精液常规检查课件.ppt
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1、精液检查,主讲:王必管,精液(spermatic)由精浆(spermatic plama)和精子(sperm)组成。精子产生于睾丸,在附睾内发育成熟,为男性生殖细胞,占精液的5%左右。精浆是由男性附性腺如精囊、附睾、前列腺、尿道旁腺和尿道球腺等分泌的混合液,是输送精子的必需介质,并为精子提供营养物质和能量。,精液中水分约占90%,其余为有形成分,包括精子和生殖管道脱落的少量上皮细胞、白细胞及未成熟生精细胞。精液的化学成分很复杂,主要包括蛋白类(清蛋白、纤维蛋白原、免疫球蛋白、a2巨球蛋白等)、酶类(酸性磷酸酶、乳酸脱氢酶-X、纤溶酶、柠檬酸酶等)、微量元素(镁、钙、铁、锌等)及激素、果糖等。,
2、精液检查的主要目的:评价男性生育功能,提供不育症的诊断和疗效观察依据。辅助男性生殖系统疾病的诊断。输精管结扎术后的疗效观察。为体外授精和精子库筛选优质精子。法医学鉴定,一、标本采集和处理,(一)标本采集精液标本采集以手淫法为宜。将一次射出的全部精液收入干净的容器内;容器应加盖、标明标本采集日期和时间。采集微生物培养标本须无菌操作。精液收集后应立即保温(20-40%)在1h内送检。,(二)标本处理,精液内可能含有乙型肝炎病毒、人类免疫缺陷性病毒和疱疹病毒等,故精液需按潜在生物危害物质处理。标本用毕后应用火焚烧,或浸入0.1%过氧乙酸12h或5%甲酚皂溶液中24h后处理。,二、一般检查,(一)理学
3、检查1.外观【参考值】灰白或乳白色,不透明【临床意义】精液放置一段时间,自行液化后为半透明乳白色,久未射精者的精液可略显浅黄色。黄色脓性精液,见于精囊炎或前列腺炎。红色或酱油色伴大量红细胞者为血精,见于精囊腺和前列腺炎症、结核、结石或肿瘤。,【参考值】一次排精量2-5ml。【临床意义】一次排精量与排精时隔时间有液减少:若5-7d未射精,精液量少于1.5 ml,视为精液减少,称为少精子症(oligospermia),首先要排除人为因素,如收集时部分精液丢失或禁欲时间过短等,病理性减少见于雄激素分泌不足、副性腺感染等。无精液症(azoospermia):指3d不排精液,精液量少于0.5 ml。可能
4、由逆行射精和不射精所致。精液增多症:精液量超过6.1 ml为精液增多症(polyspermia)。精液增多,精子稀释,不利于生育,常见于副性腺功能亢进。3.凝固及液化 健康人精液射出后,很快呈胶冻凝块状,即精液凝固。精液由胶冻状转变为流动状所需时间即精液液化时间。【检测原理】精液标本采集后立即观察其是否凝固,然后置于37C水浴中,每5min检查1次,直至液化,记录精液从凝固至完全液化的时间。,5.酸碱度【检测原理】用精密pH计测定液化精液。【方法学评价】pH试纸法简便,pH计法准确。【质量保证】测定精液pH值应在射精1h内完成,精液放置时间过长会影响测定结果。细菌污染可以使精液pH呈碱性。【参
5、考值】7.28.0(平均7.8)【临床意义】pH8.0,常见于急性前列腺炎、精囊炎或附睾炎,可能是精囊腺分泌过多或前列腺分泌过少所致。,【参考值】射精后精液立即凝固,液化时间30min。【临床意义】精液凝固障碍:见于精囊腺炎或输精管缺陷等,精囊腺炎时,凝固蛋白分泌减少引起精液凝固障碍。液化不完全:见于前列腺炎,因前列腺分泌纤溶酶减少所致,抑制精子活动力,进而影响生育能力。精液化缓慢,即超过1h或数小时不液化称精液迟缓液化症。,稠性很高,4.黏稠度【检测原理】(1)直接玻棒法:将玻璃棒插入精液标本,提棒时可拉起黏液丝。精液黏稠度分为3级:级:30 min精液基本液化,玻璃棒提拉精液呈丝状黏稠度。
