中大生化复习题1.doc

《中大生化复习题1.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《中大生化复习题1.doc（12页珍藏版）》请在三一办公上搜索。

1、基因表达：指细胞在生命过程中，把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译，转变成具有生物活性的蛋白质分子。粘性末端：当一种限制性内切酶在一个特异性的碱基序列处切断DNA时，就可在切口处留下几个未配对的核苷酸片段，即5突出。这些片断可以通过重叠的5末端形成的氢键相连，或者通过分子内反应环化。因此称这些片段具有粘性，叫做粘性末端。限制性核酸内切酶：生物体内能识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。它是可以将外来的DNA切断的酶，即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力，但对自己的DNA却无损害作用，这样可以保护细胞原有的遗传信息。由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性内切酶(

2、简称限制酶)。Endostatin：内皮抑素(endostatin) 是目前作用最强、实验效果最好的肿瘤血管生成抑制剂。 线粒体DNA病： 线粒体基因组中发生基因突变所导致的一类疾病，其传递和表达完全不同于由核基因突变引起的疾病，是一组独特的遗传病，称为线粒体基因病。HDL 高密度脂蛋白：它运载周围组织中的胆固醇，再转化为胆汁酸或直接通过胆汁从肠道排出，动脉造影证明高密度脂蛋白胆固醇含量与动脉管腔狭窄程度呈显著的负相关。所以高密度脂蛋白是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白，是冠心病的保护因子。俗称“血管清道夫”。载脂蛋白：血浆脂蛋白中的蛋白质部分称为载脂蛋白。主要在肝(部分在小肠)合成,分A、B、

3、C、D、E五类,具有运载脂类物质及稳定脂蛋白的结构，某些载脂蛋白还有激活脂蛋白代谢酶、识别受体等功能。平头末端：限制酶的切口不都是一长一短的, 一长一短的叫黏性末端,一样长的叫平末端.PEDF：PEDF，色素上皮衍生因子，属于丝氨酸蛋白酶抑制剂基因家族，即能与丝氨酸蛋白酶的活性中心结合，有效地降低其酶活性，又不使酶蛋白酶变性的物质。具有神经保护作用，还具有很强的抑制血管的作用。 mtDNA氧化损伤的易感性：线粒体基因组也叫线粒体DNA(mtDNA），MtDNA可以独立编码线粒体中的一些蛋白质是核外遗传物质。M13嗜菌体：M13噬菌体是一类特异的雄性大肠埃希菌噬菌体，只感染雄性大肠埃希菌，但M1

4、3噬菌体DNA可以转传导进入雌性大肠埃希菌。M13子代噬菌体通过细胞壁挤出，并不杀死细菌。为重组DNA技术中常用的噬菌体克隆载体，主要用于克隆单链DNA。 LDL：血浆脂蛋白的一种，是血液中胆固醇的主要载体。能转运胆固醇到外围组织，并调节这些部位的血浆脂蛋白-胆固醇从头合成。 端粒酶：端粒酶（Telomerase），在细胞中负责端粒的延长的一种酶，是基本的核蛋白逆转录酶，可将端粒DNA加至真核细胞染色体末端。端粒在不同物种细胞中对于保持染色体稳定性和细胞活性有重要作用，端粒酶能延长缩短的端粒，从而增强体外细胞的增殖能力。端粒酶的存在，就是把 DNA 克隆机制的缺陷填补起来，即由把端粒修复延长，

5、可以让端粒不会因细胞分裂而有所损耗，使得细胞分裂克隆的次数增加。线粒体的半自主性：线粒体具有独立的遗传体系，虽然线粒体也能合成蛋白质，但是合成能力有限。线粒体的核糖体蛋白、氨酰tRNA 合成酶、许多结构蛋白，都是核基因编码，在细胞质中合成后，定向转运到线粒体的，因此称线粒体为半自主细胞器。血浆脂蛋白：指哺乳动物血浆（尤其是人）中的脂-蛋白质复合物。血浆脂蛋白可以把脂类（三酰甘油、磷脂、胆固醇）从一个器官运输到另一个器官。LP 脂蛋白英文：lipoproteins，与蛋白质结合在一起形成的脂质-蛋白质复合物。脂蛋白中脂质与蛋白质之间没有共价键结合，多数是通过脂质的非极性部分与蛋白质组分之间以疏水

