自身免疫性疾病相关检测课件.ppt

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1、编辑ppt,自身免疫性疾病相关检测,Qingmao Geng,自体免疫性疾病（Autoimmune disease），亦作自体免疫问题，是一种人体内自己的免疫系统攻击自己身体正常细胞/组织/器官的疾病，就是正常的免疫能力下降，而异常的免疫能力却突显的一种问题。自身免疫病的特点：多数病因不明，常呈自发性或特发性；多数病程较长，多呈反复发作和慢性迁延过程；某些具有遗传倾向；多数疾病女性多于男性；多数患者血清中可以检测到抗核抗体或其它自身抗体；,自身免疫性疾病,分类：系统性，组织器官特异性。目前主要的疾病包括：,主 要 疾 病,涉及的科室：风湿免疫科、皮肤科、呼吸内科、血液科、肾内科、消化科、骨科、

2、保健科、神经内科等。,编辑ppt,传统定义：针对细胞核成分的自身抗体的总称。广义定义：针对细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称。对ANA 的理解不再局限于核成分，而是指核酸和核蛋白抗体的总称ANA的靶抗原分布：细胞核 整个细胞，包括细胞核、细胞浆、细胞骨架、细胞分裂周期蛋白等。ENA：抗可提取核抗原，包括RNP/Sm,Sm,SSA,SSB,Scl-70和Jo-1等 六种靶抗 原,抗核抗体的定义,编辑ppt,抗核抗体主要检测方法,间接免疫荧光法：最经典，金标准！酶联免疫吸附试验（ELISA）：可定量免疫印迹法（WB）：特异性非常好线性酶免：兼顾特异性、敏感度放射免疫法：灵敏度好,抗核抗体的主要检测

3、方法,编辑ppt,美国风湿学会(ACR)立场声明,HEp-2 细胞包含大约100 至150 种自身抗原 其它初筛方法仅具有少量自身抗原(8-10),大约 35%SLE患者和IFT-ANA阳性患者在其它初筛实验中为阴性结果,建议：IFT-ANA仍然为ANA检测的金标准!,编辑ppt,ANA检测间接免疫荧光法(IFT),抗原谱完整(细胞核、细胞浆)检测ANA的金标准，具有很高的敏感性和特异性 基质组合:HEp-2细胞+灵长类肝,编辑ppt,根据产生的荧光模型、靶抗原的分布分类如下：,ANA,核均质型：DNA、组蛋白和核小体等,核膜型：板层素、gp210等,核颗粒型,核仁型：Scl-70、RNA多聚

4、酶、PM-Scl和原纤维蛋白等,核浆点型：着丝点、核点等,胞浆颗粒型：线粒体、Jo-1、核糖体等,胞浆纤维型：波形蛋白、原肌球蛋白和肌动蛋白等,分裂期细胞阳性：纺垂体、中间体、中心粒等,核糖核蛋白：Sm、nRNP、SS-A、SS-B,细胞核,细胞浆,Ku,细胞周期蛋白：I型（PCNA）和II型,抗核抗体荧光结果,编辑ppt,编辑ppt,荧光结果滴度的解读,编辑ppt,SLE诊断标准（ACR2009年修订）,编辑ppt,ANA检测的临床意义,系统性红斑狼疮活动期非活动期药物诱导的红斑狼疮混合性结缔组织病（MCTD、Sharp综合征）类风湿性关节炎进行性系统性硬化症多发性肌炎及皮肌炎干燥综合征慢性

5、活动性肝炎溃疡性结肠炎其它风湿病正常人,9510080100100100204020508595305070803040265-10,编辑ppt,抗核抗体谱项目介绍,编辑ppt,欧蒙印迹法 实验原理,实验原理将抗原包被在固相膜片上，然后将膜片固定在合成膜条上。若样本阳性，血清/浆中的特异性抗体与固相上的抗原结合。结合的抗体与碱性磷酸酶标记的抗人抗体结果。加入色原/底物液产生颜色反应。依据所包被的抗原，可在相同条件下同时检测多种抗体。,编辑ppt,ANA-3G 检测项目,编辑ppt,ANA-3G各项自身抗体的临床意义,编辑ppt,SLE,SjS,Scl,MCTD,PBC,PM/DM,编辑ppt,

6、编辑ppt,话题:ANA全抗原检测与特异性检测,编辑ppt,全抗原检测与特异性检测,HEp-2 cells+primate liver,+,ANA profile 3G,编辑ppt,协和医院的临床研究,编辑ppt,协和医院的临床研究,SSA and/or Ro52+(n=11),Histone+(n=1),Scl-70+(n=1),Jo-1+(n=1),M2+(n=1),编辑ppt,协和医院的临床研究,编辑ppt,最新研究,IFT为阴性时，LIA的符合率为74.8%LIA为阳性时，IFT的符合率为81.1%,编辑ppt,最新研究,IFT为阴性，而LIA为阳性的206例患者中,编辑ppt,最新研

