生物化学与分子生物学学习指导与习题集.docx
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1、生物化学与分子生物学学习指导与习题集第一篇 生物大分子的结构与功能 第一章 蛋白质的结构与功能 氨基酸的结构与性质 1氨基酸的概念:氨基酸(amino acid)是蛋白质分子的基本结构单位。构成蛋白质分子的氨基酸共有20种,这些氨基酸都是L-构型的-氨基酸。 2氨基酸分子的结构通式: 5、氨基酸的等电点 氨基酸不带电荷时,溶液的pH值称为该氨基酸的等电点,以pI表示。氨基酸不同,其等电点也不同。也就是说,等电点是氨基酸的一个特征值。 6、 氨基酸的茚三酮反应 如果把氨基酸和茚三酮一起煮沸,除脯氨酸和羟脯氨酸显黄色外,其它氨基酸都显深浅不同的紫色。氨基酸与茚三酮的反应,在生化中是特别重要的,因为
2、它能用来定量测定氨基酸。 肽键: 1、肽键: 一个氨基酸的-羧基与另一个氨基酸的-氨基以共价键偶联形成肽,其间的化学键称为肽键(peptide bond),也叫酰胺键(-CO-NH-)。 4、肽是氨基酸通过肽键相连的化合物。肽按其组成的氨基酸数目为2个、3个和4个等不同而分别称为二肽、三肽和四肽等,多肽和蛋白质的区别是多肽中氨基酸残基数较蛋白质少,一般少于50个,而蛋白质大多由100个以上氨基酸残基组成,但它们之间在数量上也没有严格的分界线。 蛋白质的分离和纯化 2、盐析:在蛋白质溶液中加入大量中性盐,以破坏蛋白质的胶体性质,使蛋白质从溶液中沉淀析出,称为盐析。常用的中性盐有:硫酸铵、氯化钠、
3、硫酸钠等。 蛋白质的等电点概念:蛋白质分子所带正、负电荷相等时溶液的pH值称为蛋白质的等电点。 pH值在等电点以上,蛋白质带负电,在等电点以下,则带正电。溶液的pH在蛋白质的等电点处蛋白质的溶解度最小。 一、蛋白质的生物功能:生物催化、机械支撑作用、运输与贮存、协调、免疫保护、生长与分化调控、细胞信号转导、物质跨膜运输、电子传递等。 二、蛋白质的分子结构:可为分为一级、二级、三级和四级结构等层次。一级结构为线状结构,二、三、四级结构为空间结构。蛋白质分子的一级结构是形成空间结构的物质基础. 1一级结构:指多肽链中氨基酸的排列顺序,其维系键是肽键。蛋白质的一级结构决定其空间结构。 2二级结构:指
4、多肽链主链骨架盘绕折叠而形成的构象,借氢键维系。二级结构是肽链的局部空间结构,它是蛋白质复杂空间结构形成的基础,因此也称为构象单元。主要有以下几种类型: -螺旋:其结构特征为:主链骨架围绕中心轴盘绕形成右手螺旋;螺旋每上升一圈是3.6个氨基酸残基,螺距为0.54nm; 相邻螺旋圈之间形成许多氢键; 侧链基团位于螺旋的外侧。 -折叠:其结构特征为: 若干条肽链或肽段平行或反平行排列成片; 所有肽键的C=O和NH形成链间氢键。 无规卷曲:主链骨架无规律盘绕的部分。 蛋白质的超二级结构和结构域 在蛋白质的结构中,经常会出现两个或几个二级结构单元被连接起来,进一步组合成有特殊的几何排列的局域空间结构,
5、这些局域空间结构称为超二级结构,或简称模体。超二级结构可以视为是处于二级结构与三级结构之间的一个结构层次。现在已知的超二级结构有3种基本的组合形式:,。 多肽链还会在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的局部折叠区,称为结构域。对于一些简单的球状蛋白分子来说,它还可能是一个独立的功能单位或功能域。 3三级结构:结构域、二级结构、超二级结构的多肽链在空间进一步协同盘曲、折叠,形成包括主链、侧链在内的专一排布,这就是蛋白质的三级结构。对于一些较小的蛋白质分子,三级结构就是它的完整三维立体结构;而对于大的蛋白质分子,则需要通过三级结构单位的进一步组织才能形成完整分子。 其维系键主要是非共价键:氢
