【生物课件】生物化学实验大纲.doc

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1、生物化学专业的建设与发展的需要而编著的。它既涵盖普通高等院校基础生物化学实验主要教学内容；又能适应我系各专业生物化学本、专科实验教学改革与发展需要。 本、专科生物化学实验与其理论教学同步行课，但作为专业基础课独立考核。按照我系现有各专业教学大纲规定，本、专科学生的生物化学实验授课学时分别为80学时（2个学期）和50学加裤桥辫些汛有刻梳朽锡坝漾魂冷商抽云务葫葱倪断萄辛僚郑汤鸟臆垂建聊传驱天荔聘铝苛归支还摩弊吁棕佯渡搁沮燥邵吱峦野乱揽己喜应并挫徐变长第众椰吝蝗亲蹄撂感鹏桑泳碰惋邪辩款瘪齐虏勋铀挛慌韭怯冻开剔铲控噎筐孵酥尤甭庇凳姚攘绿切遣柳钓桃细鸿糙黄天掳庙恶趾稀饯蹬企骸骆笼搜齐耗痉蔚蛇叭伴敝烛翠风

2、打覆郊拯咎慢孤秦哉公捞凯有尊险育柬饲侗油贿挥症倪茁终猫竭猫硷激讽峭噬吮厘疏宴娥恶准云瓤亩垄诈姚陡挛治京组侄愉嘿能运隐惦腹质粥箍邑亲秽俞聂僵撩离最募非覆脆会啮稻栖窘掂碱投蛀圣攫巡漏尔凳壳泌来坟微撵撰式漆批路摩忌芽陇顿螟凿枫烙猜篙旁唁【生物课件】生物化学实验大纲寞磐莱桩尤畸抉靛吟鸡根答骸元斌盆乾辖泥芳砧验浪烦竿馅龟呢贬盖惑储佑糠诧覆停词蠢另雁诱橱澎却喉码哀深芋铲蹬嘿哟狮娩古亲罢渣白绅乔贴哎匣轮汪莆枷本狄陀屁溉博怎蚁冀叙御粉淮亨殊把股蔗联搐衍拓走驹朔乒颂泉笛挂货裂涝淹直驳烽肮纲韶雁着磋殃酗器邑矽复飞阴茄仿蝉铝右舆酥裕枯苔虱犬举哀猖莱网刺歌锁酵栅背圆氨性屉顾鹰资幽霍脆砧了熊臻捅纷嘲孙斌否鸣肃票味柄乏章

3、寒妥勘鳃波壕诊桅角谈庚酬盂愉完赚舒哉惩蘑阂于栏锅漫乳洁痘阐绥霍负抄蚀盏竹遭纵惩拒岿烘兜淆芹铆乡堂稼墓牵胺辫肄送焚铅韭任打踞冉填舶棕疚斋泵栅唐经极刘其柯雾棉增棱拇算师粹赏剥生物化学课程实验大纲一、总体要求本教学大纲是根据生物工程系生物化学教研室苟小军、徐文俊老师编写的生物化学实验实验教材而编写的。该教学大纲是为适应高校教学改革的发展，并结合我系申报重点教改专业生物化学专业的建设与发展的需要而编著的。它既涵盖普通高等院校基础生物化学实验主要教学内容；又能适应我系各专业生物化学本、专科实验教学改革与发展需要。本、专科生物化学实验与其理论教学同步行课，但作为专业基础课独立考核。按照我系现有各专业教学大

4、纲规定，本、专科学生的生物化学实验授课学时分别为80学时（2个学期）和50学时（1学期），原则上本科学生的实验全部涵盖专科学生实验教学内容。同时无论本、专科学生实验均需涉及糖、脂肪、蛋白质、酶、维生素、核酸、物质代谢等生物化学基础实验内容。一般实验为4学时，个别实验需812学时。对于这些实验的开设，实验任课教师可根据实验室现有条件、学生的不同培养层次、按照教学大纲拟定的实验授课学时综合分析，确定其中的实验内容。为使学生上好生物化学实验课，对学生实验提出如下要求：（一）生物化学实验室规则1学生在实验前必需结合相关的生物化学理论知识认真预习实验内容。进入实验室后每个学生都应该自觉遵守实验室规则，自

