吩噻嗪类药物课件.ppt

《吩噻嗪类药物课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《吩噻嗪类药物课件.ppt（58页珍藏版）》请在三一办公上搜索。

1、第九章杂环类药物的分析,药物分析教研室,Analytical of Heterocyclic drugs,吡啶类,喹啉类,托烷类,吩噻嗪类,苯并二氮杂卓类,杂环类,Contents,第一节 吡啶类药物的分析,吡 啶(Pyridine),尼可刹米(Nikethamide),硝苯地平(Nifedipine),一、主要性质与鉴别试验,第一节 吡啶类药物的分析,1.吡啶环的特性吡啶环开环适用于、位无取代，或位被羧酸衍生物取代的异烟肼、尼克刹米,A.戊烯二醛反应（kning反应）,尼克刹米,戊醛二烯,第一节 吡啶类药物的分析,在无水的条件下，吡啶及其衍生物与3,4-二硝基氯苯混合共热或加热至熔融，冷却后

2、，加醇制氢氧化钾溶液将残渣溶解，溶液呈紫红色。,B.二硝基氯苯反应（Vongerichten反应）,异烟肼氧化成羧基；尼克刹米水解成羧基,2.弱碱性：吡啶环N原子为碱性原子，吡啶环pKb为8.8（水中），可用于鉴别和非水滴定。尼克刹米：除了吡啶环上的N原子外，吡啶环位被酰氨基取代，遇碱水解释放二乙胺。Chp2005鉴别：取本品10滴，加氢氧化钠试液3ml，加热，即发生二乙胺的臭气，能使湿润的红色石蕊试纸变蓝色。,第一节 吡啶类药物的分析,3.还原性,第一节 吡啶类药物的分析,异烟肼吡啶环位被酰肼所取代，有较强的还原性，可被不同的氧化剂氧化，也可与某些含有羰基的化合物发生缩合反应。,异烟肼与硝酸

3、银银镜反应Chp2005：取本品约10mg，置试管中，加水2ml 溶解后，加氨制硝酸银试液1ml，即发生 气泡与黑色浑浊，并在试管壁上生成银镜。,A.还原反应,B.缩合反应,第一节 吡啶类药物的分析,香草醛,异烟腙(黄色结晶),取本品约0.1g，加水5ml 溶解后，加10香草醛的乙醇溶液 1ml，摇匀，微热，放冷，即析出黄色结晶；滤过，用稀乙醇重结晶，在105 干燥后，依法测定（附录 C），熔点为228 231，熔融时同时分解。,第一节 吡啶类药物的分析,异烟肼的其它鉴别反应,与亚硒酸作用，可将其还原为红色硒的沉淀,与1,2-萘醌-4-磺酸在碱性介质中，可缩合呈红色。,显红色,第一节 吡啶类药

4、物的分析,4.形成沉淀(重金属盐类或苦味酸),尼克刹米的鉴别：取本品2滴，加水1ml，摇匀，加硫酸铜试液2滴与硫氰酸铵试液3 滴，即生 成草绿色沉淀。异烟肼、尼克刹米可与氯化汞形成白色沉淀。,5.分解产物,异烟肼、尼克刹米等与无水碳酸钠或氢氧化钙共热，可发生脱羧降解，并有吡啶臭味逸出。,第一节 吡啶类药物的分析,UV和IR,二、Detection of specific impurities,一、异烟肼中游离肼的检查,异烟肼不稳定，游离肼即可能在原料中引入，又可能在贮藏过程中降解诱变剂和致癌物质,1、TLC(BP、Ch.P),肼对二甲基苯甲醛腙(显色),2、比浊法(JP)专属性差,肼水杨醛乙醇

5、液混浊,二、Detection of specific impurities,二、尼克刹米中有关物质的检查,检查方法：取本品，加甲醇制成每1ml中含40mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取适量，加甲醇分别稀释成每1ml 中含0.4mg 和40g的溶液，作为对照溶液(1)和(2)。照薄层色谱法（附录 B）试验，吸取上述三种溶液各10l，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以氯仿丙醇(75:25)为展开剂，展开后，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液(2)的主斑点比较，不得更深；如有1点超过时，应不深于对照溶液(1)的主斑点。,TLC(无杂质对照品高低浓度对比法

