[医学]外周血细胞形态检验.ppt
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1、外周血细胞形态检验,赣州市妇幼保健院 丁克文,外周血细胞检验程序 涂片、染色与镜检;外周血细胞形态检验报告方式 外周血红细胞异常形态检验 大小、形态、染色与结构异常;点彩红细胞 外周血白细胞异常形态检验 中性粒细胞异常变化;异常淋巴细胞 血小板形态与寄生虫检验 血小板大小、形态、数量变化;寄生虫,讲 授 内 容,外周血细胞检验程序,血涂片的制备,器材 清洁、干燥、无尘、无油脂的载玻片。操作 在玻片近一端1/3处,加一滴血液,握住另一张边缘光滑的推片,以3045角使血滴沿推片迅速散开,快速、平稳地推动推片至载玻片的另一端。,注意事项 血膜呈舌状,头、体、尾分明 空气中晃动,尽快干燥;37恒温箱中
2、促干 涂片的厚薄、长度与血滴大小(1020l)与血片质量 1h内染色或在1h内甲醇固定 正确清洁玻片 抗凝血或毛细血管血涂片;EDTA能阻止PLT聚集 抗凝血液4h内涂片,血涂片染色,原理 瑞氏(Wright)染色法(经典染色法)瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应,又有物理 吸附作用。试剂 瑞氏染液 瑞氏染料 0.1 g 甲醇(AR)60ml,pH6.8磷酸盐缓冲液(pH6.46.8)磷酸二氢钾(KH2PO4)0.3g 磷酸氢二钠(Na2HPO4)0.2g 加少量蒸馏水溶解,再加至1000ml。,操作加瑞氏染液数滴,固定血膜约1min。滴加约等量的缓冲液与染液混合,室温下染色510min。用
3、流水冲去染液,待干燥后镜检。,注意事项PH对细胞染色有影响。未干透的血膜不能染色。染色时间与染液浓度、染色时温度成反比。不能先倒掉染液,用流水冲去。血膜上有染料颗粒沉积,可加少许甲醇。,先在低倍镜下浏览全片,了解染色好坏和 细胞分布情况,观察有无异常细胞。选择涂片体尾交界处染色良好的区域,在 油镜下计数100个白细胞,按其形态特征 进行分类计数。求出各类细胞所占百分数。,血 涂 片 镜 检,注意事项分类时应从血膜体尾交界处边缘向中央依次上下呈城垛状迂回移动,计数使不能重复和遗漏。白细胞数明显减少的血片,应检查多张血片。分类见有核红细胞,不计入100个白细胞内,以分类100个白细胞过程中见到多少
4、有核红细胞报告,并注明所属阶段。,除慢淋外,破碎细胞或不能识别细胞不超过白细胞总数的2%。若破碎细胞仍能明确鉴别,如破碎的嗜酸性粒细胞,应包括在分类计数中。在结果报告中应对破碎细胞或不能识别细胞作适当描述。分类中应注意观察成熟红细胞、血小板的形态、染色及分布情况,注意有无寄生虫和其他异常所见。白细胞形态变化较大,遇有疑问应请示上级主管或主任进行核实,以减少错误。,异常红细胞形态检查,大小异常,正常红细胞大小较为一致,直径69um在各种贫血时,红细胞可出现大、小不一。直径10um为大红细胞,15um为巨红细胞,常见于巨幼贫、肝脏疾病等,直径6um为小红细胞,多见于缺铁性贫血等。直径相差1倍以上为
5、大小不均 右图:大红细胞(上)小红细胞(下)(中央苍白区扩大),形 态 异 常,RBC直径通常2.6 um,呈小圆形,细胞中心区蛋白含量较正常多。见于遗传性球形红细胞增多症(25%以上)、自身免疫性溶贫和异常Hb病(HBS、HBC病等)。,球形红细胞,红细胞呈椭圆形,横短,长大,有时呈畸形。正常人可见到,15%。见于以下疾病:1、遗传性椭圆性RBC增多症,高 于 2550%才有诊断价值。2、大细胞性贫血时可达25%。3、其他各类贫血有不同程度的 增多。,椭圆形红细胞,比正常红细胞扁薄,中心有少许血红蛋白,部分可与周围的血红蛋白连接,边缘部染色较中央深,故呈靶状。主要见于以下疾病:1、珠蛋白生成
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