蔬菜中农药残留检测课件.ppt

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1、蔬菜中农药残留的测定,背景,GB 2763食品中农药最大残留限量中规定了387种农药的3860项最大残留限量。目前在蔬菜上登记的农药种类有376种。在实际生产中，由于病虫害的不同，经常使用多种农药复配和混配进行防治，往往不清楚到底使用那些农药。突发事件的应急要求检测具有快速筛查的能力，由于分析对象是未知物，因此检测范围应是广泛的。,农药残留限量标准,GB 2763-2014版中：共涉及农药种类387种。限量值有3650个。GB 2763-2015版中：共涉及农药种类444种。限量值有4140个。,农药残留限量标准,GB 2763-2014标准中：涉及蔬菜的农药共223种；涉及水果的农药共209

2、种；涉及粮食的农药共228种；涉及油料及油脂的农药共159种；涉及糖料的农药共60种；涉及饮料类的农药共50种；涉及调味料的农药共38种；涉及坚果的农药共34种；,农药残留限量标准,涉及食用菌的农药共19种；涉及蛋类的农药共9种；涉及生乳的农药共7种涉及哺乳动物肉类（海洋哺乳动物除外）的农药共6种；涉及禽肉类的农药共5种；涉及水产品的农药共2种；涉及可食用家禽内脏、奶类、药用植物、肾脏（牛、羊、猪）、肝脏（牛、羊、猪）等各1种。,农残检测方法标准,根据2009年6月1日实施的中华人民共和国食品安全法第二十一条和第二十二条的规定，今后凡是涉及食品安全的标准（八个方面的内容），统一由卫生行政部门部

3、制定和颁布，对现行的食用农产品质量安全标准、食品卫生标准、食品质量标准和有关食品的行业标准中强制执行的标准予以整合，统一公布为食品安全国家标准。农药残留检测方法标准全部统一为国家标准。,检测方法,GB/T 19648-2006检测农药种类500种GB/T 20769-2008检测农药种类450种,20g,加入40 mL乙腈15000r/m匀浆1 min加入5g氯化钠，再匀浆1min,2cm无水硫酸钠加于Envi-Carb和Sep-Pak氨丙基串接柱上,Envi-18,40水浴浓缩至1mL,3次2mL洗样液瓶,2次5mL正己烷溶剂交换,分取乙腈层20mL,3000r/m离心5min,乙腈+甲苯(

4、31),40水浴浓缩至0.5mL,样液约为1mL后加入内标,氮气吹干,GC/MS,LC/MS/MS,乙腈水(32)定容1mL,A,B,C,D组农药(383种),E组农药（63种）,4mL预淋,25mL洗脱,前处理过程,农残检测方法标准,目前蔬菜和水果农药残留检测方法用的最为广泛的是农业部的行业标准：NY/T 761-2008蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定,农残检测方法标准,该方法使用气相色谱和液相色谱进行检测，一 次能检测105种农药，其中：有机磷类农药54种；有机氯和拟除虫菊酯类农药41种；氨基甲酸酯类农药及其代谢物10种。,前处理：,QuEChERS方

5、法简单介绍,QuEChERS 方法早期是专门设计用于蔬菜、水果和其它低脂肪食品中的农药多残留分析。方法中使用Agilent散装PSA（乙二胺-N-丙基）吸附剂去除基质中的杂质，包括脂肪、糖类和其它一些带有氢键的基质共萃物。QuEChERS 方法与传统匀浆技术相比，具有很重要的优势，概括如下：Quick(1小时内可以萃取10个样品),Easy(减少样品转移)Cheap(成本低)Effective(对宽范围农药均可取得很好的回收率)Rugged(操作者经过加简单培训即可得到重复性结果)Safe（减少溶剂使用-节约90%溶剂）,QuEChERS方法背景,最早的QuEChERS方法不含缓冲盐，于200

