《池塘养鱼》实训指导.doc
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1、池塘养鱼实训指导实训一 主要养殖鱼类的人工繁殖(一)实训时间 一周(共五天),其中灵活安排4课时在实验室进行家鱼性腺分期、鲤鱼脑垂体的摘取、催产剂配制及注射试验,其余内容在实习渔场进行,孵化期间要求值夜班。(二)实训目的了解主要养殖鱼类亲鱼培育,掌握主要鱼类人工催产及受精卵孵化技术。(三)实训内容1、性腺分期(在实验室进行) 解剖鲢鱼、鲫鱼,判断其性腺处于第几期。家鱼性腺发育的分期特征分期雄性雌性性腺呈细线状,灰白色,紧贴在鳔下两侧的腹膜上;肉眼不能区分雌雄性腺呈细线状,灰白色,紧贴在鳔下两侧的腹膜上;肉眼不能区分雌雄性腺呈细带状,白色,半透明;精巢表面血管不明显;肉眼已可区分出雌或雄性腺呈扁
2、带状,宽度比同体重雄性的精巢宽510倍。肉白色,半透明;卵巢表面血管不明显,撕开卵巢膜可见花瓣状纹理;肉眼看不见卵粒精巢白色,表面光滑,外形似柱状;挤压腹部,不能挤出精液卵巢的体积增大,呈青灰色或褐灰色;肉眼可见小卵粒,但不易分离、脱落精巢已不再是光滑的柱状,宽大而出现皱褶,乳白色;早期,仍挤不出精液,但后期,能挤出精液卵巢体积显著增大,充满体腔;鲤、鲫鱼呈橙黄色,其他鱼类为青灰色或灰绿色;表面血管粗大可见,卵粒大而明显,较易分离精巢体积已膨大,呈乳白色,内部充满精液,轻压腹部,有大量较稠的精液流出卵粒由不透明转为透明,在卵巢腔内呈游离状,故卵巢也具轻度流动状态,提起亲鱼,有卵从生殖孔流出排精
3、后,精巢萎缩,体积缩小,由乳白色变成粉红色,局部有充血现象;精巢内可残留一些精子大部分卵已产出体外,卵巢体积显著缩小;卵巢膜松软,表面充血;残存的、未排除的部分卵,处于退化吸收的萎缩状态2、认识催产剂(1)常用催产剂认识及鲤鱼脑垂体的摘取(在实验室进行) 绒毛膜促性腺激素(Hormone Chorionic Gonadotropin,简称HCG): HCG是一种白色粉状物,市场上销售的鱼(兽)用HCG一般都封装于安培瓶中,以国际单位(IU)计量。常用包装单位有两种:5000IU/支10支/盒、10000IU/支10支/盒。鱼类脑垂体(Pituitary Gland,简称PG) 脑垂体的摘取和保
4、存:脑垂体位于间脑下面的碟骨鞍里,用刀沿眼上缘至鳃盖后缘的头盖骨水平切开(如下图),除去脂肪,露出鱼脑,用镊子将鱼脑的一端轻轻掀起,在头骨的凹窝内有一个白色近圆形的垂体,小心地用镊子将垂体外面的被膜挑破,然后用镊子从垂体两边插入,慢慢挑出垂体,应尽量保持垂体完整不破损。也可将鱼的鳃盖掀起,用自制的“挖耳勺”(即将一段8号铁丝的一段锤扁,略弯曲成铲形)压下鳃弭,并插入鱼头的碟骨缝中,将碟骨挑起,便可露出垂体,然后将垂体挖去。取出的脑垂体应去除黏附在上的附着物,并浸泡在2030倍体积的丙酮或乙醇中脱水脱脂,过夜后,更换同样体积的丙酮或无水乙醇,再经24小时后取出,在阴凉通风处彻底吹干,密封干燥4下
