梅毒检验培训ppt课件.ppt

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1、孕产妇梅毒检测,首都医科大学附属北京佑安医院赵秀英,主要内容,梅毒与先天梅毒梅毒的检测方法孕产妇梅毒检测及服务流程,梅毒与先天梅毒,梅 毒,梅毒是苍白螺旋体（又名梅毒螺旋体）感染人体所引起的一种系统性、慢性性传播疾病多系统多脏器的损害，多种多样的临床表现，导致组织破坏、功能失常，甚至危及生命感染后至发病平均为3周,潜伏期一般为23周人体对梅毒体无天然免疫力，感染后可建立短暂免疫力，治愈后可再感染,历史回顾,记录显示梅毒起源于美洲1492年,哥伦布踏上美洲，把这种瘟疫带回了欧洲之后数十年，梅毒在西班牙、葡萄牙、法国、意大利、荷兰传播。法国军队在拿破仑的带领下，把梅毒带到欧洲的每一个角落，包括莫斯

2、科16世纪上半叶，梅毒沿着的海上丝绸之路，自西向东传播，印度、南洋、中国的东南沿海古代中国曾称其为“花柳病”,China has seen a dramatic rise in cases of syphilis,as a result of rapid social change,US researchers say.A report in the New England Journal of Medicine says syphilis is now the most commonly reported communicable disease in Shanghai,the second

3、-largest city.Pregnant women are also increasingly passing the disease to their children,with more than one baby with congenital syphilis born every hour in 2008.No other country has seen such a rise since the discovery of penicillin.Syphilis was almost eradicated from China in the 1950s with a swee

4、ping programme of antibiotics and brothel shutdowns.,Dramatic rise in China syphilis,The researchers say the disease is now a major scourge lurking in the shadows,with around 20 people in every 100,000 in China carrying the infection.Chinas economic reforms and the growing number of migrant workers

5、and men with expendable income,which has led to a growth in the commercial sex industry.Female sex workers and gay or bisexual men a third of whom are married disproportionately bear the burden of the epidemic,they say.Syphilis.but can cause paralysis,blindness and death if left untreated.Mothers ca

6、n pass syphilis to unborn babies,which can lead to deformities,neurological problems,stillbirths or death in early infancy.,Dramatic rise in China syphilis,传播方式,性接触母婴传播经由胎盘传染分娩时与伤口接触输血或血制品接触后患梅毒的概率为40%,临床表现,一期梅毒1 病史：有感染史，潜伏期一般为23周2 临床表现：a.典型硬下疳：一般单发，12cm大小，圆形或椭圆形，稍高出皮面，呈肉红色的糜烂面或浅在性溃疡。疮面清洁，分泌物量少，周边及基

7、底浸润明显具软骨样硬度，无痛。多发于外生殖器，也可见于肛门、宫颈、口唇、乳房等部位b.腹股沟或患部近卫淋巴结可肿大，常为数个，大小不等，质硬，不粘连，不破溃，无痛。,临床表现,二期梅毒1 病史：有感染史，可有一期梅毒史，病期2年以内2 临床表现：a.皮疹为多形态，包括斑疹、斑丘疹、丘疹、鳞屑性皮疹及脓疱疹等，常泛发对称；掌、跖易见暗红斑及脱屑性斑丘疹；外阴及肛周皮疹多为湿丘疹及扁平湿疣等，不痛可有瘙痒。头部可出现虫蛀样脱发。二期复发梅毒，皮损局限，数目较少，尚可见环形皮疹b.口腔可发生粘膜斑，尚可出现眼损害、骨损害、内脏及神经系统损害等c.全身可出现轻微不适及浅表淋巴结肿大,临床表现,三期梅毒

8、（晚期梅毒）1 病史：有感染史，可有一期或二期梅毒史。病期2年以上2 临床表现：常见结节性皮疹、近关节结节及皮肤、粘膜、骨骼树胶肿等。心脏血管系统受累以单纯性主动脉炎、主动脉瓣闭锁不全和主动脉瘤多见。神经系统受累以梅毒性脑膜炎、脊髓痨和麻痹性痴呆多见,梅 毒,梅 毒,梅 毒,临床表现,隐性梅毒（潜伏梅毒）早期隐性梅毒:病期在2年内,同时在过去2年内，非梅毒螺旋体抗原试验由阴转阳，或其滴度较原先升高达4倍或更高。在过去2年内，有符合一期或二期梅毒的临床表现。在过去2年内，有与疑似或确诊的一期或二期梅毒，或疑似早期隐性梅毒的性伴发生性接触史。晚期隐性梅毒：病期在2年以上。无证据表明在既往2年中获得

