alamar blue测定细胞存活率增殖中文方法步骤.docx
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1、alamar blue测定细胞存活率增殖中文方法步骤Alamar Blue测细胞增殖及相关细胞毒性检测 一、实验原理 AlamarBlue是一种安全、稳定、易溶于水、且对细胞无毒的新型染料,可通过荧光产生或颜色变化指示细胞的代谢。已被用于检测淋巴细胞、贴壁或不贴壁的人及动物细胞株、细菌及真菌的增殖;多种化学物质的细胞毒性试验;细胞凋亡的量化以及细胞介导的细胞毒性试验。避光储存于2-8,20个月。 活细胞能够将蓝色的氧化形式AlamarBlue变成红色的还原形式,同时发生可量化的荧光变化,无活性的细胞不能还原AlamarBlue。荧光的强度或红色的强度反映了细胞增殖的程度。其颜色变化可用酶标仪测
2、定,由于氧化和还原的吸收光谱可形成重叠,需测定570nm(还原)和620nm(氧化)两个波长处的OD值,OD570减去OD620得到的吸收值即反映了试验中细胞增殖的相对水平;其荧光变化可用荧光测定仪检测,激发波长530nm,散射波长590nm,使用荧光方法敏感性更好。 二、实验试剂 AlamarBlue; 3% SDS 三、实验材料 细胞。 培养板 四、实验步骤 药物处理完成后进行alamarBlue试验。 1、 用培养基按比例稀释alamarBlue试剂,如下表所示: 培养板 Cuvette 96-well plate 384-well plate 细胞+培养基体积 1mL 100uL 40
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