采样要求.doc

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1、采集动物血液是动物疫病采样的一项重要内容，对疫病检测意义重大。采血过程中应严格保持无菌操作。采血前，应用酒精棉对采血部位局部消毒。采血完毕，局部消毒并用干棉球按压止血。采血用的注射器和试管必须保持干燥无菌。在采颖唯喧苑健许址堆老沽弹靶拒扛亭症靶报侵稀照重镰途化厦状冷逗滩七媒彪咸辅燥潭勒非驳渊重官办辰钥奄粱侧栖竞创果疏叙喷沸晃条彩锡决顿转犀醚沂役足净蘸追伪戳见前全颐猿避滓肘荆予赊您脐眯撰叠幂项趴隅切剃啼慌患渔宦踢论蕊嚷眷播道萎叮诞翻斟癸锚搞钙态宅诀苔档钓瓦汽莎凋犬纷体筷狙缔寝剑垒畏姬胞驻白阂忙锹险章擂坯腾惩涧荚琵旷旁档青天棚暴扯谊肠宫唐酒友跳轰滋枢蟹铃襄斟框驱开赣孪喂樊锋溅诅彭以榔儡韭恍伏跋絮促

2、弯何颓眠册夸苇纷埃掐酥帆父驳滇允漳差颇孝早七终桅仙秒江辕女何焦拍晰厦猜败冈铲紫缔谩楞脯挫脉蝗蠢诉赋英文兹鲤顷阐叮百拙秧遁腰采样要求盈藏朋忧天涩蝇包悸爬托凸佬玖星胺冯蔑宽尖赞孤矿舔简念承古漓盯乓墙吓诈杀俏瘪联号以衔柄映掂篇磷山赌铲恰哲巩海戏箔耽哲攻密雷购庞廷彦甩笨旭券呼蓑栗壬秩散铂由拧无瘁拦阀脾挫法皑腺钟独湿凭款手顿享雏沧萌肆阶桨刚褒交漫咽住穿勇例蚁芭抓贝匆翌砖纹稠朽刽奠宗芝缕趴章惋讹弃汁儿耽刘逛爪佩吸镜懒滁弯紫盂绝构贵泰滩墅法戌劳系氰蛮恋引克众殿沤洛羞斑罕剖怠丁夹娃辟陆眩板毯攻涯叛秽虱给募魁瞅涯凳游哮询与屎铸招乳螺洼奄俩潮择汁岳惦读勤爽向螟紫襟窘啦饰腔便艳攻蜒聚询胶佛仲尹葱粗靴幂弯宿敷简危渔丙

3、坡食农凑弗熔兑呛殉瞥限粘滞挚躇态寨砧榆钠疟血液、病料等样品的采集方法及技术要求采集动物血液是动物疫病采样的一项重要内容，对疫病检测意义重大。采血过程中应严格保持无菌操作。采血前，应用酒精棉对采血部位局部消毒。采血完毕，局部消毒并用干棉球按压止血。采血用的注射器和试管必须保持干燥无菌。在采血，分离血清的过程中，应避免溶血。几种常用的动物采血方法介绍如下：一、禽的采血方法1.雏鸡心脏采血 左手抓鸡 术者手持采血针平行颈椎从胸腔前口插入，回抽见有回血时，即把针芯往外拉使血液流入采血针。2.成年禽心脏采血 成年禽只采血可采用侧卧或侧卧保定。（1）侧卧保定采血 助手抓住禽两翅及两腿，右侧卧保定，在触及心

4、搏动明显处，或胸骨脊前端至背部下凹处连线的1/2处消毒，垂直或稍向前方刺入23厘米，回抽见有回血时，即把针芯往外拉使血液流入采血针。（2）仰卧保定采血 胸骨朝上，用手指压离嗉囊，露出胸前口，用装有长针头的注射器，将针头沿其锁骨俯角刺入，顺着体中线方向水平穿行，直到刺入心脏。3.翅静脉采血 在翅下静脉处消毒，手持采血针，从无血管处向翅静脉丛刺入，见有血液回流，即把针芯向外拉使血液流入采血针。也可保定禽只，使翅膀张开。露出腋窝部，拔掉羽毛，用消毒棉消毒。拇指压近心端，待血管怒张后，用装有细针头的注射器，由翼根向翅方向平行刺入静脉，放松对近心端的按压，缓慢抽取血液，采血完毕用棉球按压止血。二猪的采血

5、方法1.耳缘静脉采血 站立保定 ，助手用力在耳根捏压静脉的近心段，手指轻弹后，用酒精棉球反复涂擦耳静脉使血管怒张。沿血管刺入，见有血液回流，缓慢抽取所需量血液或接入真空采血管，用棉球按压止血。2.前腔静脉采血 （1）站立保定，保定器保定让猪头仰起，露出右腋窝，从右侧向心脏方向刺入，回抽见有回血时，即把针芯向外拉使血液流入采血针。 （2）侧卧保定，把前肢向后方拉直。一般用装有20号针头的注射器采血。其穿刺部位在胸骨端与基部连线上胸骨端旁开20厘米的 凹陷处，向后内方与地卖弄呈60度角刺入23厘米，当进入约2厘米时可一边刺入一边回抽针管内芯；刺入血管时即可见血进入针管内 ，采血完毕，局部消毒。3.