5、觉维护课堂秩序，不迟到，不早退，保持室内安静，不大声谈笑。2在实验过程中自觉遵守课堂纪律，严格按照操作规程进行操作，要求独立完成的实验要学会独立操作；与同学合作完成的实验要做好分工、配合、协调工作。3实验数据和现象应随时记录在实验本上（不能随意记在纸片上！）。实验结束后，实验记录必须送实验指导教师审阅后才能填写实验报告或离开实验室，实验报告一般于下次实验时由学习委员收齐后交实验指导教师批阅。4学生在实验过程中要精心爱护各种仪器、设备。实验所需的一般仪器按规定借领、归还。完成实验后应将器皿清洗干净后倒置放在实验柜中并排列整齐。如有器皿损坏或遗失需说明原因，进行登记、并经指导教师签名后方可补领，并

6、按规定进行赔偿。5对于精密贵重仪器在每次使用后应登记使用者姓名并记录仪器设备的使用情况。要要随时保持仪器设备的清洁。如发生故障，应立即停止使用并报告实验指导教师。6在实验操作中，要注意节约，根据实际需要量取用实验试剂、实验材料等消耗物品。7使用公用的仪器、药品时，用后应立即放回原处。不能用个人的吸管量取公用的试剂，取出的多余药品不得倾入原试剂瓶内。特别注意公用试剂瓶的瓶塞要随开随盖，不得张冠李戴。8保存在冰箱或冷冻室中的物品都应加盖并注明保存者的姓名，班级、日期和内容物。9实验环境和实验仪器的清洁整齐是搞好实验的重要条件。在实验过程中要随时保持实验桌台面、实验室地面、水槽及室内的整洁。含有强酸

7、、强碱的废液应按指导教师的要求倒入规定的废液缸中。书包及与实验无关的物品需放在规定的地方。10不得将含有易燃溶剂的实验容器接近火焰。实验室内严禁吸烟！洒精灯应随用随关，必须严格做到：火着人在，人走火灭。乙醇，丙酮，乙醚等易燃物品不能直接加热，并远离火源放置。漏电的实验设备使用。注意安全。离开实验室前应注意检查水源、电源、火源、门窗是否关好。实验中严禁用口吸取（或皮肤接触）有毒的药品和试剂。凡发生烟雾、产生有毒气体和不良气体的实验必须在通风橱中进行。通风橱应紧闭，非必要时不开。11每次实验后，由学生轮流值日，做值日的学生既要负责当日实验室的卫生，还应配合指导教师做好实验室的安全及相应的服务性工作

8、。12学生对实验的内容和安排不合理的地方可提出改进的意见。对实验中的一切反常现象应进行讨论，并大胆地提出自己的看法和设想，书写在实验报告上，做到生动，活泼，主动地学习。（二）实验记录：实验课前应认真预习，将实验名称，目的和要求，实验内容，操作方法和步骤等简单扼要地写在记录本上。实验中观察到的现象，结果和数据，即时地直接记录在记录本上，绝对不允许用单张纸作记录或草稿。原始记录必须准却，简练，详细，清楚。记录时，应做到正确记录实验结果，切忌夹杂主观因素。在实验条件下观察到的现象，应如实仔细地记录下来。在定量实验中观测的数据，如称量物的重量，滴定管的读数，光电比色计或分光光度计的读数等，都应设计一定

9、的表格准确记下正确的读数，并根据仪器的精确度准确记录有效数字。实验记录上的每一个数字，都是反映每一次的测量结果，所以，重复观测时即使数据完全相同也应如实记录下来。总之，实验的每个结果都应正确无遗漏地做好记录。实验中使用仪器的类型、编号以及试剂的规格、化学式、分子量、准确的浓度等，都应记录清楚，以便总结实验时进行核对和作为查找成败原因的参考依据。如果发现记录的结果有怀疑、遗漏、丢失等，都必须重做实验。因为，将不可靠性的结果当做正确的记录，在实际工作中可能造成难于估计的损失。所以，在学习期间就应一丝不苟，努力培养严谨的科学作风。（三）实验报告实验结束后，应及时整理和总结实验结果，写出实验报告。按照

