abo血型不合的异基因造血干细胞移植课件.ppt

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1、abo血型不合的异基因造血干细胞移植,ABO血型不合的移植与输血,预处理的最终目的是破坏或最大程度的抑制患者自身的免疫系统，只有在机体不能识别和消灭外来抗原的情况下，植入的异基因造血干细胞才能存活，继而取代患者自身的造血系统，生产制造出正常的血细胞。干细胞的移植能否成功主要与人体HLA(白细胞抗原、组织相容性抗原）系统有关，一般 认为HLA系统位点相合度越高成功机率越 大。,ABO血型不合的移植与输血,需要特别提示：移植后病人输注的红细胞悬液和血小板应进行白细胞过滤和辐照，目的是预防输血相关的移植物抗宿主病(TA-GVHD)，达到安全输血的目的。移植病人登记本操作程序见下，是我们在实践中摸索总

2、结建立的，不全面仅供参考。这样做了以后，血库工作人员重新恢复了信心，能够做 到安全供血，没有发生过不安全苗头。,ABO血型不合移植术后病人第一次血标本处理程序,一建立病人档案 在“移植病人登记本”上登记病人资料：科室、姓名、性别、年龄、病案号、诊断、移植种类、移植物来源、移植日期及目前移植后的天数，移植前后的血型及RhD血型，HLA系统位点相合情况等。资料越完整越好。,ABO血型不合移植术后病人第一次血标本处理程序,二检测项目 1.血型鉴定:(用表格按14+表示)微柱凝胶卡式法 盐水试管法 2.不规则抗体筛查 3.直接抗人球蛋白试验（卡式法）4.自身对照试验 盐水试管法 卡式法或聚凝胺法（根据

3、病人直接抗 人球蛋白试验结果选择）,ABO血型不合移植术后病人第一次血标本处理程序,5.抗体效价测定 微柱凝胶卡式法 盐水试管法 三结论 根据试验结果得出两方面结论，一是目前病人血型状况；二是给病人选择目前最佳的输血血型和品种，提供给医师参考。四将以上各项检测内容记录在“移植病 人登记本”上。,ABO血型不合移植术后病人第二次以后血标本处理程序,一将日期、病人姓名、目前的移植后天数登记在“移植病人登记本”上；二检测项目 1.血型鉴定：要求每次新标本都做，用表格按14+表示 微柱凝胶卡式法 盐水试管法,ABO血型不合移植术后病人第二次以后血标本处理程序,2.不规则抗体筛查 距上一次抗体筛查时间2

4、周或交叉配血主侧不合时，需再次进行抗体筛查 3.直接抗人球蛋白试验 4.自身对照试验:要求每次新标本都做 盐水试管法 微柱凝胶卡式法 聚凝胺法（病人直接抗人球蛋白试验 结果阳性时选择）,ABO血型不合移植术后病人第二次以后血标本处理程序,5.抗体效价测定 要求：距上一次抗体效价测定时间1周时，再次进行效价测定。微柱凝胶卡式法 盐水试管法 三结论：结合病人血常规结果，选择目前最佳输血的血型和品种，提供医师参考。四将以上各项检测内容记录在“移植病 人登记本”上。,应该掌握的基本概念,异基因造血干细胞移植后，供者的血型出现在移植后2242天，大约需要80天才能完全转变为供者血型。但是对于ABO血型不

5、合，特别是主要血型不合的移植患者，可能会出现红系造血的延迟。主要原因是患者残留的抗-A和/或抗-B可破坏供者红细胞，发生溶血反应，影响红系造血的恢复。,应该掌握的基本概念,ABO血型次要不合的移植，也可以发生溶血反应。主要是因为供者来源的血型抗体能识别受者残存的红细胞表面抗原而引起的。患者原有的血清凝集素(抗体)在移植后逐渐减少，至移植后40天甚至更长时间才能完全消失。干细胞表面不表达ABH抗原，所以ABO血型不合并不影响造血干细胞的植活。但是ABO血型不 合可以引起溶血反应、红系造血延迟和 并发纯红细胞再生障碍性贫血（PRCA）。,ABO血型不合移植后的输血原则,ABO血型主要不合 早期输受

6、者(患者)血型红细胞或O型红细胞 血小板、血浆输供者血型或AB型 ABO血型次要不合 早期输供者血型红细胞或O型红细胞 血小板、血浆输受者(患者)血型或AB型,ABO血型不合移植后的输血原则,ABO血型主次均不合 早期输O型红细胞 待患者原有凝集素消失后才可以输供者血型红细胞 血小板和血浆输AB型 了解以上知识对我们正确地分析思 考问题和给病人选择血液品种 和血型有着极大的帮助。,1.ABO血型主次均不合病例：,病历摘要：患者女性，41岁，孕3产1，有输血史。因诊断为AML-M1急性髓系白血病M1型，2007年10月18日在某医院行骨髓移植术，患者为A型血Rh(D)阳性；供者为其胞妹，血型B型