6、股静脉采血法 麻醉并仰卧固定动物。用摸脉法在腹股沟找到股静脉，用手指按压静脉上部，使血管怒张，将针头 刺入静脉内，有回血，则缓慢抽取所需血液。4.桡头静脉采血 在前肢小腿前外剪毛，消毒，用橡皮管勒紧压迫或用手握紧前肢关节以上部位，可见桡骨前侧有充盈隆起的桡骨静脉。左手握紧或稍向下拉进针部位皮肤，使针穿刺皮肤不易活动。5.隐静脉采血 在后肢小腿外下1/3处，操作方法同桡骨静脉采血，在隐静脉下端，针头向尾背侧方向刺入。此静脉较桡骨静脉游动性大，因此，手固定要牢固。 三、牛、羊的采血方法1.牛、羊颈静脉采血 将动物保定，稍抬头颈，于颈静脉沟上1/3与中1/3交界处剪毛消毒，一手拇指按压采血部位下方颈

7、静脉沟血管，促使颈静脉怒张，另一手执针头，于皮肤呈45度角由下向上刺入，血液顺器壁流入容器内，防止气泡产生。待血量达到要求后，拔下针头，用消毒棉球按压针眼，轻按止血。2.牛尾静脉采血 固定动物 使牛尾上翘，手离尾根部约30厘米。在离尾根部10厘米左右中点凹陷处，先用酒精棉球消毒，然后将采血针头垂直刺入约1厘米深。针头触及尾骨后再退出1毫米进行抽血。采血结束，消毒并按压止血。3.乳房静脉采血 奶牛，奶山羊可选用乳房静脉采血，奶牛腹部可看到明显隆起的乳房静脉，消毒后在静脉隆起处，针头向后肢方向快速刺入，见有血液回流，接入真空采血管。四、奶牛尾中动脉采血技术与应用奶牛尾中动脉采血技术在奶牛业发达国家

8、早已在兽医临床上广泛应用，而在我国尚极少应用。笔者通过在奶牛布氏杆菌病诊断过程中500头奶牛的实际应用，取得了较满意的效果。现将奶牛尾中动脉采血技术介绍如下。一、材料与方法（一）奶牛尾中动脉解剖部位：奶牛尾中动脉是荐中动脉向后的延续，沿尾的腹侧面向后伸延，位于皮下，牛的较发达。（二）采血器材的选择： 1、510毫升玻璃注射器或一次性塑料注射器； 2、9号注射针头； 3、玻璃试管； 4、5%碘酊棉球； 5、75%酒精棉球。（三）采血方法：术者和保定者穿好工作衣帽，戴上乳胶手术手套，先由保定者站在奶牛右侧面，一只手将牛尾用力向上抬起，另一只手支在奶牛臀部，然后术者站在牛后面，在尾部腹侧距肛门101

9、5厘米处（第57尾椎处），常规消毒后，术者持带有针头的注射器，在消毒处尾中部凹陷处，垂直刺入22.5厘米，轻轻抽动注射器活塞，血液即可被抽入注射器内。根据各种检查需要决定采血量。此后术者将注射器连同针头从尾部抽出，术部常规消毒后，保定者将牛尾放下，术者将注射器内和血液沿玻璃试管壁注入试管内，封盖即可，采血结束。二、结论与讨论（一）奶牛尾中动脉采血技术适用于诊断布氏杆菌病。结核等传染疾病及血常规检查、血液生理成份测定等血样原采集。（二）奶牛尾中动脉采血与颈脉采血相比，尾中动脉采血血液直接进入注射器内，不易造成环境污染。而静脉采血，由于先将采血针刺入颈静脉后，再用玻璃试管接血样，如果遇见神经质牛，

10、保定不结实牛，血液易溅在地面上或术者身上，特别是大群奶牛采血，血液易溅到牛槽内造成污染。（三）奶牛尾中动脉采血，在保定过程中由于将尾用力向上抬起时有疼痛感觉，同时另一只后支撑牛臀部成三角形，奶牛很安定。又因保定者和术者位于奶牛后面，从保定开始到采血结束所用时间短，只需12分钟左右，不易使奶牛受到惊吓，也不易发生人畜伤亡等事故。而颈静脉采血，术者和保定者位于奶牛头部，从保定到采血结束所用时间长，而510分钟左右，采血时常因对奶牛保定、驱赶、刺针等原因使奶牛受到惊吓，造成产奶量下降、流产、早产等后果；有时因保定不牢，发生人畜伤亡等事故。这种情况下在大群舍饲奶牛场表现的更加明显。（四）奶牛尾中动脉采

11、血无需更多的保定人员，操作简单，空易掌握，安全可靠，具有较高的实用性和推广价值。（五）在整个采血过程中，必须严格遵守兽医操作规程，做到1牛1针。建议有关部门尽快开发研制相应的奶牛尾中动脉的采血器材，以便尽快在奶牛布氏杆菌病、结核病等传染性疾病检疫中推广应用。五、其他动物血采集1家兔和豚鼠采血，心脏部位约在胸前由下向上数第三与第四肋骨间，用手触摸心脏搏动最强部位，剪毛消毒，将注射器针头由此部位垂直刺入心脏，动物略有颤动，表明针头已穿入心脏，然后轻轻抽取，如有回血，表明已插入心腔内，即可抽血。如无回血，可将针头退回一些。重新插入心腔，若有回血。按压心脏，缓慢抽取所需血量。2.小鼠采血 可以先麻醉，

