[临床医学]检验标本的采集与处理.ppt
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1、2023/2/28,1,检验标本的采集与处理,XX医院检验科 2012年5月,2,概要,检验标本的采集与运送,3,一、检验标本的定义及种类,标本的定义:是指采取患者少许的血液、排泄物(粪、尿)、分泌物(痰、鼻分泌物)、呕吐物、体液(胸腔积液、腹腔积液)和脱落细胞(食道、阴道)等样品,经过物理、化学和生物学的实验室技术和方法对其进行检验,作为判断患者有无异常存在的依据。,4,检验标本的种类,血液检验标本,血常规,其他,生化检查,血沉,凝血,免疫检查,5,检验标本的种类,体液检验标本,大便,尿液,痰液,其他,6,检验标本的种类,其它特殊标本,细胞穿剌,毛发,皮屑,其它,7,临床标本检验的过程,检验
2、申请,患者准备,患者识别、采集标本,样品检测,结果分析与解释,样品运送、保存与处理,结果确认,特殊患者回访,8,二.影响检验标本质量的因素,患者的状态,药物的影响,患者的饮食,9,影响检验标本质量的因素,原则上患者应在平静、休息状态下采集标本,特别是血液标本。因为运动能影响许多项目的测定结果。研究指出,患者处于激动、兴奋、恐惧状态时,可使血红蛋白、白细胞增高。,患者的状态,10,影响检验标本质量的因素,多数检查要求在采血前禁食12h,并注意检查前一天晚餐禁食高脂食品。研究表明:一顿标准餐后,可使血中甘油三酯增高50%、血糖增高15%。进食高脂肪食物,可引起血脂的大幅度增高。餐后采集的血液标本,
3、其血清常出现乳糜状,影响到许多检验测定的正确性。,患者的饮食,11,影响检验标本质量的因素,研究表明:多种常用镇静剂,多种常用抗生素,对多种检测结果均有影响。输血、输液对电解质,血糖等检验结果均有影响,一般不宜在输血输液侧采集血液标本。通常在输液对侧采集血液标本,或输液结束后12h后采血。,药物的影响,12,影响检验标本质量的因素,运动的影响 与运动时间、强度有关。适度运动,血糖、尿酸、乳酸增加,ATP减少,血清AST、LDH、CK、ALP增加,运动员,血清Ch、TG减少,HDL-C增加。年龄的影响 性别的影响 体形的影响,13,三.静脉抽血的注意事项,采血时,应统一采血姿势(卧位、坐位、立位
4、);应尽量在使用止血带1 min内采血,看到回血马上解开止血带;当需要重复使用止血带时,应使用另一上臂;,采集过程是标本质量的关键环节,14,三.静脉抽血的注意事项,胶塞穿刺针上的乳胶套能防止滴血,采血时不能取下;采血针软管的容积为0.4ml,采血时可酌情提前拔出采血针;采血针刺入静脉后,如穿破静脉,回血撤回,可将采血针顺原路缓慢退回,见回血即可;采血完毕后,先拔出采血针,待滴血停止后再拔出试管端穿刺针.,15,三.静脉抽血的注意事项,血液标本常见溶血原因(1)注射器、针头或容器不干燥;(2)压脉带捆扎时间太久,淤血过久;(3)穿剌不畅,损伤组织过多;(4)抽血速度太慢或太快;(5)血液注入容
5、器时未取下针头;,16,三.静脉抽血的注意事项,(6)抗凝血混合时,振荡力量过大;(7)血液存放时间过长;(8)静脉采血时,为增加血流而挤压采血部位;(9)血液标本在送检或运输过程中,挤压或振动过大等。,17,多管采血的顺序:,三.静脉抽血的注意事项,血液培养,无添加剂管,凝血实验,血常规,其它,防止凝血因子活化,或者血小板聚集而影响检验结果。,18,四.各种标本的采集要求,血液标本的采集,01,体液标本的采集,02,02,0,03,微生物标本的采集与送检,19,一)、血液标本的采集,1、血常规 标记:浅紫色瓶塞真空采血管(EDTA抗凝)采集要求:采集2ml静脉血后,立即颠倒混匀,至少5次,但