6、键、疏水键、范德华力、离子键等,也可涉及二硫键。 4四级结构: 亚基的概念:亚基是指参与构成蛋白质四级结构的而又具有独立三级结构的多肽链。 四级结构的概念:含两条以上肽链的蛋白质分子,每条肽链彼此以非共价键相结合,这些肽链称为亚基。通过非共价键形成大分子体系时,亚基间的组合方式称为蛋白质分子的四级结构。其维系键为非共价键。 一般来说,单独存在的亚基并没有完整的生物活性,只有具有完整的四级结构的寡聚体才具有生物活性。 四、 蛋白质的理化性质: 1蛋白质的变性:蛋白质在某些理化因素的作用下,其特定的空间结构被破坏而导致其理化性质改变及生物活性丧失,这种现象称为蛋白质的变性。引起蛋白质变性的因素有:
7、高温、高压、电离辐射、超声波、紫外线及有机溶剂、重金属盐、强酸强碱等。绝大多数蛋白质分子的变性是不可逆的。 3蛋白质的紫外吸收:蛋白质分子中的色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸残基对紫外光有吸收,以色氨酸吸收最强,最大吸收峰为280nm。 4蛋白质的胶体性质:蛋白质具有亲水溶胶的性质。蛋白质分子表面的水化膜和表面电荷是稳定蛋白质亲水溶胶的两个重要因素。 第一章 蛋白质的结构与功能 一、名词解释 1、肽键(peptide bond) 2、蛋白质的等电点(isoelectric point of protein): 3、蛋白质的变性(denaturation of protein) 10、氨基酸 11、蛋白
8、质的紫外吸收 12、氨基酸的茚三酮反应 二、填空题 1、组成蛋白质的元素有_、_、_、_。含量恒定的元素是_,其平均含量为_。 2、蛋白质结构的基本单位是_,结构通式为_ 。 3、肽是氨基酸与氨基酸之间通过_ 相连的化合物。 4、蛋白质的二级结构形式有_、_、_、_。 5、维持蛋白质空间构象的非共价键有_、_、_、_。 7、 氨基酸在等电点(PI)时,以_离子形式存在,在PHPI时以_离子存在,在PHPI时,以_离子形式存在。 8、氨基酸与茚三酮的反应,除脯氨酸和羟脯氨酸显黄色外,其它氨基酸都显_。在生化中是特别重要的,因为它能用来定量测定_。 9、 酸性氨基酸基酸有_、_;碱性氨基酸有_、_
9、、_。 含巯基的氨基酸是_。 三、单项选择题 1有一混合蛋白质溶液,各种蛋白质的pI分别为4.6、5.0、5.3、6.7、7.3。电泳时欲使其中4种泳向正极,缓冲液的pH应该是 ( ) A5.0 B4.0 C6.0 D7.0 E8.0 2蛋白质分子引起280nm光吸收的最主要成分是 ( ) A肽键 B半胱氨酸的-SH基 C苯丙氨酸的苯环 D色氨酸的吲哚环 E组氨酸的咪唑环 3含芳香环的氨基酸是 ( ) ALys BTyr CVal DIle EAsp 4变性蛋白质的特点是 ( ) A黏度下降 B丧失原有的生物活性 C颜色反应减弱 D溶解度增加 E不易被胃蛋白酶水解 5蛋白质变性是由于 ( )
10、A蛋白质一级结构改变 B蛋白质空间构象的改变 C辅基的脱落 D蛋白质水解 E以上都不是 6以下哪一种氨基酸不具备不对称碳原子 ( ) A甘氨酸 B丝氨酸 C半胱氨酸 D苏氨酸 E丙氨酸 7下列有关蛋白质折叠结构的叙述正确的是 A折叠结构为二级结构 B肽单元折叠成锯齿状 C折叠结构的肽链较伸展 D若干肽链骨架平行或反平行排列,链间靠氢键维系 E以上都正确 8可用于蛋白质定量的测定方法有 盐析法 紫外吸收法 C层析法 D透析法 E以上都可以 9维系蛋白质一级结构的化学键是 A氢键 B肽键 C盐键 D疏水键 E范德华力 10天然蛋白质中不存在的氨基酸是 A半胱氨酸 B瓜氨酸 C羟脯氨酸 D蛋氨酸 E