7、究,原文中的讨论,编辑ppt,最新研究,最终的结论,编辑ppt,ACR的申明,编辑ppt,荧光阳性而靶抗原阴性,如果所有的已知靶抗原都是阴性，那做荧光检测的意义是什么？,编辑ppt,案例分析,编辑ppt,47岁的中年妇女，临床症状提示可能SLE，但ANA靶抗原检测全部阴性。由于受到血清学检测结果的干扰，最终得出的诊断为皮肤结节性多动脉炎专家提出质疑，要求用IFT方法重新检测ANA，发现为强阳性。根据ANA-IFT的阳性结果，最终修正结果为SLE，由于正确的诊断，患者得到了良好的治疗结论：不明靶抗原的ANA荧光阳性，是具有诊断意义的。,案例分析,编辑ppt,SLE诊断标准（ACR2009年修订）

8、,编辑ppt,慢性炎症性结缔组织病(CICTD),慢性炎症性结缔组织病(CICTD),Systemischer Lupus Erythematodes(SLE),干燥综合征(SS),系统性硬化症(SSc),Rheumatoide Arthritis(RA),多肌炎/皮肌炎(PM/DM),类风湿性关节炎(RA),系统性红斑狼疮(SLE),ANCA 相关性血管炎,MPO and PR3,编辑ppt,慢性炎症性结缔组织病(CICTD),慢性炎症性结缔组织病(CICTD),Systemischer Lupus Erythematodes(SLE),干燥综合征(SS),系统性硬化症(SSc),Rheum

9、atoide Arthritis(RA),多肌炎/皮肌炎(PM/DM),类风湿性关节炎(RA),系统性红斑狼疮(SLE),ANCA 相关性血管炎,MPO and PR3,编辑ppt,侵犯皮肤和多脏器的一种全身性自身免疫病。某些不明病因诱导机体产生多种自身抗体(如抗核抗体等)，导致：自身抗体与相应自身抗原结合为循环免疫复合物，通过III型超敏反应而损伤自身组织和器官；抗血细胞自身抗体与血细胞表面抗原结合，通过II型超敏反应而损伤血细胞。,系统性红斑狼疮（SLE）,临床发病特点 发病率:40/100,000(北欧);200/100,000(非洲);250,000(美国)患者寿命:4年/50%(19

10、50);15/80%(当前);20岁诊断/35岁死亡几率1:6,编辑ppt,SLE 各器官的表现,编辑ppt,关于SLE的诊断经历了很长时间，其标准也不断修正和完善，基本上存在4个标准：,SLE标准,编辑ppt,颊部红斑：固定红斑，扁平或高起，在两颧突出部位，不累及鼻唇沟。盘状红斑：片状高起的红斑，粘附有角质脱屑和毛囊栓，老的病变可发生萎缩性瘢痕。光过敏：对日光有不寻常的反应引起皮疹，从病史得知或医生观察到。口腔溃疡：经医生观察到的口腔或鼻咽部溃疡，一般无痛性。关节炎：非糜烂性关节炎，累及2个或更多的外周关节，特征为压痛、肿胀、积液。浆膜炎：a、胸膜炎明确的胸膜炎性疼痛史，经医生听到摩擦音或有

11、胸腔积液。b、心包炎心电图（ECG）记录，或心包摩擦音，或心包积液的证据。,1982年标准,编辑ppt,肾脏病变：a、持续性蛋白尿，尿蛋白的定量每日超过0.5g或定性实验+。b、细胞管型，可为红细胞、血红蛋白、颗粒管型等或混合性。神经病变：a、癫痫没有诱发药物或已知的代谢紊乱，如尿毒症、酮症酸中毒或电解质紊乱。b、精神病没有药物影响或已知的代谢紊乱，如尿毒症、酮症酸中毒或电解质紊乱。血液学改变：a、溶血性贫血伴有网织红细胞增多。b、白细胞减少2次或多次低于4.0109/L。c、淋巴细胞减少2次或多次低于1.5109/L。d、血小板减少在没有药物影响下低于100109/L。,1982年标准,编辑

12、ppt,免疫学异常：a、阳性LE细胞反应。b、抗DNA抗体和抗天然DNA抗体滴度异常。c、抗Sm抗体阳性，存在抗Sm核抗原的抗体。d、假阳性梅毒血清试验，至少持续6个月，并经梅毒螺旋体固定试验或荧光螺旋抗体吸收试验证实。抗核抗体：在任何恰当时间和在没有用药诱发“药物性狼疮”综合征的情况下，免疫荧光或其它相应的试验检测出抗核抗体滴度的改变。用于临床研究鉴别病人，在任何观察期间，如上述11条标准中有4条以上同时出现，可以认为病人有系统性红斑狼疮。,1982年标准,编辑ppt,临床标准急性或亚急性皮肤狼疮表现；慢性皮肤狼疮表现；口腔或鼻咽部溃疡；脱发炎性滑膜炎，有2个外周关节肿痛或压痛伴晨僵；浆膜炎