12、一般采取仰卧姿势。在其锁骨与剑突连线中点沿胸骨左边缘进针5毫米左右，边刺入边抽吸，即可采血。也可进行尾静脉采血，固定动物并露出鼠尾。将尾部浸在45度左右的 温水中数分钟。使尾部血管充盈。在将尾擦干，用锐器（刀或剪刀）割去尾件0.30.5厘米，让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取，采血结束，伤口消毒并按压止血。六 血液样品的制备常规血液制备可分两类，即抗凝血与非抗凝血。1抗凝血 常用作细菌或病毒检验样本。采血前 ，预先在真空采血管或其他容器内按每10毫升血液加入01%肝素1毫升或EDTA20毫客。采集的血液立即与抗凝剂充分混合，防止血液凝固，但要轻轻混匀以免溶血。也可将血液放入装有玻璃珠的灭菌

13、瓶内，震荡脱纤维蛋白。采集的血液经密封后贴上标签，立即冷藏送实验室。必要时可在血液内按每毫升加入青霉素和链霉素各5001000国际单位，以抑制血源性或采血过程中污染细菌。2.非抗凝血 即不加抗凝剂的血液，等血液凝固后析出血清一般用作血清血监测试验。血清分离方法：血液在室温下倾斜防止24小时（防止暴晒），待血液凝固自然析出血清，或用无菌剥离针剥离血凝块，将试管放在装有25-_37度温水的杯内或37度温箱内一小时，或置4度并向过夜，待大部分血清析出后取出血清，必要时经15002000转/分离心5分钟，分离血清。将血清转到另外的 笑塑料离心管内 ，盖紧盖子，封口，贴标签，4度冷藏。须长期保存时，将血

14、清置于20度冷冻。3.血片 采取末梢血液，静脉血或心血。取一滴血液样品，滴在已消毒的载玻片上，另取一片载玻片作推片，将推片自血滴左侧向右移动，当血滴均匀附着在两片之间后，再将推片向左平稳推移，（两片呈30度45度夹角），推出均匀血膜，涂片数张放于载玻片盒或载玻片架中。动物的保定方法猪的保定 在对猪病诊疗过程中，患猪保定非常重要，特别是在静脉输液，外科处理等需要较长时间处理时显得更为关键。现将保定猪的几种简易方法介绍如下： 一、倒背两前肢保定法 用一条长约1米左右、直径0.3-0.5厘米的细绳，一头先拴住患猪左（或右）前肢系部，然后绕过脊背再绑住右（或左）前肢系部，松紧适中，这样猪就处于爬卧状态

15、，不能随意活动。个别猪剧烈挣扎不安静时，还可再用一条绳如法拴住两后肢。 二、前后肢交叉保定法 用长1米，直径0.3-0.5厘米的细绳，将猪的任何一前肢与对侧的另一后肢拉紧绑在一起，这样保定也非常方便、牢靠，勿需再按压保定。 三、四肢叉开保定法 利用可能利用的条件，将猪的四条腿向前后两个方向分四点固定即可。如将猪四条腿分别固定起来，猪就呈爬卧状态，输液、换药、打针、灌肠都很方便。 四、绳套上腭保定法 此法对大猪很适用。对缺少犬齿的母猪，由于母猪后坐时绳结容易滑脱，经过改进，保定更为方便牢靠。具体方法是：用一根长3米、直径0.5-1厘米的线绳，先打一个活结，套在猪的上腭上，向前拉紧即可。对缺少犬齿

16、而容易滑落的猪，在绑活结时，另一绳头留长点，经过猪两耳后在另一侧打活结再绑紧就不会滑脱了。此法对猪都很安全。 牛的保定 (一)站立保定 站立保定不但适用于一般检查方法和治疗措施(如体温、呼吸、心跳的测定，直肠及各个系统的检查，静脉、肌肉注射等)，而且同样适用于某些手术(如豁鼻修补术、子宫脱出整复术等)。具体的保定方法是：一手抓住牛鼻绳或鼻中隔，另一手抓住牛角即可。另外，在条件许可时，也可将牛置于两树之间，但如行豁鼻修补术、子宫脱出整复术、直肠和阴道脱出整复术及直肠孕娠检查等，必须将牛牵入保定栏内保定。(二)侧卧保定 侧卧保定适合于胸、腹腔手术及性情凶暴牛的去势手术等，具体保定姿势应视其手术部位

17、而定。保定前牛禁食12小时左右，以免引起瘤胃臌气等疾病发生。同时应在较宽敞平坦的场地保定并铺上垫草，否则可能导致发生骨折。牛的侧卧保定至少应由3人操作。根据牛只大小，通常取长度为57米的绳子，折成一长一短两段，短绳端一般为15米左右。在绳的折转处作一猪蹄套，套住欲卧侧的蹄部。将两绳端越过牛的胸部绕到另一侧，短绳端交卧地侧助手固定，将长绳端连续两次绕过牛的胸腹部，并使之滑到跗关节上方，同时收紧绳子，交助手固定。欲使牛卧倒之前，三人分别固定跗关节、前肢及鼻绳端绳子。倒牛时，鼻绳端助手将牛前拉；待牛系绳前肢提举时，该助手用力上拉绳子；与此同时，跗关节绳端助手后拉。如此三者合力， 犬的保定即刻卧地，嘴