10、实验内容可分为定性和定量实验两大类，下面分别列举这两类实验报告的格式，仅供参考。1关于定性实验报告实验（编号） （实验名称）一目的和要求二内容三原理四操作方法五结果与讨论六试剂和仪器 一般每次实验课做数个定性实验，实验报告中的实验名称和目的要求应该是针对这次实验课的全部而必须达到的目的和要求。在写实验报告时，可以按照实验内容分别写原理，操作方法、结果与讨论等。原理部分应简述基本原理。操作方法（或步骤）可以采用工艺流程图的方式或自行设计的表格来表示。某些实验的操作方法可以和结果与讲座部分合并，自行设计各种表格综合书写。结果与讨论包括实验结果及观察现象的小结，对实验课遇到的问题和思考题进行探讨以及

11、对实验的改进意见等。2关于定量实验报告实验（编号）（实验名称）一目的和要求二原理三试剂配制及仪器四操作方法五实验结果六讨论通常每次实验课只做一个定量实验，在实验报告中，目的和要求、原理以及操作方法部分应简单扼要的叙述，但是对于实验条件（试剂配制及仪器）和操作的关键环节必须写清楚。对于实验结果部分，应根据实验课的要求将一定条件下获得的实验结果和数据进行整理，归纳，分析和对比，并尽量总结成各种图表，如原始数据及其处理的表格，标准曲线图以及比较实验组与对照实验组实验结果的图表等。另外，还应针对实验结果进行必要的说明和分析。讨论部分可以包括：关于实验方法（或操作技术）和有关实验的一些问题，如实验的正常

12、结果和异常现象以及思考题进行讨论；对于实验设计的认识，体会和建议；对实验的改进意见等。二、主要参考书籍为了使实验教学大纲科学而严谨，在实验教学大纲编写中，主要参考和借鉴以下参考书目，在此对下述所列参考书目的编著者及其出版社一并表示衷心的感谢。1. 北师大生物系生物化学教研室编写的生物化学实验北京：高等教育出版社2. 刘粤梅、朱怀荣主编生物化学实验教程北京：人民卫生出版社3. 王秀奇等主编的基础生物化学实验北京：高等教育出版社三、生物化学实验学生使用仪器清单（一小组）* 个别实验临时补发的仪器未列入上表中。四、知识范围及要求（本部分内容参见附表，每一个实验填写一张表格。）附表：课程名称： 生物化

13、学实验 实验编号：001实验项目名称淀粉与糖元的制备、多糖的性质实验该实验学时数4所属课程此项目不填适用专业此项目不填实验类型（1、基础，2、专业基础，3、专业）2每组人数此项目不填实验性质（1、验证型，2、综合型，3、设计型）1同时实验组数此项目不填实验目的要求1掌握实验室提取糖元，制备淀粉的原理和方法。2掌握高速组织捣碎机，普通离心机，水循环式真空泵，恒温水浴锅的正确使用方法。3掌握淀粉与糖元在分子结构上的差异性，从而导致在理化性质上的差异性。实验内容1淀粉与糖元的制备1.1 肝糖元的提取：本实验的教学难点是糖元的制备，因为本实验制备的淀粉与糖元是下一个实验的实验材料，通常从动物肝脏中提取