13、；肾脏病变：尿蛋白0.5g/24h，或有RBC管型；神经病变：癫痫发作或精神失常，多发性单神经炎，脊髓炎，外周或颅神经病变，脑炎溶血性贫血WBC 4 X 109/L至少一次，或淋巴细胞 1 X 109/L至少一次；血小板100 X 109/L至少一次。,2009年标准,编辑ppt,免疫学诊断标准ANA滴度高于正常值；抗dsDNA高于参考值；抗Sm抗体;抗磷脂抗体阳性，即狼疮抗凝物阳性，梅毒血清学试验假阳性，抗心磷脂抗体水平升高；补体降低，包括C3、C4和CH50；直接抗人球蛋白（Combs）实验阳性（非溶血性贫血状态）。,2009年标准,编辑ppt,确诊条件：肾活检证实为LN（免疫荧光技术）：

14、肾小球基底膜广泛的Ig、C3、C4、C1q沉积“满堂亮”满足以上4条标准（包括至少一条临床标准和至少一条免疫学标准）与以前标准的差别：明确分为两类标准：临床标准和免疫学标准增加了自身抗体的种类和比重,2009年标准,编辑ppt,SLE相关自身抗体,高特异性抗体,编辑ppt,核均质型HEp-2-Cells/Primate liver,EUROIMMUN,编辑ppt,-检测方法:IIFT,Farr-法(RIA),ELISA or Blot,抗dsDNA 自身抗体,编辑ppt,高度特异性抗体70%患者阳性滴度与疾病活动性相关抗体滴度上升但临床症状不明显的患者，抗体检测后5年内80%患者进入活动期,抗

15、dsDNA抗体与SLE,用两种或两种以上的方法进行检测！,靶抗原：dsDNA-组蛋白-复合物的构象决定簇方法：IIFA、ELISA、Blot临床意义：SLE，阳性率5095%；特异性：接近100%,抗核小体抗体与SLE,ANuA与疾病的活动性相关性强（SLEDAI score）Su et al.,ClinImmunol122:115-120,2007,抗核小体抗体与SLE,编辑ppt,抗核小体抗体与SLE,编辑ppt,抗核小体抗体与狼疮性肾炎,LNTP=lupus nephritis requiring renal transplantationLN=biopsy proven lupus n

16、ephritisCON=SLE patients without nephritis,狼疮肾炎是SLE的一种潜在的严重并发症(高达 50%)1.2%需要进行肾移植的患者有狼疮肾炎,伴有狼疮肾炎的严重SLE的生物标记物,Stinton et al.,Lupus 15:394-400,2007,编辑ppt,U1-nRNP and Sm,Anti-Sm,Anti-U1 RNP,MCTD:95-100%SLE:15-40%,SLE:530%,Anti-Sm and SLE,Elizabeth Benito-Garcia et al.,Arthritis Care&Research 51(6),2004

17、,10301044,编辑ppt,Anti-RNP and SLE,Elizabeth Benito-Garcia et al.,Arthritis Care&Research 51(6),2004,10301044,核糖体60S亚单位的3个蛋白：P0,P1,P2.在羧基末端有相同的免疫反应表位。核糖体P抗原的五聚体复合物。,抗核糖体P蛋白抗体,*systemicsclerosis,Sjgrens syndrome,dermato-/polymyositis,抗核糖体P蛋白抗体与SLE,对SLE 接近100%特异性；9.4%阳性率。,编辑ppt,抗核糖体P蛋白抗体与SLE,对SLE 接近100%

18、特异性；5.4%阳性率。,编辑ppt,细胞周期蛋白I型（PCNA）,靶抗原：细胞周期依赖性表达(S-期)三聚体(36 kDa)，是DNA多聚酶的辅因子并参与DNA 修复调控检测:IIFT,Blot临床意义:SLE高特异性(阳性率37%),特异性接近100%。与肾脏和CNS及血小板减少相关,编辑ppt,全抗体检测实验：间接免疫荧光法（IIFT）（抗核抗体）单抗体检测实验：ELISA或Blot实验（dsDNA，Sm，U1-RNP，核小体，核糖体P蛋白，PCNA，C1q等）,SLE相关抗体检测,编辑ppt,慢性炎症性结缔组织病(CICTD),慢性炎症性结缔组织病(CICTD),Systemische

19、r Lupus Erythematodes(SLE),干燥综合征(SS),系统性硬化症(SSc),Rheumatoide Arthritis(RA),多肌炎/皮肌炎(PM/DM),类风湿性关节炎(RA),系统性红斑狼疮(SLE),ANCA 相关性血管炎,MPO and PR3,编辑ppt,干燥综合征（SjS）,干燥综合症又名舍格伦综合症。英文名称为Sjgrens syndrome。国内调查证实，人群中患病为0.290.77；西方国家人群中患病率在风湿性疾病中占第二位，女性占90以上，多在中年以后发病。是自免疫疾病的一种，具体来讲是自身的免疫细胞攻击并破坏自身功能正常的分泌腺，主要以侵犯泪腺、唾

