出血、血栓与止血检测ppt课件.ppt

《出血、血栓与止血检测ppt课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《出血、血栓与止血检测ppt课件.ppt（48页珍藏版）》请在三一办公上搜索。

1、出血、血栓与止血检测(Laboratory Diagnostics in Thrombosis and Hemostasis),ZhuliqingThe first affiliated hospital of WMC,止血和凝血系统,抗凝血和纤溶系统,前 言,Case 1,Case 2,第一节 基础理论（止血、凝血和纤溶机制）,一.止血机制：机体的正常止血，主要依赖于完整的血管壁结构和功能，有效的血小板质量和数量，正常的血浆凝血因子活性及健全的神经体液调节。,1.Hemorrhage(Bleeding),2.Hemostasis(White Thrombus),3.Coagulation(R

2、ed Thrombus),Bleeding and Clotting-1,4.Restoration,5.fibrolysis,6.Recovered,Bleeding and Clotting-2,二、凝血机制,血液由液体状态变为凝胶状态称为血液凝固，这一过程分为三条途径两个系统。,The coagulation cascade,The coagulation cascade,(依赖vitK因子：因子、）,三.抗凝系统：细胞抗凝作用体液抗凝作用：抗凝血酶：可灭活活化的凝血因子：FII,FIX,FX,FXI,FXII等。AT-：体内最主要的生理抗凝活性物质。蛋白C和蛋白S系统。,四.纤溶系统,

3、原发性纤溶,继发性纤溶,(FDP),纤溶过程主要是：纤溶酶原被特异性激活物转化为纤溶酶（PL），纤溶酶降解纤维蛋白。,凝血系统激活 纤溶酶激活 继发性纤溶T-PA,U-PA 直接激活纤溶酶 原发性纤溶,纤溶酶可降解Fg和Fb,纤维蛋白原降解产物,纤维蛋白降解产物,D-二聚体,FDP与D-二聚体,Fibrin degradation product(FDPs)：纤维蛋白原和纤维蛋白被纤溶酶降解产物的总称。D-dimer（D-二聚体）交联的纤维蛋白在纤溶酶降解下产生的FDP的一个成分，是目前认为DIC实验诊断中一个特异性较强的指标。,第二节 血栓与止血检测,筛选试验确诊试验通过筛选试验，可以大致明

4、确止、凝血障碍的相关环节，在筛选试验的基础之上再选作确诊试验。,血管壁检测vessel function screen,1.毛细血管脆性试验(毛细血管抵抗力试验、束臂试验，CRT)主要反映毛细血管结构和功能，也与血小板质和量有关。,毛细血管脆性试验,原理 毛细血管壁的完整性有赖于毛细血管的结构、功能和血小板质和量的正常，也与血浆vWF等有关。当这些因素有缺陷时，毛细血管的完整性就受到破坏。毛细血管脆性试验是在上臂给静脉及毛细血管外加“标准压力”、增加血管负荷，观察前臂一定范围内皮肤出血点数量的方法。本试验主要反映毛细血管结构和功能，也与血小板质和量有关。,参考值 阳性：男性5个出血点；女性10

5、个出血点。,临床意义,病理性CRT阳性：毛细血管壁有缺陷的疾病：如遗传性出血性毛细血管扩张（本试验较有价值）、坏血病、过敏性紫癜、老年性紫癜等；血小板有缺陷的疾病：原发性血小板减少性紫癜（ITP）、血小板无力症等；血管性血友病（von willebrand disease,vWD）,2.出血时间测定（bleeding time，BT）,【原理】刺破皮肤毛细血管后，从血液自然流出到自然停止所需的时间.【方法】标准化出血时间测定器法（template bleeding time,TBT）。,2 Template Bleeding Time,TBT,BT测定受血小板的数量和质量、毛细血管结构和功能以

6、及血小板与毛细血管之间相互作用的影响，而受血浆凝血因子含量及活性作用影响较小。,临床意义 BT 延长 见于：血小板数量异常：原发性血小板减少性紫癜、血栓性血小板减少性紫癜等。血小板功能缺陷：先天性血小板病如血小板无力症；获得性血小板病如药物引起的血小板病等。血管性血友病（von Willebrands disease，VWD）。血管壁及结构异常如遗传性出血性毛细血管扩张症等。药物干扰：如服用阿司匹林、潘生丁等。,粘附、聚集试验,二、血小板功能检测 platelet function screen,临床意义1.PLT粘附、聚集功能降低常见于PLT无力症、vWD、骨髓增生性疾病等。2.PLT粘附、

7、聚集功能升高常见于一些高凝状态的疾病：心梗、脑梗、静脉血栓形成等。,The PFA-100 Analyzer,三.凝血功能检查examination for coagulating system,APTTPT,1.活化部分凝血活酶时间测定（activated partial thromboplastin time，APTT）,原理：在抗凝血浆中，加入活化接触因子激活剂和部分凝血活酶（代替血小板的磷脂），再加入适量的钙离子即可满足内源性凝血的全部条件。从加入钙离子到血浆凝固所需的时间即称为活化部分凝血活酶时间。,sample preparation,colleted blood from the

8、 patients veinanticoagulated with natrium citricum（枸橼酸钠）centrifugated by 3000rpm for 5min.So the plasma is with poor platelet.(PPP),add reagents into PPP.(1.Kaolin,phospholipids，2.calcium）,3243s,1113s,Detect the clotting time.,APTT,APTT的长短反映了血浆中内源凝血系统凝血因子及共同途径中凝血酶原、纤维蛋白原和因子、的水平。本试验是目前最常用的敏感的检查内源凝血系统

