OperationalPrincipleofDiodeArrayDetector二极管阵列检测器课件.ppt
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1、仪器分析实验,王 芳,2023/3/25,自强 弘毅 求是 拓新,2,实验七高效液相色谱法(HPLC)分离巴比妥与苯巴比妥,实验目的,基本原理,数据处理,2023/3/25,自强 弘毅 求是 拓新,3,药物分析,血药浓度分析,鉴定,手性分离,杂质检查,含量测定,HPLC,新药开发、药品检验、生物样品分析等,生物医药、化妆品、食品等,2023/3/25,自强 弘毅 求是 拓新,4,1.实验目的,学习高效液相色谱仪的结构以及操作流程。了解反相液相色谱法药物分离的基本原理。掌握用反相色谱法药物分离的方法。,2023/3/25,自强 弘毅 求是 拓新,5,2.基本原理,分离原理:分配系数定量依据:外标
2、法 峰面积反相液相色谱:固定相 流动相,疏水性强的保留时间长!,2023/3/25,自强 弘毅 求是 拓新,6,HPLC结构:输液系统;进样系统;分离系统;检测系统;梯度洗脱装置;数据处理系统,六通阀,检测器,色谱柱,2023/3/25,自强 弘毅 求是 拓新,8,准备(load),工作(inject),2023/3/25,自强 弘毅 求是 拓新,9,ODS,十八烷基硅烷键合硅胶 C18,色谱柱是色谱分离的核心。色谱柱管多由不锈钢制成,内装一定的固定相。色谱往长一般1030cm,内径25mm。,2023/3/25,自强 弘毅 求是 拓新,10,2023/3/25,自强 弘毅 求是 拓新,11,
3、Operational Principle of Diode Array Detector 二极管阵列检测器,2023/3/25,自强 弘毅 求是 拓新,12,3.实验步骤,开启仪器及电脑,设置参数。待仪器稳定后,分别用注射器进混样各20微升,记录保留时间,峰面积,半峰宽。进未知样20微升,记录保留时间。冲洗色谱柱,关闭仪器。,准备,2023/3/25,自强 弘毅 求是 拓新,13,4.数据处理,以标准物的保留时间为基准,给未知样品各组分定性。根据标准物的峰面积,估算未知样品中相应组分的含量。计算分离度Rs,2023/3/25,自强 弘毅 求是 拓新,14,解释未知试样中各组分的洗脱顺序。试述正相色谱基本原理及应用。,2023/3/25,自强 弘毅 求是 拓新,15,Thank you!,
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