6、),二、Detection of specific impurities,三、二氢吡啶类有关物质的检查,HPLC法测定，避光操作,硝苯地平,第二节 喹啉类药物的分析,硫酸奎宁(Quinine sulfate),硫酸奎尼丁(quinidine sulfate),盐酸环丙沙星(ciprofloxacin hydrochloride),第二节 喹啉类药物的分析,一、主要性质,1.碱性,环丙沙星：盐酸；奎宁、奎尼丁：二元酸硫酸（喹核碱含脂环氮，碱性强）奎宁(左旋体)：pKb1为5.07 pKb2为9.7，饱和水溶液pH为8.8，易溶于氯仿无水乙醇(2:1)奎尼丁(右旋体)：pKb1为5.4pKb2为1

7、0，易溶于沸水或乙醇,喹啉环上的N原子具有碱性，与强酸成盐,2.旋光性,硫酸奎宁(左旋体)硫酸奎尼丁(右旋体),3.荧光特性硫酸奎宁和硫酸奎宁丁在稀硫酸中显蓝色荧光，盐酸环丙沙星无荧光。,二、Identification,一、绿奎宁反应（Thalleioquin）奎宁和奎尼丁鉴别,二醌基亚胺的胺盐,取其水溶液加溴试液23滴和氨试液1ml，即显翠绿色；加酸至中性显蓝色；酸性则呈紫红色；翠绿色可转溶于醇、氯仿中不溶于醚。,二、Identification,二、光谱特征,UV盐酸环丙沙星：取本品，加0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml中含8g的溶液，照分光光度法(附录 A)测定，在 277nm与31

8、5nm的波长处有最大吸收。FLD硫酸奎宁：取本品约20mg，加水20ml溶解后，分取溶液10ml，加稀硫酸使成酸性，即显蓝色荧光。,三、无机酸盐,硫酸奎宁、硫酸奎尼丁硫酸根氯化钡白色沉淀 盐酸环丙沙星盐酸根硝酸银白色沉淀,三、Detection of specific impurities,一、硫酸奎宁,1.酸度酸性杂质 取本品0.2g，加水20ml溶解后，测定pH值应为5.76.6。2.氯仿乙醇不溶物 取本品2g，加氯仿无水乙醇(2:1)的混合液15ml，在50加热10min后，用称定重量的垂熔坩埚滤过，滤渣用上述混合液分5 次洗涤，每次10ml，在105 干燥至恒重，遗留残渣不得过2mg。

9、3.其他金鸡纳碱(TLC、HPLC),三、Detection of specific impurities,1.酸度 取本品，加水制成每1ml中含25mg的溶液，测定pH值应为3.04.5。2.溶液的澄清度和颜色 取本品0.1g，加水10ml溶解后，溶液应澄清；如显色，与黄色或黄绿色4号标准比色液(附录 A)比较，不得更深。3.有关物质（HPLC）,二、盐酸环丙沙星中特殊杂质检查,第三节 托烷类药物,莨菪烷(Tropane),莨菪醇(Tropine),硫酸阿托品(atropine),氢溴酸东莨菪碱(scopolamine hydrochloride),*,*,*,*,第三节 托烷类药物,一、主

10、要性质,1.水解性（酯水解生成醇和酸）,阿托品 莨菪醇 莨菪酸,2.碱性阿托品和东莨菪碱结构中，五元脂环含有叔胺氮原子，较强的碱性，易于酸成盐，如阿托品pKb1为4.353.旋光性,一、托烷生物碱一般鉴别试验(Vitaili反应),取供试品约10mg，加发烟硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黄色的残渣，放冷，加乙醇23滴，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。,二、Identification,二、氧化反应,三、沉淀反应,生物碱与生物碱沉淀剂生成沉淀,阿托品氯化汞醇试液黄色沉淀东莨菪碱氯化汞醇白色复盐沉淀,四、硫酸盐和溴化物反应,二、Identification,三、Detection of specif

11、ic impurities,一、氢溴酸东莨菪碱,酸度易氧化物阿扑阿托品、颠茄碱 其它生物碱阿扑阿托品、其他含有不饱和双键的有机物质,二、硫酸阿托品,第四节 吩噻嗪类药物,吩噻嗪类药物为苯并噻嗪的衍生物，分子结构中均含有硫氮杂蒽母核，基本结构如下：,R:-H、-Cl、-CF3、-COCH3、-SCH2CH3R:具有23碳链的二甲或二乙胺基，或含氮杂环如哌嗪和哌啶的衍生物,一、主要性质与鉴别,第四节 吩噻嗪类药物,1.UV 硫氮杂蒽母核为共轭三环的系统，紫外区三个吸收峰值，约205nm、254nm、300nm，最强多在254nm附近，根据2位、10位取代基不同，可引起最大吸收峰的位移。当母核的二价