9、感染。无法判断病期者亦视为晚期隐性梅毒处理。无论早期隐性梅毒或晚期隐性梅毒，均无任何梅毒性的症状和体征。,妊娠梅毒,孕期发生或发现的活动性梅毒或潜伏梅毒称为妊娠梅毒，应防止梅毒螺旋体感染胎儿，导致先天性梅毒:-围产期死亡：孕早期梅毒感染未治:有40%孕妇会有流产，死胎或围产期死亡-早产-低出生体重-先天异常,胎传梅毒（先天梅毒）,流行病学史：生母为梅毒患者三分之二感染先天性梅毒的活产婴儿在出生时都是没有症状的感染症状可在胎儿期、新生儿时期或童年期表现出来婴儿可能有许多或者没有症状，直到出生后68周（延迟临床表现型）根据临床表现，先天性梅毒被人为分为:-早期先天性梅毒（2岁）,先天性梅毒的危险因

10、素,产前保健缺乏或不足产妇滥用药物 在怀孕第6到9个月期间没有重复进行梅毒血清测试治疗失败对性传染病（STD）诊所及STD相关疾病的了解不足，未进行相关咨询,早期先天性梅毒的临床表现,一般在2岁以内发病，类似于获得性二期梅毒，发育不良，皮损常为水疱-大疱、红斑、丘疹、扁平湿疣；梅毒性鼻炎及喉炎；骨髓炎、骨软骨炎及骨膜炎；可有全身淋巴结肿大、肝脾肿大、贫血等,先天性梅毒,先天性梅毒,先天性梅毒,先天性梅毒,晚期先天性梅毒的临床表现,Hutchinsons三症(63%):-Hutchinsons teeth(梅毒齿，上门齿钝圆)-间质性角膜炎-神经性耳聋Frontal bossae(前额骨状突起)

11、(87%),马鞍鼻(74%)硬腭缺陷梅毒性关节炎(膝盖双侧无痛肿胀)军刀状胫上颌骨短下颌骨突出,Hutchinsons 三症（先天性梅毒晚期）：间质性角膜炎牙齿畸形耳聋,先天性梅毒,梅毒性关节炎,马鞍鼻,军刀状胫（胫骨前凸）,治疗原则,药物主要为青霉素治疗越早效果越好剂量必须足够，疗程必须规则治疗后要追踪观察，对传染源及性接触者应同时进行检查和治疗包括全身体检及非梅毒螺旋体抗原血清学试验（VDRL、RPR或USR试验等），以了解是否治愈或复发,梅毒感染孕产妇及所生儿童治疗方案,一、梅毒感染孕产妇治疗方案（一）推荐方案1.普鲁卡因青霉素G，80万单位/日，肌内注射，连续15日；2.苄星青霉素24

12、0万单位，两侧臀部肌内注射，每周1次，共3次。（二）替代方案1.可用头孢曲松，1克/日，肌内注射或静脉给药，连续10 天；2.青霉素过敏者：可用红霉素治疗（禁用四环素、多西环素），红霉素500mg，每日4次，口服，连服15天。,二、梅毒感染孕产妇所生新生儿的预防性治疗方案 出生后应用苄星青霉素G，5万单位/公斤体重，肌注三、先天梅毒患儿的治疗方案（一）脑脊液正常者：苄星青霉素G，5万单位/公斤，1次注射（二）脑脊液异常者：水剂青霉素G，每日5万单位/公斤，分2次静脉滴注，连续1014天；或普鲁卡因青霉素G，每日5万单位/公斤，肌注，连续1014天 无条件检查脑脊液者，可按脑脊液异常者治疗,梅毒