6、3年开发。现在，有两种常用的缓冲盐方法：来自欧洲标准化委员会（CEN）各成员国的欧盟标准（EN 15662）；被美国官方分析化学师协会标准（AOAC 2007.01）认可，在美国和其它国家使用。QuEChERS的应用范围正逐步扩展到水果和蔬菜以外的样品，已经开发了针对各种食品基质中丙烯酰胺的分析的QuEChERS方法。,QuEChERS方法现状,为现有前处理方法LLE,SPE,GPC提供更多选择 QuEChERS在世界范围内还是一个新方法，我国NY/T 1380-2007与之非常接近 对检测器的要求:MS/MS(高选择高灵敏).NPD等自动QuEChERS:ChemSpeed,Gerstel,

7、and Anatune QuEChERS 很大程度上降低了每个样品的分析成本官方网站可获得更多农药回收率及方法验证信息,Page 14,食品安全检测,QuEChERS 特点：允许同时测定多种类化合物 流程包括3个步骤:提取，d-SPE（分散固相萃取），分析测定大部分污染物/有害物质都已建立限量要求，如MRLs(最大残留量)通常样品前处理方法的设计需要考虑这些限量的要求。MS and MS/MS检测的高选择性和高灵敏度使得简单快速的QuEChERS 方法能够成为很好的前处理方式,QuEChERS 操作过程,Bond Elut QuEChERS提取试剂盒,Bond Elut QuEChERS Ex

8、traction Kit Packaging提取试剂盒包装,其他公司的萃取包装,安捷伦Bond Elut QuEChERS产品净化包,Bond Elut 净化包,为特定应用提供最多样的吸附剂选择,多数蔬菜和水果:PSA+MgSO4 去除极性有机酸,一些糖和少量脂肪类 蔬菜和水果1%Fat,PSA+C18EC+MgSO4去除极性有机酸，糖类，脂肪,和一些类固醇 带色素的蔬菜和水果：PSA+GCB+MgSO4去除极性有机酸，糖类，少量类胡萝卜素和 叶绿素，不能用于平面结构农药含有高水平 色素含量的水果和蔬菜:PSA+GCB+MgSO4去除极性有机酸，糖类，类胡萝卜素和 叶绿素，不能用于平面结构农药

9、带有色素和脂肪的蔬菜和水果:PSA+GCB+MgSO4+C18去除极性有机酸，糖类，脂肪，类胡萝卜素和叶绿素，不能用于平面结构农药,AOAC ONLY!,Both AOAC and EN available!,EN ONLY!,订货指南-散装填料,Bond Elut QuEChERS kit 特点,提取步骤,AOAC/EN/原始方法灵活多样，萃取管可选陶瓷均质子缩短振摇时间至20秒避免盐类结块避免个人操作差异提高回收率及重现性独立盐类包装设计预先称量，具计量证书隔水、避光、充氮、洁净遵照标准操作流程，避免过度放热引起的损失，达到最大回收率,净化步骤（d-SPE）,全面、多样的净化方法，选择简单

10、针对AOAC和EN的水果蔬菜分类，快速选择合适的净化试剂盒提供2ml及15ml两种净化规格，方便进一步浓缩，提高灵敏度针对Schenck的改进提供NH2或PSA以及双层柱的SPE解决方案，针对平面结构和极性农药，以及更加复杂的基质，提供了QuEChERS方法的净化步骤改进。,Non-buffered QuEChERS method(Original)(10 or 15 g sample)4 or 6 g MgSO4,1 or 1.5 g NaCl AOAC method 2007.01(AOAC)(15 g sample)6 g MgSO4,1.5 g Na Acetate EN method

11、 15662(CEN)(10 g sample)4 g MgSO4,1 g NaCl,1 g NaCitrate,0.5 g disodium citrate sesquihydrate,比较第一步中3种提取方法,第一步的目的是便于提取/分配:加入过量的盐和无水硫酸镁,三种方法如何选择？,在大多数情况下，三种方法均能得到良好的结果 特殊情况下，需要考虑化合物的稳定性，尤其是pH稳定性 净化程度略有不同,QuEChERS提取方法选择,Acetate buffer system resulted in“visibly worse cleanup results compared to the or

12、iginal QuEChERS method”-M.Anastassiades,50 mg PSA,50 mg C18,7.5 mg GCB,150 mg MgSO4(2 mL)*PN 5982-0028 400 mg PSA,400 mg C18,45 mg GCB,1200 mg MgSO4(15 mL)*PN 5982-0029 对所有基质都可以保证更干净的萃取效果，并不影响农药的回收率，即使共面结构的农药也没问题*PSA=Primary Secondary Amines GCB=石墨化炭黑,第二步分散固相萃取(d-SPE)选择:取决于基质和分析物 MgSO4 在所有净化试剂盒中均含有，