6、性相互作用而结合在一起。 VEGF： 血管内皮生长因子，属血小板源性生长因子家族的生长因子，刺激血管内皮细胞的有丝分裂和血管的发生，提高单层内皮的通透性，可在体内诱导血管新生。基因文库：一个生物体的基因组DNA用限制性内切酶部分酶切后，将酶切片段插入到载体DNA分子中，所有这些插入了基因组DNA片段的载体分子的集合体，将包含这个生物体的整个基因组，也就是构成了这个生物体的基因文库。 ox-LDL： 氧化的低密度脂蛋白（Ox-LDL）是动脉粥样硬化的核心，当血液中的低密度脂蛋白（LDL）被活性氧(ROS)等自由基氧化后叫着“氧化的低密度脂蛋白”简称“Ox-LDL”，他会进入血管壁，1.Ox-LD

7、L损坏血管壁的内皮细胞，并且让内皮细胞间隙变大；2.Ox-LDL刺激单核细胞游走进入血管壁；3.OX-LDL被巨噬细胞以及血管的平滑肌细胞的受体所吞噬，-形成泡沫细胞，4.Ox-LDL使上述两种泡沫细胞坏死崩解，形成糜粥样坏死物，粥样硬化斑块形成。 基因表达：是指细胞在生命过程中，把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译，转变成具有生物活性的蛋白质分子。生物体内的各种功能蛋白质和酶都是同相应的结构基因编码的。 血管新生：是从已有血管发芽生成新血管的过程。内共生假说： 关于线粒体起源的一种学说。认为线粒体来源于细菌，即细菌被真核生物吞噬后，在长期的共生过程中，通过演变，形成了线粒体。该学说认为

8、：线粒体祖先原线粒体（一种可进行三羧酸循环和电子传递的革兰氏阴性菌）被原始真核生物吞噬后与宿主间形成共生关系。在共生关系中，对共生体和宿主都有好处：原线粒体可从宿主处获得更多的营养，而宿主可借用原线粒体具有的氧化分解功能获得更多的能量。端粒：端粒是线状染色体末端的DNA重复序列。 端粒是线状染色体末端的一种特殊结构，在正常人体细胞中，可随着细胞分裂而逐渐缩短。分子克隆载体：在基因工程重组DNA技术中将DNA片段（目的基因）转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。三种最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒。胆固醇逆转运作用：高密度脂蛋白（HDL）是血液中密度最高、颗粒最小的一种脂蛋白，是

9、机体血脂代谢的重要物质。目前研究最多的就是其参与体内胆固醇的逆转运过程。它可作为胆固醇的接受体，通过与受体相互作用介导胆固醇从动脉壁内膜流出并转运之到肝脏进行代谢，从而降低血浆中的胆固醇水平，预防AS的发生Angiogenesis：血管新生 在原有血管网基础上，通过内皮细胞芽出而形成新生血管的复杂过程，涉及血管内皮细胞外基质降解、内皮细胞向基质降解处迁移、增殖、伸展及管状结构形成和内皮细胞外基质膜产生等多个步骤。 目的基因 ：把需要研究的基因称为目的基因。（一般把需要分析的基因称靶基因，在基因克隆过程中有时两者均称为插入基因，有时三者含义相近。）LCAT ： 卵磷脂胆固醇脂酰基转移酶：催化HD

10、L中卵磷脂2位上的脂酰基转移到游离胆固醇的3位羟基上，使位于HDL表面的胆固醇酯化后向HDL内核转移，促进HDL成熟及胆固醇的逆向转运。回文结构： 双链DNA中含有的二个结构相同、方向相反的序列称为反向重复序列，也称为回文结构，每条单链以任一方向阅读时都与另一条链以相同方向阅读时的序列是一致的，例如5GGTACC3 3CCATGG5.短的回文结构可能是一种特别的信号，如限制性内切酶的识别位点。较长的回文结构容易转化成发夹结构。发夹结构的作用：控制转录的中止、翻译的效率以及mRNA的稳定性。基因工程 ： 又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法

11、为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。表达载体 ： 就是在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件（如启动子、RBS、终止子等），使目的基因能够表达的载体。表达载体四部分：目的基因、启动子、终止子、标记基因。血管增生抑制因子 ： 血管生成过程受到血管增生刺激因子和血管增生抑制因子的调节。常见的抑制因子有血管抑素 (angi0statin)、内皮抑素 (endostatin)、色素上皮衍生因子(PEDF)、kallistatin，肿瘤抑素 (tumstatin)等 。mtDNA病： 线粒体基因组中发生基因

