光照和漂白粉对白僵菌孢子萌发及致病力的影响.doc
《光照和漂白粉对白僵菌孢子萌发及致病力的影响.doc》由会员分享,可在线阅读,更多相关《光照和漂白粉对白僵菌孢子萌发及致病力的影响.doc(4页珍藏版)》请在三一办公上搜索。
1、摘要:研究人工紫外光和自然光照射以及消毒剂漂白粉对白僵菌(Beauveria bassiana)孢子萌发和致病力的影响。结果表明,人工紫外光照射对裸露的白僵菌孢子有明显的杀伤作用,使孢子萌发率和对家蚕(Bombyx mori L.)的致病力明显下降,但对白僵菌原粉中的孢子杀伤力相对较弱,照射24 h后白僵菌原粉对家蚕的致死率仍达93.33%。在自然光下,喷洒到桑叶上的白僵菌孢子悬浮液随光照时间的增加对家蚕的致病力下降,自然光照射3、6、12、24、36 h后,对家蚕的致死率分别为100.00%、70.00%、79.66%、10.00%和25.00%;用白僵菌原粉喷桑树,经自然光照射036 h后
2、,对家蚕的致死率为88.33%96.67%,48 h后对家蚕的致死率大幅度下降,照射48、54、78 h对家蚕的致死率分别为53.33%、31.67%和23.33%;直接置于自然光下照射的白僵菌原粉,随光照时间增加,对家蚕的致病力下降,30 h后致病力明显下降,致死率只有38.33%。有效氯浓度为1.00%和2.00%的漂白粉溶液对白僵菌孢子萌发有很强的抑制作用,72 h孢子萌发率分别为1.000%和0;用有效氯浓度为2.00%的漂白粉液进行叶片和蚕体消毒处理对白僵菌孢子均有杀灭效果,使白僵菌孢子液和原粉对家蚕的致病力明显下降,但对叶片消毒比对蚕体消毒效果好。 中国论文网 关键词:白僵菌(Be
3、auveria bassiana);致病力;光照;漂白粉;家蚕(Bombyx mori L.) 中图分类号:S432.4+4 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2013)03-0583-05 中国是世界上最大的蚕丝生产国,目前蚕丝产量占世界总产量的80%以上。全国共有蚕农2 000多万户,分布于20多个省区1。蚕业已成为中国农村经济中的重要组成部分,其年出口创汇额在农产品中位居前列,是农民增收的重要来源。家蚕白僵病是由白僵菌引起的一种真菌性病害,是家蚕主要病害之一,发生流行范围广,在世界各蚕区都有发生2。根据孢子形态可以将白僵菌分为球孢白僵菌Beauveria bassiana (
4、Bals.) Vuillemin和布氏白僵菌B. brongniartii (Sacc.) Petch3。球孢白僵菌的寄生范围广,能够侵染鳞翅目、鞘翅目、同翅目、膜翅目、双翅目等15个目149科707种昆虫4,5。近几年广西蚕茧主产区局部暴发家蚕白僵病,使很多蚕农遭受重大损失,严重影响了广西养蚕业的健康发展。据调查,2008年广西来宾市象州县在56月家蚕白僵病发病率达30%;2009年广西蚕茧主产区宜州市从5月上旬开始暴发家蚕白僵病6-8。因此,有效控制该病的发生和危害已是当务之急。本研究探讨人工紫外光和自然光照射及消毒剂漂白粉对白僵菌孢子萌发和致病力的影响,以期为家蚕白僵病的防治提供科学依据