20、液腺等外分泌腺为主，又称为自身免疫性外分泌腺体病。,编辑ppt,干燥综合征,主要表现为干燥性角膜、结膜炎、口腔干燥症或伴发类风湿性关节炎等其它风湿性疾病，它可累及其他系统如呼吸系、消化系、泌尿系、血液系、神经系以及肌肉、关节等 造成多系统、多器官受损。,本病可以单独存在，亦可出现在其他自身免疫病中。单独存在者为原发性干燥综合征（pSS），而继发于类风湿性关节炎、系统性硬皮病、系统性红斑狼疮等其他自身免疫病者为继发性干燥综合征（sSS）。,编辑ppt,SS 常见症状,口鼻干：吞咽馒头之类的食物困难，舌面干燥、溃疡或光滑如镜面。眼干泪少：异物感，眼睑反复化脓性感染，甚至视力下降。龋齿：多个不易控制

21、的龋齿，牙齿变黑，小片脱落。腮腺、颌下腺反复肿大、疼痛。全身乏力、低热、肌肉关节痛、肌无力。阴道、皮肤干燥、瘙痒，紫癜样皮疹，结节性红斑。本病是一种预后较好的自身免疫病，仅有少数患者有合并淋巴瘤的危险。有内脏损害者经恰当治疗，大多可缓解。及早发现，正确治疗，可预防因长期干燥造成的口眼干燥及肾、肺、肝脏等脏器的损害。,Classification criteria for SS,眼部症状,组织病理学,唾液腺,口腔症状,自身抗体,眼部指标,编辑ppt,Classifation for SS,编辑ppt,SS 诊断,新修订的干燥综合征诊断标准要求同时存在迹象、病征及实验室检验结果才能确诊。病人报告的

22、病征必须同时包括眼部及口腔的病理现象，例如每天眼睛干燥并持续三个月以上，以及需要喝水才能咽下食物等。客观的取证则包括前面提到的泪液分泌试验以及玫瑰色染色法(或类似的其它染色法)，同时组织病理学的检查也应该显示出小唾液腺焦点淋巴浸润德情况。实验室血清学诊断，即应该检测出SS-A和/或SS-B自身抗体。在诊断时，需要排除以下情况：曾对头部及颈部进行过放射疗法；处于淋巴癌早期；患有丙型肝炎、艾滋病、结节病或者移植器官排斥等疾病；使用抗胆碱药物后未超过其四倍代谢时间等。,编辑ppt,SS antibody,编辑ppt,抗SSA/SSB抗体,编辑ppt,SS-A,SS-B and Ro-52,SS-A

23、and Ro-52,Boire et al.,1995:-Ro-52抗体不与SS-A抗原结合-纯化的SS-A 抗原不包含Ro-52 抗原,Anti-Ro52,Ro52在SS中阳性率较高，疾病特异性较差！在很多自免疾病中都出现，指示作用！Meyer,Schlumberger et al.,4th Asian Congress on Autoimmunity,Singapore,Sep.2009,编辑ppt,Anti-Ro52:不同组别中均可出现,具有一定的提示意义！,编辑ppt,全抗体检测实验：间接免疫荧光法（IIFT）（抗核抗体）单抗体检测实验：ELISA或Blot实验（SS-A和SS-B）,

24、SS实验室诊断,编辑ppt,慢性炎症性结缔组织病(CICTD),慢性炎症性结缔组织病(CICTD),Systemischer Lupus Erythematodes(SLE),干燥综合征(SS),系统性硬化症(SSc),Rheumatoide Arthritis(RA),多肌炎/皮肌炎(PM/DM),类风湿性关节炎(RA),系统性红斑狼疮(SLE),ANCA 相关性血管炎,MPO and PR3,编辑ppt,系统性硬化症,系统性硬化症（硬皮病）是一种以皮肤各系统胶原纤维硬化为特征的结缔组织疾病。本病在结缔组织病中仅次于红斑狼疮而居第二位。患者以女性较多，女性与男性之比约为31。发病年龄以205

25、0岁多见。,编辑ppt,常见症状,-表皮硬化-指端硬化，爪型手-面具脸(嘴周边出现皱纹,嘴唇变薄)-毛细血管扩张(表面血管永久性扩张)-表皮钙质沉着(血管壁与皮肤钙化),编辑ppt,临床分类,分为两大类：,在进行诊断时，应将实验室结果和临床表现结合！,编辑ppt,SSc 自身抗体,编辑ppt,抗着丝点抗体HEp-2-Cells/Primate liver,编辑ppt,抗着丝点抗体,靶抗原:着丝点-DNA联合蛋白:CENP(A,B,C,D)检测方法:IIFT,ELISA,Blot临床意义:局限性PSS(CREST-Syndrome)经常出现在:硬皮病-PBC-重叠综合症,编辑ppt,抗Scl 7

