分光光度技术课件.ppt
《分光光度技术课件.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《分光光度技术课件.ppt(28页珍藏版)》请在三一办公上搜索。
1、第一章 分光光度技术p1,分光光度法(Spectrophotometry):它是根据物质对不同波长的光线具有选择性吸收,每种物质都具有其特异的吸收光谱,而建立起来的一种定量、定性分析的技术。也称为吸收光谱法(Absorption spectrometry)。它不需要我们把欲分析的样品从混合物中分离开来,即可利用样品特殊的吸收峰或特殊的显色反应,直接进行定性、定量的分析。,第一节 基本原理,一、光的基本知识 光是由光量子组成的,具有二重性,即不连续的微粒性和连续的波动性。波长和频率是光的波动性的特征,可用下式表示:C 为波长,为频率,c为光速,等于299 7704kms。,第一节 基本原理,入射
2、光的强度为Io,通过厚度为L的溶液后,透射光的强度为It,称为透光度(transmittance),用T表示。lg 称为吸光度A(Aabsorbance A),又称为消光度(degree of extinction E)或光密度(optical density D)。,图1-1 光吸收示意图,第一节 基本原理,二、朗伯一比尔(1ambertBeer)定律 AKLC 它表示溶液的吸光度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比。,第一节 基本原理,三、吸光系数 吸光系数的物理意义是吸光物质在单位浓度及单位厚度时的吸光度。1.摩尔吸光系数:指1摩尔浓度的溶液在厚度为1cm时,在某一特定波长下的吸光度,用或E
3、M表示。2.百分吸光系数 其意义指某物质的1%(W/V)浓度的溶液,在厚度为1cm时,在某一特定波长下的吸光度,用E1%来表示。两种吸光系数表示方式之间的关系是 E1%,第二节 分光光度计的基本类型和组件,一、分光光度计的基本类型1:单光束分光光度计 2:双光束分光光度计3:二极管距阵分光光度计 4:双波长分光光度计,第二节 分光光度计的基本类型和组件,一、光光度计的基本类型,图1-2 各种类型分光光度计的结构示意图A:单光束分光光度计 B:双光束分光光度计C:二极管距阵分光光度计 D:双波长分光光度计,第二节 分光光度计的基本类型和组件,二、分光光度计的基本组件(一)光源:常用的有白炽灯(钨
4、丝灯、卤钨灯等),气体放电灯(氢灯、氘灯及氙灯等),金属弧灯(各种汞灯)等多种。(二)分光系统(单色器):有棱镜及光栅两种类型。(三)狭缝:一对隔板在光路上形成的缝隙,用来调节入射单色光的纯度和强度,第二节 分光光度计的基本类型和组件,二、分光光度计的基本组件(四)比色杯:玻璃比色杯用于可见光区,紫外光区要用石英比色杯。标准光径为10mm,还有带有自动进样装置的流动池。(五)检测及显示系统:光电检测器有四种类型:光电池、光电管,光电二极管及光电二极管距阵。,第三节 分光光度技术的应用,一、定量分析 1标准曲线(工作曲线)法 2.对比法=,即Cx=Cs 3计算法 C=,第三节 分光光度技术的应用
5、,二、定性分析 用分光光度计绘制出样品的吸收光谱曲线。各种物质都有它自己一定的吸收光谱曲线,利用用吸收光谱曲线图可以进行物质种类的鉴定。一般情况,单独依靠紫外光吸收光谱不能决定一个未知物质的结构,往往需要与红外、质谱等其它方法相配合。,第四节 测试条件的选择,一、测试波长的选择 一般都是选择吸收光谱图中最高峰的max作为测试波长。这不仅能获得高的灵敏度;而且由于在max附近吸光度随波长的变化较小,入射光波长的稍许偏移和非单色性引起的吸光度变化较小,从而对比耳定律的偏离较小,图1-4 测试波长的选择及影响,测试波长的选择及影响,第四节 测试条件的选择,二、测量狭缝的选择 测定狭缝越窄,单色光“越
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 分光 光度 技术 课件

链接地址:https://www.31ppt.com/p-3806151.html