6、级:60 min精液不液化,玻璃棒提拉可见粗大黏稠丝,涂片有较明显黏稠感。级:24h精液不液化,难以用玻璃棒提拉起精液,黏涂片困难。,精液靠重力滴落,并观察拉丝长度。【方法学评价】常用直接玻璃棒法和滴管法均简单,适合临床应用。【参考值】拉丝长度2cm,呈水样,形成不连续小滴。【临床意义】精液黏稠度测定对精浆性质观察提供了一个客观数据。黏稠度减低:即新排出的精液呈米汤样,可见于先天性无精囊腺及精子浓度太低或无精子症。黏稠度增加:可干扰精子计数、精子活力和精子表面抗体的测定。多与附属性腺功能异常有关,如附睾炎、前列腺炎;且常伴有不液化,影响精子活力,致使精子穿透障碍而影响生育。,5.酸碱度【检测原
7、理】用精密pH计测定液化精液。【方法学评价】pH试纸法简便,pH计法准确。【质量保证】测定精液pH值应在射精1h内完成,精液放置时间过长会影响测定结果。细菌污染可以使精液pH呈碱性。【参考值】7.28.0(平均7.8)【临床意义】pH8.0,常见于急性前列腺炎、精囊炎或附睾炎,可能是精囊腺分泌过多或前列腺分泌过少所致。,1.涂片检查 取1滴液化而混匀的精液置于载玻片上,加盖玻片静置片刻,在显微镜下观察有无精子。若未见精子,应将标本离心15min(3000r/min)后,取沉淀物重复检查。仍未见精子,则不必继续检查。直接涂片观察有无精子,可判断结扎术是否成功,一般在术后第6周开始检查,每周12次
8、,连续观察3次,查不到精子则表明手术成功。,(1)精子活率(sperm activty rate)指显微镜下直接观察活动精子所占精子总数的比例。【方法学评价】因误差较大,此法只能作为初筛检查。【质量保证】检查应在射精后2h内完成。标本应注重保暖,宜在保温镜台上进行观察。直接涂片检查时,若不活动精子过多(75%),应作进一步确证,采用体外精子活体染色技术测定活精子数量。,【参考值】排精后60 min内,精子活率为80%90%(至少大于60%)。【参考值】精子活率减低是导致男性不育的重要因素。当精子活率低于70%时,可使生育力下降,如低于40%则可致不育。引起精子活率下降的因素较多,见于:精索静脉
9、曲张。生殖系统感染,如淋病、梅毒等。物理因素,如高温环境(热水浴)、放射线因素等。化学因素,如某些药物(抗代谢药、抗疟药、雌激素)、乙醇等。,(2)精子活力:精子活力(sperm activity)指精子前向运动的能力。WHO将精子活力分为a、b、c、d四级:a级:精子快速前向运动,370C时速度25m/s,或200C时速度20 m/s;(25m相当于5个精子头部长度或半个尾部长度)。b级:慢速或呆滞地前向运动。c级,非前向运动(5 m/s)。d级:不动【方法学评价】除用显微镜检查精子活力外,还有连续摄影法及精子质量分析仪测定。连续摄影法需高精度设备,方法较复杂,尚不能普及。精液质量分析仪操作