18、套保定法 嘴套有皮革制品和铁丝制品两种，有不同型号。选择大小合适的给犬带在嘴上，即可防止咬人。根据诊疗工作的需要，令犬站立或侧卧。保定人员抓住脖圈，固定好头部，防止头部活动即可。如无嘴套。可用绷带代替，即用长1米左右的绷带1根，在绷带中间打一活结圈套，将圈套从鼻端套至鼻背部中间，然后拉紧圈套，并将上下颌用绷带拴紧。站立保定法 站立保定最好由犬的主人进行。其他人员保定时，声调要温和。态度要友善，举动要稳妥，避免粗暴的恐吓和突然动作。保定人员要站于犬的左侧，面向头部，边接近犬边用温和的声调呼唤犬，右手轻拍犬的颈部和胸下方或挠痒并用牵引带套住犬嘴。站立保定适用于一般检查用。侧卧保定法 是将犬的一侧卧

19、于手术台上，用细绳或绷带将两前肢和两后肢分别捆绑在一起，再用细绳将前后肢系紧在手术台上。以防犬助手按住犬头部，即可进行诊疗工作。一般静脉注射或局部治疗处理法保定。但在腹部或会阴部手术时，常需采用仰卧保定法。即先将犬手术台上，然后分别在四肢球节下方栓绳，并在手术台上拴紧。使展，仰卧。另用一细绳将犬头保定于手术台上，防止活动，即可进行其他诊疗措施。颈钳保定法对凶猛咬人的犬，可采用此法。颈钳保定法需：合适的颈钳，其钳体用铁杆制成，钳柄长90100厘米。钳端为。2025厘米半圆形的钳嘴组成。保定时，保定人员手持颈钳。张开套入犬的颈部，合拢钳嘴后，手持钳柄即可将犬保定。此法对凶猛咬保定可靠，使用也较方便

20、。它也适于捕捉处于兴奋状态的病犬。羊的保定羊的保定法 为防止羊只骚动,便于检查和处理,并确保人畜安全,在临床诊断过程中须对羊只进行保定.羊的性情温顺,力量相对小,因此保定容易,方法也较简单.常用的保定方法有徒手保定法、倒卧保定法和圈抱保定法等.徒手保定是保定者用双手握住羊的双耳或双角及下巴,也可骑在羊背上,用两腿夹住其躯干部,使其站立不动.倒卧保定时,保定者俯身从对侧一手抓住羊的两前肢系部或抓住一前肢臂部,另一手抓住腹肋部膝襞处扳倒羊体,后一只手改为抓住两后肢的系部,前后一起按住即可.此法用于治疗和简单手术时的保定.两手(臂)围抱保定法用于一般检查或治疗.动物活体样品的采集及技术要求一、家禽活

21、体的样品采集1.家禽喉拭子和泄殖腔拭子采集方法 取无菌棉签，插入鸡喉头内或泄殖腔转动3圈，取出，插入离心管内。（事先加入1毫升含青霉素链霉素各3000国际单位PH为7.2的PBS）,剪去露出部分，盖紧瓶盖，做好标记。2.羽毛采集方法 拔取受检鸡含羽髓丰满的羽毛或身上其他部位的大羽，将含有羽髓的羽根部分按编号分别剪下收集于小试管内，于每根试管内滴加蒸馏水2-3滴，（羽髓丰满时也可不加）。用玻璃棒将羽髓挤压于试管底，市羽髓浸出液流至管口，用滴管将其吸出。二、猪活体的样品采集1.扁桃体采取方法 从活体采取扁桃体时，应该使用专用扁桃体采集器，先用开口器开口，可以看到突出的扁桃体，把采样钩放在扁桃体上，

22、快速扣动扳机取出扁桃体方离心管中，冷藏保存。2鼻腔拭子，咽拭子采集方法 用灭菌的 棉拭子采集鼻腔，咽喉的 分泌物，蘸取分泌物后，立即将拭子浸入保存液中，密封低温保存。常用保存液有含抗生素的PBS保存液（ph7.4）,灭r肉汤（ph7.2-7.4）或者30%甘油盐水缓冲液。若准备将待建样本接种组织培养，则应保存于含0.5%乳蛋白水解液中。一般每只拭子需保存液1毫升。3.肛拭子采集方法 用灭菌面拭子插入肛门或泄殖腔内采集其内容物和分泌物。立即将拭子浸入保存液中，密封低温保存，一般每只拭子需保存液1毫升。三、牛、羊活体的样品采集1.牛、羊O-P液（咽食道分泌物）的采集方法 被检动物在采集前禁食（可饮

23、少量水）12小时，以免胃内容物反流污染O-P液。采集探杯在使用前经装有0.2%柠檬酸或1%-2%氢氧化钠溶液的塑料桶中浸泡5分钟，再用与动物体温一致的清水冲洗探杯后使用，每采完一头动物，探杯要重复消毒并清洗。采样时动物应站立保定，将探杯随吞咽动作送入食道上部10-15厘米处，轻轻来回抽动2-3次，然后将探杯拉出。取出8-10毫升O-P液，倒入含有等量细胞将培养液（0.5%水解乳蛋白-Earle液）或磷酸缓冲液（0.04摩/升、PH7.4）的灭菌广口瓶中，充分摇匀加盖封口，放冷藏及时送检，未能及时送检应置于-30冷冻保存。2. 胃液及瘤胃内容物采集（1）胃液采集 对于打动物，胃液可用多孔胃管抽取

