常见荧光定量PCR仪汇总课件.ppt

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1、常见荧光定量PCR仪汇总,概述,技术发明史,1992年由日本科学家Higuchi在报告中提出1996年由美国Applied Biosystems公司推出,技术发展趋势,从单一的染料染色法发展到特异性更高的探针法,从最初的只能检测单一波长光源发展到可以检测多种波长光源,进口定量PCR仪器厂商,ABI,ROChe（罗氏）,Bio-Rad（伯乐）,如何选择荧光定量 PCR 仪器？,1、仪器使用的广泛程度,2、仪器的检测通量（反应孔数）,3、仪器的通道数量,4、耗材的开放性,5、硬件设计特点,6、运行速度,7、灵活性,热模块系统,荧光定量PCR的光学系统,决定其通道数,荧光定量PCR技术的优点,ABI

2、荧光定量PCR仪,厂家介绍：,美国应用生物系统公司，经营生产生命科学设备仪器和试剂，其荧光PCR仪成系列，市场占有率高。,荧光PCR仪型号：,ABI 7500,ABI 7300,ABI 7900,ABI stepone,ABI ViiA7,代理公司：,达安基因，上海创萌，创博环球，北京博凌科为，北京优尼康，北京鼎盛伟业等,ABI 7900,优缺点：,7900是ABI第二代PCR产品，目前最强PCR仪。价格70-80万RMB，理论支持本公司PCR体系：40ul1.检测孔数：支持8联管，96孔板，384孔板，Taqman 低密度表达谱芯片2.激发光源：氩离子激光，全波长检测3.进样时可以采用ABI

3、自动机械臂，方便快捷4.加热模块：半导体加热模块，升温3/S缺点：体积大，价格贵，性能比上不如7500。,96孔板,384孔,芯片板,8联管,各孔板基座,ABI 7500,优缺点：,7500是ABI第三代PCR产品，目前ABI市场占有率最高，最成功PCR仪。价格40万RMB，理论支持本公司PCR体系：40ul检测孔数：兼容96孔和8联管。检测通道：5通道，除去ROX后4通道。加热模块：半导体加热模块，升温3/S激发光源：齿钨灯。,ABI 7500 fast,7500 fast是7500快速反应模式仪器，理论支持本公司PCR体系：20ul检测孔数：兼容96孔和8联管。检测通道：5通道，除去ROX

4、后4通道。反应时间：3040min激发光源：齿钨灯。,ABI 7300,优缺点：,ABI7300就是ABI7000的简单升级版，硬件设计上几乎没有改变，只是换过几个性能更好的配件，软件有所升级。价格20-30万RMB，理论支持本公司PCR体系：40ul检测孔数：兼容96孔和8联管。检测通道：4通道，除去ROX后3通道。激发光源：齿钨灯。加热模块：半导体加热模块，升温3/S,光源系统：LED激发+PMT扫描机制检测孔数：48孔检测通道：3通道理论支持本公司PCR体系：30ul,ABI Step One/Step one plus,ABI Step one system,ABI Step one

5、plus system,检测孔数：96孔检测通道：4通道加热模块：半导体加热模块，升温3/S具有独特的Veriflex TM 加块，控温效果大大提高理论支持本公司PCR体系：30ul,ABI ViiA7,优缺点：,ABI第7代产品，优点比7900有所提升，理论支持本公司PCR体系：40ul1.检测孔数：96孔板，384孔板，Taqman 低密度表达谱芯片2.激发光源：齿钨灯3.加热模块：半导体加热模块，升温3/S，温控准确性好。4.运行时间：35min完成40个循环。5.检测通道：6通道，除去ROX后5通道缺点：价格昂贵，体积大,综上所述，以上几款为ABI常见的荧光定量PCR仪器，像ABI77

6、00,7000已被市面所淘汰。ABI系列是市场占有率最大的荧光PCR仪器厂商，但由于硬件设计上的缺陷，需要额外的ROX染料进行校正，且ABI维修费用相当高。,进口定量PCR仪器厂商,ABI,ROChe（罗氏）,Bio-Rad（伯乐）,ROChe,厂家介绍：,罗氏公司始创于1896年，总部位于瑞士巴塞尔，主要涉及药品、医疗诊断、维生素和精细化工、香精香料等四个领域。LightCycler以运行速度快而著称，在国内市场占有率单款最高,荧光PCR仪型号：,LightCycler 2.0,LightCycler,LightCycler 480,LightCycler Nano,代理公司：,上海浩然，达