6、不能剧烈震荡,如果血液有凝块,一定要重新抽血。,20,一)、血液标本的采集,2、生化分析 标记:绿色瓶塞真空采血管 采集要求:采集3-5ml空腹血,避免溶血,避免 强光照射。糖化血红蛋白:浅紫色瓶塞真空采血管(EDTA抗凝),21,标本的正确采集与保存是生化检验结果是否可靠的前提,而这种差异往往不易被检测者发现,因此,必须给予重视。,一)、血液标本的采集,22,一)、血液标本的采集,3:红细胞沉降率(血沉)标记:黑色瓶塞真空采血管(抗凝)采集要求:采集1.6ml空腹血(至2ml瓶签刻度处),立即颠倒混匀,至少8次。,23,一)、血液标本的采集,4:免疫血清分析(如:肝炎系列、甲功、激素等)标记
7、:红色瓶塞真空采血管(不抗凝)采集要求:采集35ml空腹血,避免溶血,避免强光照射。,24,一)、血液标本的采集,5:凝血四项标记:浅蓝色瓶塞真空采血管(枸橼酸钠抗凝),检验凝血四项是为了证明有无出血性疾病。采集1.8ml空腹血(至2ml瓶签刻度处),立即颠倒混匀,至少5次。避免溶血,避免凝固。,25,6、采集方法静脉采血法:采血部位:最常用的是肘静脉,此外,也可采用手背静脉、外踝静脉、颈外静脉。取血容器:最好采用一次性注射器和试管。,26,注意事项:如遇到病人采血发生眩晕,平卧休息,必要时嗅吸芳香氨酊,掐人中。防止溶血:造成溶血原因,穿刺不顺利,局部组织损伤过多,取血容器有水,血液注入试管时
8、不取下针头,抗凝血的剧烈震荡。,27,避免充血和血液浓缩:止血带压迫时间不能过长,最好不超过半分钟。抽血时,只能向外抽,不能向内推。以免注人空气。肢体进行静脉输液时不宜在同侧静脉采血。,28,动脉采血法:一般多采用股动脉,其他部位如桡动脉,肱动脉也可采用,在博动明显处,常规消毒,刺入动脉后,血液自行涌入注射器,达所需血量,用干棉球压迫止血。,29,抗凝剂 阻止血液凝固的化学试剂,称为抗凝剂,常用的有:草酸钾 与血液中钙离子结合生成草酸钙沉淀。通常配成100g/L水溶液,每支试管中加0.1ml,80以下烘干备用。优点:溶解度大,抗凝作用强(抗凝用量2mg/ml血),价格低 缺点:改变血液pH,不
9、能用于酸碱平衡观察,不能用于K+、Ca2+测定,抑制一些酶活性,LDH、ACP、ALT。,7、标本的处理,30,氟化钠 抗凝作用弱,常与草酸钾混合使用,NaF4g,草酸钾6g,溶解至100ml,每管加0.1ml,80以下烘干备用,可抗凝23ml血。优点:防止糖酵解,用于血糖测定。肝素 是一种含硫酸基团的粘多糖,具有多方面抗凝作用。优点:抗凝作用强(抗凝用量0.1mg/ml血)不影响血细胞体积,不易溶血,配成1g/L水溶液,每管0.5ml,60烘干备用,久置而失效,价格贵。,31,二)、体液标本的采集,1:尿常规晨尿标本:一般留取清晨第一次尿最佳。尿标本的送检及保存:(1)一般需留取10ml左右
10、(2)尿标本收集后应及时送检,以免有型成分破坏和有机物质分解,32,二)、体液标本的采集,2:大便标本(1)患者的准备:患者应于治疗之前留取标本,留作隐血试验的标本应于日前禁食肉类及动物性食物,并禁服铁剂及维生素等药物。(2)自然排便后,挑取有脓血、粘液部分粪便2-3g,若稀水样便则应取约2ml,于粪便标本容器中送检。,33,二)、体液标本的采集,(3)标本务必新鲜且不可混入尿液、消毒液及污水等,以免有型成分破坏。(4)标本采集后应于1-2小时内检查完毕,否则可因pH及消化酶等影响导致有型成分破坏分解。,34,二)、体液标本的采集,3:痰液标本(1)痰液要求新鲜,一般检查以清晨第一口痰作标本最
11、适宜。(2)咳痰:清水反复漱口后用力咳嗽,从肺深部咳新鲜痰液于无菌容器送检。(3)对咳嗽乏力或昏迷病人,可用吸痰管经 鼻腔或口腔抵达气管腔内吸取痰液。,35,二)、体液标本的采集,4:其它分泌物排泄物标本及特殊标本的采集 主要由专科医生或检验人员进行:,胃液标本 精液标本脑脊液标本 前列腺液标本 胸腹水标本 阴道分泌物标本羊水标本骨髓标本等细胞穿剌标本,36,体液标本的处理 收集24小时尿液时,为防止细菌生长而影响检验结果,应使用防腐剂,常用的有:1、甲苯(或二甲苯)在尿液表面形成一薄膜,防止细菌繁殖,防腐能力较弱。用量10ml左右,适合作尿糖,尿蛋白、尿素、肌酸、肌酐、尿酸,钾、钠、氯测定。