9、是否正常的筛选试验。参考值：3243s，超过正常对照10s以上即为异常,临床意义,APTT延长：APTT是内源凝血因子缺乏最可靠的筛选试验，主要用于发现轻型的血友病。共同途径的凝血酶原、纤维蛋白原及因子、缺乏时也可延长，但敏感性略差；血中抗凝物如凝血因子抑制物或肝素水平增高时也；其它尚有肝病、DIC、大量输入库存血等。,APTT缩短：血栓前状态及血栓性疾病等肝素治疗监护：由于APTT对肝素的高敏感性，目前广泛用在普通肝素抗凝治疗监护中。一般在肝素治疗期间，APTT维持在正常对照的1.52.5倍为宜。对于低分子量肝素，APTT不敏感。狼疮抗凝因子是一种抗磷脂的自身抗体，常引起静脉血栓。由于它与参

10、与凝血反应的磷脂相结合，故能干扰凝血使APTT延长。,2.血浆凝血酶原时间测定（prothrombin time，PT)原理 在抗凝血浆中，加入足够量的组织凝血活酶（组织因子，TF）和适量的钙离子，即可满足外源凝血的全部条件。从加入钙离子到血浆凝固所需的时间即称为血浆凝血酶原时间。,The PT sample is also PPP.,3243s,1113s,add reagents into PPP.(1.TF，2.calcium）,Detect the clotting time.,报告方式 PT：1113s，超过正常对照3s以上为异常。PTR(凝血酶原比值)：即被检血浆的凝血酶原时间/正

11、常血浆的凝血酶原时间比值。INR(国际标准化比值):即PTRISI，ISI为国际敏感度指数。,International Normalized Ratio(INR)International Sensitivity Index(ISI),PT:9 s,PT:14 s,ISI为所用凝血活酶试剂利用标准品的凝血活酶进行校正而得出的，致使每个实验室及每批试剂所测的INR具有可比性,临床意义,PT延长：a.先天性因子、减少及纤维蛋白原的缺乏（低或无纤维蛋白血症）；b.获得性凝血因子缺乏，如DIC、原发性纤溶亢进症、维生素K缺乏、严重肝病等。PT缩短常见于血液高凝状态：DIC早期、心梗、脑梗、静脉血栓形

12、成、口服避孕药等。,口服抗凝药的监护：临床上对口服抗凝剂双香刀豆素（华法令）的病人常用INR为24时为抗凝治疗的合适范围（中国人一般维持在INR 23)。,华法令的抗凝机理主要在于拮抗VitK，使依K因子活性下降而影响PT，对APTT影响较小。,四、抗凝系统检测,增高：可导致出血，见于先天性凝血因子缺乏，如血友病；后天性凝血因子缺乏，如急性肝炎、肾移植、使用抗凝药物等。减低：可导致血栓形成，见于先天性缺乏和功能异常，如肺梗塞、深部静脉血栓等血栓性疾病；后天性减低，如 DIC、慢性肝病、心肌梗塞等。,参考值：1.抗原测定：免疫火箭电泳法：259.8320.2mg/L。2.活性测定：凝胶空斑法：7

13、7.1%103.5%发色底物法：103.2%113.8%,抗凝血酶-(AT-),五.纤溶功能检查,1.血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验（plasmaprotamineparacogulationtest,3P）原理 凝血与纤维蛋白降解过程中形成的可溶性纤维蛋白单体复合物(SFMC)不被凝血酶所凝固。但其中的纤维蛋白单体却能被硫酸鱼精蛋白沉析出来，形成纤维蛋白样的副凝块。这种不需凝血酶的 凝结 现象叫副凝现象。,临床意义 3P试验阳性1.主要说明体内凝血酶的生成，并已激活了纤溶系统，因此主要见于DIC的早期和中期;2.在创伤、大手术后、上消出血等的病人也可出现阳性。3P试验阴性：见于正常人，原发性纤溶

14、症及DIC晚期。,3P试验是早年诊断DIC较特异的指标，但其假阴性和假阳性是非常多的，目前建议用血浆 D-二聚体来代替3P试验。,2.D-二聚体测定 是诊断DIC和溶栓治疗的重要指标，也是鉴别原发性纤溶和继发性纤溶的重要试验。3.FDP测定 体内总FDP升高是体内纤溶亢进的标志，见于原发性纤溶和继发性纤溶，但不能鉴别两者。,卫生部卫医发2000412号文件,一、停止使用出血时间测定项目的Duke法，但出血时间的检验项目不废除。若临床怀疑血管壁异常所致出血性疾病时（如血管性血友病、单纯性紫癜、过敏性紫癜等），可使用出血时间测定器法检测出血时间。二、停止使用凝血时间测定玻片法和毛细血管法，用活化部

15、分凝血活酶时间（APTT）或全血凝固时间（CT，试管法）测定进行替代。三、停止使用一般外科手术前的常规出血时间检测，用活化部分凝血活酶时间（APTT）、血浆凝血酶原时间（PT）和血小板计数（PLT）联合检测取代，如临床有出血史时另加出血时间测定器法进行出血时间检测。,第三节 检测项目的合理选择和应用,筛选试验的选择：一期止血缺陷：血小板计数(PLT）、出血时间（BT）二期止血缺陷：APTT、PT 纤维蛋白溶解综合征（纤溶亢进）：FDP、D-二聚体,诊断出血病的思维程序,Summary,掌握 反映机体止凝血功能的重要筛检及诊断试验的原理及临床意义；血栓与止血检测项目的选择和应用。熟悉 止血、凝血和纤溶机制。了解 反映机体止凝血功能的重要筛检及诊断试验的参考值；其他的反映机体止凝血功能的试验。,