临床生化标准操作程序文件(临床生化检验SOP文件).doc
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1、 临床生化标准操作程序文件(临床生化检验SOP文件)山东德棉职工医院检验科CS600B全自动生化分析仪标准化操作程序文件单位:山东德棉职工医院科室: 检验科生化室文件编号:版本:批准施日期:有校期: 一年复审计划:每年复审,测定系统变化时需进行修订发放部门:检验科生化室编写者: 巩建刚审批者:保管者:修订者:CS-600B全自动生化分析仪 标准化操作程序文件【仪器运行条件】为保证仪器的正常运行,仪器必须满足下列条件:1.灰尘少、通风良好的环境,避免阳光直接照射。2.地面水平良好(斜度1/200),地面强度要能够承受仪器的重量(850kg)。3.室内温度保持在1532,温度变化不超过3/小时。4
2、.室内相对湿度应保持在4585,且不结露。5.纯水供应:反渗水或离子交换水。出水量:40升/小时,水压:0.53.5kg/cm2。6.电源供应:220V10%,5060Hz,最大功率4KVA。有保护性接地(接地电阻10下)。7.放置本仪器的房间请不要带入以下电器:手机、对讲机等发出特定电磁波的小功率电器。【开机程序】)开机前检查1.供电系统(包括UPS)是否正常。2.供水系统是否正常。3.检查样品针、试剂针、搅拌针、清洗针是否有弯曲、堵塞、污物、漏水等,如有上述情况发生,参照仪器维护、保养说明书处理。4.检查清洗液(迪瑞原厂供应),包括样品针、搅拌针、去污剂箱及试剂位45(抗菌无磷)和45位(
3、碱性)各种清洗液,必要时补足。5.检查打印机是否正常、打印纸是否安装好及是否联机(打印机上Online灯亮)。6.仪器及操作台面表面干净、无污物,机房空调正常开启。2)开机为保证试剂舱的冷藏作用,位于仪器右后下方的总电源(ON)可长期处于开启状态,同时UPS长期处于工作状态。1.打开仪器右侧电源(ON)开关,记录开机时间。2.待仪器自检及程序装载(15分钟)结束,仪器至备用(Ready)状态,如有错误(Trouble),根据错误代码查找维护保养说明书检查原因,及时处理。3.自动开机在自动开机程序中设置开机时间:MAIN MENU F5:DEFINE F6:DEFINE OPTIONAL PAR
4、AMETERS F2:FOR AUTOMATIC STARTUP CONDITION 3) 执行开机程序Startup1 或Startup2开机程序设置: MAIN MENU F5:DEFINE F6:DEFINE OPTIONAL PARAMETERS F3:FOR STARTUP1 或F4:FOR STARTUP2开机程序至少应包括:1.更换仪器内水箱纯水一次。2.更换孵育槽内纯水一次。3.清洗管道3次。4.清洗液清洗探针3次。5.纯水清洗探针3次。6.清洗比色杯(酸、碱、水)。7.测定水空白。8.根据具体试剂空白变化情况设定试剂空白检查周期。9.检查剩余试剂体积。四、根据检查剩余试剂体积
5、及当日工作量,及时补足当日工作所需试剂量。五、自动开机在自动开机程序中设置每日开机条件(同上): MAIN MENU F5:DEFINE F6:DEFINE OPTIONAL PARAMETERS F2:FOR AUTOMATIC STARTUP CONDITION 【校准程序】1.校准物的准备将校准物从冰箱取出,冻干校准物按说明书加入蒸馏水复溶,轻轻颠倒混匀3次,不可用力震摇,室温放置30分钟至完全溶解;液体校准物从冰箱取出,室温放置15分钟以平衡至室温。校准物的选择尽可能选择配套仪器厂家校准品。2.上机校准程序1 MAIN MENU F1:WORKLIST F1:ENTER+右空格键 F4