13、起到去除水分的作用 PSA*去除极性的有机酸，一些糖类和脂类 C18EC 去除脂类和固醇，类胡萝卜素等GCB*去除色素，如叶绿素（对平面结构药物会有吸附）dispersive-SPE(d-SPE)无论是EN 还是 AOAC 方法，C18对净化的影响大于PSA,Universal d-SPE(dispersive-SPE),针对不同基质的通用净化包，兼顾净化效果与回收率,Analytical Chemist have a common saying:“分析方法象牙刷，每个人只能使用自己的牙刷。”QuEChERS 方法很灵活 有可供修改的模版 依分析物性质而定 考虑基质的成分 仪器配置 分析技术在

14、修正操作过程之前，要确保遵循QuEChERS方法的流程,LCGC专栏作者Ron Major对QuEChERS发明者M.Anastassiades 和 S.J.Lehotay 的访谈,QuEChERS应用进展,-农药多残留分析的应用-不稳定的农药及解决方法-动物源食品中兽药残留 分析中的应用-食品中其它有机污染物的分析生物毒素PAHs和PCB丙烯酰胺-不同类型基质的处理方法,QuEChERS广泛适用于多种基质中的农药多种残留分析,食品中残留农药检验方法-多重残留分析方法（台湾）-涵盖果蔬、谷类、干豆类、茶类、香辛植物及其他草本植物等食品中213项 农药多重残留分析AOAC official me

15、thod 2007.01-涵盖葡萄、莴苣和柑橘中26种农药的多重残留分析EN official method 15662*-涵盖水果（含干燥水果）、蔬菜、谷物及其他加工食品中多农药残留 分析Results of interlaboratory method validation 136项Results of single laboratory validations 235项NY/T 1380-2007-蔬菜、水果中51中农药的多残留测定,*An updated version of validation data can be found on the website www.crl-pes

16、ticides-datapool.eu,which is run by the EU Community Reference Laboratories for Pesticides.,QuEChERS method回收率229种农药 GC-MS and LC-MS-MS分析,QuEChERS method重现性229种农药 GC-MS and LC-MS-MS分析,Original QuEChERS method(unbuffered)4 or 6 g MgSO4,1 or 1.5 g NaCl AOAC method 2007.01(AOAC)6 g MgSO4,1.5 g Na Aceta

17、te EN method 15662(CEN)4 g MgSO4,1 g NaCl,1 g NaCitrate,0.5 g disodium citrate,缓冲体系保证农药的稳定性,七叶苷,未缓冲的方法，起于2003年发表的文献 2 个修整过的版本 AOAC official method 2007.01 EN official method 15662（2008）3种方法都可以给出很好的优秀的回收率结果:平均90%农药，RSDs，10%不缓冲的方法对pH 敏感的农药回收率不会太好,QuEChERS方法发展过程中，关于提取条件的优化,AOACEN方法采用不同程度的缓冲体系来改善pH敏感农药的

18、回收率,AOAC buffered method 相对强的醋酸盐的缓冲体系(pH 4.8)*EN buffered method 弱的柠檬酸盐缓冲体系(pH 5-5.5)*两个版本均经过大量实验室间的测试，50,000 100,000 数据点 缓冲至pH 5的体系可以 提供最佳平衡，对pH 敏感的农药能获得可接受的高的回收率(70%)(例如吡蚜酮,抑霉唑,噻菌灵),*S.J.Lehotay,K.Mastovska,A.R.Lightfield,J.AOAC Int.88(2005),615-629&60A*M.Anastassiades,E.Scherbaum,B.Tasdelen,D.Sta

19、jnbaher,in:H.Ohkawa,H.Miyagawa,P.W.Lee(Eds.),Crop Protection,Public Health,Environmental Safety,Wiley-VCH,Weinheim,Germany,2007,p.439.,缓冲盐的缓冲能力,影响农药回收率的因素,pH敏感农药：提取液的酸碱度碱-不稳定农药酸-不稳定农药酸性农药热不稳定农药：萃取放热影响平面结构农药：石墨化炭黑的影响,碱-不稳定农药,如captan 克菌丹,folpet 灭菌丹,dichlofluanid 抑菌灵和其它在QuEChERS 提取之后的碱性PSA 净化步骤中不稳定的农药.