12、硫被氧化为砜或亚砜，则呈现四个峰值。,2.IR,第四节 吩噻嗪类药物,3.氧化呈色 硫氮杂蒽母核中的二价硫易氧化，母核易被不同的氧化剂氧化成亚砜、砜等不同的产物，随取代基的不同，呈现不同的颜色。,第四节 吩噻嗪类药物,4.金属离子络合显色,未氧化的硫可与金属钯离子形成配位化合物，而氧化产物亚砜、砜则不能，可用于鉴别和含有测定，具有专属性。,取本品约50mg，加甲醇2ml溶解后，加0.1%氯化钯溶液3ml，既有沉淀生成，并显红色，再加过量的氯化钯溶液，颜色变深。,1-二甲氨基-2-氯丙烷,第四节 吩噻嗪类药物,5.分解产物特性（如氟奋乃静等含氟有机药物）,红色,黄色,二、有关物质鉴别,1.盐酸异

13、丙嗪,第四节 吩噻嗪类药物,1-二甲氨基-2-氯丙烷,2-二甲氨基-1-丙醇,异丙美沙嗪,此异构体在丙酮中溶解度大，精制也不易除去。异丙嗪不太稳定，易氧化，贮藏过程可能分解。,第四节 吩噻嗪类药物,方法TLC法以自身高低浓度对照法控制其限量。硅胶GF254 展开剂：环已烷-丙酮-二乙胺 在紫外灯下检视。注射剂的检查中：采用二个限量的对照溶液 规定：供试品溶液如显杂质斑点，不得多于3个；其杂质斑点与对照溶液(2)的主斑点比较，不得更深；如有一个超过，应不深于对照溶液(1)的主斑点。,第五节 苯并二氮杂卓类药物,地西泮(diazepam),七元亚胺内酰胺环,奥普唑仑,奥沙西泮(Oxazepam),

14、氯氮卓(Chlordiazepoxide),第五节 苯并二氮杂卓类药物,一、鉴别试验,(一)化学鉴别试验 1.沉淀反应 氯氮卓 橙红色沉淀 阿普唑仑 KBiI4 盐酸氟西泮 也生成橙红色沉淀 氯硝西泮 放置后，沉淀颜色变深，因此可以相互区别。,阿普唑仑+遇硅钨酸 白色沉淀，药典中也用于鉴别。,第五节 苯并二氮杂卓类药物,2.水解后呈芳伯胺反应 氯氮卓和奥沙西泮的盐酸溶液(12)，缓缓加热煮沸，放冷，加亚硝酸钠和碱性-萘酚试液，生成橙红色沉淀，后者放置后颜色变暗。,3.分解产物的反应 有机氯化合物，氧瓶燃烧法破坏，生成HCl，以5%氢氧化钠溶液吸收，硝酸酸化，显氯化物反应。,第五节 苯并二氮杂卓

15、类药物,4.硫酸荧光反应：苯并二氮杂卓类药物溶于硫酸/稀硫酸在紫外光(365nm)下显不同的颜色。,(二)UV,第五节 苯并二氮杂卓类药物,第五节 苯并二氮杂卓类药物,(三)TLC,硅胶G薄层板，苯丙酮(3:2)为展开剂，稀硫酸喷雾，105干燥30min，紫外灯下检视荧光斑点,*s,m,w分别表示荧光的强、中、弱,二、有关物质检查,第五节 苯并二氮杂卓类药物,TLC HPLC GC,第六节 含量测定,非水溶液滴定法 氧化还原滴定法 酸性染料比色法 紫外分光光度法 气相色谱法 高效液相色谱法 液质联用法,第六节 含量测定,一、非水溶液滴定法,当HA酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低HA

16、的酸性，使反应顺利地完成。,游离碱类盐,被置换出的弱酸,第六节 含量测定,供试品,+,冰醋酸,10ml30ml,若供试品为氢卤酸盐再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml5ml,结果,HClO4滴定,空白试验校正,指示剂,碱性溶液pKb10，冰醋酸中滴定突跃不明显，需加入醋酐，使碱性增强，突跃更明显,第六节 含量测定,问题讨论,1.适用范围 主要用于Kb10-8的有机碱盐的含量测定。对碱性较弱的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴定剂和终点指示的方法，可使pKb为813的弱碱性药物采用本法滴定。Kb为10-810-10时，宜选冰醋酸作为溶剂；Kb为10-1010-12时，宜选冰醋酸与醋酐的混合溶液；Kb1