10、便捷、准确、客观,是较理想的精子活力分析法。,【质量保证】精子活力和运动速度依赖于温度,包括显微镜台和其他操作器材等表面的温度,故应尽可能在370C左右的环境下测定精子活力。【参考值】射精后60min内,a级和b级精子总和50%,或a级精子25%。【临床意义】精子活力低下常见于:精索静脉曲张、静脉血回流不畅,睾丸组织缺氧等。生殖系统非特异性感染以及使用某些药物(抗代谢药、抗疟药、雌激素、氧氮芥等)。,(3)精子存活率(sperm motility rate):用活精子所占比例表示。常用染色法:用伊红Y或台盼蓝等染料对液化精液染色,在高倍镜下观察200个精子,以不着色精子的百分率报告。通常,精子
11、死亡后,细胞膜完整性受损,失去屏障功能,很容易着色。当精子活动率低于50%时,应检查精子存活率。【方法学评价】湿片法和干片法均简单,适合临床应用。,【方法学评价】湿片法和干片法均简单,适合临床应用。【参考值】存活率75%(伊红染色法)【临床意义】精子存活率减低是导致不育的重要原因之一。死精子超过50%,即可诊断为死精子症(可能与附属性腺炎症和附睾炎有关)。2.精子密度(sperm density)即指计数单位体积内精子数量。精子密度乘以1次精液量,即1次射精的精子总数。【参考值】精子计数20109/L;精子总数40106/1次射精。【临床意义】精子计数20109/L时为少精症;精液中无精子时为
12、无精子症。常见于:睾丸病变:如精索静脉曲张;睾丸畸形、炎症、结核、淋病、肿瘤及隐睾等。输精管疾病:如输精管阻塞、输精管先天性缺如和免疫性不育(睾丸创伤和感染使睾丸屏障的完整性受到破坏,产生抗精子抗体所致)。其他:逆行射精、有害金属或放射性损害、环境因素、老年人、应用抗癌药物等。,3.精子形态(1)湿片法:精子计数后,用高倍镜或相差显微镜(600)直接检查精子形态。(2)染色法:将液化精液涂成薄片,经干燥、固定后作H-E、吉姆萨、改良巴氏、勃力-利染色(Bryan-Leishman staining)和肖尔染色(Shorr staining)等。油镜下观察计数200个精子,报告形态正常和异常的精
13、子百分率。现已有预先固定染料的商品化载玻片,在载玻片上直接滴加510ul液化精液,加盖玻片,数分钟后精子着色,可以清楚地显示精子形态结构。正常精子形态(图7-9、图7-10):头部呈椭圆形,长约4.05.0m,宽约2.53.5 m/顶体的界限清,占头部的40%70%。中段细,宽度1 m,长度是头部的1.5倍,且在轴线上紧贴头部。尾部均一且直,比中段细,长45 m。胞质小滴小于头部大小的一半。巴氏染色后正常精子头部顶体染成浅蓝色,顶体后区域染成深蓝色,中段染成浅红色,尾部染成蓝色或浅红色。异常精子形态包括精子头部、劲段、中段和尾部的各种异常(表7-28),【方法学评价】(1)湿片法:操作便捷,但
14、要求检验人员经验丰富,否则会因识别错误导致结果差异较大,故不推荐使用。目前,相差显微镜检查在临床上应用仍较少。(2)染色法:操作相对费时、复杂、但染色后精子结构清楚,易于辨认,结果更为准确,重复性好,为WHO推荐方法。【质量保证】当形态学异常的精子有多种缺陷同时存在时,此时只须记录1种,应先记录头部缺陷,其次为尾部缺陷。脱落或游离的精子头作为异常形态计数,但不计数游离尾(避免重复)。卷尾与精子衰老有关,但高卷尾率与低渗透压有关,应予注意。畸形精子指数是指计算各种精子缺陷的平均数量,此指标对预测精子功能有一定意义。,【参考值】1%【临床意义】当睾丸曲细精管生精功能受到药物或其他因素的影响时,精液