20、考虑到这些农药的稳定性，因此净化后的样品溶液可以使用甲酸/乙酸调节pH至5来保证这些化合物的回收率.,酸-不稳定农药,酸-不稳定农药如乙氧喹啉和吡蚜酮 若回收率不理想可将提取盐中的0.5 g 柠檬酸二钠盐和1g的柠檬酸三钠盐换成 1.5 g柠檬酸三钠盐，同时控制较低的提取温度来提高回收率。尤其对于 乙氧喹啉在pH 5 的提取溶液中会降解,需要加快前处理的速度或者直接选用不缓冲的提取试剂盒。,酸性农药,酸性农药净化时，可能发生损失。建议提取后，跳过PSA的净化步骤，直接进行分析。,酸性农药,苯氧羧酸类,吡啶类除草剂,热不稳定农药,Step1提取盐类的加入顺序，直接影响到热不稳定农药的回收率,盐类

21、独立包装，于乙腈之后加入，有效控制系统放热,盐类置放于离心管中，与样品直接接触，剧烈放热！,放热监测装置,样品和缓冲盐,50 mL 聚丙烯离心管，经过改进，使其能容纳热电偶。热电偶(Omega:HSTC-TT-K-24S-36-SMPW-CC)连接在数字温度计上(FLUKE 52 K/J温度计)用于记录温度随时间的变化。样品称量好，溶剂按照试验1 和实验 2加入 50 mL PP 管中，用手或者用机械立式磨床剧烈振摇 50 mL PP离心管 Geno/Grinder 在一段时间内记录温度变化，60 seconds取几次试验的平均值作为实验结果，见图 1和图2,The Geno/Grinder

22、is a registered trademark of SPEX Sample Prep,AOAC 和 EN 两种方法不同盐类加入方式的温度曲线,如图展现的温度数据在AOAC和EN方法萃取包基础上采集。将样品加入盛有萃取盐的50mLPP管中，与先称量样品，加萃取溶剂，然后将盐从无水包装中倒入萃取管中相比对，可以看到明显的温度增高差异(AOAC大约25 C，EN方法大约 10 C)，,25,10,温度对回收率的影响评价,下面四个化合物用来评定先加盐和后加盐放热对回收率的影响,Fenthion倍硫磷,Nicotine烟碱*,Isofenphos甲基异柳磷,Isocarbophos水胺硫磷,4 种

23、农药的选择是基于他们的化学结构的不稳定性 使用 Agilent 6410 QQQLC/MS 和Zorbax Phenyl-Hexyl 柱 2.1 x 50 mm,3.5 m,明显提高热不稳定农药的回收率,Represents the negative effect adding the produce matrix to the salt has on recovery during the QuEChERS extraction step,AOAC method,后加盐,先加盐,平面结构农药,Carbendazim多菌灵,Thiabendazole噻菌灵,Pymetrozine吡嗪酮,Cyp

24、rodinil嘧菌环胺,石墨化炭黑(GCB)在分散包中，是为了去除基质中高水平含量的色素，但同时会保留平面结构农药，导致差的回收率和分析精度。,使用甲苯对菠菜中平面农药回收率的优化,初始方法的Dispersive SPE 过程(w/o toluene)和 修正方法的Dispersive SPE 过程(w/toluene),甲苯被加入 dispersive SPE 净化管,8:3(乙腈(ACN)萃取物/甲苯),可以在很大程度上改善平面结构农药的萃取效率,2 mL 净化管，包含 50 mg GCB,15 mL 管包含400 mg GCB,多菌灵,吡嗪酮,嘧菌环胺,加入甲苯明显提高平面结构农药的回收

