氨基酸含量对啤酒发酵的影响.doc
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1、 目 录前言11啤酒中氨基酸的来源22啤酒中氨基酸的分类33氨基酸含量对啤酒发酵过程中风味物质形成的影响43.1氨基酸含量对高级醇形成的影响43.1.1高级醇的形成43.1.2氨基酸与高级醇形成的关系53.1.3控制啤酒中高级醇含量的方法63.2氨基酸含量对双乙酰形成的影响63.2.1双乙酰的形成63.2.2氨基酸与双乙酰形成的关系63.2.3降低啤酒中双乙酰含量的方法73.3氨基酸含量对硫化氢形成的影响83.3.1硫化氢的形成83.3.2氨基酸与硫化氢形成的关系83.3.3降低啤酒中硫化氢含量方法93.4氨基酸含量对醋形成的影响94结论9参考文献11致谢12摘 要啤酒中含有多种氨基酸,对啤酒
2、的口感和品质有着一定的决定性作用,分析啤酒中游离氨基酸含量的多少可以反映其营养状况。主要原因是氨基酸含量对啤酒发酵过程中风味物质的形成有着一定的影响,最密切的风味物质主要是高级醇、双乙酰、硫化氢、酯、有机酸等。本文主要讨论了麦汁中氨基酸含量对啤酒酵母代谢副产物高级醇、双乙酰、硫化氢及酯含量的影响及啤酒质量的影响。结果表明:麦汁中氨基酸含量过高或过低都会使高级醇生成量增加,当氨基酸含量控制在适宜条件时,有利于降低高级醇生成量和提高发酵度;不同氨基酸对总双乙酰水平的影响差异很大(缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸在降低双乙酰含量方面效果显著;精氨酸、组氨酸、谷氨酰胺、赖氨酸、丝氨酸在降低总双乙酰含量方面起到
3、了明显的反作用);麦汁中不同的氨基酸含量对啤酒发酵中硫化氢的形成均有不同程度的影响,影响最大的是半胱氨酸与甲硫氨酸。关键词:氨基酸;高级醇;双乙酰;硫化氢AbstractIn the beer includes many kinds of amino acids, having certain decisive effect to the beer feeling in the mouth and the quality. The analysis to amino acids content in beer may reflect its nutritional status. Main r
4、eason was that the amino acids content had certain influence to the formation of flavor material in the beer fermentative process, and the closest flavor material were mainly higher alcohols, the diacetyl, the hydrogen sulfide, the ester, the organic acid and so on. This study mainly discussed the a
5、mino acids content in wort to the influence of beer yeast metabolism by-product higher alcohols, the diacetyl, the hydrogen sulfide and the ester content and the beer quality. The result indicated: amino acids content in wort too high or too low made the quantity of higher alcohols to increase,and i
6、t was advantageous in reducing the higher alcohols quantity and enhancing the degree of fermentation when amino acid content was controlled in suitable condition; the production of the total diacetyl was really different by the different amino acids (the amino-isovaleric acid, the leucine, the isole