5、保存。促黄体素释放激素类似物(Luteotropin Releasing Hormone-Analogue,简称LRH-A):近年来,我国又在研制LRH-A的基础上,研制出LRH-A2和LRH-A3。市场上销售的鱼(兽)用LRH-A一般都封装于安培瓶中,以国际单位(g)计量。常用包装单位有两种:50g/支10支/盒、100g/支10支/盒。地欧酮(DOM):市场上销售的鱼(兽)用DOM常用包装单位为:100mg/支10支/盒。3、参与催产前的准备:准备产卵池、工具 亲鱼网、布夹(担架)、集卵箱、亲鱼暂养网箱、卵和苗计数用的白碟、量杯等常用工具,催产用的研钵、注射器以及人工授精所需的受精盆、吸管
6、等。4、雌雄鉴别 常规养殖鱼类雌雄特征比较鱼类名称生殖季节非生殖季节雄性雌性雄性雌性青鱼胸鳍及鳃盖有细密的锥状追星,触摸时,感觉粗糙;发育好的,头部也有追星;轻压成熟个体的腹部,可见白色精液流出无追星,手摸头、鳃盖、胸鳍时,有光滑感;成熟个体腹部膨大,当腹部朝天时,可见明显的卵巢轮廓胸鳍一般较大,且长胸鳍比雄性小草鱼与青鱼基本相同,胸鳍鳍条粗大,狭长,自然张开时,呈尖刀形仅胸鳍鳍条末梢有少数追星,手感仍光滑;胸鳍张开时,呈扇状胸鳍狭长,长度超过胸鳍至腹鳍之间距离的一半;腹部鳞小而尖,排列紧密胸鳍略宽且短,长度小于胸、腹鳍之间距离的一半,腹部鳞大而圆,排列疏松鲢鱼胸鳍前面几根鳍条上,有锯齿状突起
7、,手感很粗糙;鳃盖、眼眶边缘有细小的追星胸鳍鳍条光滑,仅鳍条末梢有少数锯齿状突起,无追星;生殖孔长稍凸,有时红润同生殖季节,但无追星同生殖季节鳙鱼胸鳍内侧有骨质刀状突起,有割手感;鳃盖、眼眶边缘有细小的追星手摸胸鳍,有光滑感同生殖季节,但无追星同生殖季节5、成熟亲鱼的鉴定:一看、二摸、三挤、四挖卵。6、催产(1)雌雄亲鱼配组 一般采用11.5比较好;若雄鱼较少,雌雄比例不应低于11。如果采用人工授精方式,雄鱼可少于雌鱼,1尾雄鱼的精液可供23尾同样大小的雌鱼受精。同时,应注意同一批催产的雌雄鱼,个体重量应大致相同。(2)确定催产剂和注射方式催产剂的使用方法与常用剂量鱼类雌鱼备注一次注射法(每千
8、克体重用量)两次注射法(每千克体重用量)第一次注射第二次注射间隔时间(小时)鲢、鳙、三角鲂1.PG 35 mg2.HCG 1 0001 200国际单位3.LRH-A 1520 gPG 1 mg(或HCG 200国际单位)1.LRH-A 12 g2.PG 0.30.5 mg1.PG 35 mg2.HCG 1 0001 200国际单位3.LRH-A 1520 g12241.雄鱼用量为雌鱼的一半;2.一次注射法,雌雄鱼同时注射;二次注射法,在第二次注射时,雌雄鱼才同时注射;3.左列药物只任选一项草鱼1.LRH-A 1520 g2.PG 35 mg1.LRH-A 12 g2.PG 0.30.5 mg同