25、率,QuEChERS方法适用于低脂肪含量的高含水基质，如大部分水果蔬菜。应用在如下基质时，一般需要略作调整。低含水量基质 鱼，肉，谷物，大米，香辛料，油类，茶叶，中草药 在初始匀浆样品中加入水 提取时目标分析物进入乙腈层 油性基质加正己烷去除脂肪，丢弃正己烷层 结合d-SPE 净化,QuEChERS方法在非水果蔬菜基质中的应用,常见食品基质的含水量及建议加水量参考EN 方法,葡萄柚,柠檬汁,柠檬/酸橙,桔子,桔子皮,柑橘,典型含水量,10g样品中加入水的量,5g样品中加入水的量,加入600L 5mol NaOH溶液到缓冲盐中，见3.12,仅在柠檬和酸橙中加,可以选择冷动操作去除蜡质见,常见食品

26、基质的含水量及建议加水量参考EN 方法,谷物类 玉米，面粉,咖啡豆,茶叶,干的中草药和香辛料,蘑菇,红酒,可以选择冷动操作或者在每mL萃取物中加入25mg C18 吸附剂，在分散SPE中去除油脂参见,针对发酵茶，在每mL萃取物中加入75mg PSA吸附剂，进行分散SPE操作，,鳄梨中的农残,鳄梨是一个高含脂量的含水基质，因此，在提取前需先加入一定量的水，并且采用冷冻的方式除酯；同时净化时选择含有C18的净化包能够帮助去除脂肪。,植物油,用QuEChERS 方法处理植物油的时候，可直接在2g油中加入乙腈.只有非常弱极性的农药回收率会小于70%，比如HCB和DDT，但回收率很稳定可以通过因子校正结

27、果。残余油脂可通过冷冻及加入C18去除。,茶,茶是非常复杂的基质，存在许多共萃取物。通常需要额外的净化步骤。红茶用PSA净化结合CaCl2 的使用往往能达到更好的净化效果。GCB通常在一定用量内使用能有效去除色素并保证回收率。,QuEChERS:不仅仅用于农药残留分析,其他基质中的农药残留 PAHs PCBs 非法染料 生物毒素 兽药 抗生素 药物 生物流体中的滥用药物 丙烯酰胺 And More to Come.,中药材中的农药残留分析,特点：一般来源于种植及加工、储存过程中的施用及环境污染基质非常复杂。来源不同的药材成份不同，多含有皂苷,多糖,黄酮,酚酸,脂肪酸残留量低有机氯检出率最高（与

28、农药本身性质有关）,食品基质中农药残留筛查QuEChERS前处理流程,Weigh of 2gsample to a 50mL Teflon tube;add 10 mL distilled water to thoroughly soak the sample and store the sample at ambient temperature for 2 hours,Weigh of 2gsample to a 50mL Teflon tube;add 10 mL distilled water to thoroughly soak the sample and store the sam

29、ple at ambient temperature for 2 hours,干性样品（谷物、粮食、茶叶、中草药、食用油）,含水量比较高的样品（蔬菜水果）,Add 10mL 0.1%HAc/acetonitrile,and shake vigorously for 1 minute,then add 5982-5755CH,and shake vigorously for 1 minute.Centrifuge for 5 minutes at 4,000 rpm.,Transfer an aliquot(6 mL)of the above extracts upper layer into

30、the Dispersive Kits tube（5982-0029）and then centrifuge for 5 minute at 5,000 rpm.,Transfer an aliquot(1.0 mL)of the extract into the sample vials,dilute or concentrate,LC-QQ or LC-Q-TOF detect,QuEChERS前处理流程,中草药多为干燥样品，一般需要加水稀释基质并适当浸泡,提取体系为弱酸性缓冲体系,如果体系颜色过深，可加入GCB吸附色素（如叶绿素）,Gas Chromatography and Mass

31、Spectrometers Conditions,DB-5 MSUI 超高惰性气相管柱提供更加可靠地分析结果！,混合中草药样品的在rQuEChERS净化后的典型TIC谱图:金银花,黄芪,银杏叶,人参,枸杞子.,结论,对于trace-level的农残分析，最主要的挑战来自于TCM复杂基质的化学干扰。简单、快速、适用性强的QuEChERS前处理方法配合Backflushing和DRS技术，能够大幅度减少基质干扰，从前处理到筛查报告生成仅需1小时即可。由于样品复杂多样，某些情况下也可结合SPE进行净化富集,配合SPE技术完成中草药复杂基质的前处理,QuEChERS技术在非农药残留领域外应用举例,兽药