13、感染孕产妇及所生儿童治疗方案,梅毒治愈标准,临床治愈：一期梅毒（硬下疳）、二期梅毒及三期梅毒（包括皮肤、粘膜、骨骼、眼、鼻等）损害愈合或消退，症状消失。梅毒损害愈合或消退，梅毒血清学反应仍阳性属于临床治愈血清治愈：抗梅治疗后2年内梅毒血清学反应（非梅毒螺旋体抗原试验，如VDRL、RPR、UsR试验）由阳性转变为阴性，脑脊液检查阴性,治疗后观察,早期梅毒疗后第1年每3个月复查一次，以后每半年复查一次，连续23年血清反应由阴性转为阳性或滴定度升高四倍属于血清复发，或有症状复发，均应加倍量复治超过2年血清不阴转者属于血清固定，如无临床症状复发，是否再治疗，根据具体病情而定；无论再治疗与否，应作神经系

14、统检查及脑脊液检查，以便早期发现无症状神经梅毒,晚期梅毒疗后复查同早期梅毒，但应连续观察3年，血清反应固定阳性者，应作神经系统检查及脑脊液检查妊娠梅毒治疗后，分娩前每月复查梅毒血清反应，分娩后观察同其他梅毒，但所生婴儿要观察到血清阴性为止，如发现滴度升高或有症状发生，应立即进行治疗,梅毒的检测方法,梅毒检测方法,1.直接检测T.pallidum 暗视野显微镜，银染 RIT(Rabbit Inoculation Test)2.检测血液中抗T.pallidum 抗体 TPHA(T.p Haemagglutination)TPPA(T.p Particle Agglutination)EIA/CMI

15、A(IgG,IgM+IgG;recombinant TP antigens)3.FTA-ABS(免疫抗体荧吸附)“金标准”4.PCR(取材硬下疳）5.非特异性抗体检测 VDRL(Venereal Disease Reference Laboratory)RPR(Rapid Plasma Reagin),暗视野显微镜,早期皮肤粘膜损害（一期、二期）可直接观到苍白螺旋体一期梅毒苍白螺旋体多在硬下疳的硬结、溃疡的分泌物和渗出液或淋巴结穿刺液中存在二期梅毒苍白螺旋体可在全身血液和组织中检出，但以皮肤检出率最高早期先天性梅毒，可以通过皮肤或粘膜损害处刮片发现梅毒苍白螺旋体通过羊膜穿刺术获得孕妇的羊水，暗

16、视野显微镜观察，对先天性梅毒有诊断价值,未检出螺旋体不能排除梅毒的诊断螺旋体数量不足(单次显微镜检查阳性率小于50%)患者已接受抗生素或杀灭梅毒螺旋体的药物治疗损害接近自然消退损害不是梅毒,暗视野显微镜检,梅毒血清学检测,非梅毒螺旋体血清试验：其抗原分为心磷脂、卵磷脂和胆固醇的混悬液，用来检测抗心磷脂抗体性病研究实验室玻片试验（VDRL）血清不加热的反应素玻片试验（USR）快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）,螺旋体体内的心磷脂、卵磷脂及胆固醇具有抗原性，可诱发机体产生（心磷脂或卵磷脂）反应素，该反应素可与从动物中提取的心磷脂（VDRL）抗原在体外发生抗原抗体反应将VDRL抗原吸附于活性炭颗粒

17、表面，当遇到梅毒血清抗体(IgG、IgM)时，在物理的摇动、碰撞下，微粒便相互粘附而形成肉眼可见的黑色凝集颗粒，其结果便是阳性（+）,实验原理,RPR试验是VDRL试验的一种改良方法。该法是在抗原中加入活性炭颗粒作为指示物，加入了氯化胆碱，因此血清不需灭活。特制的白色纸卡替代了玻片。试验结果易于判断，肉眼即可观察。也可用血浆进行检测试验结果可保存。抗原放4冰箱可保存1年此法操作简单，肉眼即可读出结果试剂及对照血清已标准化，费用低,血浆反应素环状卡片RPR试验-（定量法）,本试验适用于一期梅毒(阳性率75 85)及二期梅毒(阳性率100)诊断。也适用于疗效观察，判定复发及再感染的监测，由于操作简