9、一次注射法的催产剂剂量6121.雄鱼用量为雌鱼的一半;2.一次注射法,雌雄鱼同时注射;两次注射法,在第二次注射时,雌雄鱼才同时注射;3.左列药物只任选一项青鱼1.HCG1 0001 250国际单位PG 0.51 mg121.雄鱼用量为雌鱼的一半;2.一次注射法,雌雄鱼同时注射;两次注射法,在第二次注射时,雌雄鱼才同时注射;3.左列药物只任选一项;4.如需三次注射时,雌鱼首次用LRH-A 25 g,在催产前15天注射2.LRH-A 5 gLRH-A 10 gHCG 500国际单位PG 0.51 mg123.LRH-A 5 gLRH-A 10 gPG 0.51 mg12注:剂量、药剂组合及间隔时间
10、等,均按标准化要求制表。(3)效应时间 观察效应时间(4)注射方法和时间 家鱼注射分体腔注射和肌肉注射两种。7、人工授精 (1)干法人工授精。当发现亲鱼发情进入产卵时刻(用流水产卵方法最好在集卵箱中发现刚产出的鱼卵时),立即捕捞亲鱼检查。若轻压雌鱼腹部卵子能自动流出,则一人用手压住生殖孔,将鱼提出水面,擦去鱼体水分,另一人将卵挤入擦干的脸盘中(每一脸盆约可放卵50万粒)。用同样方法立即向脸盆内挤入雄鱼精液,用手或羽毛轻轻搅拌,约12分钟,使精、卵充分混合。然后徐徐加入清水,再轻轻搅拌12分钟。静置1分钟左右,倒去污水。如此重复用清水洗卵23次,即可移入孵化器中孵化。(2)半干法授精。将精液挤出
11、或用吸管吸出,用0.3%0.5%生理盐水稀释,然后倒在卵上,按干法授精方法进行。(3)湿法人工授精。将精卵挤在盛有清水的盆中,然后再按干法授精方法操作。在进行人工授精过程中,应避免精、卵受阳光直射。操作人员要配合协调,做到动作轻、快。否则,易造成亲鱼受伤,引起产后亲鱼死亡。8、鱼卵质量的鉴别 家鱼卵子质量的鉴别 性状成熟卵子不熟或过熟卵子颜色鲜明暗淡吸水情况吸水膨胀速度快吸水膨胀速度慢,卵子吸水不足弹性状况卵球饱满,弹性强卵球扁塌,弹性差鱼卵在盘中静止时胚胎所在的位置胚体动物极侧卧胚体动物极朝上,植物极向下胚胎的发育卵裂整齐,分裂清晰,发育正常卵裂不规则,发育不正常9、亲鱼产卵的几种情况鉴定:
12、 (1)全产(产空)。雌鱼腹壁松弛,腹部空瘪,轻压腹部没有或仅有少量卵粒流出,说明卵子已基本产空。(2)半产。雌鱼腹部有所减少,但没有空瘪。(3)难产。可分为三种情况: 雌鱼腹部变化不大或无变化,挤压腹部时没有卵粒流出。 雌鱼腹部异常膨大、变硬,轻挤腹部时,有混浊略带黄色的液体或血水流出,但无卵粒,有时卵巢块突出在生殖孔外。取卵检查,卵子无光泽,失去弹性,易与容器粘连。 已排卵,但没有产出。卵子已过熟、糜烂。10、产后亲鱼的护理 产卵后亲鱼的护理,首先应该把产后过度疲劳的亲鱼放入水质清新的池塘里,让其充分休息,并精养细喂,使它们迅速恢复体质,增强对病菌的抵抗力。为了防止亲鱼伤口感染,可对产后亲
13、鱼加强防病措施,进行伤口涂药和注射抗菌药物。轻度外伤,用5%食盐水,或10 mg/ L亚甲基蓝,或饱和高锰酸钾液药浴,并在伤处涂抹广谱抗菌素油膏;创伤严重时,要注射磺胺嘧啶钠,控制感染,加快康复,用法:体重10 kg以下的亲鱼,每尾注射0.2 g;体重超过10 kg的亲鱼,注射0.4 g。11、孵化(1)家鱼的胚胎发育鲢鱼胚胎发育特征和进度(水温2024)序号分期外部特征经历时间备注1受精卵圆球形、卵质均匀分布0:0021细胞期原生质集中在卵球一极,形成隆起的胚盘30分32细胞期胚盘经分裂为两个大小相等的细胞1小时44细胞期分裂球再次经分裂,分裂沟与第一次垂直,4个细胞大小相等1小时10分58