7、安基因，上海博尼，山东艾克韦，济南朋远，北京博凌，上海众华，北京普生瑞等,检测通道：3通道加热模式：离心式空气加热/冷却升温：20/S 孔数：32孔材料：玻璃毛细管 20ul和100ul 两种规格实验成本：体系小，成本低理论支持本公司PCR体系：20ul,LightCycler,优缺点：,检测通道：6通道加热模式：空气加热/冷却升温：20/S 孔数：32孔材料：玻璃毛细管 20ul和100ul 两种规格实验成本：体系小，成本低，一般是ABI的一半理论支持本公司PCR体系：20ul,LightCycler 2.0,优缺点：,检测通道：6通道加热模式：半导体加热制冷模块升温：5/S 孔数：96孔（

8、10-100ul）检测1小时,384孔（5-20ul）检 测40min材料：专用板，理论支持本公司PCR体系：40ul集多个优点于一身，目前市面上最强悍的PCR仪,LightCycler 480,优缺点：,LightCycler Nano,优缺点：,检测通道：12个以上加热模式：空气加热/冷却升温：20/S 孔数：32孔（48联管）理论支持本公司PCR体系：40ul,价格为LC480的一半,综上所述：LightCycler系列检测速度快，稳定性非常好，灵敏度明显比其它仪器高。但操作过程是以毛细管进行，操作时应特别小心。Roche使用的耗材的通用性差，成本高(毛细管)，且每次的检测数量低。,进口

9、定量PCR仪器厂商,ABI,ROChe（罗氏）,Bio-Rad（伯乐）,Bio-Rad,厂家介绍：,伯乐自1952年在美国成立，在50多年中为临床诊断和生命科学研究市场提供了广泛的新型产品和服务，始终居于科学发现的中心地位。,荧光PCR仪型号：,Chromo 4,Opticon 2,CFX96,IQ 5,代理公司：,上海劢瑞，上海甄明，创博环球，北京赛伯乐，黑龙江万联顺等,CFX96,优缺点：,1.检测孔数：96孔板2.激发光源：6色LED 3.加热模块：其基座为半导体加热模块，反应模块为专利蜂巢设计，升温5/S，温控准确性好。4.运行时间：55min完成40个循环。5.检测通道：5通道，PM

10、T扫描机制，无需ROX校正6.可以脱离电脑控制，独立运行7.具有温度梯度功能,IQ 5,优缺点：,1.检测孔数：96孔板 或 8联管2.激发光源：卤素灯光源激发 3.加热模块：iCycler4.运行时间：2h完成40个循环。5.检测通道：冷CCD检测,5通道，无需ROX校正6.可以脱离电脑控制，独立运行7.具有温度梯度功能，1-25,Bio-rad DNA Engine Opticon 2,优缺点：由DNA Engine和光学模块组成,1.检测孔数：96孔板 或 8联管2.激发光源：LED单激发光源，双通道检测3.加热模块：DNA Engine 升温3/S4.运行时间：2h完成40个循环。5.

11、检测通道：2通道，无需ROX校正6.可以脱离电脑控制，独立运行7.具有温度梯度功能，最高可达248.具有mini Opticon 产品 48孔,Chromo 4,优缺点：由DNA Engine和光学模块组成,1.检测孔数：96孔板 或 8联管2.激发光源：4个LED3.加热模块：DNA Engine的Alpha 升温3/S4.运行时间：2h完成40个循环。5.检测通道：4通道，无需ROX校正6.可以脱离电脑控制，独立运行7.具有温度梯度功能，最高可达24,国产各厂家仪器展示,达安基因 DA,杭州 博日FQD,厦门安普利 GeneLight,上海宏石 SLAN,达安基因 DA 7600,性能描述

12、,样本容量：支持48孔，480.2ml离心管或68连管 检测通道：两个检测通道，F1.F2升温速率：4.0/s 加热基座：半导体加热模块光路系统：LED激发+PMT检测支持本公司体系：40ul,性能描述,linegene-3310/3320具体的型号为FQD-33a。最多检测33个样本，支持0.2mlPCR管和8联管，支持本公司体系：40ul升温速率：6/秒，通过Peltier技术控温 光路：LED激发+PMT检测其中3310为单通道检测（FAM），支持两种荧光染料（FAM/SYBR）而3320为双通道检测（FAM，HEX），支持三种荧光染料,杭州 博日 linegene-3310/3320,

13、杭州 博日FQD-48a,性能描述,FQD-48a具有单通道和4通道两种规格，通过硬件转换可升级至4通道，支持0.2mlPCR管，支持本公司体系：40ul梯度温度范围：124升温速率：4.0/S光路：LED激发+PMT检测,杭州 博日FQD-66A,性能描述,FQD-66A具有4通道规格，为博日公司最新产品，支持0.2mlPCR管检测通道：4通道，同时具有4波长激发光梯度温度范围：124升温速率：4.0/S光路：LED激发+PMT检测支持本公司体系：40ul,厦门安普利 9800GeneLight 2400,性能描述,激发光源：固态激光检测光源：光电倍增管，灵敏度是CCD、光电二极管的1000