32、残留领域应用举例PAHs 和PCB 分析在毒素分析领域中的应用丙烯酰胺分析奶粉中的双氰胺腌肉食品中的亚硝胺土壤中有机污染物分析,Bond Elut QuEChERS 在兽药领域中的全新应用,应用QuECHERS方法进行兽药残留检测的主要挑战,兽药基质（组织，蛋，奶等）更加复杂。基质高脂肪，高蛋白质。即使同类兽药性质（极性，酸碱性）存在巨大差异,QuECHERS最新应用:动物组织中的兽药残留,牛肝脏中喹诺酮类药物测定方法:提取步骤：采用SampliQ EN extraction kits 净化步骤：采用全新SampliQ dispersive SPE kits(25 mg C18*and 150

33、 mg MgSO4),用于动物组织中药物残留(5982-4921,5982-4956)净化后的样品用于LC/MS/MS分析,牛肝脏中喹诺酮QuEChERs提取流程图(5990-5085EN),带缓冲盐的QuEChERS 萃取管，EN 15662 方法，5982-5650,Bond Elut QuEChERS 动物组织中抗生素净化包,2ml,5982-4921,contains 25 mg C18 和150 mg MgSO4,LC/MS/MS Chromatograms of A)liver blank extract,and B)200ng/g fortified liver extract.

34、Peaks identification:1.Pipemidic acid,2.Ofloxacin,3.Ciprofloxacin,4.Danofloxacin,5.Lomefloxacin,6.Enrofloxacin,7.Sarafloxacin,8.Cinoxacin,9.,Oxolinic acid,10.Nalidixic acid,11.Norfloxacin,Flumequine,IS(internal standard).,牛肝脏空白和 200 ng/g 加标提取MRM图,牛肝脏中喹诺酮回收率和重现性结果,牛肝中的9种磺胺类药物分析,带缓冲盐的QuEChERS 萃取管，EN 1

35、5662 方法，(PN.5982-5650),Bond Elut QuEChERS 脂肪基质净化包,15ml,(PN.5982-5156),contains 150 mg C18，150PSA 和900 mg MgSO4,动物源性食品中喹诺酮类、磺胺类、大环内酯类和抗球虫类，常见四大类35种抗生素的同时测定QuEChERS兽药多残留提取包+净化包超高效快速液相色谱（RRLC）和三重串联四极杆质谱（QQQ）结合多重反应监控模式（DMRM）基于Zobax Eclipse Plus C18 3.0100mm,1.8m（部件号：959759-302），13分钟内快速分离本方法适合猪肉，牛奶，蜂蜜和鸡蛋

36、的药物残留测定,兽药多残留QuEChERS方法,QuEChERS流程,提取,净化,35种兽药（10ppb）LC-MS/MS MRM,优化后方法（方法4）平均回收率,关于QuEChERS应用于兽药多残留检测的其他文献参考,水产中的残留污染物分析,基质特点：与植物样品相比，动物组织含有大量蛋白质和脂肪，去除这些干扰是关键。应用参考：5990-5441EN 鱼肉中的PAH5990-6236EN 鱼肉中的PCBs5990-6589EN 虾肉中的荷尔蒙激素5990-7714EN 海鲜、贝壳类中的污染物,使用安捷伦 Bond Elut QuEChERSAOAC 试剂盒和 HPLC-FLD分析鱼类体内的多环

37、芳烃,5-20ppb,AOAC fatty sample d-SPE(5982-5158)contains 400mg C18EC,GC/MS SIM Chromatogram of 10 ppb PAHs spiked in fish matrix blank extract,GC/MSD:7890/5975B with purged ultimate union Column:DB-5ms UI 20 m 0.18 mm 0.18 mRestrictor:Siltek 0.7m x 0.15mm ID(Col 2)MMInlet:0.5L,320C,splitless,purge flow