14、细胞期有两个分裂面与第一次分裂面平行,8个细胞排列成两排,中间4个细胞大,两侧4个小1小时20分616细胞期两个经裂面与第二次分裂面平行,16个细胞,中央4个大,外围12个细胞小1小时30分7囊胚早期分裂球很小,细胞界限不清楚,由很多分裂球组成囊胚层,高突在卵黄上2小时27分8囊胚中期囊胚层较囊胚早期为低,看不出细胞界限,解剖观察,可见到囊胚腔3小时9囊胚晚期囊胚表面细胞向卵黄部分下包约占整个胚胎的1/3,囊胚层变扁5小时30分10原肠早期胚盘下包1/2,胚环出现,背唇呈新月形6小时30分11原肠中期胚盘下包2/3,胚盾出现7小时30分计算受精率12原肠晚期胚盘下包3/4,侧面观胚胎背面9小时
15、15分13神经胚期胚盘下包4/5,神经板形成,胚体转为侧卧10小时14胚孔封闭期胚孔关闭,神经板中线略向下凹,脊索呈柱状11小时33分15尾芽期胚体后端腹面有一圆柱状的尾芽。眼囊变圆,体节10对,体长1.7 mm16小时5分16肌肉效应期胚体开始微微收缩,第四脑室出现,晶体很清楚19小时35分17心跳期在卵黄囊头脊前下方,可以看到管状的心脏开始跳动,起初搏动微弱,继而变为有力25小时15分18出膜期胚胎破卵膜而出,中脑和后脑膨大,全身无色素,心脏为长管状,鳃板三块,头仍弯向腹面,体节4042对31小时35分19鳔形成期眼球色素增多,眼变黑。在胸鳍之后,可见囊状的鳔,胸鳍如扇状,伸向体两侧,体节
16、4648对96小时35分20肠管形成期身体色素增多,鳃盖形成,肠管直而细长。鳔膨大如气球,胸鳍活动。仔鱼有4、5对外鳃,可作长期游动,并主动摄食,不再停于水底125小时35分下塘从开始产卵起,每隔一小时用组织显微镜观察并绘出胚胎发育图。(2)飘浮性鱼卵的孵化 孵化设备 观察了解常用孵化设备有孵化缸(桶)和孵化环道等的结构及运行 孵化管理 凡能影响鱼卵孵化的主、客观因素,都是管理工作的内容,现分述如下:A、水温。青、草、鲢、鳙等“四大家鱼”受精卵的孵化水温为253, B、溶解氧。生产中不仅要求鳙鱼孵化的水含氧量不低于45 mg/ L,更需保证卵和苗不堆积。C、污染与酸碱度。一般孵化用水的酸碱度以
17、pH7.5最佳。D、流速。目前生产中,都按慢快慢快慢的方式调控。E、提早出膜。提前出膜,畸形增多,死亡率高,所以生产中要采用高锰酸钾液处理鱼卵。方法:将所需量的高锰酸钾,先用水溶解,在适当减少水流的情况下,把已溶化的药液放入水底,依靠低速水流,使整个孵化水达到5 mg/ L浓度(卵质差,药液浓;反之,则淡),并保持1小时。经浸泡处理,卵膜韧性、弹性增加,孵化率得以提高。不过,卵膜增固后,孵化酶溶解卵膜的速度变慢,出苗时间会推迟几小时。 F、敌害生物。做好严防敌害侵入的工作。11、催产率、受精率和出苗率的计算 产卵雌鱼数 催产率 100% 催产雌鱼数 受精卵数(好卵)受精率 100% 总卵数(好
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