12、突变所导致的一类疾病，其传递和表达完全不同于由核基因突变引起的疾病，是一组独特的遗传病，称为线粒体基因病。母系遗传；（1）一般说，突变的mtDNA的数量超过一定限度时，会出现临床症状。（阈值）（2）突变mtDNA所占比例似与临床症状的表现程度相关。传递突变的母亲可为患者，也可是表现正常的杂质携带者。Leber 遗传性视神经病(Leber hereditary optic neuropathy，LHON)是这类疾病的典型例子之一。质粒： 是附加到细胞中的非细胞的染色体或核区DNA原有的能够自主复制的较小的DNA分子（即细胞附殖粒、又胞附殖粒）。大部分的质粒虽然都是环状构形，然而目前也发现有少数的

13、质粒属于线性构形，它存在于许多细菌以及酵母菌等生物中，乃至于植物的线粒体等胞器中。 1什么是基因文库？简述常用的从基因文库中筛选目标基因的方法。答：将这些载体导入到受体细菌或细胞中，这样每个细胞就包含了一个基因组DNA片段与载体重组DNA分子，经过繁殖扩增，许多细胞一起包含了该生物全部基因组序列，我们将这一个集合体叫做基因文库。从基因文库中筛选某一克隆的常用办法是分子杂交。首先把属于一个文库的细菌或噬菌体以较低密度接种在培养皿上以取得相当分散的菌落或噬菌斑，然后用硝酸纤维滤膜吸印，使培养皿和滤膜的相对应的位置上具有相同的克隆。同时另行制备供分子杂交用的探针。为了筛选真核生物的某种基因，常从它的

14、转录产物mRNA经反向转录合成相应的互补DNA(cDNA)，再加入用32P标记的核苷三磷酸，用DNA多聚酶切口移位方法制成有同位素标记的探针。把探针DNA和硝酸纤维滤膜上的菌落或噬菌体分别进行变性处理，然后进行分子杂交。再将X光底片覆盖在经过处理的滤膜上以进行放射自显影。在培养皿上找出和X光底片上的黑点相对应的菌落或噬菌斑。这些菌落或噬菌体中便包含着所需要的基因，经过扩增便能得到大量的细菌或噬菌体，从中可以分离出所需基因的DNA片段。2浅谈目的基因及其制备方法。把需要研究的基因称为目的基因。（一）从细胞核中直接分离。直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”，具体做法是：用限制酶（即限制性内切酶）将

15、供体细胞中的DNA切成许多片段，将这些片段分别载入运载体，然后通过运载体分别转入不同的受体细胞，扩增，从中找出含有目的基因的细胞，再用一定的方法把带有目的基因的DNA片段分离出来。（二）染色体DNA的限制性内切酶酶解。II型限制性内切酶可专一性地识别并切割特定的DNA顺序，产生不同类型的DNA末端。若载体DNA与插入的DNA片段用同一种内切酶消化，或靶DNA与载体DNA末端具有互补的粘性末端，可以直接进行连接。（三）人工体外合成。简短的目的基因可在了解DNA一级结构或多肽链一级结构氨基酸编码的核苷酸序列的基础上人工合成。（四）用逆转录酶制备cDNA。大多数的目的基因是由mRNA合成cDNA（反

16、转录DNA）得到。（五）从基因文库中获取。依据：基因的核苷酸序列，功能，在染色体中的位置，转录产物mRNA，翻译产物蛋白质性质。（六）PCR技术扩增3为什么线粒体DNA容易受到损伤？mtDNA表现为母系遗传。由于其裸露于线粒体基质中，既没有组蛋白的结合保护，又缺少DNA损伤的修复系统，所以极易发生突变，且突变结果容易保存下来，因此mtDNA的突变率为核DNA的10倍以上。1有些遗传病，如Leber遗传性视神经病，肌阵挛性癫痫等均与线粒体基因突变有关。4何谓ox-LDL？简述其致动脉粥样硬化的机制。答：氧化的低密度脂蛋白（Ox-LDL）是动脉粥样硬化的核心，当血液中的低密度脂蛋白（LDL）被活性

17、氧(ROS)等自由基氧化后叫“氧化的低密度脂蛋白”简称“Ox-LDL”，他会进入血管壁，Ox-LDL损坏血管壁的内皮细胞，并且让内皮细胞间隙变大；Ox-LDL刺激单核细胞游走进入血管壁；OX-LDL被巨噬细胞以及血管的平滑肌细胞的受体所吞噬，形成泡沫细胞，Ox-LDL使上述两种泡沫细胞坏死崩解，形成糜粥样坏死物，粥样硬化斑块形成。5血管新生的“平衡失调假说及证据”。佛克曼首先建立的是兔眼角膜模型，另一个模型是鸡胚绒毛尿囊膜试验（CAM）。人体在健康时，血管新生刺激因子和抑制因子同时存在，二者是矛盾的两个方面，互相拮抗，使机体处于平衡状态。对血管新生刺激因子来说，当身体受伤时，会立刻征召新生血管