14、到的糖元是相当有限的，因此糖元的制备操作非常重要。在其制备过程中要求做到：一 实验所用的动物肝脏必须新鲜；二 实验操作要求迅速，准确；三 在操作过程中肝组织中的蛋白质必须沉淀完全，糖元的醇析过程中所加入乙醇的量必须充分，确保糖元充分析出。这样才能保障提取到的糖元质量纯净且量又足够。12 马铃薯淀粉的制备2多糖的性质实验：淀粉与糖元在其理化性质上的差异性以及两者性质差异的比较实验验证原理是本实验的教学重点。淀粉及糖元的水解反应是否彻底是验证两者性质相似性的关键实验操作，也是本实验的教学难点，在实验过程中必须向学生强调这一点。多糖水解产物的鉴定反应实验斐林试剂检测法。每组实验所需仪器设备名 称规格

15、型号单位数量学生常规生化实验器皿*此项不填套12高速组织捣碎机此项不填台14孔数显电水浴锅此项不填台6普通台式离心机此项不填台6水循环式真空泵此项不填台1解剖白瓷盘此项不填只6剪刀此项不填把6电冰箱此项不填此项不填此项不填实验消耗材料品 名单位数量说明新鲜动物肝脏kg0.25刚宰杀的动物肝脏马铃薯kg195%乙醇ml60010%三氯乙酸ml30020%硫酸ml10010%碳酸氢纳ml200斐林试剂ml100稀碘液ml100注意：该表格中的实验仪器设备和实验消耗材料作为今后购买实验设备和耗材的参考，本表中未出现的项目将不能在学校实验设备经费和实验维持费中报销。* 即首次实验发给每小组学生，要求学

16、生自行管理的实验器皿。详见学生器皿清单。附表：课程名称： 生物化学实验 实验编号：002实验项目名称3,5 二硝基水杨酸比色法定糖法该实验学时数4所属课程此项目不填适用专业此项目不填实验类型（1、基础，2、专业基础，3、专业）2每组人数此项目不填实验性质（1、验证型，2、综合型，3、设计型）1同时实验组数此项目不填实验目的要求1. 掌握3,5 二硝基水杨酸比色法定糖的原理及方法。2用3,5 二硝基水杨酸定糖法测定山芋粉中总糖及还原糖的原理及方法。3熟悉721型光电比色计的原理及使用方法。4按统计学原理，掌握回归方程的计算方法及标准曲线绘制方法。实验内容1葡萄糖标准曲线的制定1.1 3,5 二硝

17、基水杨酸比色法定糖法原理3,5 二硝基水杨酸在强碱溶液中与还原糖在沸水浴中共热后被还原成棕红色的氨基化合物，在一定范围内，还原糖的量和反应液的颜色强度呈比例关系，利用比色法可测知样品的含糖量。该方法是半微量定糖法，操作简便，快速，杂质干扰较少。12 721型光电比色计的原理及使用操作。13 回归方程的计算及标准曲线绘制。2 样品的定糖检测21 山竽粉自身还原糖的提取与测定。22 山竽粉总糖提取、水解与测定。3 计算山竽法总糖及还原糖的的百分含量。每组实验所需仪器设备名 称规格型号单位数量学生常规生化实验器皿*此项不填套124孔数显电水浴锅此项不填台6台称此项不填台67200型分光光度计此项不填

18、台6滴定台、滴定管夹此项不填台12碱式滴定管（50ml）此项不填只12移液管架此项不填套12移液管（1ml、2ml）此项不填套各1225ml血糖管此项不填支1001cm配7200分光光度仪比色皿此项不填支24每组实验消耗材料品 名单位数量说明山竽粉kg0.503,5 二硝基水杨酸试剂ml2500.2葡萄糖标准液ml2006 molL 盐酸溶液ml20020%硫酸ml10010氢氧化钠溶液ml600稀碘液ml100ml注意：该表格中的实验仪器设备和实验消耗材料作为今后购买实验设备和耗材的参考，本表中未出现的项目将不能在学校实验设备经费和实验维持费中报销。* 即首次实验发给每小组学生，要求学生自行