38、 50mL/min at 0.8min gas saver 30mL/min at 2minCarrier:Helium,1.7mL/min cnst flow col 1 PCM 1=3.8 psi cnst pressure,col 2=3.8ml/min flow 50C Oven:50C(0.4 min)to 195C(25C/min)hold 1.5 min,8C/min to 265C 20C/min to 315C(1.25 min)Postrun backflush 7 min 320C MSD:Transfer line 340C Source 340C Quad 150C,

39、配合高效 DB-5msUI 超高惰性 GC 管柱进行PAH GC/MS高灵敏度度分析,采用安捷伦 J&W DB-35ms 及DB-XLB GC 色谱柱对鱼肉组织中的PCB 进行 GC/ECD 分析和确认,AOAC fatty d-SPE tube(5982-5158)contains 400mg C18EC,双柱定性对鱼肉组织中的PCB进行分析,QuEChERS基质分析固相萃取应用实例面粉，花生，等中的黄曲霉毒素,采用安捷伦SampliQ QuEChERS AOAC试剂盒及LC/MS/MS 分析炸薯条中的丙烯酰胺,提取,净化,线性范围为0 1000 ng/mL(r20.9999),Bond E

40、lut QuEChERS AOAC 分散固相萃取管中(p/n 5982-5022）,Bond Elut QuEChERS AOAC 分散固相萃取管中(p/n 5982-5022,QuEChERS applications（1）,中文化,QuEChERS applications(2),中文化,QuEChERS applications(3),中文化,QuEChERS applications(4),中文化,QuEChERS applications(5),中文化,QuEChERS applications(6),中文化,QuEChERS applications(6),中文化,Other Qu

41、EChERS Applications,植物和中草药中的多农药残留 Anal.Chem.2009,81(14),5716-23 and J.Agric.Food Chem 2010,58(10),5884-96 水产品中的农药 V.Briscoe,FPRW 2009 牛奶和奶油中的农药 J.Agric.Chem 2010,58,5884-95 葡萄汁、谷物和可可豆中的农药和毒素类 Brazil 2nd Latin American Pesticide Residue workshop 牛奶和肝脏中的杀吸虫剂和驱虫剂 Analytica ChimicaActa,2009,637,196-207

42、动物组织中的兽药 Analytica ChimicaActa,2009,637,68-78 蜂蜜、蜜蜂和花粉中的80种环境化学污染物 J.Chromatogr.A,2011,34,5743-56 水果凝胶剂中的邻苯二甲酸酯类 J.Sep.Sci.2010,33,251-257对于QuEChERS，除了大体积的水样，任何基质都可能适用！,Other QuEChERS Applications,Acrylamides in Food 食品中的丙烯酰胺 J.Agri.Food Chem 2006,54,7001-7008 Bisphenol A in Canned Food 灌装食物中的双酚A UC

43、T Illegal dyes in Food Sauces 食品调味料中的违法色素 Agilent App Dispersants(DOSS)Oil Spill 溢油分散剂 FDA method Fungicides in Fruit and Veg 水果蔬菜中的杀真菌剂 Anal Bioanal Chem(2007)387:673-685 Cannabinoids in Marijuana 大麻中的大麻醇 Restek Penicillins and Amphenicols in Milk 牛奶中的青霉素和氯霉素 J.Sep.Sci.2011,34:1-9 Pyrethrins and Py

44、rethroids in Fish 鱼肉中的除虫菊酯和拟除虫菊酯 Anal.Bioanal Chem(2010)397:2525-2531对于QuEChERS，除了大体积的水样，任何基质都可能适用！,尽管如此，没有任何一个方法是万能的！请警惕如下农药，它们不适用于QuEChERS方法！,有机磷酸性除草剂,氯代苯氧型酸性除草剂,季铵类除草剂-极性大无法被有机溶剂萃取,硫代氨基甲酸盐杀真菌剂-不溶于有机溶剂,主要内容,Bond Elut QuEChERS产品背景、现状及特点如何选择QuEChERS产品QuEChERS应用进展产品应用总结,GB method Duplication Project,

45、March 18,2023,Confidentiality Label,99,GB method Duplication Project,Application template,March 18,2023,Confidentiality Label,101,与重点客户的合作项目,Confidentiality Label,102,食品安全样品前处理应用文集,农药残留分析（46）兽药残留分析（46）生物毒素分析（8）食品添加剂和其他污染物(32）,900s pages，132 applications From Agilent and Customers,Any Questions?,前处理-