18、有利于修复组织缺损，另一方面，又会替肿瘤细胞招募新生血管，促进肿瘤的生长和转移，损害机体，此时血管新生刺激因子是矛盾的主体。同理，血管新生抑制因子对机体也是又有利又有害。6简述大肠杆菌表达体系的优缺点。用途是基因工程主要原核受体菌。外源DNA克隆和扩增；原核基因高效表达；基因文库构建。优点：遗传背景清楚、载体受体系统完备、生长迅速、培养简单、重组子稳定1缺点：产结构复杂、种类繁多的内毒素7如何检测端粒酶活性?一，TRAP-PCR银染法：原理端粒DNA与细胞的寿命密切相关，而合成又依赖于端粒酶。正常人体细胞中不能检测出端粒酶活性的表达而肿瘤细胞株及大多数肿瘤组织中的端粒酶活性却异常的高表达。TR

19、AP银染法端粒酶活性检测试剂盒是采用端粒重复序列扩增的方法，利用银染技术检测端粒酶的活性。阳性结果在凝胶电泳上显示相隔6 bp的梯状条带，条带的深浅表示端粒酶活性的大小。二、荧光定量PCR法：原理端粒酶蛋白催化亚基TERT或TRT具有反转录酶的主要特征，其表达在正常细胞中受到抑制，与端粒酶活性的表达一致。实时荧光定量PCR端粒酶检测实验通过检测TERT的mRNA表达水平来间接反应端粒酶的活性。8简述mtDNA结构异常的可能原因。mtDNA表现为母系遗传。由于其裸露于线粒体基质中，既没有组蛋白的结合保护，又缺少DNA损伤的修复系统，所以极易发生突变，且突变结果容易保存下来，因此mtDNA的突变率

20、为核DNA的10倍以上。1有些遗传病，如Leber遗传性视神经病，肌阵挛性癫痫等均与线粒体基因突变有关。9何谓限制性核酸内切酶？写出大多数限制性核酸内切酶识别DNA序列的结构特点。可以识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶，简称限制酶。限制作用实际就是限制酶降解外源DNA ，维护宿主遗传稳定的保护机制。甲基化是常见的修饰作用，可使腺嘌呤A和胞嘧啶C甲基化而受到保护。通过甲基化作用达到识别自身遗传物质和外来遗传物质的目的10何谓血管抑制因子？试举例说明。血管生成过程受到血管增生刺激因子和血管增生抑制因子的调节。常见的抑制因子有血管抑素 (angi0statin)、内

21、皮抑素 (endostatin)、色素上皮衍生因子(PEDF)、kallistatin，肿瘤抑素 (tumstatin)等 。11简述类限制性核酸内切酶的作用特点？型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解。类酶有EcoR I、BamH I、Hind 、Hind 等。其分子量小于105道尔顿；反应只需Mg2+；最重要的是在所识别的特定碱基顺序上有特异性的切点，因而DNA分子经过类酶作用后，可产生特异性的酶解片断，这些片断可用凝胶电泳法进行分离、鉴别。只具有认知切割的作用，修饰作用由其他酵素进行。所认知的位置多为短的回文序列（palindrome sequence）；所剪切的碱基序列通常即为所认

22、知的序列。是遗传工程上，实用性较高的限制酶种类。例如：EcoRI、Hind。12阐述肿瘤“饥饿疗法”的依据和策略。肿瘤”与“血管”的关系是“树”与“根”、“鱼”与“水”的关系，“血管”就是肿瘤的“命门”，破坏或者清除肿瘤的血管，肿瘤必然死亡。血液肿瘤血管生成的实验研究提示，抑制血管生成势必导致血液系统恶性细胞血供不足，营养缺乏，处于“饥饿”状态，从而促进细胞凋亡。这为提出抗血管生成治疗的新策略提供了理论和实验依据。定向于血管生成的治疗代表了一种特异的、毒性小而有效的治疗方法。随着对血管生成在血液系统恶性疾病中的深入研究，抗血管生成在临床治疗中的应用必将取得更大的进展。13以质粒为例，说说基因载