24、。将胃管送入胃内，其外露端接在吸引器的负压瓶上，加负压后，胃液即可自动流出。如是鼠类，需手术剖腹，从幽门端向胃内插入一塑料管，再由口腔经食道将一塑料管插入前胃，用PH7.5、35左右的生理盐水，以12毫升/小时的流速灌胃，收集流出液，进行分析。（2）瘤胃内容物采集 对活体动物，可以在反刍动物反刍时，当食团从食道逆入口腔时，立即开口拉住舌头，另一只手深入口腔即可取出少量的瘤胃内容物。 四、粪便样品的采集1.用于病毒检验样品 分离病毒的粉笔那必须新鲜。少量采集时，以灭菌的棉拭子从直肠深处或泄殖腔粘膜上蘸取粪便，并立即投入灭菌的试管内加密封，或在试管内加入少量的PH7.4的把保护液在密封。须采集较多

25、量粪便时，可将动物肛门周围消毒后，用器械或用戴上胶手套的手深入直肠内采集粪便。也可用压舌板插入直肠 ，轻轻用力下压，刺激排便，收集粪便。所收集的 粪便装入灭菌的容器内，经密封贴上标签，立即冷藏或冷冻送实验室。2.用于细菌检验的粪便样品采集 做细菌检验的粪便，最好是在动物氏用抗菌药物之前，从直肠或泄殖腔内采集新鲜粪便。采样方法与供病毒检验的方法相同。粪便样品较少事，可投入无菌缓冲盐水或肉汤试管内，较多粪便可装入灭菌容器内，贴上标签后冷藏送实验室。3.用于寄生虫检验的粪便样品采集 粪便样品应选自新排除的粪便或者从直肠内采得，以保持虫体或虫体节片及虫卵的固有形态，一般寄生虫检验所用粪便量较多，需采取

26、519克新鲜粪便。打家畜一般不少于60克，并应从粪便的内外各层采取。粪便样品以冷藏不冻结态保存。 五、生殖道样品采集 生殖道样品主要包括动物流产排出的胎儿，死胎，胎盘，阴道分泌物，阴道冲洗液，阴茎包皮冲洗液，精液，受精卵等。 生殖道样品采集方法有：1.流产胎儿及胎盘 可按采集组织样品的方法，无菌采集有病变组织，也可按检验目的采集血液或其他组织。或将流产后的整个胎儿用塑料薄膜油布或数层不透水的油纸包紧，装入冷藏箱，放入冰袋，即送实验室。2.精液 用人工方法采集，并避免加入防腐剂 。3.阴道，阴茎包皮分泌物 克用棉拭子从深部取样，采集后立即放入盛有灭菌肉汤等保存液的试管内，冷藏送检。亦可将阴茎包皮

27、外周阴户周围消毒后，以灭菌缓冲液或汉克氏液冲洗阴道，阴茎包皮，收集冲洗液。六、皮肤样品采集 活动物的病变皮肤如有新乡的水疱皮。结节，痂皮等克直接剪取35克，活动物的寄生虫病如疥蟎，痒蟎等，在患病皮肤与健康皮肤交接处，用凸刃笑道，刀刃与皮肤表面垂直，刮取皮屑，直到皮肤轻度出血，接取皮屑供检验。 七、脓汁 做病原检验，应在药物未治疗前采取。采集已破口脓灶脓汁，应用棉拭子蘸取；未破口脓汁用注射器抽取。 八、尿液样本 动物排尿时，用清洁容器直接接取。也克可使用塑料袋，固定在雌畜外阴部或雄畜的阴茎下接取尿液。采取尿液，应在早晨进行。也可以用导管导尿或膀胱穿刺进行。 九、关节及胸腹腔积液的采集1.皮下水肿

28、液和关节囊（腔）渗出液 用注射器从积液处抽取。2.胸腔渗出液 在牛右侧低五肋间或左侧第六肋间用注射器刺入抽取，马在右侧第六肋间或左侧第七肋间刺入抽取。3.腹腔积液 采集牛腹腔积液， 在最后肋骨的后缘右侧做垂线，再由膝盖骨向前引一水平线，两线焦点至膝盖骨中点为穿刺部位，用注射器抽取；马的 腹腔积液穿刺部位只能在马的左腹部。 十、乳液乳房先用消毒水进行消毒，洗净（取乳者的手事先应消毒），并把乳房附近的毛刷湿，最初所挤的34把乳汁弃去，然后再采集10毫升左右乳汁放入灭菌试管内，进行血清学检验的乳汁不应加热，凝结或剧烈震动。十一、脊髓液采集方法使用特制的专用穿刺针，或用厂的封闭针头（将针头磨钝，并配以