7、，Rh(D)阳性，HLA提示66相合。2008年1月10日行预防性造血干细胞回输。2008年12月17日因移植后白血 病复发再次入院。,1.ABO血型主次均不合病例：,第一次输血前：2009年1月2日 患者ABO/RhD 血型及相关检测，结果如下：一、血型,1.ABO血型主次均不合病例：,二、抗体筛查3细胞：抗人球蛋白凝胶卡和盐水试管法均阴性 三、直接抗人球蛋白试验：阴性 四、自身对照试验：抗人球蛋白凝胶卡及盐水试管法均阴性提问1：根据以上检查情况，患者目前的ABO血型是？已转为移植后供者的血型：B型，反定无 抗-A抗体是正常的,1.ABO血型主次均不合病例：,正定血型转为供者型，但正、反定型

8、不符，还需加做其它试验明确原因 正定血型转为供者型，由于疾病导致自身血型抗体减弱，表现为反定无抗-A 抗体)直接抗人球蛋白试验阴性，说明患者红细胞表面无抗体包被 自身对照试验阴性，说明试验结果是可靠 的,1.ABO血型主次均不合病例：,2009年1月2日第一次输血前的血常规结果：血小板计数8109L，申请输血。1月2日至1月15日期间，共输注B型辐照机 采血小板6U。第二次检查：2009年1月15日复查患者ABO/Rh(D)血型及相关检测，结果如下：一、血型,1.ABO血型主次均不合病例：,二、抗体筛查（3细胞）：抗人球蛋白凝胶卡和盐水试管法均阴性 三、直接抗人球蛋白试验：W+抗人球蛋白凝胶卡

9、 四、自身对照试验：抗人球蛋白凝胶卡W+；盐水试管法：阴性提问2：根据以上试验结果，患者正、反定型为何又 转为B型表现？,1.ABO血型主次均不合病例：,通过临床治疗病情好转,故自身血型抗体恢复并出现 输入的B型血小板血浆中带入抗-A抗体造成 直接抗球蛋白试验阳性，说明患者红细胞表面有抗体包被 直接抗球蛋白试验阳性，是因为患者存在自身抗体所致 自身对照试验抗人球蛋白凝胶卡阳性是因为直接抗球蛋白试验阳性 自身对照试验盐水试管法阴性，说明患者红细胞表面无IgM抗体包被,1.ABO血型主次均不合病例：,提示：2009年1月15日至2月25日期间，病人输B型辐照机采血小板4U，B型辐照悬浮红细胞6U。

10、第三次检查：2009年2月25日复查ABO/Rh(D)血型及相关检测，结果如下：一、血型,1.ABO血型主次均不合病例：,二、抗体筛查（3细胞）：抗人球蛋白凝胶卡和盐水试管法均阴性 三、直接抗人球蛋白试验：1+抗人球蛋白凝胶卡 四、自身对照试验：抗人球蛋白凝胶卡1+）；盐水试管法W+）提问3：根据以上试验结果，目前病人应选择以下 哪些血液品种输注？,1.ABO血型主次均不合病例：,B型悬浮红细胞 O型悬浮红细胞 B型辐照悬浮红细胞 O型辐照悬浮红细胞 O型辐照洗涤红细胞 B型机采血小板 B型辐照机采血小板 AB型机采血小板 AB型辐照机采血小板,1.ABO血型主次均不合病例：,提示：2009年

11、2月25日至3月14日期间，病人输B型辐照机采血小板5U，O型辐照洗涤红细胞4U，AB型辐照机采血小板7U。第四次检查：2009年3月14日复查ABO/(RhD血 型及相关检测，结果如下：一、血型,1.ABO血型主次均不合病例：,二、抗体筛查（3细胞）：抗人球蛋白凝胶卡和盐水试管法均阴性 三、直接抗人球蛋白试验：1+抗人球蛋白凝胶卡 四、自身对照试验：抗人球蛋白凝胶卡1+）；盐水试管法W+）提问4：以下哪些因素可造成上述试验结果？,1.ABO血型主次均不合病例：,移植后因白血病复发，患者原骨髓生成少量A型红细胞 移植转型后产生的抗-A抗体减弱，有可能是与新生成的少量A抗原结合并破坏 输入血液中

12、的抗-A抗体减弱，有可能是与新生成的少量A型红细胞结合并破坏 直接抗球蛋白试验阳性，说明患者红细胞表面有抗体包被 正定血型抗-B表现血球上下分离，说明B抗原已减弱，部分红细胞上无B抗原 患者出现的抗-B抗体是由于输血品种选 择不当引起,2.血型相容性肝移植与输血病例,病历摘要：患者女性，52岁，2006年7月28日因胆管癌在我院行肝移植术。无输血史，孕2产2。术前血红蛋白128g/L，血小板117109/L,血型B型,RhD(+)，抗体筛查阴性。供肝者为O型。术中输配血相合的B型红细胞悬液9U及新鲜冰 冻血浆2400ml，无不良反应。术后第1天查血红蛋白109g/L，血小板125109/L。1