14、0倍以上 加热系统：采用电阻薄膜加热，速率为1.5/S，弥补了空气加热造成的受热不均，温差较大的缺陷，又克服了半导体加热所致的热效应较低，元器件易损 检测通量：可达96，适用于高通量分析,上海宏石 SLAN,性能描述,采用LED+PMT检测模式，升温3/S半导体加热模块具有单通道，双通道，三通道三种检测模式支持48孔模式，耗材为0.2mlPCR管在病原体的临床检测，食品卫生检测方面应用比较不错。,北京博奥 RT-CyclerTM 136,性能描述,检测通道：4通道光源系统：LED激发+PMT旋转检测一次可同时进行36个反应，样品管为0.2ml薄壁PCR管离心式空气加热原理升温20/S,上海枫岭

15、FTC-3000,性能描述,10寸，触摸屏适用耗材：0.2ml单管，8x0.2ml排管，96孔反应板高配支持5通道检测齿钨灯激发，冷CCD检测支持96孔板，机身小巧，可进行温度梯度反应 支持本公司体系：40ul,上海枫岭FTC-2000,枫岭生物ftc-2000一共具有a/b/c三种型号，共具有96、64、32检测孔，支持：0.2ml单管，8x0.2ml排管，96孔反应板（国产管适用），检测通道分别达到了4、3、1检测光源模式：卤钨灯激发+CCD检测具有温度梯度功能支持本公司体系：40ul2004年全线产品技术升级，6点温控、免维护激发光源、梯度温度功能等技术的应用，使FTC-2000系列充分

16、满足于医疗、科研等分子生物学领域。,上海科华 FluoCycle,性能描述,离心式空气加热原理采用LED激发+PMT旋转检测的光源系统采用玻璃毛细管作为扩增容器，耗材适用性差DNA类标本40分钟即可完成测试支持本公司体系只需20ul。,西安天隆TL988,光源系统：LED激发+PMT检测检测通道：可达5通道。检测通量：36/96加热模块可切换缺点：使用单激发虑光片，激发光特异性不好，导致检测灵敏度较低。,历史岳麓版第13课交通与通讯的变化资料,精品课件欢迎使用,自读教材填要点,一、铁路，更多的铁路 1地位 铁路是 建设的重点，便于国计民生，成为国民经济发展的动脉。2出现 1881年，中国自建的

17、第一条铁路唐山 至胥各庄铁路建成通车。1888年，宫廷专用铁路落成。,交通运输,开平,3发展(1)原因：甲午战争以后列强激烈争夺在华铁路的。修路成为中国人 的强烈愿望。(2)成果：1909年 建成通车；民国以后，各条商路修筑权收归国有。4制约因素 政潮迭起，军阀混战，社会经济凋敝，铁路建设始终未入正轨。,修筑权,救亡图存,京张铁路,二、水运与航空 1水运(1)1872年,正式成立，标志着中国新式航运业的诞生。(2)1900年前后，民间兴办的各种轮船航运公司近百家，几乎都是在列强排挤中艰难求生。2航空(1)起步：1918年，附设在福建马尾造船厂的海军飞机工程处开始研制。(2)发展：1918年，北

18、洋政府在交通部下设“”；此后十年间，航空事业获得较快发展。,轮船招商局,水上飞机,筹办航空事宜,处,三、从驿传到邮政 1邮政(1)初办邮政：1896年成立“大清邮政局”，此后又设，邮传正式脱离海关。(2)进一步发展：1913年，北洋政府宣布裁撤全部驿站；1920年，中国首次参加。,邮传部,万国邮联大会,2电讯(1)开端：1877年，福建巡抚在 架设第一条电报线，成为中国自办电报的开端。(2)特点：进程曲折，发展缓慢，直到20世纪30年代情况才发生变化。3交通通讯变化的影响(1)新式交通促进了经济发展，改变了人们的通讯手段和，转变了人们的思想观念。(2)交通近代化使中国同世界的联系大大增强，使异

19、地传输更为便捷。(3)促进了中国的经济与社会发展，也使人们的生活。,台湾,出行,方式,多姿多彩,合作探究提认知,电视剧闯关东讲述了济南章丘朱家峪人朱开山一家，从清末到九一八事变爆发闯关东的前尘往事。下图是朱开山一家从山东辗转逃亡到东北途中可能用到的四种交通工具。,依据材料概括晚清中国交通方式的特点，并分析其成因。提示：特点：新旧交通工具并存(或：传统的帆船、独轮车，近代的小火轮、火车同时使用)。原因：近代西方列强的侵略加剧了中国的贫困，阻碍社会发展；西方工业文明的冲击与示范；中国民族工业的兴起与发展；政府及各阶层人士的提倡与推动。,串点成面握全局,一、近代交通业发展的原因、特点及影响 1原因(