12、,37,2、浓盐酸 使尿液保持强酸性,阻止细菌繁殖,防止尿液中某些成分因尿酸碱化而分解,用量10ml左右,适合作尿17-羟、17-酮、儿茶酚胺、钙测定。3、麝香草酚 可抑制尿中细菌生长,用量1g左右,也可用麝香草酚异丙醇溶液(10%),5 ml左右,适合作尿钾,钠、钙、AA、糖、尿胆原、胆红素测定,不适合作尿蛋白测定。,38,标本的分离和储存 血液标本采集后,如需要血浆或血清者,应及时分离,以免红细胞与血清或血浆之间物质的转移和红细胞对血清中某些物质的利用。血浆的分离:取血后与抗凝剂充分混匀后,可立即离心分离,25003000转/min,5min。血清的分离:取血后将试管放37水浴放置30mi
13、n左右,离心分离。分离的血浆或血清不能及时检测时,可放46冰箱保存,保存期限依待测成分稳定性而定,一般35天。,39,三)、微生物检验的标本采集及送检,在医学高度发展,新的抗菌药物不断涌现的今天,感染性疾病的发病率和病死率仍然居高不下。主要原因之一是当代的感染性疾病,在病原上发生了较大的变化,形成了现代感染性疾病在病原学上的新特点。,40,现代感染性疾病的新特点,以条件致病菌为主:很多低致病、弱毒的细菌,在外环境、人体体表以及与外界相通的腔道中广泛存在的细菌,引起感染甚至造成严重后果的现象日益增多。病原菌的种类更为广泛:包括需氧菌、厌氧菌、苛氧菌、分枝杆菌和真菌等。,41,细菌的耐药性不断增强
14、:同一种细菌对抗生素的耐药性可以完全不同,甚至出现同时耐多种抗生素的“多重耐药”细菌,往往使临床医师的“经验性”治疗或所谓的常规治疗根本无效。,现代感染性疾病的新特点,42,出现一些新的感染性病原:有人统计,20世纪后期,全世界一共出现种31种新的传染病,其中病毒14种,细菌11种,寄生物6种,由于人们的认识不足,缺乏有效的预防、治疗办法,人群又无免疫力,这些新出现的病菌在不同的地区和范围内流行,来势猛,传播快,造成巨大的损失和社会恐慌。例如:疯牛病、埃博拉出血热、新型肝炎病毒、大肠杆菌O157、出血性肠炎、O139霍乱、艾滋病、莱姆病等。,现代感染性疾病的新特点,43,我们应该追求:“准确的
15、病原学诊断”“针对性病原学治疗”正确的微生物标本采集和运送,是准确的病原学诊断的前提!,微生物让人类步步为营,,44,检验误差发生率哪个阶段最高,?,45,60%以上实验误差发生在分析前,1997年,一位意大利著名检验专家就对急诊检验误差发生的种类和发生率进行了统计。结果显示,约有68.2%的检验误差发生在检验前期,而来自于检验中期和检验后期的误差率分别为13.3%和18.5%。2007年,这位检验专家又进行了类似统计,结果显示,检验前期的误差发生率仍高达61.9%。,摘自:,46,分析前质量控制,获得准确结果的重要环节,47,基本原则,1.及时采集微生物标本作病原学检查2.在抗菌药物使用前采
16、集标本3.采样时严格执行无菌操作4.采样后立即送检5.标本容器须灭菌处理,但不得使用消毒剂6.送检标本应注明来源和检验目的,48,如何提高细菌阳性检出率?,标本采集时机标本采集方法标本的质与量标本的运送与保存镜检筛选合格标本(退检制度)高质量、多种分离培养基培养环境,49,常见不合格标本主要有以下问题:,标本采集时间错误容器错误标本量不足 标本采集延误 标本未及时正确运送 以及暂存条件错误。,50,最有价值的细菌学检测项目,血液培养 脑脊液培养 胆汁培养 胸腹水培养 关节液 其他无菌体液或分泌液,51,血培养标本,采集与运送,52,血培养是进行血流感诊断的最佳手段,53,血培养概念:,采集患者
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