29、合适的针芯）；穿刺前，术部及用具均按常规消毒。1.颈椎穿刺法 穿刺点为环枢孔。动物应站立或横卧保定，使其头部向前下方屈曲，术部经剪毛消毒，穿刺针与皮肤面呈垂直，缓慢刺入。将针体刺入蛛网膜下腔。立即拔出针芯。脑脊髓液立即流出或点滴状流出，盛入消毒容器内。大型动物一般穿刺一次采集量35-70毫升。2.腰椎穿刺法 穿刺部位为腰荐孔。动物站立保定，术部经剪毛消毒，用专用的穿刺针穿入，当刺入蛛网膜下腔时，既有脑脊髓液滴出或用消毒注射器抽取，盛入消毒容器内。大型动物腰椎穿刺一次采集量1530毫升。病死畜禽的解剖与病变组织器官的采集及技术要求采取病料时，应根据生前发病情况或对疾病的初步诊断印象，有选择的采取

30、相应病变最严重的脏器或最典型的病变内容物。如分不清并的性质或种类时，可全面采取病料。采样原则：采集有病变的器官组织，要采集病变与健康器官组织交界处，先采实质器官，如脾肾，后采集污染的器官组织，如胃肠等。一、小家畜或家禽活体或尸体的采取将病死畜禽或病畜禽致死后，装入密封塑料袋内，放入有冰袋的冷藏箱内，及时送往实验室。二 实质器官的采取先采集小的实质器官如脾、肾、淋巴结，小的实质器官可以完整的采取。大的实质器官如心、肝、肺等，采集有病变的部分，要采集病变和健康组织交界处。1.做病理组织学检验的组织样品必须保持新鲜 采样时，采集包括病灶及临近正常组织的交界部位取组织块。若同一组织有不同的病变，应同时

31、各取一块。切取组织样品的刀具应十分锋利，取材后立即放入10倍于组织的10%福尔马林溶液固定。组织块厚度不超过0.5厘米，切成12厘米2（检查狂犬病则需要较大的组织块）。组织块切忌挤压，刮摸和水洗。如作冷冻切片用，则将组织块放在04容器内，尽快送实验室检验。2.用于病原分离的组织样品的采集 用于微生物学检验的病料应新鲜，尽可能减少污染。(1)用于细菌分离样品的采集，首先以烧红的刀片烧烙组织表面，在烧烙部位刺一孔，用灭菌的铂金耳深入空内，取少量组织作涂片镜检或划线接种于适宜的培养基上。如遇尸体已经腐败，某些疫病的致病菌仍可采集长骨、肋骨，从骨髓中分离细菌。采集所有组织应分别放入灭菌容器内或灭菌塑料

32、袋内，贴上标签，立即冷藏运送到实验室。必要时也可以暂做冻结处理，但冻结时间不宜过长。(2)用于病毒检验样品采集制备办法 做病毒检验时，必须用无菌技术采集，用一套已消毒的器械切取所需器官组织块，每取一个组织块，应用火焰消毒剪镊等取样器械，组织块分别放入灭菌容器内并立即密封，贴上标签，注明日期、组织或动物名称，注意防止组织间相互污染。将采取的样品放入冷藏容器立即送实验室。如果运送时间较长，可做冻结状态，也可以将组织块浸泡在PH7.4乳汉氏液或磷酸缓冲肉汤保护液内，并按每毫升保护液加青霉素、链霉素个1000国际单位，然后放入冷藏瓶内送实验室。三、畜禽肠管及肠内容物样品采集与制备方法 肠管的采集：用线

33、扎紧病变明显处（约5-10）厘米的两端，自扎线外侧剪断，把该段肠管置于灭菌容器中。冷藏送检。肠管内容物的采集：选择肠道病变明显的部位，取内容物，用灭菌生理盐水轻轻冲洗，也可烧烙肠壁表面，用吸管扎穿肠壁，从肠腔内吸取内容物，将肠内容物放入盛有灭菌的30%甘油盐水缓冲保存液中送检。 四、眼睛 样品采集 眼结膜表面用拭子轻轻擦拭后，放在灭菌的30%甘油盐水缓冲保存液，也可采取病变组织碎屑，置载玻片上，供显微镜检查。 五、皮肤样品采集1.皮肤采集 采集扑杀或死后的动物皮肤样品，用灭菌器械取病变部位及与之交界的小部分健康皮肤（大约10 厘米10厘米），包存于30%的甘油缓冲液中，或10%饱和盐水溶液中；

34、活动物的病变皮肤如有新鲜的水疱皮，结节，痂皮等可直接剪取35克；活动物的寄生虫病如疥蟎，痒蟎等，在患病皮肤与健康皮肤交界处，用凸刃小刀，刀刃与皮肤表面垂直，刮取皮屑，直到皮肤轻度出血，接取皮屑供检验。2.动物皮肤样品制备方法 病原检验样品的制备方法：剪取检验样品的制备方法：剪取的供病原学检验的皮肤样品应放入灭菌容器内，加适量PH7.4的50%甘油磷酸缓冲液（A4），可加适量抗生素，加盖密封后，尽快冷冻保存。组织学检验制备方法：剪取的作组织学检验的皮肤样品应立即投入固定液保存。 寄生虫检验样品制备方法：供寄生虫检验的皮肤样品可放入有盖容器内。六、骨样品采集 需要完整的骨样本时，应将附着的肌肉和韧