46、制样与提取,【蔬菜样品切块】,【打成匀浆】,【加入20 mL乙腈】,【称10g样品】,【高速均质1 min或振荡30min】,二、实验步骤,在50mL离心管中加入8 g氯化钠与无水硫酸镁的1:1混合粉末，将均质后的样品转移至离心管中。立即剧烈震摇。,振摇后5000转/min 离心3 min,二、实验步骤,前处理-制样与提取,向10 mL离心管中加入：40mg PSA、40mg C18、20mg GCB、1mL甲苯,取1 mL第7步的上层提取液到准备好的离心管中。剧烈振摇后静置5 min。,上清液过0.22m微孔滤膜，待测。,GCMSMS-1,GCMSMS-2,GCMSMS-3,二、实验步骤,样

47、品前处理-GCMSMS部分,0.5 mL上层提取液+0.5 mL50%甲醇水溶液稀释,混合均匀后过0.22m微孔滤膜上LCMSMS检测,振摇后5000转/min 离心3 min,LCMSMS-1,LCMSMS-2,样品前处理-LCMSMS部分,二、实验步骤,15g样品加15mL乙腈（含1%乙酸）,3450r/m离心1min,3450r/m离心1min,加入内标物，6g无水硫酸镁和1.5g 醋酸钠,前处理过程,取1mL上层液,加入50mg PSA,50mg C18和150mg无水硫酸镁,取上层液,LC/MS/MS,GC/MS,稀释后,加保护剂后,剧烈振摇1min,混合20s,37种农药EIC色谱

48、图（0.5 g/L）,37种农药EIC色谱图（0.5 g/L）,线性关系（部分）,甲胺磷,乙酰甲胺磷,氧乐果,涕灭威亚砜,涕灭威砜,灭多威,0.1 100.0 g/L范围内，R2 0.995,稳定性考察（n=6）,基质中保留时间长期稳定性（n=20，5 g/L）,甘蓝基质加标回收率,LCMS-8040农药筛查质谱库谱库搜索结果,目前已有326种农药,谱库搜索结果,谱库搜索结果,匹配度（部分）,对这些溶液分别进行分析后，对相应的质谱图进行谱库搜索，匹配度结果如下：,120,-六六六,乐果,分析结果(1)：油麦菜样品加标(5 g/kg),GC-MS(SIM)与GC-MS/MS(MRM)测定对比,杀

49、螟硫磷,对硫磷,SIM,MRM,121,三氯杀螨醇,溴氰菊酯,分析结果(1)：油麦菜的样品加标(5 g/kg),腐霉利,硫丹-1,SIM,MRM,GC-MS(SIM)与GC-MS/MS(MRM)测定对比,分析结果(1)：生姜的样品加标(5 g/kg),敌敌畏,五氯硝基苯,二嗪农,磷胺,SIM,MRM,GC-MS(SIM)与GC-MS/MS(MRM)测定对比,分析结果(1)：生姜的样品加标(5 g/kg),稻丰散,o,p-DDT,氰戊菊酯,苯醚甲环唑,SIM,MRM,GC-MS(SIM)与GC-MS/MS(MRM)测定对比,注：对于生姜等复杂基质样品，在5 g/kg添加浓度水平，使用单四极杆质谱

50、仪基本无法检测,GCMSMS Smart MRM数据库,农药名称、CAS号、保留指数,MRM参数,分组管理,分组管理功能快速找到目标农药已经针对农业部系统检测农药建立了四个分组-China 137（中国登记的、适用于GCMSMS检测的农药）-例行监测（农业部例行监测农药）-能力考核（农业部年度能力考核农药）-风险评估（农业部风险评估农药）,分析结果(2)：仪器精密度,标准溶液（油麦菜基质，浓度1 g/L），采集方式：MRM,分析结果(2)：仪器精密度,标准溶液（油麦菜基质，浓度5 g/L）结果表明：MRM方式的重现性好于SIM方式,当溶剂为乙腈，以SPL进样口进样时，第15次进样、第207次进