11、丝氨酸 11蛋白质多肽链书写方向是 A从3 端到5端 B从5 端到3 端 C从C端到N端 D从N端到C端 E以上都不是 12血浆蛋白质的pI大多为pH56,它们在血液中的主要存在形式是 A兼性离子 B带负电荷 C带正电荷 D非极性分子 E疏水分子 13蛋白质分子中的螺旋和片层都属于 A一级结构 B二级结构 C三级结构 D域结构 E四级结构 14螺旋每上升一圈相当于氨基酸残基的个数是 A4.5 B3.6 C3.0 D2.7 E2.5 15下列含有两个羧基的氨基酸是 A缬氨酸 B色氨酸 C赖氨酸 D甘氨酸 E谷氨酸 16组成蛋白质的基本单位是 AL-氨基酸 BD-氨基酸 CL,-氨基酸 DL,D-
12、氨基酸 ED-氨基酸 17维持蛋白质二级结构的主要化学键是 A疏水键 B盐键 C肽键 D氢键 E二硫键 18蛋白质分子的转角属于蛋白质的 A一级结构 B二级结构 C结构域 D三级结构 E四级结构 19关于蛋白质分子三级结构的描述错误的是 A具有三级结构的多肽链都具有生物学活性 B天然蛋白质分子均有这种结构 C三级结构的稳定性主要由次级键维系 D亲水基团多聚集在三级结构的表面 E决定盘曲折叠的因素是氨基酸序列 20有关血红蛋白(Hb)的叙述正确的是 A可以与氧结合 B含铁 C含辅基的结合蛋白 D具有四级结构形式 E以上都正确 21具有四级结构的蛋白质特征是 A分子中必定含有辅基 B四级结构在三级
13、结构的基础上,多肽链进一步折叠、盘曲形成 C依赖肽键维系四级结构的稳定性 D每条多肽链都具有独立的生物学活性 E由两条或两条以上的多肽链组成 22关于蛋白质的四级结构正确的是 A一定有多个不同的亚基 B一定有多个相同的亚基C一定有种类相同,而数目不同的亚基数 D一定有种类不同,而数目相同的亚基;E亚基的种类,数目都不一定相同 23蛋白质的一级结构及高级结构决定于 A 亚基 B分子中盐键 C氨基酸组成和顺序 D分子内部疏水键 E分子中氢 24蛋白质的等电点是 A蛋白质溶液的pH等于7时溶液的pH B蛋白质溶液的PH等于7.4时溶液的pH C蛋白质分子呈负离子状态时溶液的pH D蛋白质分子呈正离子
14、状态时溶液的pH E蛋白质的正电荷与负电荷相等时溶液的p 25蛋白质溶液的主要稳定因素是 A蛋白质溶液的黏度大 B蛋白质在溶液中有“布朗运动” C蛋白质分子表面带有水化膜和同种电荷 D蛋白质溶液有分子扩散现象 E蛋白质分子带有电荷 26血清在饱和硫酸铵状态下析出的蛋白质是 A纤维蛋白原 B球蛋白 C拟球蛋白 D清蛋白 E球蛋白 27. 胰岛素分子A链与B链交联是靠 A疏水键 B盐键 C氢键 D二硫键 E范德华力 四、多项选择题 1关于蛋白质的组成正确的有 A由C,H,O,N等多种元素组成 B含氮量约为16 C可水解成肽或氨基酸 D由-氨基酸组成 E含磷量约为10 2蛋白质在280nm波长处的最
15、大光吸收是由下列哪些结构引起的 A半胱氨酸的巯基 B酪氨酸的酚基 C色氨酸的吲哚基 D组氨酸的异吡唑基 E精氨酸的胍基 3关于蛋白质中的肽键哪些叙述是正确的 A比一般CN单键短 B具有部分双键性质 C与肽键相连的氢原子和氧原子呈反式结构 D肽键可自由旋转 E比一般CN单键长 4蛋白质的螺旋结构 A多肽链主链骨架C=O基氧原子与NH基氢原子形成氢键 B脯氨酸和甘氨酸对螺旋的形成无影响 C为右手螺旋 D每隔3.6个氨基酸残基上升一圈 E侧链R基团出现在螺旋圈内 5关于蛋白质结构的叙述正确的有 A蛋白质的一级结构是空间结构的基础 B亲水氨基酸侧链伸向蛋白质分子的表面 C蛋白质的空间结构由次级键维持