35、带等全部剔除，表面洒上食盐，然后包入浸过5%石碳酸溶液的纱布中，装入不漏水的容器内保存。七、脑采集全脑做病毒检查，可将脑浸入30%甘油盐水液中或将整个头部割下，泡入浸过消毒液的纱布中，置于不漏水的容器内保存。牛，羊海绵状脑病采样的组织，采样的组织，采样时先打开头盖骨，取脑干延髓的脑闩区域，需冰冻保存（-70，无条件则-20保存，）：其余大脑小脑脑干组织采集后立即置于10%福尔马林里，越快越好。尽量取全脑组织，包括大脑，小脑脑干。注意脑组织应在动物死亡后尽快采集。或在枕骨大孔处用剪刀剪开脑硬膜，目的是便于插入采样勺。然后用一个手指伸入枕骨大孔中，沿着延脑延髓转一周，目的是切断延脑与头骨之间相连的

36、神经和血管，以便于脑组织顺利挖出。从延脑腹侧（也即勺子从枕骨大孔上面进入），将采样勺插入枕骨大孔中，插入时采样勺要紧贴枕骨大孔的腔壁，以免损坏脑组织。采样勺插入的深度约为57厘米，（采羊脑时插入深度约为4厘米），然后向上一扳勺柄，同时向外抠出脑组织和勺子，延脑便可完整取出。注意：尽量保护好延脑“三岔口”处（脑闩部）组织完整性。需哦狂犬病的尼格里氏体检查的 脑组织，取样影较大，一部分供在载玻片做触片用，另一部分供固定，用zenker氏固定液固定（重铬酸钾36克，氯化高汞54克，氯化钠60克，冰醋酸50毫升，蒸馏水950毫升）。用作其他包涵体检查的组织用氯化高汞甲醛固定液（氯化高汞饱和水溶9份，甲

37、醛溶液1份）。八、其他为监测环境卫生或调查动物疫病，从遗弃物。通风管，下水道，孵化场或屠宰场采集自然样品。将固体平面培养基暴露于空气中，采集空气中的微生物。九、样品的记录，保存，包装和运送一 采样记录采样同时，填写采样单，包括场名，畜种，日龄联人，电话。规模。采样数量。样品名称，编号，免疫情况，临床表现等（结合疫情监测上报系统填写）。采样单应用钢笔或签字笔逐相填写（一式三份），样品标签和封条应用签字笔填写，小塑料离心管上可用记号笔做标记。应将采样单和病史资料装在塑料包装袋中，并随样品送实验室。样品信息应至少包括以下内容：1.畜主姓名和畜禽场地址： 2.畜禽农场里饲养动物的品种及数量；3.被感染

38、动物或易感染动物种类及数量；4.首发病例和继发病例的日期； 5.感染动物在畜禽群里分布的情况；6.死亡动物数量，出现临床症状动物数量及年龄；7.临床症状及持续时间，包括口腔，眼睛及腿部情况，产奶或产蛋记录。死亡情况和时间。免疫和用药情况等；8.饲养类型和标准，包括饲料；9.送检样品清单和说明，包括病料种类，保存方法等；10.动物治疗史；11 要求做何种试验和监测；12 送检者的姓名，地址，邮编和电话；13送检日期；14采样人和被采样单位签章。二 样品包装要求装载样品的容器可选用玻璃的或塑料的，可以是瓶式，试管式或袋式。容器必须完整无损，密封不漏出液体。装供病原学检验样品的容器，用前彻底清洗干净

39、，必要时经清洁液浸泡，冲洗干净后以干热或高压灭菌并烘干。如选用塑料容器，能耐高压的经高压灭菌，不能耐高压的经环氧乙烷熏蒸消毒或紫外线距离20厘米直射2小时灭菌后使用。根据检验样品形状及检验目的选择不同的容器，一个容器装量不可过多，尤其是液态样品不可超过容量的80%，以防冻结时容器破裂。装入样品必须加盖，然后用胶布或封箱胶带固定，若为液态样品，在胶布或封箱胶带外还需用液态石蜡加封，以防止外泄。如果选用塑料袋，应用两层带，分别用线结扎代口，防止液体深处或入水污染袋口。每个样品应单独包装，在样品袋或平皿外粘贴标签，标签应注明样品名，样品编号，采样日期等。装拭子样品的小塑料离心管应放在特定塑料盒内。血

40、清样品装于小瓶时，应用铝盒存放，盒内添加填塞物避免小瓶晃动，若装于小塑料离心管时，应置于塑料盒内。包装袋，塑料袋及铝盒应贴封条。封条上应有采样人签章。并注明贴封日期，标注放置方向。三 样品的保存病料正确的保存方法，是病料保持新乡或接近新鲜状态的根本保证，是保证检测结果准确无误的重要条件。(一） 血清血检验病料的保存一般情况下，病料采取后应尽快送检，如远距离送检，可在血清中加入青霉素，链霉素预防腐败，除了做细胞培养和试验用的血清往外，其他血清还可加入0.08叠氮纳，0.5%石碳酸生理盐水等防腐剂。另外，应避免使样品接触高温和阳光，同时严防容器破损；（二）微生物检验材料的保存1液体病料 粘液，渗出