5、。 1 材料与方法 1.1 材料 白僵菌原粉:广西环江县白僵菌厂生产。 白僵菌菌株:由白僵菌原粉经室内用PPDA培养基分离纯化获得。经形态和分子鉴定为球孢白僵菌(Beauveria bassiana Vuillemin)。 供试家蚕(Bombyx mori L.):两广二号家蚕品种,广西蚕业技术推广总站提供。 1.2 方法 1.2.1 白僵菌原粉对家蚕致病力测定 白僵菌原粉处理蚕体:用白僵菌原粉对蚕体喷粉,喷白僵菌原粉后的家蚕放到直径15 cm的培养皿中正常饲养,饲养温度(251),相对湿度90%。每处理设3个重复,每重复20头家蚕。每个重复喷1 g白僵菌原粉,设蚕体不喷白僵菌原粉为对照。饲养
6、14 d,观察家蚕生长状况,统计累计死亡率。死亡蚕体保湿培养,检查是否有菌丝和分生孢子长出,统计白僵蚕数。白僵菌原粉处理桑叶:用白僵菌原粉喷桑叶,使桑叶两面附着一层薄菌粉,再用这些桑叶饲喂健康家蚕,家蚕取食24 h后换干净新鲜桑叶正常饲喂。饲养温度(251),相对湿度90%。每处理设3个重复,每重复20头蚕。设桑叶不喷白僵菌原粉为对照,饲养14 d,观察家蚕生长状况,统计累计死亡率,死亡蚕体保湿培养,检查是否有菌丝和分生孢子长出,统计白僵蚕数。 1.2.2 白僵菌分离菌株对家蚕的致病力测定 1)孢子悬浮液制备。取已培养好的白僵菌平板(各菌株均采用第二代培养孢子),加入约10 mL 0.1%吐温
7、-80无菌水,用涂布器在平板上轻轻涂布以便将菌体表面的孢子刮下,然后用移液器将孢子悬浮液吸至已灭菌的50 mL三角瓶内,瓶中预先放置数粒灭菌玻璃球,充分振摇后用5层灭菌的纱布过滤。用血球计数板计数滤液孢子数,并计算出孢子浓度。然后将原液按试验要求配制成相应浓度的孢子悬浮液备用。 2)孢子悬浮液对家蚕的致病力测定。浸虫法:取20 mL已配好的白僵菌孢子悬浮液,挑选大小相近的健康家蚕,将其浸入孢子悬浮液中约5 s,取出后用滤纸吸干蚕体上多余的液体,放到直径15 cm的培养皿中用新鲜桑叶喂养。饲养温度为(251),相对湿度为90%。每处理设3个重复,每重复20头蚕。对照用0.1%吐温-80无菌水代替
8、孢子悬浮液。 浸叶片法:取孢子悬浮液40 mL,选取新鲜、大小相近的桑叶,浸入孢子悬浮液中,使整个叶片都充分润湿后取出,置于白磁盘中自然晾干后用于喂养健康家蚕,让蚕取食24 h后换未经处理的新鲜桑叶饲养。饲养温度为(251),相对湿度为90%。每处理设3个重复,每重复20头蚕。对照用0.1%吐温-80无菌水代替孢子悬浮液。 1.2.3 白僵菌孢子萌发率的测定 采用凹玻片法测定白僵菌孢子的萌发率9。将白僵菌孢子悬浮液滴加在洁净凹玻片的凹槽处,置于温度(251)、相对湿度 90%的条件下培养,分别于不同时间用显微镜观察孢子萌发情况,以可见芽管长度大于孢子长度1/2作为萌发标准。每处理重复3次,每重
9、复随机检查5个视野,镜检孢子总数不少于200个,计算孢子萌发率。 孢子萌发率=孢子萌发数/检查孢子总数100% 2 结果与分析 2.1 人工紫外光照射对白僵菌孢子萌发及致病力的影响 2.1.1 人工紫外光照射对白僵菌孢子萌发的影响 用紫外灯(功率20 W,照射距离20 cm)分别照射白僵菌孢子悬浮液1、3和6 h,然后采用凹玻片法测定孢子萌发率,结果见表1。由表1可见,人工紫外光对孢子萌发有明显的抑制作用,经人工紫外光照射后孢子的萌发率明显降低,人工紫外光照射1、3和6 h后白僵菌孢子72 h的萌发率分别为10.250%、2.730%和0.490%,而对照萌发率均为100.000%。 2.1.
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 光照 漂白粉 对白 孢子 萌发 致病 影响

链接地址:https://www.31ppt.com/p-3027111.html