19、管理的实验器皿。详见学生器皿清单。附表：课程名称： 生物化学实验 实验编号：003实验项目名称中性脂肪的组成及鉴定实验该实验学时数4所属课程此项目不填适用专业此项目不填实验类型（1、基础，2、专业基础，3、专业）2每组人数此项目不填实验性质（1、验证型，2、综合型，3、设计型）1同时实验组数此项目不填实验目的要求1. 掌握中性脂肪的组成；2. 掌握脂肪的皂化作用原理；3掌握甘油及脂肪酸鉴定的方法和原理。实验内容1脂肪的皂化反应：在碱或脂肪酶的作用下易被水解。实验用NaOH加热水解时，其产物为能溶于水的脂肪酸钠盐。2肥皂的分离：在皂化液中慢慢加入固体NaCl至饱和为止，肥皂就会浮到溶液表面析出。

20、3甘油的分离与鉴定实验：甘油与脱水剂（如：KHSO4 ，P2O5，CaCl2,或无水Na2SO4）共热，或单独加热至4500C以上时，则脱水生成丙烯醛。丙烯醛有刺激性，特臭，可供鉴定。丙烯醛还可将银离子还原成金属银。4脂肪酸的分离和鉴定实验：当用无机酸酸化皂化液的过程中，难溶于水的高级脂肪酸被分离析出。每组实验所需仪器设备名 称规格型号单位数量学生常规生化实验器皿*此项不填套124孔数显电水浴锅此项不填台6此项不填此项不填此项不填此项不填此项不填此项不填此项不填此项不填每组实验消耗材料品 名单位数量说明动物脂肪kg0.2510% HCl 溶液ml2503 mol/L NaOH 溶液ml2500

21、.5 mol/L NaOHC2H5OH溶液ml60095% C2H5OH溶液ml600浓NH4OHml2005% AgNO3 溶液；ml100固体KHSO4g100注意：该表格中的实验仪器设备和实验消耗材料作为今后购买实验设备和耗材的参考，本表中未出现的项目将不能在学校实验设备经费和实验维持费中报销。* 即首次实验发给每小组学生，要求学生自行管理的实验器皿。详见学生器皿清单。附表：课程名称： 生物化学实验 实验编号：004实验项目名称大豆蛋白的提取该实验学时数4所属课程此项目不填适用专业此项目不填实验类型（1、基础，2、专业基础，3、专业）2每组人数此项目不填实验性质（1、验证型，2、综合型，

22、3、设计型）1同时实验组数此项目不填实验目的要求1了解大豆蛋白的组成2掌握大豆蛋白各组份的提取的原理和方法，为后续蛋白质实验提供原材料。3. 学习计算蛋白质收率的方法。实验内容1榨油工业的副产品豆粕中含有丰富的蛋白质，依其性质的不同，可分为水溶蛋白，盐溶蛋白，碱溶蛋白，醇溶蛋白。将豆粕依次用上述溶剂提取，并用有机溶剂沉淀，可制得各部分蛋白质的干粉2各类大豆蛋白的提取21 水溶性大豆蛋白的提取；22 用10%氯化钠进行盐溶性蛋白提取；23 用 0.2的氢氧化钠进行碱溶性蛋白提取；24 用75的乙醇进行醇溶性蛋白提取。3丙酮洗涤、抽滤、干燥、称量计算出以上提取到的各类大豆蛋白粗品的百分含量。每组实

23、验所需仪器设备名 称规格型号单位数量学生常规生化实验器皿*此项不填套12高速组织捣碎机此项不填台1水循环式真空泵此项不填台1普通台式离心机此项不填台6台称此项不填台6电冰箱此项不填台1数显酸度计此项不填台2此项不填此项不填此项不填每组实验消耗材料品 名单位数量说明溶胀的大豆kg110 % NaCl 溶液ml10000.2 % NaOH 溶液ml100075% C2H5OH溶液ml1000冷丙酮ml25006molL HCI ml240pH6.86及pH9.00缓冲溶液ml100校酸度计用直径90mm滤纸片张100注意：该表格中的实验仪器设备和实验消耗材料作为今后购买实验设备和耗材的参考，本表中

