实验关于动物实验室的管理与使用培训课件.ppt

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1、动物实验室的管理与使用,吉林大学国家级生物实验教学示范中心,实验动物与实验用动物 的概念及特点,实验动物是指经人工培育，对其携带微生物实行控制，遗传背景明确，来源清楚，可用于科学实验、药品、生物制品的生产和检定及其它科学实验的动物。,有三大特点：1 遗传角度有要求，必须经人工培育，遗传背景明确，来源清楚。根据基因的纯合程度，实验动物分为：近交系、突变系、杂交群、封闭群。2 对其携带的微生物、寄生虫实行人工控制。3 用于科学实验，它是人类的替身，最精密的仪器都无法替代。,实验用动物是指一切能用于科学实验的动物，除实验动物外，还包括野生动物、经济动物和观赏动物。,按微生物学控制原理分类：实验动物可

2、分为普通级动物清洁级动物SPF级（Specific Pathogen Free)无特定病原体 的动物无菌动物,无菌动物是指动物体内外无任何微生物和寄生虫的动物。是经人工剖腹产净化培育出来的。饲养在隔离环境设施中。,SPF级（无特定病原体的动物）是指实验动物体内不存在特定病原微生物和寄生虫的特殊动物。不允许存在干扰实验的潜在感染，如绿脓杆菌。饲养在屏障环境设施系统中。来源：无菌动物悉生动物SPF动物悉生动物指体内携带的微生物是经人工有计划投给的已知菌或动物生存必需菌。如大肠杆菌或双歧杆菌。,清洁级动物动物体内外不携带人畜共患的病原体或动物传染病病原体的动物。对动物危害大的、科学研究干扰大的微生物

3、不允许存在。如肝炎病毒、仙台病毒。,普通级动物未经严格控制微生物的动物，饲养在开放环境设施中。用于教育示教。不允许存在人畜共患病和严重的动物传染病。如沙门氏菌、出血热、弓形虫、螨、虱，猴疱疹病毒（B病毒），鼠痘病毒。,普通环境：该环境设施符合动物居住的基本要求，不能完全控制传染因子，适用于饲育教学等用途的普通级实验动物。屏障环境：该环境设施适用于饲育清洁实验动物及无特定病原体实验动物，该环境严格控制人员和物品的进出。,隔离环境：该环境设施采用无菌隔离装置以保存无菌或无外来污染动物，隔离装置内的空气、饲料、水、垫料和设备均为无菌，动物和物料的动态传递须经特殊的传递系统，该系统既能保证与环境的绝对

4、隔离，又能满足转运动物时保持内环境一致。该环境设施适用于饲育无特定病原体（SPF）、悉生动物（Gnotobiotic）及无菌（Germ Free）实验动物。,影响实验结果的遗传和环境因素 基因型 表现型 发育环境 演出型 周围环境,动物实验的目的就是对演出型进行各种有控制的处理而获得实验结果。为求得动物实验结果重复性好，就必须要求演出型稳定。这就需要对决定演出型的遗传和环境条件加以控制。反应的重复性指不同的实验工作者，在不同的实验地点，不同的时间，用同一品系动物所做的实验，几乎没有差异地均能获得相同的结果。,动物对实验处理的反应：R=（A+B+C）DE R实验动物的总反应A实验动物种的共同反应

5、B动物品种和品系的特有反应C动物个体反应（个体差异）D环境的影响（包括实验处理）E实验误差,实验动物环境因素包括两个方面：自然因素（物理、化学、生物）人为因素,实验动物的环境因素实验动物的环境因素 人为因素：设施、饲养、管理、调教和实验处理等物理因素：化学因素：温度 饲料湿度 饮水气流 空气 光照 臭气噪声 杀虫剂笼具 消毒剂垫料 有毒物质饲养密度 生物因素：各种病原体（细菌、病毒、寄生虫）,清洁级动物引入动物实验室的规定 1、外购的大、小鼠品系，需查明该生产单位 是否具 备该动物生产合格证，如不具备合法 证明，则立即退回。2、动物运输盒箱包装是否符合该级别要求，如发现有破漏等不符合该级别要求

6、的情况，则立即退回。,3、如怀疑该品系动物不合要求或不健康，则应立即向法定检测机构要求鉴定，如确属不合格或以次充好，则将该批动物如数退回，并通报上级动物管理委员会严肃处理。4、在以上三点均符合要求的前提下，将动物连同包装盒一起送入缓冲间，不得在送入之前将动物包装盒打开。,5、动物连同合格的包装盒放入缓冲间后，即喷洒过氧乙酸等空气消毒剂，开启紫外线消毒20分钟，然后打开实验室内缓冲间的门，连盒进入实验室，取出动物入笼架。,动物实验人员操作规定 实验中必需的器件、物品均需严格消毒 后由传递仓（大物品由缓冲间）进入，并按照传递仓或缓冲间的进入程序操 作，非实验所需的一切物品严禁带入实 验室。,传递仓

7、（缓冲间）使用规定：物品传递仓（缓冲间）是传送实验用品、各种灭菌物品及更替下的物品的专用通道，严禁随意开启，开而不关或改作其他用途。,传递仓（缓冲间）使用方法如下：灭菌物品传入：开启外门消毒液喷洒仓内 去除外包装（二层包布）放入仓内喷液 关闭外门开紫外线灯30分钟关紫外线灯 开启内门传入实验室物品传出：开紫外线灯30分钟关紫外线灯 开启内门放入送出物品关闭内门开启外门搬出物品喷液关闭外门开紫外线灯,实验人员进入动物房程序 戴口罩、帽子 洗手 更衣室 风淋 内走廊 穿鞋套 动物室 缓冲间 外走廊 在进出时不能同时打开两扇门。,加水喂料：饮水采用过滤水，饮水瓶应及时更换，防止漏水、断水。定时消毒。