26、0抗体HEp-2-Cells/Primate liver:,编辑ppt,抗Scl-70抗体,靶抗原:DNA-拓扑异构酶I(100 kDa)DNA双螺旋复制和转录检测方法:IIFA,ELISA,Blot临床意义:弥散性硬皮病的诊断标志(50-75%)。预后:较着丝点阳性的患者病情更严重。,编辑ppt,anti-CenpB and anti-Scl-70 autobody,只检测Scl-70会导致35.93%漏诊！58.3%的Scl患者分别出现Scl-70或CenpB阳性，同时检测有利于提高阳性率！,编辑ppt,抗RNA聚合酶I抗体HEp-2-Cells/Primate liver,EUROIMM

27、UN,编辑ppt,抗原纤维蛋白抗体HEp-2-Cells/Primate liver:,EUROIMMUN,编辑ppt,抗PM-Scl抗体HEp-2-Cells/Primate liver,编辑ppt,Anti-PM-Scl,靶抗原:PM-Scl:11到16 个多肽复合物在rRNA和一些U-snRNAs剪接中起作用检测方法:IIFT,ELISA,Blot临床意义:重叠综合症的诊断标志，表现为肌炎和硬皮病症状(阳性率50-70%)。,编辑ppt,SSc 自身抗体研究,患者血清:129 份SSc血清和202份对照血清(50 PM/DM,50 SLE,42 RA,60 HD),所有抗原的血清命中率为

28、85.3%！,编辑ppt,SSc 自身抗体检测,1、全抗原检测实验：间接免疫荧光法（抗核抗体）2、纯抗原检测实验：ELISA或印迹（抗Scl-70,CENP A,CENP B,RP11,RP155,Fibrillin,NOR-90,Th/T1,PM-Scl,Ku,PDGFR抗体）,编辑ppt,慢性炎症性结缔组织病(CICTD),慢性炎症性结缔组织病(CICTD),Systemischer Lupus Erythematodes(SLE),干燥综合征(SS),系统性硬化症(SSc),Rheumatoide Arthritis(RA),多肌炎/皮肌炎(PM/DM),类风湿性关节炎(RA),系统性红

29、斑狼疮(SLE),ANCA 相关性血管炎,MPO and PR3,编辑ppt,多肌炎/皮肌炎（PM/DM）,属自身免疫性肌肉炎症性疾病。机体产生多种抗肌肉组织的自身抗体，为系统性结缔组织疾病，临床表现为肌肉炎症和特征性皮炎。主要有多肌炎和皮肌炎两种。本病并不少见，发病率低于系统性红斑狼疮和进行性系统性硬化症，但比结节性多动脉炎高。男女之比为1:2。任何年龄组的人都可以发病，但发病率最高的是4060岁者，或为515岁的儿童。,编辑ppt,典型症状,症状:-肌肉疼痛/肌无力（比如肩膀、骨盆）-皮肤症状:-红斑-膝盖/手指关节处皮肤异变-皮肤褪色,编辑ppt,实验室抗核抗体检测,抗核抗体和细胞浆抗体

30、 LE细胞约10%阳性，抗核抗体约1/51/3病例阳性，核型主要为微小斑点型。抗J0-1抗体：抗原为组胺酰tRNA全成酶，抗胞浆抗体，PM中阳性率为30%40%，DM中5%，儿童型DM中罕见。亦可见于重叠综合征尤其伴有干燥综合征患者。其间质性肺部疾患密切关联。抗Mi-2抗体：Mi-2抗原为一核蛋白，约8%病例阳性，儿童型DM及伴恶性肿瘤的DM偶见。抗PM-1/PM-Scl抗体：抗原为核仁蛋白，阳性率为812%，亦可见于与硬皮病重叠的病例。,编辑ppt,实验室抗核抗体检测,抗PL-7抗体：即抗苏氨酰tRNA合成酶抗体，肌炎患者中阳性率为3%4%。抗PL-12抗体：即抗丙氨酰tRNA合成酶抗体，阳

31、性率为3%，在非肌炎患者中抗PL-7和PL-12抗体均属罕见，两者与J0-1抗体相关的疾患为同一亚类肌炎。肌炎患者中发现的其他细胞浆抗体有：1）Fer抗体；2）Mas抗体，两者均属罕见；3）Ro/SS-A抗体和La/SS-B抗体，肌炎患者的阳性率通常为7%8%，常见于与其他结缔组织病重叠的病例；4）抗U1SmRNP抗体，在DM/PM患者中阳性率为10%15%。,编辑ppt,PM/DM auto-antibody,编辑ppt,抗Jo-1抗体HEp-2-cells/Primate liver,编辑ppt,Anti Jo-1,靶抗原:Jo-1（组胺酰-tRNA合成酶）检测方法:IIFA,ELISA,