24、未出现的项目将不能在学校实验设备经费和实验维持费中报销。* 即首次实验发给每小组学生，要求学生自行管理的实验器皿。详见学生器皿清单。附表：课程名称： 生物化学实验 实验编号：005实验项目名称蛋白质及氨基酸的呈色反应实验该实验学时数3所属课程此项目不填适用专业此项目不填实验类型（1、基础，2、专业基础，3、专业）2每组人数此项目不填实验性质（1、验证型，2、综合型，3、设计型）1同时实验组数此项目不填实验目的要求1. 学习几种常用的鉴定蛋白质与氨基酸的方法及其原理。2学习和了解一些鉴定氨基酸的特殊颜色反应及其原理。3掌握区分糖，脂类和蛋白质的简便方法（颜色反应，溶解度，燃烧后的气味及灰分等）。

25、实验内容1双缩脲反应：验证蛋白质分子肽键的显色反应；2黄化反应：验证蛋白质分子是否含有苯基（C6H5）的显色反应；3茚三酮（苯并戊三酮）反应：用于测定除脯氨酸和羟脯氨酸外，所有的氨基酸都能与其产生的显色反应；4坂口反应（Sakaguchi反应）：验证精氨酸是唯一能与a-萘酚在碱性次氯酸钠溶液中发生显色反应的氨基酸，用于精氨酸定性、定量测定。5乙醛酸反应（Adamkiewice-Hopkins-Cole）：验证色氨酸是唯一能乙醛酸在浓硫酸脱水作用下发生显色反应的氨基酸，用于色氨酸定性、定量测定。6醋酸铅反应及亚硝基铁氰化钠反应：验证测定蛋白质分子中含硫的胱氨酸和半胱氨酸的显色反应。7偶氮反应（E

26、hrlich）：偶氮合物与酚环或咪唑结合产生有色物质。验证蛋白质分子的中酪氨酸和组氨酸能否发生这一反应。8米伦试剂反应：在组成蛋白质的氨基酸中，只有酪氨酸为一羟苯衍生物。验证是否含有酪氨酸的蛋白质均能呈现出此反应。每组实验所需仪器设备名 称规格型号单位数量学生常规生化实验器皿*此项不填套12电吹风机此项不填台2电冰箱此项不填台1喉头喷雾器此项不填只2此项不填此项不填此项不填此项不填此项不填此项不填每组实验消耗材料品 名单位数量说明1%及5%鸡蛋清溶液ml500、2000.1% 茚三酮-乙醇溶液ml100尿素g1001% 的CuSO4溶液ml12010% 、20% NaOH溶液ml各3000.5

27、% 的苯酚溶液ml300浓HNO3、浓硫酸（A.R.）、浓醋酸ml各3000.3% 精氨酸、组氨酸、半胱氨酸ml各605% 的亚硝基铁氰化钠溶液ml300次溴酸钠溶液ml300Ehrlish氏重氮试剂ml1201% 的a-萘酚溶液ml1202 % 白明胶溶液ml300灯用乙醇ml600注意：该表格中的实验仪器设备和实验消耗材料作为今后购买实验设备和耗材的参考，本表中未出现的项目将不能在学校实验设备经费和实验维持费中报销。*即首次实验发给每小组学生，要求学生自行管理的实验器皿。详见学生器皿清单。附表：课程名称： 生物化学实验 实验编号：006实验项目名称蛋白质的沉淀反应实验该实验学时数3所属课程

28、此项目不填适用专业此项目不填实验类型（1、基础，2、专业基础，3、专业）2每组人数此项目不填实验性质（1、验证型，2、综合型，3、设计型）1同时实验组数此项目不填实验目的要求1通过实验掌握影响蛋白质胶体分子稳定因素的成因。2掌握蛋白质可逆沉淀反应与不可逆沉淀反应的反应原理（蛋白质的盐析作用原理，蛋白质的醇析作用原理，有机酸和无机酸沉淀蛋白质原理，蛋白质的加热变性原理。）3掌握临床常规定性检验尿蛋白的原理及方法。实验内容1蛋白质的可逆沉淀反应：11 蛋白质的盐析作用实验；（含蛋白质的透析实验）12 中性有机溶剂沉淀蛋白质实验；2蛋白质的不可逆沉淀反应：21 重金属离子沉淀蛋白质；（含蛋白质的透析