6、:DEFINE CALIBRATION F1:WORKLIST12 用光标键选欲校准项目,用“SELECT”键选择“1”(试剂空白)及“2”(校准), F5:ENTER 。3 将校准品按屏幕显示放入绿色校准架相应位置,将校准架置入进样轨道,打开进样架(FEED)。【质控程序】1.质控物的准备将质控物从冰箱取出,冻干质控物按说明书加入蒸馏水复溶,轻轻颠倒混匀3次,不可用力震摇,室温放置30分钟至完全溶解;液体校准物从冰箱取出,室温放置15分钟以平衡至室温。至少有两水平质控品,8小时一次。质控物的选择尽可能选择配套仪器厂家及人血清基质质控材料。2.上机质控程序1 MAIN MENU F1:WORK
7、LIST F1:ENTER+右空格键 F4:DEFINE CONTROL F1:WORKLIST12 用光标键及SELECT键选择质控项目,F5:ENTER 。3将质控品按屏幕显示放入黄色质控架相应位置,将质控架置入进样轨道,打开进 样架(FEED)。质控在控方可进行标本检测。【标本检测程序】1.输入标本编号及测定项目: MAIN MENU F 1:WORKLIST F1:ENTER F1:TESTS 1输入顺序号(REQUEST NO)及样本编号(PATIENT ID NO)。2输入检测项目通道号或组合分析(PROFILE)代码3F5:ENTER。2.编辑标本架号(COMPILE):1 MA
8、IN MENU F 1:WORKLIST F2:COMPILE F1:BY PATIENTS2 输入起始顺序号(REQUEST NO,FROM),终止顺序号(REQUEST NO,TO), ROUTINE(1),开始架号(STARTING RACK NO)。3 F5:ENTER。3.将分离好的血清或血浆标本置入设置好的灰色样品架上,注意样本不可有凝块,样本量不可少于0.2ml 。4.打开进样架(FEED)。5.测试完毕,执行关机程序(SHUT DOWN)或设置自动关机。【关机程序】1.作好各种工作记录登记:当日工作量登记表,当日校准登记表,室内质控登记表,仪器维护保养登记表。2.执行关机程序S
9、hut-down关机程序设置:MAIN MENU F5:DEFINE F6:DEFINE OPTIONAL PARAMETERS F5:FOR SHUTDOWN关机程序至少应包括:1 清洗管道3次。2 清洗液清洗探针3次。3 纯水清洗探针3次。4 清洗比色杯(酸、碱、水)。5 测定水空白。6 检查剩余试剂体积。3.自动关机在自动关机程序中设置每日关机条件(同上):MAIN MENU F5:DEFINE F6:DEFINE OPTIONAL PARAMETERS F2:FOR AUTOMATIC STARTUP CONDITION4.关机后维护1清擦样品针、试剂针、搅拌针、清洗针。2检查清洗液(
10、Shimadzu原厂供应),包括样品针、搅拌针、去污剂箱及试剂位31(ACID)和32位(ALKLI)各种清洗液,必要时补足。3关闭水处理电源。4记录关机时间。5及时补足次日工作所需试剂量。6清洁仪器及操作台面。7关闭机房空调。【维护保养程序】1.日保养1检查去污剂箱清洗液(NEW CLEAN,8%)液面,及时更换。2更换样品针清洗液(NEW ALKLI,5%)。3更换搅拌针清洗液(NEW ALKLI,5%)。4更换去离子水箱纯水。5更换孵育槽纯水。标本的接收与拒收标准化操作程序文件单位:山东德棉职工医院科室: 检验科生化室文件编号:版本:批准施日期:有校期: 一年复审计划:每年复审,测定系统
11、变化时需进行修订发放部门:检验科生化室编写者: 巩建刚审批者:保管者:修订者: 标本的接收与拒收 1 病人的准备做血液检验项目检验的病人,一般要求采血前禁食1214小时,采血的前一天避免吃高脂肪、高蛋白类食物,避免饮酒。否则,会引 起血脂及某些血清酶结果升高,甚至血清出现混浊,影响整个检验结果;进行葡萄糖耐量试验的病人,在试验前3天给予适量的碳水化学 物饮食,有利于取得正确的结果;做碘131吸收试验者,在试验前一个月停服一切含碘的药物和含碘丰富的食物,如海产品类。 2 采血时间血液生化检验一般要求早晨空腹安静时采血。因为体内的各种化学成份受许多因素调节:如饮食后大量葡萄糖及脂类物质吸收入血,使