32、Blot临床意义:对多肌炎具有高度特异性（阳性率2535%）Jo-1:病情严重的标志。常与肺纤维化有关（70%）,编辑ppt,氨酰基-tRNA-合成酶,编辑ppt,抗Mi-2抗体 HEp-2-Cells/Primate liver,编辑ppt,Anti Mi-2,靶抗原:多组分系统；与组蛋白乙酰基转移酶和核小体重塑活性有关的主要抗原（218kDa）临床意义:肌炎5-15%（主要是皮肌炎）,编辑ppt,抗Ku抗体HEp-2-Cells/Primate liver,编辑ppt,Anti Ku(P70/P80),靶抗原:DNA结合的非组蛋白和DNA依赖的蛋白酶异源二聚体分析方法:IIFA，Blot临

33、床意义:PM/Scl-重叠综合症30-55%SLE 5-10%,编辑ppt,其他与肌炎相关的抗体,Anti-SRP,Anti-PL-12,编辑ppt,肌炎相关抗体-1,Rnnelidet al.,Autoimmun Rev,2009,患者血清：153 份肌炎患者血清：（其中50 DM，89 PM，4 juvenile DM，10 IBM）77 份对照血清：（26 SjS，26 SLE，25 SSc）,所有抗原的血清学命中率：26%,编辑ppt,肌炎相关抗体-2,Ghirardelloet al.,AutoimmunRev,2009,患者血清：208份肌炎患者血清：214份对照血清：（50 HD

34、，65 SLE，34 SSc，21 SjS，13 非自身免疫性肌病，23 CTD-相关性肌炎，8 关节病）,所有抗原的血清学命中率：37%,编辑ppt,全抗体检测实验：IIFT（抗核抗体）单抗体检测实验：ELISA或Blot（Jo-1，Mi-2，Ku，PL-7，PL-12，SRP等）,肌炎相关抗体检测,编辑ppt,慢性炎症性结缔组织病(CICTD),慢性炎症性结缔组织病(CICTD),Systemischer Lupus Erythematodes(SLE),干燥综合征(SS),系统性硬化症(SSc),Rheumatoide Arthritis(RA),多肌炎/皮肌炎(PM/DM),类风湿性关

35、节炎(RA),系统性红斑狼疮(SLE),ANCA 相关性血管炎,MPO and PR3,编辑ppt,ANCA抗中性粒细胞胞浆抗体,ANCA=Anti-Neutrophil Cytoplasm Autoantibodies,william2009_Fifty years of antineutrophil cytoplasmic antibodies(ANCA),编辑ppt,AAV,编辑ppt,相关疾病 IIF染色型 特异性靶抗原抗体 韦格纳氏肉芽肿(WG)c,p(少见)PR3(85%),MPO(10%)显微型多动脉炎(MPA)c,p PR3(30%),MPO(70%)坏死性新月体肾小球肾炎 p

36、,c(少见)PR3(25%),MPO(65%)（NCGN）过敏性肉芽肿性血管炎(CSS)p,c(少见)PR3(10%),MPO(60%)结节性多动脉炎(PAN)低阳性率 PR3(5%),MPO(15%)抗肾小球基底膜疾病 p MPO(30%)（抗GBM病）,ANCA临床意义(1)：原发性系统性小血管炎,编辑ppt,相关疾病 IIF染色型 特异性靶抗原抗体 炎症性肠病 溃疡性结肠炎(UC,60-80%)p,a BPI,lamina？其它 克罗恩病(Crohns病,10-20%)p,a BPI,lamina？其它自身免疫性肝病 原发性硬化性胆管炎(PSC,70-88%)p,a actin?BPI,

37、其它 原发性胆汁性肝硬化(PBC,3-18%)p,a actin?BPI,其它 自身免疫性肝炎(AIH)p,a actin?BPI,其它 结缔组织病 系统性红斑狼疮(SLE)p,a LF,CG,MPO(少见)类风湿性关节炎(RA)p,a LF,CG,MPO(少见)Felty综合征 p,a LF,CG,MPO(少见),ANCA临床意义(2)：IBD/ALD/CTD,编辑ppt,相关疾病 IIF染色型 特异性靶抗原抗体药物性ANCA阳性血管炎 药物性狼疮(DIL)p MPO（常见）LF,HEL 甲状腺功能亢进(PTU治疗)p,a MPO,LF,HEL,BPI,其它呼吸系统炎性疾病 囊性纤维化(CF

38、)a,p BPI（91%）原发性支气管扩张症 a,p BPI，其它 原发性支气管扩张 a,p BPI，其它感染性疾病 细菌(心内膜炎、呼吸道感染)a,p BPI，CG，其它 病毒(HIV感染)a,p 不明 真菌(着色真菌病)a,p 不明 原虫(急性疟疾、侵袭性阿米巴感染)a,p CG，PR3,ANCA临床意义(3)：药物性/感染性疾病,编辑ppt,诊断标准（Chapel Hill Consensus Conference,1994）,韦格纳肉芽肿（WG）：鼻或口腔炎症浸润；痛性或无痛性口腔溃疡；胸部影像学异常：发现结节、浸润或空洞；血尿：红细胞 5/HP 或见红细胞管型；活组织检查:见动脉、小