8、饲料要保持新鲜，灭菌饲料贮藏不超过一周。更换笼具：每天更换、清洗接粪盘，定期用消毒液擦拭笼架。动物的排泄物和废物由实验者清除汇总，实验结束后，通过缓冲室带出，交动物实验管理人员处理。,非实验人员不得擅自进入动物实验室。实验后，不必要的仪器、物品、样本或死亡的动物，应在离开实验室时带出（通过缓冲室随身带出），死亡的动物应交实验室管理人员统一处理。,高压饲料的准备 1、饲料需用可高压灭菌的耐高压饲料。2、检查饲料质量，如发现饲料有霉变、结块及虫蛀的情况，不得使用。3、将饲料装入牛皮纸袋内，外套布袋，扎紧袋口，放高压消毒锅中消毒（120、20分钟）。4、将消毒过的饲料用脱皮法进入传递仓 和实验室。,

9、实验室环境主要参数的例行观察记录1、每天由值班人员观察并记录动物实验室的温度和相对湿度。2、大、小鼠要求室内温度保持在20 24之间。3、发现温度过高或过低时及时调整。,动物健康状况的间接观察和发 现异常情况的处置规定 1、在实验中如发现动物有异常情况应及时报告实验室负责人。2、对动物不明原因的死亡，须作必要的尸体 解剖，查明原因。3、如发现尚未进行实验的动物表现异常，应 及时隔离观察 并追查动物来源。4、如动物经检验后，发现有感染烈性传染病的，应立即隔离处死，动物实验室需严格消毒,动物废物处理动物废物处理1、动物的废物应统一置于规定地方倾倒，并有专人负责处理。2、废物应与动物尸体分开处理。3

10、、动物尸体一定要焚烧，其他废物可作焚烧、发酵、无害化处理后丢弃或其他相应办法处理，以不污染环境为原则。4、对于有特殊试验的实验动物排泄物，要有专人负责按规定处理。,实验室的例行清洁卫生和消毒规定1、实验室内环境需符合该动物级别的要求。外环境需整洁，及时处理污迹。2、实验结束后作一次清洁消毒（用福尔马林与高锰酸钾熏蒸），再次实验前作一次加强消毒。3、对外环境每周进行一次消毒性大扫除。4、常用消毒剂应每周更换，以保证其消毒性能可靠。5、消毒前后的物品应严格分开保存。6、每隔一定时间更换消毒品种，以防抗药性。,实验中心动物实验室标准操作规程（C621）,1 实行预约制度 使用者必须于使用前3个工作日

11、进行预约，提交实验周期计划，进行动物实验的时间尽量安排在8：0016：00之间，在此时间之外要有指导教师签字同意，并确保实验过程的安全。2 培训及考核制度 实验人员必须参加负责人组织的实验动物室使用技术和注意事项的培训，合格后由负责人再行安排具体使用时间。,3 使用前准备工作3.1使用时间预约成功后，由使用者按实验动物室的消毒清洁程序，对室内地面、玻璃、门、所有器具表面、实验所用动物笼具、动物饮水瓶子等物品严格按照实验动物室操作规程进行科学、合理的消毒清洁处理，以确保实验动物室洁净度。3.2实验人员必须穿好实验服，戴好实验帽、口罩、手套等，做好个人防护后方可进入动物实验室开始操作。,4 操作使

12、用过程要求4.1购入或领取实验动物时，应严格检查实验动物健康状况，包括动物的皮毛、眼、耳、四肢、肛门，查看合格证书并详细填写入室记录。4.2必须保证实验动物饮食充沛、环境舒适卫生，保证实验动物健康饲育，不影响实验数据及结果。4.3实验动物的生存环境应舒适，确保每星期一、四更换垫料一次。更换的垫料要立即处理掉，不能在实验动物房存放。,4.4实验动物饮食充沛，但不应过量，应保证每天上午查看动物并加水、加料一次。在饲育实验动物过程中要及时、详细、真实地填写实验记录本。4.5实验时要小心认真操作，杜绝嬉笑打闹，如被鼠咬伤，应立即将创口的血挤出并用碘酒消毒处理，尽快注射出血热、破伤风等疫苗。4.6意外死

13、亡的动物要及时汇报，分析死亡原因，确定不是传染性疾病后，封存好放入冰柜；如是传染性疾病致死应及时采取措施，进行消毒处理并尽快上报。如有动物逃出必须捕回并酌情处理。,5 实验后要及时清洁实验动物房5.1实验动物房的清洁范围包括：实验动物的饲育盒、饮水瓶、笼具、架子等；实验动物房内的实验台面、窗台、地面、水池等。5.2实验动物房的清洁过程包括：清水擦拭除去灰尘、血迹、废物、污物；用消毒剂擦拭实验动物房内的实验台面、窗台、地面、水池等。5.3实验完全结束时应把实验动物所用盒子清洗干净，用消毒剂擦拭，并把上面标记记号除去，将实验动物所用饮水瓶刷净，放于指定位置，以便再次使用。,6 实验动物室清洁工作所用试剂由使用者自备。退出实验室前必须认真检查门、窗、水、电、气等确认安全无误后详细填写实验室开放记录本、值日生记录本等。7 不经负责人同意，任何人不得私自打开实验动物室的门和私自使用实验动物室及附属设备。否则将追究责任！与实验无关人员禁止入内！,8 负责人将不定期检查实验动物室的情况，如有不符合要求的，负责人有权责令整改，督促使用者及时进行清洁处理，消毒灭菌。如有不服从或不按要求整改者，则立即停止使用本实验动物室！,谢谢！,Thanks,