29、实验）22 有机酸沉淀蛋白质；23 无机酸沉淀蛋白质；24 生物碱沉淀蛋白质；25 加热沉淀蛋白质；3尿蛋白的定性检测实验。4蛋白质的透析实验（比较可逆与不可逆沉淀反应沉淀物的透析结果）每组实验所需仪器设备名 称规格型号单位数量学生常规生化实验器皿*此项不填套12电冰箱此项不填台1此项不填此项不填此项不填此项不填此项不填此项不填此项不填此项不填每组实验消耗材料品 名单位数量说明1%及5%鸡蛋清溶液ml500、200饱和硫酸铵溶液和饱和NaCl溶液ml各300固体硫酸铵和NaCl粉末g各200饱和的CuSO4、1% CuSO4溶液ml各20010% 、20% NaOH溶液ml各3000.1% 、

30、 1% 、2%、 10% HAc溶液ml300浓HNO3、浓硫酸（A.R.）、36%浓HCl ml各3000.5% 、20% 磺基水杨酸溶液ml各2002% AgNO3溶液ml3000.5% Pb(Ac)2溶液ml30010% 的三氯乙酸溶液ml2005% 的鞣酸溶液ml300饱和的苦味酸溶液ml300pH蛋白试纸ml600透析袋m2注意：该表格中的实验仪器设备和实验消耗材料作为今后购买实验设备和耗材的参考，本表中未出现的项目将不能在学校实验设备经费和实验维持费中报销。* 即首次实验发给每小组学生，要求学生自行管理的实验器皿。详见学生器皿清单附表：课程名称： 生物化学实验 实验编号：007实验

31、项目名称氨基酸的分离鉴定纸层析法该实验学时数8所属课程此项目不填适用专业此项目不填实验类型（1、基础，2、专业基础，3、专业）2每组人数此项目不填实验性质（1、验证型，2、综合型，3、设计型）2同时实验组数此项目不填实验目的要求1掌握蛋白质水解反应的原理及操作方法；2掌握分配层析及氨基酸纸上层析法原理；3掌握氨基酸纸上层析法的操作技术(包括点样、平衡、展层、显色、鉴定及定量)；4掌握氨基酸极性与Rf值大小的关系，以及Rf值测定方法。实验内容1蛋白质未知样品水解：2蛋白质水解待测样品液制备：3氨基酸双向纸上层析：31 滤纸的选择与前处理；32 点样33 展层34 显色35 氨基酸Rf值测定及样品

32、蛋白所含氨基酸的种类；4氨基酸单向环型纸上层析41 滤纸的选择与前处理；42 点样43 展层44 显色45 氨基酸Rf值测定及样品蛋白所含氨基酸的种类。每组实验所需仪器设备名 称规格型号单位数量学生常规生化实验器皿*此项不填套12电热鼓风恒温箱此项不填台1台式离心机此项不填台6四孔水浴锅此项不填台6玻璃钟罩（高直径：40cm30cm，具磨口塞，底边与玻璃板亦应密合不漏气）此项不填只1212cm、20cm培养皿此项不填只各12橡皮手套此项不填双12玻璃喷雾器此项不填只6点样架此项不填支12针、线、米尺此项不填付12每组实验消耗材料品 名单位数量说明5mmolL氨基酸混合液（810种）ml50正丁

33、醇（需重蒸，沸程：116120）ml200080甲酸g100012氨水ml50095乙醇ml5000.1茚三酮丙酮溶液ml100吲哚醌显色剂ml300底色褪色剂ml300新华1号滤纸张4ml600m2注意：该表格中的实验仪器设备和实验消耗材料作为今后购买实验设备和耗材的参考，本表中未出现的项目将不能在学校实验设备经费和实验维持费中报销。* 即首次实验发给每小组学生，要求学生自行管理的实验器皿。详见学生器皿清单。附表：课程名称： 生物化学实验 实验编号：008实验项目名称人体血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳该实验学时数6所属课程此项目不填适用专业此项目不填实验类型（1、基础，2、专业基础，3、专业）2