39、动脉壁内、血管周、血管外区域肉芽肿浸润。（2）Churg-Srauss综合征（CSS）：哮喘：发作时可闻及哮鸣音或呼气相弥散的高调的啰音；外周血嗜酸性粒细胞增多 0.10；单神经病变、多发性单神经病变或多神经病变；肺部浸润：游走性和一过性肺部浸润；副鼻窦异常：急、慢性副鼻窦炎，副鼻窦压痛，或影像学提示副鼻窦混浊；病理：活组织检查发现动脉、小动脉或静脉周围嗜酸性粒细胞聚集。（4）显微镜下多动脉炎（MPA）：活检示小血管的坏死性血管炎和(或)没有明显免疫沉积的肾小球肾炎；多个脏器受累；呼吸系统无肉芽肿炎症。,临床症状+病理活检敏感性约80%，特异性90%,编辑ppt,临床实际应用中的问题 1（以W

40、G为例）,1.传统观念：发病率低，无意识。,鼻塞、流涕、鼻出血耳鼻喉科咳嗽、咳痰、咯血呼吸科血尿、泡沫尿 肾内科甲状腺受累内分泌科.,康春燕,中国人民解放军总医院南楼呼吸科.2010,误诊误治（误诊率44%：中国人民解放军总医院）,2.症状不典型，涉及科室多：,编辑ppt,鼻损害：拟诊鼻疾病 8例，3例做过鼻中隔、鼻甲、鼻窦等切除术。当疗效不佳时，仍未考虑本病。,张孔.中山大学附属第一医院内科.2010,编辑ppt,病历-WG,男，50岁。因发热、咳嗽、右下胸部疼痛3 个月，左耳流脓伴同侧头痛6天入我院。3个月前无明显诱因出现发热，右下胸痛，体温38.5 左右，伴咳嗽、咳少量白痰，当地肿瘤医院

41、查血常规正常，多次痰找结核杆菌阴性，行胸部CT 检查示右下肺斑片状阴影，行B 超引导下经皮穿刺肺活检，病理报告为炎性改变。对症治疗20余天，体温下降，胸痛缓解，复查胸部CT病灶无明显吸收。为明确诊断行右下肺叶切除术，术后病理报告为炎性假瘤，术后无发热，有轻微咳嗽，咳少许脓痰，出院。,北京大学深圳医院，临床误诊误治，2007,编辑ppt,出院第3天出现发热，左耳疼痛、流脓，左侧头痛，咳嗽加重，再次入我院。查体：体温37.7，脉搏88/min，呼吸20/min，血压120/80 mmHg。意识清，左耳道内红肿、流脓，浅表淋巴结不大，胸部切口红肿，无流脓，两肺呼吸音弱，左下肺有湿啰音，心率88/m

42、in，律齐。查血白细胞12 109/L，中性粒细胞0.95，血红蛋白114 g/L，红细胞沉降率140mm/h；尿蛋白(-)，隐血(2+)；肝肾功能正常；抗链球菌溶血素O 正常，类风湿因子127 Ku/L(正常参考值0 21 Ku/L)，C 反应蛋白16.9 mg/L(正常参考值0 8mg/L)。复查胸部CT示右上、左下肺部出现阴影。诊断：1.化脓性中耳炎；2.右下肺切除术后切口感染；3.肺部感染。,病历-WG,编辑ppt,病历-WG,予左氧氟沙星抗感染治疗,，并于入院第3天行左乳突根治术，术中见乳突气房充满肉芽肿及脓液，听骨被肉芽肿包围。术后病理报告：慢性中耳炎，脓液、血液培养均阴性。术后仍

43、发热，咳嗽、咳痰症状加重，痰中带血丝，胸部切口化脓渗脓液。复查胸部CT 示两肺有多个大的团块状病灶。考虑金黄色葡萄球菌感染，予万古霉素抗感染及支持、对症处理。,编辑ppt,查c-ANCA(+)，PR3(+)，MPO(+)。结合病人胸部阴影特点，中耳化脓及ANCA 阳性，尿隐血(2+)，考虑WG。予泼尼松30 mg，每日1 次口服；环磷酰胺1 g，每日1次静脉滴注，后改用环磷酰胺50 mg，每日1次口服。治疗第3天体温下降，咳嗽、咳痰症状缓解，切口流脓减少。行支气管镜检查示左肺上下叶、右肺上叶及左侧支气管黏膜苍白，左肺下叶背段C 亚段有脓性分泌物，右侧支气管中间支气管开口处黏膜隆起，凹凸不平，见