23、体应具备哪些条件？是染色质外的双链共价闭合环形DNA能自主复制，是能独立复制的复制子质粒对宿主生存并不是必需的。14简述血浆脂蛋白的分类及其功能。（1） 乳糜微粒(0.95g/cm3)，密度非常低，运输甘油三酯和胆固醇酯，从小肠到组织肌肉和adipose组织。（2） 极低密度脂蛋白VLDL(0.95-1.006g/cm3)，在肝脏中生成，将脂类运输到组织中，当VLDL被运输到全身组织时，被分解为三酰甘油、脱辅基蛋白和磷脂，最后，VLDL被转变为低密度脂蛋白。（3） 低密度脂蛋白(LDL，1.006-1.063g/cm3)，把胆固醇运输到组织，经过一系列复杂的过程，LDL与LDL受体结合并被细胞

24、吞食。（4） 高密度脂蛋白(HDL，1.063-1.210g/cm3)，也是在肝脏中生成，可能负责清除细胞膜上过量的胆固醇。当血浆中的卵磷脂：胆固醇酰基转移酶 LCAT将卵磷脂上的脂肪酸残基转移到胆固醇上生成胆固醇脂时，HDL将这些胆固醇脂运输到肝。肝脏将过量的胆固醇转化为胆汁酸。16质粒作为基因工程载体应具备什么条件？能自主复制，是能独立复制的复制子对宿主生存并不是必需的。（1）复制子（ori）：一段具有特殊结构的DNA序列；（2）有一个或多个便于检测的遗传表型，如抗药性、显色表型反应等；（3）有一个或几个限制性内切酶位点，便于外源基因片段的插入；（4）适当的拷贝数。17为什么选用M13噬菌

25、体作定点突变的目的基因载体？M13DNA的复制起始位点定位在基因间隔区内。但是基因间隔区的有些核苷酸序列即使发生突变、缺失或插入外源DNA片段，也不会影响M13DNA的复制，这为13DNA构建克隆载体提供了条件。18、VEGF促进血管增生的机制？VEGF在血管新生中起重要作用10：VEGF通过增强小血管内皮细胞内的囊泡、细胞器、囊状结构的活性来促进血管腔内和腔外血浆成分代谢，以及通过对钙粘蛋白/链蛋白复合体的作用使单层内皮细胞之间的粘附连接松解，从而提高循环代谢中小血管通透性。血管通透性增加可使血浆蛋白外渗并形成细胞外基质，引起内皮细胞和基质细胞的转移。VEGF刺激内皮细胞产生纤溶酶原激活物(

26、uPA和tPA)、纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）和胶原酶，并使蛋白分解增加而引起血管外基质成分改变，为内皮细胞迁移创造条件。VEGF刺激内皮细胞增殖（VEGF仅可刺激内皮细胞增殖，而不能刺激其他类型细胞，如角膜内皮细胞、晶状体上皮细胞、纤维母细胞及肾上腺皮质细胞的增殖）。VEGF促进内皮细胞的迁移，这是从血管前体形成内皮分支重要的一步。VEGF抑制内皮细胞的凋亡。19何谓胆固醇逆转运作用？简述其作用机制及生物学意义。HDL 将多余的胆固醇从周围组织细胞(包括动脉粥样斑块)转运到肝脏进行机体的再循环或以胆酸的形式排泄出体外，这一过程称作胆固醇的逆向转运(RCT)。胆固醇通过RCT这一过程

27、可以减少其在血管壁的沉积，从而阻止动脉粥样硬化的发生。胆固醇的逆转运包括组织细胞胆固醇的流出、胆固醇的酯化以及清除。20从基因文库钓取目的基因的困难何在？存在两个限制因素：1） 必须存在着目的基因的突变品系2） 需要一种只有野生型能够生长的培养基。21何谓“内共生假说”，列举出支持它的证据。认为线粒体来源于细菌，即细菌被真核生物吞噬后,在长期的共生过程中,通过演变,形成了线粒体。该学说认为:线粒体祖先原线粒体(一种可进行三羧酸循环和电子传递的革兰氏阴性菌)被原始真核生物吞噬后与宿主间形成共生关系。在共生关系中,对共生体和宿主都有好处：原线粒体可从宿主处获得更多的营养,而宿主可借用原线粒体具有的

28、氧化分解功能获得更多的能量。由美国生物学家马古利斯（LynnMargulis）于1970年出版的真核细胞的起源一书中正式提出。她认为，好气细菌被变形虫状的原核生物吞噬后、经过长期共生能成为线粒体，蓝藻被吞噬后经过共生能变成叶绿体，螺旋体被吞噬后经过共生能变成原始鞭毛。22谈谈基因工程及其应用价值。基因工程（genetic engineering）又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。应用价值：农牧业、食品工业