18、便，出结果快，亦适用于普查、婚检、产前检查及其它健康检查等。,试剂与器材,1、试剂盒：梅毒快速血浆反应素诊断试剂2、0.85生理盐水；3、采集静脉血2.0ml,分离血清或 血浆备用；4、加样器（100ul)、吸头（100ul)。,操作步骤,孔 号 1 2 3 4 5 6 7 8 稀释倍数 原倍 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 阳性K 阴性K生理盐水(ul)-50.0 50.0 50.0 50.0 50.0-样 品(ul)50.0 50.0 50.0 50.0 50.0 50.0弃50.0-阳性血清(ul)-50.0-阴性血清(ul)-50.0抗原悬液(ul)50.0 50.0 50

19、.0 50.0 50.0 50.0 50.0 50.0按每分钟100转速度，摇动卡片8-10分钟，置室温，肉眼观察结果.,结果判定,以出现凝集颗粒判为阳性，当凝集达到100%时可判+，当凝集达到75%时可判+,当凝集达到50%时可判+,当凝集达到25%时可判+,当凝集25%或无凝集现象时可判或-。活动性梅毒抗体滴度在1:8以上才有诊断意义。,注意事项,本试验在23-29环境下进行。试剂使用前应充分摇匀。此方法主要用于梅毒的筛选和治疗效果的观察，初诊病人抗体滴度如果1:8时应同时作特异性抗体试验证实或考虑其它疾病。,注意事项,作为治疗效果观察时，恢复期病人第一年内每三个月复查一次，以后每半年复查

20、一次观察抗体，随访2-3年。,梅毒螺旋体血清试验荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）梅毒螺旋体制动试验（TPI）梅毒螺旋体IgM抗体检测这类试验特异性高，主要用于诊断试验,梅毒血清学检测,梅毒螺旋体IgM抗体检测,早期诊断：TP-IgM阳性的一期梅毒病人经过抗生素治疗后，约24周TP-IgM消失。二期梅毒TP-IgM阳性病人经过抗生素治疗后，28个月之内IgM消失TP-IgM的检测对诊断新生儿的先天性梅毒意义很大，母体IgM抗体不能通过胎盘，如果TP-IgM阳性则表示婴儿已被感染经有效治疗后IgM抗体消失，IgG抗体则持续存在,PCR技术,扩增螺旋体DNA序列

21、，使经选择的螺旋体DNA拷贝数量增加，再用特异性探针来进行检测，以提高诊断率敏感性高，对实验室及人员要求高，存在假阳性可能,脑脊液检查,晚期梅毒患者，当出现神经症状，应作脑脊液检查脑脊液常规：白细胞计数10106/L，蛋白量500mg/L，且无其他引起这些异常的原因脑脊液VDRL试验或FTA-ABS试验阳性,表1 265例梅毒患者梅毒血清试验及暗视野检查梅毒螺旋体的结果,表2 114例一期梅毒患者的血清及TP试验的结果比较,梅毒检测总结,VDRL和RPR：相对灵敏度差，是活动性感染的标志，主要应用于梅毒的筛查和疗效观察TPHA/TPPA:灵敏，TPPA特异性更好，主要用于定性诊断RPR与TPP

22、A均会因前带效应有假阳性FTA-ABS：结果灵敏和特异，但检测对人工操作专业性要求高，仅在特殊参考实验室使用EIA/CMIA：结果灵敏和特异，能全自动化检测,孕产妇梅毒检测及服务流程,1.预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播工作实施方案2.梅毒诊断标准 WS-2007,孕产妇梅毒检测及服务流程,解 析,RPR 与TPPA检测结果都是阳性才能诊断梅毒梅毒感染母亲分娩前要检测RPR滴度,解 析,非诊断先天梅毒感染的四个条件需与母体抗体滴度比较有条件者建议进行IgM抗体检测18个月龄进行TPPA检测,母婴梅毒螺旋体血清测试的说明,母亲梅毒、婴儿可能感染,+,+,+或-,+,母亲在近期或之前感染过梅毒；婴儿可能感染,+,+,+,+,母亲无梅毒,-,-,+,+,-,-,-,-,+,婴,-,婴,母,母,母亲在怀孕前或早孕期已经成功治愈梅毒,+,-,说明母婴没有梅毒或正在潜伏期,梅毒螺旋体测试,非梅毒螺旋体测试,谢 谢！,电话：83997300E.mail:,