12、血 糖和血脂上升,游离脂肪酸及无机磷降低;运动后会使乳酸、丙酮酸、乳酸脱氢酶、转氨酶、肌酸激酶等升高,血糖降低;昼夜变化大的 成份有皮质醇、血清铁、胆红素等;日间变化大的主要是代谢废物成份如尿素、尿酸等;大量饮水可致血液稀释等等。所以,做血液生化 检验时应掌握好采血时间。但是,对重症昏迷或急症病例,可随时采血送检糖、钾、钠、钙、血气分析、淀粉酶等项目。但在输液时采血 应避免送检项目受输液成份的影响,如输液中补钾、补糖、补硷时送检,对血钾、血糖、二氧化碳结合力等项目均有影响。 3 采血部位成人一般取肘部静脉,肥胖者可用腕背静脉;婴儿常用颈部静脉、股动脉或前囟静脉窦;刚出生的婴儿可收集脐带血;尸体
13、解剖者取心脏 血;血气分析一般采动脉血;检验只需微量全血时,成人从耳垂或指尖取血,婴儿从大脚趾或脚跟取血;输液病人采血应避免在输液的同 一侧上肢或下肢采血,烧伤患者采血应避免穿剌炎症或水肿部,以免影响结果。 4 采血操作及送检的注意事项 41 采血器械:采血用的注射器、试管必须干燥清洁。注射器及针头不宜用酒精消毒。目前多用一次性注射器及试管。 42 采血操作:必须按无菌操作,采血部位皮肤必须干燥,止血带不可缚扎过久,抽血时速度不可过快,以免血细胞破裂,采血后应卸下针头 再将血液沿管壁徐徐注入试管内。 43 防止气体逸散:采集血气分析样本,抽血时注射器内不能有空泡,抽出后立即用小橡皮密封针头,隔
14、绝空气。因空气中的氧分压高于动脉 血,二氧化碳分压低于动脉血;作二氧化碳结力测定时,盛血标本的容器亦应加塞盖紧,避免血液与空气接触过久,影响检验结果。 44 防止分解及自身变化:采血后应尽快送检。因血液中有些化学成份于离体后极易分解,使其含量改变,如血糖及酶类测定,时间过久,血 细胞酵解可使血糖下降,酶活力变化等。有些化学成份在细胞内外相差悬株,离体时间过长,细胞内外浓度会发生变化,影响测定结果。 如肌酸激酶、乳酸脱氢酶、电解质等。 45 防止污染:有些检查项目要求极严格,其采血器具及标本容器必须经过化学清洁。如血氨、铜、锌、铁等项目,因其含量极低,稍有污染 即影响结果。作淀粉酶测定时,要防止
15、唾液污染,因唾液中含有大量的淀粉酶,污染后会引起假性淀粉酶升高。 46 防止溶血:作各类生化检验,要防止血细胞破裂溶血,因溶血引起细胞内外浓度改变,可使钾、胆红素、氯化物、无机磷、ALT、AS T、LDH等升高,钠、钙、AKP等降低,溶血对某些实验的反应过程干扰:如血红蛋白可直接抑制脂肪酶的活性,使脂肪酶降低。溶 血可影响呈色反应终点为红色的实验,如酶法测定血糖、胆固醇、甘油三酯、胆红素的重氮反应、尿素的二乙酰肟法等。 5 抗凝剂的选择生化检验大部份项目都采用血清,但有些项目需用血浆或全血,采集的血液必须加入抗凝剂。抗凝剂的种类较多,如选择不当,亦会影响 检验结果的准确性。下面介绍几种生化检验
16、常用的抗凝剂及其用途: 51 草酸钾:常用于尿素、肌酐、纤维蛋白原等测定,不能用钾、钙等测定,对LDH、丙酮酸激酶、AKP和淀粉酶有抑制作用。 52 肝素:常用于电解质、血气分析、血氨等测定。其钠盐可使淀粉酶升高。 53 氟化钠:常用氟化钠草酸钠混合抗凝剂作血糖测定的抗凝剂,它可抑制血细胞葡萄糖酵解酶的作用,延长标本的保存时间。 54 二乙胺四乙酸钠盐(EDTA-Na2):生化常用的抗凝剂,但不能用于钙、钠、及含氮物质的测定,对淀粉酶、肌酸激酶、AKP、 ACP、5-核苷酸酶等可抑制,对丙酮酸激酶有明显升高的作用。 正确的血液收集方法采集步骤:查看检验单,询问病史,查对检验单上病人姓名、性别、
17、年龄等项目与病人是否吻合,耐心检查需要空腹血检验项目要询问病人是否8小 时以内没有能量摄入,询问病人在检验前是否有足够的休息;需要增添项目时先与出具检验申请单的医生联系。 请患者准备。(“请将左手衣袖挽起,手伸直平放,拳头握紧。”)对孩子应多哄劝,避免剧烈躁动、哭闹。对于紧张或有晕血史的病人 要进行安慰(“您可以侧过身去,不看很快会好”)。采血器材准备,选择相应的真空采血管;并记录采集时间。选择穿刺血管:扎好压脉带,观察血管走向,选择穿刺点,松开压脉带(压脉带压迫时间不能超过1分钟),正在输液的病人绝对不可同 侧采血,更不可以利用原有的输液针头采血。消毒:以穿刺点为圆心,用蘸有碘伏的棉签由内到