29、：运用基因工程技术，不但可以培养优质、高产、抗性好的农作物及畜、禽新品种，还可以培养出具有特殊用途的动、植物。环境保护：基因工程做成的DNA探针能够十分灵敏地检测环境中的病毒、细菌等污染。基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。医学：用基因治病是把功能基因导入病人体内使之表达，并因表达产物蛋白质发挥了功能使疾病得以治疗。医药卫生：基因工程药品的生产，基因诊断与基因治疗。23为什么说端粒酶是一个抗癌靶点? 有何抗癌策略?端粒酶在绝大多数恶性肿瘤中特异性表达，这使得人们对肿瘤的抗端粒酶疗法产生了特别的关注。设想以端粒、端粒酶为靶点，通过抑制癌细胞端粒酶活性或直接抑制端粒延长、稳定

30、，而使细胞无法连续增殖，继而进入衰老途径，直至死亡。同时端粒、端粒酶在肿瘤细胞与正常体组织之间的差别又可以减少端粒、端粒酶抑制剂对机体的毒副作用。抗癌策略:1 控制端粒延长靶点的物质；2抑制端粒酶结构和功能靶点的物质。24根据端粒和端粒酶的结构和功能特点论述它们与细胞“永生化”的关系？端粒（Telomere）是真核细胞染色体末端的特殊结构。人端粒是由6个碱基重复序列（TTAGGG）和结合蛋白组成。端粒有重要的生物学功能，可稳定染色体的功能，防止染色体DNA降解、末端融合，保护染色体结构基因DNA，调节正常细胞生长。端粒酶（Telomerase）是使端粒延伸的反转录DNA合成酶。是个由RNA和蛋

31、白质组成的核糖核酸-蛋白复合物。其RNA组分为模板，蛋白组分具有催化活性，以端粒3末端为引物，合成端粒重复序列。端粒酶的活性在真核细胞中可检测到，其功能是合成染色体末端的端粒，使因每次细胞分裂而逐渐缩短的端粒长度得以补偿，进而稳定端粒长度。端粒的缩短，引起衰老。如果端粒长度得不到维持，细胞停止分裂或者死亡。在某种情况下，濒临衰亡的细胞愈变成永生细胞，即癌细胞。25从基因组遗传信息传递的角度论述线粒体与原核生物的相似之处。26为什么说端粒是历数细胞生命历程的“分子钟”?端粒本身没有任何密码功能，它就像一顶高帽子置于染色体头上。在新细胞中，细胞每分裂一次，染色体顶端的端粒就缩短一次，当端粒不能再缩

32、短时，细胞就无法继续分裂了。这时候细胞也就到了普遍认为的分裂100次的极限并开始死亡。因此，端粒被科学家们视为“生命时钟”。27从脂蛋白代谢的角度阐述脂肪肝可能的发生机制和治疗策略。脂类代谢障碍是产生脂肪肝的原因：(1)食物中脂肪过量、高脂血症及脂肪组织动员增加(饥饿、创伤及糖尿病)，游离脂肪酸(FFA)输送入肝增多，为肝内三酰甘油合成提供大量前体。(2)食物中缺乏必需脂肪酸，急性酒精中毒、急性苏氨酸缺乏、摄入大剂量巴比妥盐等使肝细胞内三酰甘油及游离脂酸合成增加。(3)热量摄入过高，从糖类转化为三酰甘油增多。(4)肝细胞内游离脂酸清除减少，过量饮酒、胆碱缺乏、四氯化碳和乙硫氨酸中毒等均可抑制肝

33、内游离脂酸的氧化。乙硫氨酸中毒及胆碱缺乏可阻断磷脂合成。(5)VLDL合成或分泌障碍等一个或多个环节，破坏脂肪组织细胞、血液及肝细胞之间脂肪代谢的动态平衡，引起肝细胞三酰甘油的合成与分泌之间失去平衡，最终导致中性脂肪为主的脂质在肝细胞内过度沉积形成脂肪肿。治疗：1、找出病因，有的放矢采取措施。2、调整饮食结构，提倡高蛋白质、高维生素、低糖、低脂肪饮食。3、适当增加运动，促进体内脂肪消耗。4、药物辅助治疗。9试述端粒、端粒酶与恶性肿瘤的关系及其应用前景。正常细胞的分裂次数是有限的。端粒酶的激活是细胞走向永生化的必要途径，而永生化又被认为是肿瘤恶化的必要步骤。肿瘤细胞的端粒长度很短，其继续缩短将导