16、D有的蛋白质有多个不同结构和功能的结构域 E所有蛋白质都有一、二、三、四级结构 6关于蛋白质变性的叙述哪些是正确的 A 尿素引起蛋白质变性是由于特定的肽键断裂 B变性是由于二硫键和非共价键破坏引起的 C变性都是可逆的 D变性蛋白质的理化性质发生改变 E变性蛋白质的空间结构并无改变 7下列哪些方法基于蛋白质的带电性质 A电泳 B透析和超滤 C离子交换层析 D凝胶过滤 E超速离心 8 已知卵清蛋白pI=4.6,乳球蛋白pI=5.2,糜蛋白酶原pI=9.1,上述蛋白质在电场中的移动情况为 A缓冲液pH为7.0时,糜蛋白酶原向阳极移动,其他两种向阴极移动 B缓冲液pH为5.0时,卵清蛋白向阳极移动,其
17、他两种向阴极移动 C缓冲液pH为9.1时,糜蛋白酶原在原地不动,其他两种向阳极移动 D缓冲液pH为5.2时,乳球蛋白在原地不动,卵清蛋白向阴极移动,糜蛋白酶原移向阳极 E缓冲液pH为5.0时,卵清蛋白向阴极移动,其他两种向阳极移动 9蛋白质处于pH等于其pI的溶液时,蛋白质分子解离状态可为 蛋白质分子解离为正、负离子的趋势相等,为兼性离子 蛋白质的净电荷为零 具有相等量的正离子和负离子 蛋白质分子处于不解离状态 蛋白质分子解离带同一种电荷 10组成人体蛋白质的氨基酸 A都是-氨基酸 B都是-氨基酸 C除甘氨酸外都是D系氨基酸 D除甘氨酸外都是L系氨基酸 EL系和D系氨基酸各半 11属于蛋白质二
18、级结构的有 螺旋 折叠 转角 亚基 无规卷曲 12含羟基的氨基酸有 苏氨酸 丝氨酸 赖氨酸 酪氨酸 半胱氨酸 五、问答题 1、蛋白质含氮量平均为多少?为何能用蛋白质的含氮量表示蛋白质的相对含量?如何计算? 2、蛋白质的分离、提纯一般程序 参考答案 一、名词解释 1、肽键(peptide bond):一个氨基酸的-羧基与另一个氨基酸的-氨基以共价键偶联形成肽,其间的化学键称为肽键(peptide bond),也叫酰胺键(-CO-NH-)。 2、蛋白质的等电点(isoelectric point of protein):蛋白质所带正负电荷相等时的溶液pH值。 3、蛋白质的变性(denaturati
19、on of protein):蛋白质在某些理化因素的作用下,其特定的空间结构被破坏而导致其理化性质改变及生物活性丧失,这种现象称为蛋白质的变性。 。 二、填空题 1、C、H、O、N;N;16% 2、氨基酸 3、肽键 4、-螺旋、-折叠、-转角、无规卷曲 5、 疏水作用、盐键、氢键、范德华力 7、 中性、带负电的阴、带正电荷的阳 8、紫色、氨基酸 9、 谷氨酸、天冬氨酸;精氨酸、赖氨酸、组氨酸;半胱氨酸 三、选择题 1 D2 D3 B4B5 B6 A7 E8 B9 B10 B11 D12 B13 B 4 B15 E16 A17D18 B19 A20 E21 E22 E23 C24 E25 C26
20、 D27D 四、多项选择题 1 ABCD 2 BC 3 ABC 4 ACD5 ABCD6 BD7 AC8 BC9 AB10 AD11 ABCE12 ABD 四、问答题 1、16%。各种来源的蛋白质含氮量基本恒定。每克样品含氮克数6.25100=100克样品蛋白质含量 6、 蛋白质分离、提纯的一般程序: 7、答:可分为以下几个步骤: 材料的预处理及细胞破碎 常用的破碎组织细胞的方法有: 1. 机械破碎法 2. 渗透破碎法 3. 反复冻融法 4. 超声波法 5. 酶法 (二) 蛋白质的抽提 通常选择适当的缓冲液溶剂把蛋白质提取出来。抽提所用缓冲液的pH、离子强度、组成成分等条件的选择应根据欲制备的
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