15、中可出现较多未成熟生殖细胞。(2)上皮细胞、红细胞、白细胞:正常生育男性精液中偶见前列腺上皮细胞(呈柱状或立方形、圆形及多边形)、精囊细胞(呈圆形或卵圆形嗜碱性胞质含色素颗粒)、尿道移行上皮细胞(呈多边形)、柱状或鳞状上皮细胞;少量红细胞和白细胞。前列腺增生患者还可见到较多增大的前列腺上皮细胞。【参考值】红细胞、白细胞和上皮细胞5个/HPF。,【临床意义】精液中红细胞、白细胞增多见于生殖道炎症、结核、恶性肿瘤等。正常精液白细胞小于1109/L(正甲苯胺蓝过氧化酶染色)。精液中白细胞数超过1109/L称为白细胞精子症(leukocytospermia),患者可伴有精子浓度、射精量、精子活力等改变
16、和(或)精子功能丧失。精液中检查到癌细胞,对生殖系统恶性肿瘤的诊断将提供重要依据。,前列腺液检查 前列腺液检查(prostatic fluid)是由前列腺分泌的不透明的淡乳白色液体,是精液的重要组成部分,占精液的30%。主要成分包括酶类、无机离子、免疫物质和一些有形成分等。前列腺液能维持精液适当的pH值、参与精子能量代谢、抵制细菌生长、促使精液液化。,前列腺液检查主要用于前列腺炎、前列腺结核和前列腺癌的辅助诊断和疗效观察及性传播性疾病(sexual transmitted disease,STD)的诊断。,一、标本采集和处理(一)标本采集和转运 前列腺液体标本由临床医师行前列腺按摩术后采集。量
17、少时可直接涂于载玻片上,量多时弃去第1滴前列腺液后,收集于洁净干燥试管中。若标本用于细菌培养,应无菌采集并立即送检。【质量保证】检验前应掌握前列腺按摩禁忌证,如疑有前列腺结核、脓肿、肿瘤或急性炎症且有明显压痛者,应禁忌或慎重采集标本。检查前3d患者应禁止性活动,以免白细胞增加。(二)标本检查后处理检验后标本、试管、载玻片应浸入5%甲酚皂溶液24h或0.1%过氧乙酸12h,如试管和玻片反复使用,再应煮沸、流水冲洗、晾干或烘干备用。,二、一般检查(一)理学检查1.量 正常前列腺液为数滴至2ml左右。减少:见于前列腺炎;若前列腺液减少至采集不到,提示前列腺分泌功能严重不足,常见于某些性功能低下者和前
18、 列腺炎。增多:见于前列腺慢性充血、过度兴奋时。2.颜色和透明度 正常前列腺液呈乳白色、稀薄、不透明而有光泽的液体。红色:提示有出血现象,见于精囊炎、前列腺炎、前列腺结核、结石及恶性肿瘤等,也可由按摩过重引起。黄色浑浊、脓性黏稠:提示化脓性感染,见于化,脓性前列腺炎或精囊炎。3.酸碱度 正常前列腺液pH6.36.5。75岁以后pH可略增高;若混入较多精囊液,则pH可增高。(二)显微镜检查前列腺液通常采用非染色直接涂片法进行显微镜检查,也可采用Wright染色法、苏木素-伊红染色法或巴氏染色法等进行细胞形态学检查。前列腺液还可以直接进行革兰染色或抗酸染色,寻找病原微生物。1.非染色检查(1)卵磷
19、脂小体(lecithin):为磷脂酰胆碱(phosphatidyl choline)成为,呈圆形或卵圆形,折光性强,大小不均,形似血小板,但略大,故观察时应与血小板区分。(2)前列腺颗粒细胞(prostatic granular cell):体积较大,可能是吞噬了卵磷脂小体的吞噬细胞。,3)淀粉样小体(starchy bodies):呈圆形或卵圆形,形态似淀粉样颗粒。小体中央常含有碳酸钙沉淀物,具有同心圆线纹的层状结构,呈褐色或微黄色。此小体随年龄增长而增多。【方法学评价】非染色操作简便快速,临床较常用。【质量保证】检验人员要掌握前列腺液正常和异常有形成分形态特点、提高阳性检出率。,(1)检查
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