34、致染色体融合、细胞死亡，而端粒酶的激活可以维持端粒的长度，从而维持肿瘤的继续分裂、增殖和生存。端粒酶的表达，可能是肿瘤形成和发展的共同途径。端粒酶的活性与某些肿瘤的恶性程度和预后相关。临床应用前景1.肿瘤的治疗方面：端粒酶与恶性肿瘤之间令人惊异的相关性，使他在肿瘤的诊断和治疗上有望成为行之有效的新的靶目标。通过各种途径抑制端粒酶的活性，可能将有效地抑制大多数肿瘤的生长。这种抑制作用可以通过直接抑制端粒酶活性、抑制端粒酶RNA(如导入反义核酸)，或端粒酶蛋白成分以及诱导肿瘤细胞发生分化等方法实现。2.诊断与鉴别诊断及临床预后方面：端粒酶可以出现在某些肿瘤的早期甚至癌前病变，在分化低有转移倾向的肿

35、瘤中高度表达，使其在诊断及评价预后方面，具有一定价值。31ox-LDL是怎样形成的？试述它与动脉粥样硬化的关系。天然的LDL中含有大量的不饱和脂肪酸，在氧自由基及其他多种氧化剂的作用下可生成脂类自由基，介导产生更多的过氧化脂质引起连锁的链式反应，最终形成多种活性醛。这些活性醛与LDL中的脂质蛋白apoB结合，产生新的抗原决定族，形成oxLDL。（1）细胞介导LDL氧化修饰。;（2）化学氧化修饰LDL。;（3）其他形式的氧化修饰。物理方法如紫外线、钴60或过氧化酶类等均可对LDL进行氧化修饰。1、 OxLDL能够引起血管内皮细胞功能障碍和内皮细胞损伤，这一作用是启动动脉粥样硬化发生的重要环节。.

36、2、oxLDL募集单核细胞并诱导泡沫细胞形成。.3 、oxLDL作为抗原形成抗原抗体复合物促进动脉粥样硬化的形成。.4 oxLDL诱导血管平滑肌细胞的增生和凋亡。5 、oxLDL抑制内皮细胞合成和释放NO。6、 oxLDL促血栓形成。32 线粒体的半自主性线粒体自主程度是有限的，它们对核遗传系统有很大的依赖性。因此，线粒体的生长和增殖是受核基因组及自身的基因组两套遗传信息系统控制的，所以它们都被称为半自主性细胞器。线粒体DNA可以自我复制，复制也是以半保留方式进行的。线粒体DNA复制的时间主要在细胞周期的S期及G2期，而且DNA先复制，随后线粒体分裂。自身合成蛋白质的种类十分有限，绝大多数蛋白

37、质都是由核DNA编码，在细胞质核糖体上合成。33 mtDNA对氧化损伤具有易感性，为什么？35 防治动脉粥样硬化的根本方法是清洗血管，其唯一手段是什么？为什么？升高高密度脂蛋白胆固醇（HDL）是清洗血管的唯一手段。高密度脂蛋白是血管保护因子，起到血清到夫的作用，能够把血管内壁的血垢”转运到肝脏，通过代谢排出体外，不但可以预防动脉粥样硬化的产生，而且对已经形成的粥样斑块沉积能彻底清除.37举一例说明基因工程载体应具备哪些条件？对理想的基因工程载体一般至少有以下几点要求：能在宿主细胞中复制繁殖，而且最好要有较高的自主复制能力。容易进入宿主细胞，而且进入效率越高越好。容易插入外来核酸片段，插入后不影

38、响其进入宿主细胞和在细胞中的复制。这就要求载体DNA上要有合适的限制性核酸内切酶位点。每种酶的切位点最好只有一个。容易从宿主细胞中分离纯化出来， 这才便于重组操作。有容易被识别筛选的标志，当其进入宿主细胞、或携带着外来的核酸序列进入宿主细胞都能容易被辨认和分离出来。这才介于克隆操作。39为什么说正常血浆脂蛋白有四大类6种，请分析之。超速离心法是根据各种脂蛋白在一定密度的介质中进行离心时，因漂浮速率不同而进行分离的方法。通常可将血浆脂蛋白分为乳糜微粒、极低密度脂蛋白（vldl）、低密度脂蛋白（ldl）和高密度脂蛋白（hdl）等四大类。电泳法:：由于血浆脂蛋白表面电荷量大小不同，在电场中，其迁移速

