弃去(再水洗)1.5.2样品液的配制用1ml移液管移取1ml样品入
7、柱用25ml纯化水洗柱,洗液弃去用25ml70的酒精洗柱,接收洗液(可用25ml容量瓶,也可用蒸发皿直接接收)60水浴挥干(注:水温不高于70)加入0.2ml5的香兰素冰醋酸溶液(用1ml吸管吸)加0.8ml高氯酸(分两次加,洗涤蒸发皿)60水浴10min迅速冷却加5ml冰醋酸,混匀,倒进10ml的比色皿中,比色,波长560nm,与标准管一起比色测定1.5.3标准液的配制精密称取人参皂苷 Re标准溶液(2.0mg/ml)50ul放入具塞试管中加入新配置的0.2ml5的香兰素冰醋酸溶液(用1ml吸管吸)加0.8ml高氯酸(分两次加,洗涤蒸发皿)60水浴,10min迅速冷却加5ml冰醋酸,摇匀,作
8、为供试品溶液另取15 ml具塞试管中加入新配置的0.2ml5的香兰素冰醋酸溶液(用1ml吸管吸)加0.8ml高氯酸(分两次加,洗涤蒸发皿)60水浴,10min迅速冷却加5ml冰醋酸,摇匀,作为空白溶液取供试品溶液和空白溶液,在 560 nm的波长处分别测定吸收度。 1.5.4结果计算X=A1CV1001A2m10001000X-试样中总皂甙量,g/100gA1-测液的吸光度值A2-标准液的吸光度值C-标准管人参皂甙Re的量,ug待添加的隐藏文字内容2V-试样稀释体积mlm-试样质量1.6 实验分析方法1.6.1. 单因素法根据初步试验结果,选用三个单因素,分别为浸提温度,浸提时间,浸提溶剂量,
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