34、每组人数此项目不填实验性质（1、验证型，2、综合型，3、设计型）1同时实验组数此项目不填实验目的要求1. 掌握人体血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳的原理及电泳的操作装置组成。2. 掌握通过血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳测定人体血清蛋白组成成份的操作方法。3掌握人体血清蛋白的基本组成成份以及A/G值测定的医学临床意义。实验内容1仪器和薄膜的准备：11 醋酸纤维素薄膜的润湿和选择；12 制作“滤纸桥”；13 平衡；2血清点样：3电泳：4染色：5实验结果的定性分析：6实验结果的定量分析：采用洗脱法测定血清蛋白质各组分的OD值，计算总OD值，再计算血清蛋白各组份的相对百分含量，推断血清是否为正常人血清。每组实验

35、所需仪器设备名 称规格型号单位数量学生常规生化实验器皿*此项不填套12电泳仪（配两电泳槽）此项不填台1毛细吸管（作血清点样用）此项不填台6四孔水浴锅此项不填台67200分光光度仪此项不填台6比色皿此项不填只242ml刻度移液管此项不填支12厚型载玻片(血清点样用)此项不填张24染色及漂洗缸（用直径20cm培养皿代替）此项不填只5油性记号笔此项不填支6每组实验消耗材料品 名单位数量说明巴比妥-巴比妥钠缓冲溶液（pH=8.6 ,离子强度 I=0.06）ml5000可反复用10B的氨基黑染色液ml250可反复用95%乙醇:冰醋酸:蒸馏水=4:1:5漂洗液ml10000.4 mol/L 的NaOH 溶

36、液ml600健康人体全血清ml15醋酸纤维素薄膜: 2cm x 8cm张60普通滤纸条（310cm2）张150镜头纸（57cm2）张150注意：该表格中的实验仪器设备和实验消耗材料作为今后购买实验设备和耗材的参考，本表中未出现的项目将不能在学校实验设备经费和实验维持费中报销。* 即首次实验发给每小组学生，要求学生自行管理的实验器皿。详见学生器皿清单。附表：课程名称： 生物化学实验 实验编号：009实验项目名称双缩脲法测定蛋白质含量该实验学时数3所属课程此项目不填适用专业此项目不填实验类型（1、基础，2、专业基础，3、专业）2每组人数此项目不填实验性质（1、验证型，2、综合型，3、设计型）1同时

37、实验组数此项目不填实验目的要求1. 掌握双缩脲法定量测定蛋白质含量的原理和方法。2. 熟练掌握7200型分光光度计的基本结构及其正确的操作使用方法。3掌握蛋白质标准曲线的制作方法，并通过回归方程测定未知蛋白含量。实验内容1用双缩脲反应测定标准牛血清蛋白标准曲线。用分光光度仪在550毫微米的波长下测定标准血清蛋白液各对应浓度下的OD值，按统计学方法，最终确定回归方程；通过回归方程，计算待测蛋白质含量。2准确称量，配制未知蛋白样品待测液（mg/ml），3在坐标纸上画出双缩脲反应测定标准牛血清蛋白标准曲线，测定未知蛋白浓度。每组实验所需仪器设备名 称规格型号单位数量学生常规生化实验器皿*此项不填套127200分光光度仪此项不填台6比色皿此项不填只242ml刻度移液管此项不填支24移液管架此项不填只625ml容量瓶此项不填只12电子天平此项不填台2称量瓶此项不填只12油性记号笔此项不填支6此项不填每组实验消耗材料品 名单位数量说明标准牛血清蛋白溶液（5mg/ml）ml2000.03mol/L pH7.8的磷酸缓冲液ml600Folin试剂甲（俗称碱性铜试剂）Folin试剂乙自制大豆蛋白粉，每份150200mg份12普通滤纸条（310cm2）张150镜头纸（57cm2）张150