20、1)先进的中国人为救国救民，积极兴办近代交通业，促进中国社会发展。(2)列强侵华的需要。为扩大在华利益，加强控制、镇压中国人民的反抗，控制和操纵中国交通建设。(3)工业革命的成果传入中国，为近代交通业的发展提供了物质条件。,2特点(1)近代中国交通业逐渐开始近代化的进程，铁路、水运和航空都获得了一定程度的发展。(2)近代中国交通业受到西方列强的控制和操纵。(3)地域之间的发展不平衡。3影响(1)积极影响：促进了经济发展，改变了人们的出行方式，一定程度上转变了人们的思想观念；加强了中国与世界各地的联系，丰富了人们的生活。(2)消极影响：有利于西方列强的政治侵略和经济掠夺。,1李鸿章1872年在上

21、海创办轮船招商局，“前10年盈和，成为长江上重要商局，招商局和英商太古、怡和三家呈鼎立之势”。这说明该企业的创办()A打破了外商对中国航运业的垄断B阻止了外国对中国的经济侵略C标志着中国近代化的起步D使李鸿章转变为民族资本家,解析：李鸿章是地主阶级的代表，并未转化为民族资本家；洋务运动标志着中国近代化的开端，但不是具体以某个企业的创办为标志；洋务运动中民用企业的创办在一定程度上抵制了列强的经济侵略，但是并未能阻止其侵略。故B、C、D三项表述都有错误。答案：A,二、近代以来交通、通讯工具的进步对人们社会生活的影响(1)交通工具和交通事业的发展，不仅推动各地经济文化交流和发展，而且也促进信息的传播

22、，开阔人们的视野，加快生活的节奏，对人们的社会生活产生了深刻影响。(2)通讯工具的变迁和电讯事业的发展，使信息的传递变得快捷简便，深刻地改变着人们的思想观念，影响着人们的社会生活。,2清朝黄遵宪曾作诗曰：“钟声一及时，顷刻不少留。虽有万钧柁，动如绕指柔。”这是在描写()A电话 B汽车C电报 D火车解析：从“万钧柁”“动如绕指柔”可推断为火车。答案：D,典题例析,例1上海世博会曾吸引了大批海内外人士利用各种交通工具前往参观。然而在19世纪七十年代，江苏沿江居民到上海，最有可能乘坐的交通工具是()A江南制造总局的汽车 B洋人发明的火车 C轮船招商局的轮船 D福州船政局的军舰,解析由材料信息“19世

23、纪七十年代，由江苏沿江居民到上海”可判断最有可能是轮船招商局的轮船。答案C,题组冲关,1中国近代史上首次打破列强垄断局面的交通行业是()A公路运输 B铁路运输C轮船运输 D航空运输解析：根据所学1872年李鸿章创办轮船招商局，这是洋务运动中由军工企业转向兼办民用企业、由官办转向官督商办的第一个企业。具有打破外轮垄断中国航运业的积极意义，这在一定程度上保护了中国的权利。据此本题选C项。答案：C,2.右图是1909年民呼日报上登载的一幅漫画，其要表达的主题是()A帝国主义掠夺中国铁路权益B西方国家学习中国文化C西方列强掀起瓜分中国狂潮D西方八国组成联军侵略中国,解析：从图片中可以了解到各国举的灯笼

24、是火车形状，20世纪初的这一幅漫画正反映了帝国主义掠夺中国铁路权益。B项说法错误，C项不能反映漫画的主题，D项时间上不一致。答案：A,典题例析,例2(2010福建高考)上海是近代中国茶叶的一个外销中心。1884年，福建茶叶市场出现了茶叶收购价格与上海出口价格同步变动的现象。与这一现象直接相关的近代事业是()A电报业 B大众报业 C铁路交通业 D轮船航运业 解析材料主要反映了信息交流的快捷，故选A。答案A,题组冲关,3假如某爱国实业家在20世纪初需要了解全国各地商业信息，可采用的最快捷的方式是()A乘坐飞机赴各地了解 B通过无线电报输送讯息C通过互联网 D乘坐火车赴各地了解解析：本题考查中国近代物质生活的变迁。注意题干信息“20世纪初”“最快捷的方式”，因此应选B，火车速度远不及电报快。20世纪30年代民航飞机才在中国出现，互联网出现在20世纪90年代。答案：B,4下列不属于通讯工具变迁和电讯事业发展影响的是()A信息传递快捷简便B改变着人们的思想观念C阻碍了人们的感情交流D影响着人们的社会生活解析：新式通讯工具方便快捷，便于人们感情的沟通和交流。答案：C,