39、率也不同，从而将血浆脂蛋白分为乳糜微粒、-脂蛋白、前-脂蛋白和-脂蛋白等四种。40 试述一种血管生成抑制的重要因子及其作用。血管抑制素是相对分子量为3.8104的纤维蛋白溶酶原片段（krigles 1-3）。它选择性抑制内皮细胞增生，从而阻碍肿瘤血管的形成和肿瘤转移灶建立。总的是肿瘤介导纤维蛋白溶酶原的蛋白溶解作用。Gately等发现在人前列腺癌细胞显示酶的活性转化纤维蛋白溶酶原为血管抑制素。经鉴定其尿激酶（urokinase, uPA）和游离硫氢基供体（Free eulfhydryl donors，FSDs）可满足促进癌细胞血管抑制素的形成。游离细胞源血管抑制素在体内能抑制lewis肺癌转移

40、。这些发现证明瘤细胞介导血管抑制素为直接机制。当前可以将大量生物的活性血管抑制素作为研究和潜在的肿瘤治疗应用。41简述支持“内共生假说”的证据。线粒体和叶绿体起源于古代细菌内共生的证据如下：线粒体和叶绿体都含有DNA，这些DNA与细胞核中的很不同，却类似细菌的DNA（环状及其大小）。线粒体具有和真核宿主细胞不同的遗传密码，这些密码与细菌和古菌中的很类似。它们被两层或更多的膜所包被，其中最里面一层的成分与细胞中其它膜的都不同，而更接近于原核生物的细胞膜。新的线粒体和叶绿体只能通过类似二分分裂的过程形成。在一些藻类以及眼虫(Euglena)中，可以用药物或长时间缺乏光照来破坏叶绿体而同时不影响细胞

41、。这种情况下，叶绿体不能够再生。叶绿体的很多内部结构和生物化学特征，如类囊体的存在和某些叶绿素和蓝藻很接近。对细菌、叶绿体和真核生物基因组构件的系统发生树同样支持了叶绿体与蓝藻更接近。DNA序列分析和系统发生学表明了核DNA包含了一些可能来源于叶绿体的基因。一些核中编码的蛋白被转运到细胞器中，而线粒体和叶绿体的基因组相对于其它生物来说都小得多。这和内共生物形成后越来越依赖真核生物宿主相一致。叶绿体存在于很多完全不同的原生生物中，这些生物普遍和不包含叶绿体的原生生物更接近。这表明了，如果叶绿体起源于细胞的一个部分，很难解释他们多次起源而互相又非常接近。细胞器的大小与细菌相当。细胞器的核糖体和细菌

42、相似，细菌的核糖体是70S，线粒体的核糖体是55S。43 抗氧化剂VitE和C为什么具有预防心肌梗死和脑卒中的功效?维生素C是水溶性维生素，是细胞外液的主要抗氧化剂。人体内血浆遭受各种氧化损伤时，它构成第一道抗氧化防线，能够防止自由基启动物(AAPH)产生的水溶性过氧化氢自由基引起脂质过氧化的物质，并能有效地防止低密度脂蛋白胆固醇氧化，延缓动脉粥样硬化的进展2。维生素E强化可延缓LDL的氧化；抑制血管平滑肌细胞增殖，从而延缓动脉壁变狭窄；抑制血小板粘连、凝集和血小板释放反应；抑制粘附分子的表达和功能，降低单核细胞与内皮间的反应，从而减少单核细胞向血管中的迁移；减少白三烯的合成和强化前列腺环素的

43、释放。维生素E：维生素E的抗氧化作用可减低脑中风的发病率。维生素C：维生素C具有抗氧化作用，可降低过氧化脂质的形成，还可防止低密度脂蛋白附着在血管壁上，维持血管的弹性，防止血管破裂。45 何谓血管新生？简述其“平衡失调假说及证据”。血管生成（angiogenesis）是从已有血管发芽生成新血管的过程。这一过程与血管内皮细胞迁移和增殖相关。46试述肿瘤“饥饿疗法”的依据和策略。肿瘤在人体内生长过程中，需要形成自身的血管网络来提供营养，否则肿瘤将不能继续生长。通过抑制肿瘤新生血管形成，切断其营养供应，最终导致肿瘤细胞死亡，这种治疗方法称为肿瘤饥饿疗法。48 试从LP（a）的组成和结构特点阐述它与动脉粥样硬化的关系。 脂蛋白英文：lipoproteins，与蛋白质结合在一起形成的脂质-蛋白质复合物。脂蛋白中脂质与蛋白质之间没有共价键结合，多数是通过脂质的非极性部分与蛋白质组分之间以疏水性相互作用而结合在一起。人体脂蛋白大体可分为以下四类： 1、乳糜微粒2、极低密度脂蛋白3、低密度脂蛋白4、高密度脂蛋白极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白是动脉粥样硬化的危险因素之一，被认为是致动脉粥样硬化的因子。高密度脂蛋白是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白，是冠心病的保护因子。俗称“血管清道夫”。