18、外螺旋型涂抹,消毒范围为直径大约3厘米,注意消毒过的地方不能重复涂抹,在涂 抹的过程中棉签必须也要同时旋转。采样及混匀:等待碘伏干了以后(必须等到干了以后,否则达不到消毒效果),再次扎好压脉带,将针头平面朝上与手臂成15穿刺, 最好一针见血。拔出采血管后立即进行颠倒8次混匀。在抽血时要询问病人感受(如有无心慌,头晕等情况),当出现异常时如:?病人 出汗、面色苍白、晕倒时立即拔出针并急救?操作失败,取得病人谅解,再次进行操作(“对不起,由于的原因需要再取一次血,请 原谅”)。采样尽量在1分钟内完成。止血:采血结束后,解开压脉带,退针后请病人“手指压住棉球,手伸直抬高于心脏,保持两分钟”(如果是有
19、出血倾向患者如紫癜,ITP,血液病等要压迫510分钟直到无血渗出)。标本前处理:将采血管与相应的检验单裹好,分类,尽快送检验项目所对应的采血管:1.生化检验 黄头管2.凝血试验 蓝头管3.血常规 紫头管采血顺序:红头管蓝头管紫头管黄头管,注:除红头管外,其他各种采血管均须颠倒混匀8次。 以下检验项目须特别注意1.所有生化项目、微量元素、血沉必须用空腹血;乙肝三对最好用空腹血。2.糖耐量试验:(方法一)空腹抽血吃饭(3分钟内进食75克葡萄糖或二两馒头一个)饭后30分钟抽血饭后60分钟抽血饭后 120分钟抽血(方法二)空腹抽血吃饭(3分钟内进食50克葡萄糖)饭后60分钟抽血注:血糖正常的人吃葡萄糖
20、,高血糖的人吃馒头.3. 激素检查:病人必须空腹且在抽血前要静坐30分钟,激素全套要抽血5ml。临床化学检验血液标本的采集和处理 临床检验的目的是为临床提供准确可靠的实验诊断依据。为了保证实验数据的可靠性,在检验医学中必须坚持全面质量控制 (total quality control,TQC。即指对影响临床检验结果可靠性的各方面因素及各个环节进行质量控制)和全过程质量控制(即指对实验工作 的全过程进行质量控制和质量管理)。全过程质量控制包括实验前(分析前)、实验中(分析中)和实验后(分析后)三个阶段的质量控 制。在实验误差中实验前误差占70%,因而实验前质量保证对减少实验误差显得尤其重要。 实
21、验前质量保证包括病人准备、 标本收集、处理、贮存和运输等, 因而能否正确地、规范化地采集和处理标本,是能否做到实验前质量保证的重要内容。在临床化学检验中,血液标本是最多应用的生物体液,血液标本因素是影响临床化学分析准确性和可靠性的最重要、最直接的因素。我国从我们的国情出发,参考了美国临床实验室标准化 委员会(NCCLS)的有关规定,对临床化学检验血液标本的有关问题也提出了相应的要求。 我国卫生标准技术委员会临床检验标准专业委员会(CCCLS)已对“临床化学检验血液标本的收集与处理”提出了“中华人民共和国卫生行业标准”,旨在通过标本方面的质量控制达到临床化学分析的质量保证。目前该“标准”文件正在
22、待批中。 一、临床化学检验血液标本的定义 临床化学检验血液标本是指为完成某项或多项临床化学检验项目而采集的一定量的血液,包括抗凝及非抗凝血。 二、血液标本的采取 (一) 采取部位 静脉采血:应用最多的采血方式。常用的静脉为肘前静脉、腕背静脉,小儿和新生儿有时用颈静脉和前囟静脉。 动脉采血:主要用于血气分析时。常用的动脉为股动脉、肱动脉、桡动脉和脐动脉。 毛细血管采血:适用于仅需微量血液的试验或婴幼儿。 常用部位为耳垂、指端,小儿有时为大趾和足跟。采血针刺入皮肤深度应为2mm (2.5mm), 采血局部应无炎症、水肿等。 (二)标本类型 临床化学检验血液标本分为血清、血浆和全血3种。血清和血浆为
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