7、ucine to reduce the diacetyl content were remarkable; while the arginine, the histidine, the valley ammonia amide, the lysine, the serine to reduce the total diacetyl content had the obvious reaction); the different amino acids contents in wort had the varying degree influence to the hydrogen sulfid
8、e formation in beer fermentation, the cysteine and the methionine being most obvious. Key words: amino acids; higher alcohols; diacetyl; hydrogen sulfide 氨基酸含量对啤酒发酵的影响前言众所周知,蛋白质是“生命的载体”即生命的第一要素,而蛋白质的基本单位是氨基酸。氨基酸在人体中不仅是合成蛋白质的重要原料,而且为促进生长发育的正常代谢、维持生命提供物质基础。如果人体缺少某一种氨基酸,有可能发生人体的正常生命代谢异常,甚至导致各种疾病或生命活动的终
9、止。从营养学角度而言,人体(或其他脊椎动物)的氨基酸可分为必需氨基酸(essential amino acid,8种:赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸)、半必需氨基酸(half-essential amino acid,又称为条件必需氨基酸,2种:精氨酸和组氨酸)及非必需氨基酸(nonessential amino acid,如甘氨酸、丙氨酸等氨基酸),每一种氨基酸都有其独特的生理作用1-3。酒中所含有的氦基酸以游离状态存在,对啤酒的口感和品质也有着一定的决定性作用,分析酒中游离氦基酸含量的多少可以反映酒的营养状况, 同时还可以反映其质量的高低。近年米对酒类游
10、离氦基酸的分析侧试越来越引起人们的重视。通常氨基酸的测定采用氨基酸分析仪以离子交换分离, 柱后衍生测定, 但氨基酸分析仪价格昂贵,分析时间长, 且只能专用于分析氨基酸, 因而大大限制了氨基酸分析技术在国内啤酒行业的推广。70年代以来, 用柱前衍生, 高效液相色谱法开始应用于氨基酸的测定4。许多早期的研究都是在Moore和Stein所提出的方法基础上开展的。其中氨基酸的分离用离子交换色谱柱(IEC)进行, 分离后的氨基酸立即用水合茚三酮进行柱后衍生。衍生物的检测波长在可见光区(=440nm)。目前最新研究的方法是柱前衍生法, 先进行氨基酸衍生化, 然后再用反相色谱柱分离。该方法提高了分析灵敏度,
11、 并且缩短了分析时间, 可灵活用于其它领域, 例如多肽的分析。对于氨基酸的检测,考虑到一机多用,啤酒企业大多采用反相高效液相色谱法(HPLC)5。其中郑昕等采用邻苯二甲醛-氯甲酸芴甲酯(OPA-FMOC)衍生,检测了17种氨基酸。除这17种氨基酸外,啤酒中还含有天冬酰胺(Asn)、谷氨酰胺(Gln)、-氨基丁酸(Gaba)和色氨酸(Trp)。Gln是衡量啤酒氧化程度的指标,Gaba是体现啤酒保健功能的重要营养成分。AQC柱前衍生高效液相色谱法可以同时检测上述21种氨基酸6。啤酒素有“液体面包”之称,1972 年7 月1 日在墨西哥召开的第九次世界营养食品会议上,把啤酒正式列为营养食品,它满足营
12、养食品三个重要条件之一,即啤酒含有多量和多种氨基酸。啤酒中氨基酸的含量丰富,一部分是原料麦芽中的蛋白质经过酶的作用分解而产生的,一部分是酵母在代谢过程中分泌到发酵液中的,它们以溶解状态存在于啤酒中7。在啤酒发酵的过程中,酿酒酵母必须通过吸收麦汁中的氨基酸等含氮物质,以繁殖细胞。因此对麦汁中氨基酸的含量以及对最终产品啤酒中氨基酸含量的分析,是非常必要的。麦汁中氨基酸含量总体比啤酒更为丰富,啤酒中氨基酸总量为1.42 g/L,而麦汁中氨基酸总量为1.96 g/L。比较两种样品,啤酒中苏氨酸、丝氨酸、胱氨酸的浓度较麦汁有显著增加,谷氨酰胺、脯氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸和酪氨酸的浓度也有增加,其它氨基酸的