17、0-12时，应用醋酐作为溶剂。冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突跃显著增大。,咖啡因(pKb=14.2),第六节 含量测定,2.酸根的影响,高氯酸氢溴酸硫酸盐酸硝酸,消除HX干扰的方法：加Hg(Ac)2 量不足终点不明显，结果偏低。2BHX+Hg(Ac)2 2BHAc+HgX2,过量(13倍)不影响测定结果,3.滴定剂的稳定性,4.终点指示方法,常用电位法和指示剂法,应用实例游离弱碱性药物：地西泮、尼克刹米或氯氮卓，基于氮原子的弱碱性可以结晶紫为指示剂，非水溶液直接滴定，终点颜色绿色蓝绿色蓝色不等。氢卤酸盐类药物：加入过量的醋酸汞冰醋酸溶液，使其形成难电离的卤化汞，再用高氯酸滴定，可用结晶

18、紫、橙黄作为指示剂，或用电位法指示终点。硫酸盐类药物：硫酸为二元酸，但在非水介质中只显示一元酸解离为HSO4-,第六节 含量测定,第六节 含量测定,硝酸盐类：滴定反应完全，硝酸破坏指示剂，使用电位滴定法指示终点。磷酸盐类：冰醋酸中酸性极弱，直接滴定。,A.硫酸阿托品测定,(BH+)2SO42-+HClO4(BH+)ClO4-+(BH+)HSO4-,一元强碱,直接滴定,冰醋酸、醋酐混合溶剂,结晶紫,第六节 含量测定,B.硫酸奎宁测定,第六节 含量测定,二、氧化还原滴定法,1.铈量法,吩噻嗪类药物自身颜色的变化,Free radical 红色自由基,Bivalent cation 二价阳离子，无色

19、,邻二氮菲指示剂(邻二氮菲亚铁盐溶液),(还原型)红色(氧化型)浅蓝色,电位法、永停法,第六节 含量测定,硝苯地平,2.溴酸钾法,粉红色消失,第六节 含量测定,三、酸性染料比色法,UV,第六节 含量测定,应用示例,氢溴酸东莨菪碱片的含量测定,精密量取对照品溶液和供试品溶液各2ml，分别置预先精密加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加溴甲酚绿溶液4ml，振摇提取后，静置使分层；分取三氯甲烷液，照紫外-可见分光光度法，在420nm波长处分别测定吸光度，计算，即得。,第六节 含量测定,影响因素,水性最佳pH值：使得BH+和In-最多 酸性染料及其浓度：定量结合，产物溶解性好；可稍过量 有机溶剂的选择

20、：提取效率高，氯仿最理想 水分的影响：影响结果，脱水剂或滤纸除去水分 酸性染料里面的有色杂质,四、UV,第六节 含量测定,1.直接紫外测定,奥沙西泮原料的测定229nm采用标准对照法测定。盐酸异丙嗪片的测定249nm测定A。盐酸异丙嗪注射液的测定299nm测定A,2.萃取后紫外测定,碱化，有机溶剂萃取游离型碱，使其与制剂辅料分离，再用分光光度法测定,3.萃取-双波长分光光度法,碱化，有机溶剂萃取，在254nm、277nm波长处测定吸收，用吸收度之差计算含量，以消除抗氧剂的干扰。,4.二阶导数分光光度法,第六节 含量测定,5.钯离子比色法,500nm,通过空白试验对照法，可选择性地消除吩噻嗪类药

21、物中氧化物的干扰，准确测定未被氧化的吩噻嗪药物的含量。,五、GC,第六节 含量测定,分离效能好、灵敏度高、选择性好、用量少、分析速度快,有机碱或其盐类均可直接GC分析，但盐解离的酸对色谱柱和检测器会损害，因此一般将生物碱盐的水溶液先碱化，用有机溶剂提取游离碱后再分析。,六、HPLC,固定相：十八烷基硅烷键合硅胶（ODS）流动相：水甲醇或水乙腈系统，极性较强极性较强的组分在分离时先流出柱子，极性较弱的组分后流出柱子，适合于共存组分极性差异较大样品的分析。杂环类药物分析一般加入扫尾剂二乙胺或三乙胺。,第六节 含量测定,Ion-Pair HPLC,测定杂环类药物中吡啶类、喹啉类等药物时，主要采用烷基磺酸盐（如戊烷磺酸钠、庚烷磺酸钠）或其他盐类。,影响条件：流动相一般呈酸性，以利于生物碱的离解；离子对试剂的非极性部分越大，形成的离子对分配系数越大，保留时间越长（十二烷基磺酸钠庚烷磺酸钠戊烷磺酸钠）。,第六节 含量测定,七、LC-MS/MS,三重四极杆(QQQ),Thank You!,