44、一鱼泡样新生物，其上血管丰富，管腔高度狭窄，气管镜不能进入，有中量脓性分泌物，取活检，报告为WG。继续上述治疗，病人精神、症状逐渐好转，切口逐渐愈合，复查血象、尿常规正常，但仍有咳嗽，痰中带血，带泼尼松出院。,病历-WG,编辑ppt,组织活检属有创检查术式，得到患者同意首先应有较充分的 理由。活检阳性率：鼻腔活检阳性率不足50%（活检部位的局限、取材组织小、人为致组织变态）：多次、多部位活检。组织活检并不能进行病程跟踪。,临床实际应用中的问题 2,编辑ppt,更大样本量的验证,John H.2001_Test Characteristics of Immunofluorescence and

45、ELISA Tests in 856 Consecutive Patients with Possible ANCA-Associated Conditions,编辑ppt,ANCA在非AAV中的比例(2001),编辑ppt,ANCA在非AAV中的比例(2003),DIMITRIOS VASSILOPOULOS,Prevalence of Antineutrophil Cytoplasmic Antibodies in Patients With Various Pulmonary Diseases or Multiorgan Dysfunction.2003,编辑ppt,ANCA与IBD（炎

46、症性肠病）,单位：/10万,亚太地区炎症性肠病处理共识意见，胃肠病学，2006.,慢性炎症性肠病（CIBD）相关自身抗体,靶抗原 阳性率（%）溃疡性结肠炎 克隆恩病小肠杯状细胞28 0pANCA76 7胰外分泌腺和排出道 2 39酿酒酵母 4 70,编辑ppt,各项指标联合检测增加CIBD血清学诊断的命中率,80%,胰腺抗体+酿酒酵母抗体,39%,胰腺抗体,70%,酿酒酵母抗体,溃疡性结肠炎,83%,小肠杯状细胞抗体+pANCA,28%,小肠杯状细胞抗体,76%,pANCA,克罗恩病,编辑ppt,抗胰外分泌腺抗体：猴胰腺,靶抗原：胰腺外分泌腺细 胞及排除道基质：猴胰腺相关疾病：克隆恩病39,编

47、辑ppt,抗酿酒酵母抗体：酿酒酵母涂片,靶抗原：酿酒酵母细胞壁成分基质：酿酒酵母相关疾病：克隆恩病70,编辑ppt,抗小肠杯状细胞抗体：猴小肠,靶抗原：小肠杯状细胞基质：猴小肠相关疾病：溃疡性结肠炎28,萎缩性胃炎及恶性贫血相关自身抗体,靶抗原 阳性率（%）萎缩性胃炎 恶性贫血抗胃壁细胞抗体（PCA）60 90抗内因子抗体（IF）50,编辑ppt,抗胃壁细胞抗体：猴胃,靶抗原：胃壁细胞膜上H-K ATP酶基质：猴胃相关疾病：萎缩性胃炎60 恶性贫血90,乳糜泻/麸质过敏性肠病,麸质敏感性肠病相关自身抗体,靶抗原 阳性率（%）肌内膜 90-100麦胶蛋白 80-100组织谷氨酰胺转移酶 91-1

48、00,ESPGHAN-诊断标准*European Society of Pediatric Gastroenterology,Hepatology and Nutrition,麸质过敏性肠病,编辑ppt,ANCA结果综合判读 Judy Savige 2003,编辑ppt,2000,2003,2009,2008,Professor Judy Savige,编辑ppt,IF与ELISA结果综合判断(1),编辑ppt,IF与ELISA结果综合判断(2),编辑ppt,慢性炎症性结缔组织病(CICTD),慢性炎症性结缔组织病(CICTD),Systemischer Lupus Erythematodes

49、(SLE),干燥综合征(SS),系统性硬化症(SSc),Rheumatoide Arthritis(RA),多肌炎/皮肌炎(PM/DM),类风湿性关节炎(RA),系统性红斑狼疮(SLE),ANCA 相关性血管炎,MPO and PR3,编辑ppt,类风湿性关节炎,类风湿性关节炎又称类风湿(RA)，是一种病因尚未明了的慢性全身性炎症性疾病，以慢性、对称性、多滑膜关节炎和关节外病变为主要临床表现，属于自身免疫炎性疾病。该病好发于手、腕、足等小关节，反复发作，呈对称分布。最常见的慢性炎性关节病患病率：0.5%1.0%发病几率：30-80/100,000/year75%患者为女性，在35和45之间以及

50、60年龄患者中多发,编辑ppt,类风湿性关节炎常见症状,关节疼痛与压痛关节肿胀晨僵关节摩擦音,编辑ppt,诊断标准,早期发现可以较好地预防类风湿性关节炎的不可逆病变，因此早期诊断是RA诊断的第一要务，但RA通常由医师数次诊查之後才能确定。有鉴於此，美国风湿协会（American College of Rheumatology，简称为ACR）於一九八七年集合专家重新拟定一套简单而准确的诊断标准，目前，很多国家都采用这一标准。另外，国内也提出了有关本病的诊断标准。,编辑ppt,1987年ACR标准,晨僵。至少一个关节活动时疼痛或有压痛。至少一个关节肿胀（软组织肥厚或积液而非骨质增生）。至少另一个关