13、含量仅稍有差别8。在追求经济效益和啤酒质量的激烈竞争下,提高啤酒质量,降低生产成本,是啤酒生产厂家生存的根本。在麦汁制备过程中添加适当的辅料有助于降低生产成本,同时辅料比掌握合适,又能保证啤酒的风味和质量,而啤酒的风味物质高级醇和双乙酰均与麦汁中的氨基酸含量有关,因而控制氨基酸含量显得尤为重要,且麦汁中氨基酸含量的控制可以通过辅料来调节,因此掌握麦汁中酵母发酵的最适氨基酸含量为关键所在9-10。本文主要讨论麦汁中氨基酸含量对啤酒酵母代谢副产物高级醇、双乙酰、硫化氢及酯含量的影响及啤酒质量的影响。1啤酒中氨基酸的来源大麦含有丰富的蛋白质。在制麦过程中, 所合成的多种蛋白酶, 对大麦蛋白质进行分解
14、, 使高分子的蛋白质逐浙分解为各级的降解产物,如氨基酸, 肽、胨、及一些低分子的蛋白质。在糖化过程中, 蛋白质的分解是继续进行的, 这主要是由对热相对稳定的内肽酶和羧肽酶同时作用来完成的。这些降解产物就构成了麦汁中的可溶性氮, 而氨基酸及二部分小分子的多肤, 则构成了可同化氮部份11。麦汁中的氨基酸, 是可同化氮的重要组成部分。虽然含量只有60120ppm, 但是它对啤酒的酿造、风味物质的形成却起到一个不可低估的作用。在发酵过程中, 酵母将它作为含氧的营养物质,以合成自身细胞, 也正是由于它的这一功能, 使得酵母在利用这些氨基酸的代谢过程中, 通过复杂的生化反应, 产生相应的发酵副产物。对啤酒
15、风味有影响的主要是一些挥发性物质,它们的不同组分, 不同含量均影响啤酒的风味。因此它们对啤酒的感官质量是很重要的, 消费者可以根据它来决定此产品是否可以接受。由于氨基酸与啤酒风味物质的形成, 有着直接的联系, 了解它们之间的相互关系, 有助于更好地控制有关因素, 从而调整各种发酵副产物组份和含量, 以达到赋予啤酒一种和谐的风味12-13。麦汁中的氨基酸含量可因不同品种的大麦、大麦不同的含氮量、不同的制麦条件、及不同的糖化方法而改变, 但是其各种氨基酸所占的比例却是相对稳定的。2啤酒中氨基酸的分类在发酵开始阶段, 酵母利用麦汁中的氨基酸来合成细胞的蛋白质和其他含氮化合物, 以进行自身繁殖。在发酵
16、后期, 当酵母增殖停止时, 氨基酸的吸收也逐渐缓慢或停止。麦汁中的氨基酸不能以简单的扩散作用自由地进入细胞内, 而是受渗透酶的复杂系统所操纵。酵母具有两个输送氨基酸通过细胞膜的系统, 一个是一般的渗透酶系统, 它是没有专一性的, 可以不加区别地将除脯氨酸以外的氨基酸进行输送, 该酶具有很高的活性, 但是它受氨的抑制, 因此, 在发酵开始时, 由于氨基酸脱氨所产生的氨对其有抑制, 所以没有活性; 另一系统, 也就是最重要的特殊渗透酶系统, 这一系统的渗透酶是具有专一性的, 而且它们也分别受到其它氨基酸的抑制, 从而使麦汁中的氨基酸按一定顺序进入到细胞内。根据酵母对氨基酸利用的顺序, 可将麦汁中的
17、氨基酸分为四组。第一组: 酵母对其迅速吸收的有谷氨酸、天冬氨酸、天冬酞氨、谷氨酸氨、丝氨酸、苏氨酸、赖氨酸、精氨酸。第二组: 酵母对其缓慢吸收的有撷氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、组氨酸。第三组: 酵母在后期才对其吸收的有甘氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、丙氨酸、氨。第四组: 酵母对其不吸收的有脯氨酸、-氨基丁酸。酵母利用氦基酸的顺序是遵循很严格的指令, 不受可溶性氮含量或发酵条件的影响。它首先利用第一组的氨基酸, 这是因为第一组氨基酸的特殊渗透酶没有受到抑制, 而却抑制了其它氨基酸的渗透酶作用。当第一组氨基酸的浓度下降后, 第二组氨基酸的渗透酶才逐渐地将这组的氨基酸输送到细胞中, 被酵母利用
18、。在传统的啤酒酿造条件下, 第三组氨基酸是较少被利用的, 因为这时酵母已经停止生长, 它仅有部份随着温度和搅拌情况而被利用。而这组氨基酸的渗入是完全取决于一般渗透酶的作用。第四组氨基酸不被酵母所利用。由于酵母有顺序地利用麦汁中的氨基酸, 而蛋白质和核酸的合成, 需要所有20种的氨基酸参与, 那些不能进入到细胞中的氨基酸虽然就存在于酵母细胞的周围, 但是不能被利用, 还必须靠酵母自己合成。这就导致了酵母按顺序地合成那些被抑制渗入的氨基酸及被利用完的氨基酸。在这个合成过程中, 所有对应的氨基酸前驱物从而产生, 对应的酮酸被合成, 因此也就产生了这些合成中所形成的发酵副产物。但是, 在对应的氨基酸渗
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