13、周后出现血 红蛋白下降，术后13天时降至49g/L，申 请输血。,2.血型相容性肝移植与输血病例,配血(微柱凝胶LISS-IAT卡)时发现:患者与12名B型供者主侧阳性，凝集强度2+2+s。血液内科诊断溶血性贫血，建议尽量不要输血。病人肝移植后重度贫血，血色素呈逐渐下降趋势，病情危重但无法输血，原因何在？输血实验室快速开展各项检查，希望尽快 查明原因，挽救病人生命！,2.血型相容性肝移植与输血病例,试验结果如下：1.患者血型鉴定：结果见表1和表2。2.抗体筛查：输血前阴性。配血不合后用谱细 胞做抗体鉴定，在盐水、凝聚胺和微柱凝胶（LISS-IAT）卡中均阴性。3.患者血清中抗-B抗体性质：结果

14、见表3。4.患者直接抗人球蛋白试验：结果见表4。5.放散试验：患者洗涤的压积红细胞用三氯甲 烷放散，对放散液检测结果见表5。,2.血型相容性肝移植与输血病例,表-1 患者输血前血型鉴定结果,2.血型相容性肝移植与输血病例,表-2 输血后13d血型鉴定结果（毛细管离心法分离患者自身红细胞）,2.血型相容性肝移植与输血病例,表3 患者输血后血清用DTT处理前后试验结果,2.血型相容性肝移植与输血病例,表4 患者输血前后直接抗人球试验结果,2.血型相容性肝移植与输血病例,表5 患者红细胞放散液检测结果,2.血型相容性肝移植与输血病例,吸收放散试验：患者出院2个月后复查，对其红细胞（DAT阴性）做吸收

15、放散试验，4吸收2小时、56放散,结果见表6。亚型特点：吸收弱、放散强。表6 患者红细胞吸收放散结果（出院2个月后）,2.血型相容性肝移植与输血病例,病例分析：病史回顾 本例患者为ABO血型相容性肝移植，术前采 用达亚美血型卡检测患者血型，其正反定血型 符合正常B型表现，与B型供者配血相合，输血 后无不良反应。术后1周患者出现不明原因贫 血，13天血红蛋白降至49g/L，临床表现为溶 血性贫血。再次与B型血配血主侧不合。,2.血型相容性肝移植与输血病例,实验显示 用试管法做正反定型，室温立即离心结果象正常B型，室温和4分别放置15分钟后，检出患者血清中有弱的IgM性质的抗-B，患者红细胞上H抗

16、原增强，且比正常B型红细胞吸收弱放散强，证明患者为B亚型，血清中有抗-B抗体。对血清中抗-B抗体性质进行分析，证明存在 IgM和IgG性质抗-B。,2.血型相容性肝移植与输血病例,实验显示 患者红细胞直接抗人球蛋白试验阳性，经直 抗分型试验，发现患者红细胞上包被了IgG抗体。用三氯甲烷放散，放散液与Bc LISS-IAT试验阳性，与Oc不反应，说明患者红细胞上包被的是IgG性质抗-B抗体。,2.血型相容性肝移植与输血病例,经重新给患者进行相关实验室检查，确定其血型为B亚型，输血后产生IgG抗-B抗体导致主侧配血不合并引起迟发性溶血反应。查清原因后，通知肝胆外科医师病人可以输血治疗了。从术后第1

17、4天起给患者输O型洗涤红细胞2U/日，连续5d共输10U，患者血红蛋白升至103g/L，病情稳定出院。两个月后患者复查血红 蛋白107g/L,血小板227109/L。,2.血型相容性肝移植与输血病例,讨论 B亚型人血清中存在的天然IgM抗-B，在37 一般无反应活性，输配血相合的B型血不会引起 溶血性输血反应。但如果患者因输血或妊娠免 疫产生IgG抗-B，就会出现与B型血配血不合，或发生溶血性输血反应。本例患者为B亚型，患者血清中可能一直有 弱的IgM抗-B抗体，但是用血型卡未检测到。术 前与B型血用LISS-IAT法配血相合，说明 患者血清中无IgG抗-B抗体。,2.血型相容性肝移植与输血病例,输O型洗涤红细胞后，患者血红蛋白逐渐上 升，病情稳定出院。两个月后患者复查血红蛋 白正常。本例为B亚型患者接受O型肝移植，当发生溶 血性贫血及配血不合时，应从多方面考虑问 题，根据实验结果客观分析原因。,2.血型相容性肝移植与输血病例,启示：1.肝移植手术前应加强与临床科沟通，了解供受体之间ABO血型属于相同、相容还是不合，以便有的放矢地解决输血中出现的问题；2.对ABO血型相容性肝移植，还要注意排除随供肝进入受体内的“过客”淋巴细胞产生抗红细胞抗体而发生的溶血性贫血。,50,结束语,谢谢大家聆听！,