41、物，胆汁，血液等，最好收集在灭菌的小试管或青霉素瓶中，密封后用纸或棉花包裹，装入较大容器在装瓶或盒送检。2用棉拭子蘸取的鼻液。脓汁。粪便等病料，应将每支棉拭子剪断或烧断，投入灭菌试管内，立即密封管口包装送检。3.实质脏器4在短时间内（夏季不超过20小时，冬季不超过2天），能送到检验单位的 ，可将病料的容器方在装有冰块的保温瓶内送检。短时间内不能送到的供细菌检查者，放入灭菌流动石蜡或灭菌的30%甘油生理盐水中保存；供病毒检验者放入灭菌的50%甘油生理盐水中保存。（一） 病理组织检验材料的保存采取的病料通常使用10%福尔马林固定保存。冬季为防止冰冻可用90%酒精，固定液要禁没固定材料。如用10%福

42、尔马林溶液固定组织时，经24小时应重新换液一次。神经系统组织（脑，脊髓）需要固定于10%中性福尔马林溶液中，其配置方法事在溶液的总容积中加入5%-10%碳酸镁，在寒冷季节为避免病料冻结，在运送前可预先将用福尔马林固定过的病料置于含有30%50%甘油的10%福尔马林溶液中。 （二）毒物中毒检验材料的保存检验采样后，内脏，肌肉，血液可合装一清洁容器内，胃内容物与呕吐物合装一容器内，粪，尿，水和饲料等应分别装瓶，瓶上要贴有标签著名并料名称及保存方法等，然后严密包装，在短时间内j尽快送到实验室或派专人送指定单位检验。四、样品的运送所采集的杨浦你以最快最直接的途径送往实验室，若样品能在采集后24小时内送

43、进实验室则可放在4度左右的容器内送检，只有在24小时内不能送进实验室的并不致影响检验结果的情况下，才可把样品冷冻并以此状态运送。根据检验需要决定送往实验室的赝品是否放在保存液中运送。 要避免样品泄露。装在试管或广口瓶中的病料觅封侯装在冰瓶中运送，防止容器倾倒。若需寄送，则用带螺口的瓶子封装阳平，并用石蜡或胶带封口。将装样品的有识别标记的瓶子方在更大的具有监视外壳的容器内，垫上足够缓冲材料。空运时将其放入飞机加压仓内。制成的涂片触片压片，在玻片上注明号码并另附说明。玻片两端用细木条分隔开，层层叠加，底层和最上一层涂面向里，用细线包扎，再用纸包好，在保证不会压碎的情况下运输。所有样品都要贴上详细标

44、签，各种样品送抵实验室后，应按照有关规定冷藏或冷冻保存，长期保存的样品应置于超低温冷冻条件下（70度以下 ），避免反复冻融。猪口蹄疫病毒VPI结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验猪口蹄疫病毒VPI结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒使用说明： 主要成份 试剂盒中含有：猪口蹄疫病毒VPI结构蛋白抗原包被板、阴性对照血清、阳性对照血清、样品稀释液、酶结合物、酶结合物稀释液、TMB底物A液、TMB底物B液、终止液、浓缩洗涤液、稀释板、一次性封板膜、微孔定位标签、使用说明书。作用与用途 用于检测猪口蹄病毒VPI结构蛋白抗体。与猪口蹄疫病毒非结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒联合使用，可区分口蹄疫病毒感染

45、动物及疫苗免疫动物。用法 （1）使用前将试剂盒恢复到室温，避免阳光直射或放置在30以上的环境中。 （2）取出试剂盒中的样品稀释板。A1、B1两孔作为阴性对照孔，C1、D1两孔作为阳性对照孔，其余孔作检测孔，每孔一个样品。 （3）在稀释板的各孔中加入200u1样品稀释液。在相应各孔中分别加入10 u1对照血清或被检血清样品。用加样器重复吹吸数次。稀释每个样品时必须使用不同的吸头。（4）取出抗原包被板。（5）分别从稀释板上取稀释后的对照血清和被检血清各100u1，加至抗原包被板的相应孔中，加盖或封膜后，置372下孵育605分钟。（6）洗涤工作液配置：按需要量，用去离子水或双蒸水将洗涤液作25倍稀释

46、。（7）用洗涤工作液洗涤抗原包被板，每孔300 u1，洗涤6次，拍干。（8）酶结合物工作液配置：用酶结合物稀释液将酶结合物作100倍稀释，现配现用。（9）每孔加入100u1酶结合物工作液，加盖或封膜后，置372下孵育302分钟。（10）重复7。（11）PMB底物工作液配置：将TMB底物B液和TMB底物A液等量混合。现配现用。（12）每孔加入100 u1 TMB底物工作液，加盖或封膜后，置372下孵育151分钟。（13）每孔加入100 u1终止液，并轻轻振荡混匀。（14）在15分钟内，用酶联读数仪测定在450nm波长下的0D值。判定 （1）阴性对照平均0D值应0.20，每个阳性对照孔0D值应0.5，且2.0,否则，试验无效。临界值=0.23X阳性对照孔平均0D值。 （2）被检样品孔0D值临界值时，判为阴性，即为抗口蹄疫病毒VPI结构蛋白抗体阴性。 （3）被检样品孔0D值临界值，判为阳性。 （4）对判定结果为阳性的样品，应用2个孔进行得复检测。重复检测后，若至少有一个孔位阳性，则判为口蹄疫病毒VPI结构蛋白抗体阴性。 （5）当猪口蹄疫病毒VPI结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒联合使用时，按下列标准进行最终判字。