人体寄生虫学实验课件.ppt

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1、人体寄生虫学实验,人体寄生虫学实验,2,实验课注意事项,一、实验室规则1.进实验室上课时必须穿白大衣，按编号入座（编号=座位号=标本盒号=显微镜号）；2.实验前做好预习，明确实验目的和要求。3.严格遵守操作程序，爱护教学标本、仪器、试剂、动物。,2实验课注意事项 一、实验室规则,3,4.实验操作时要耐心细致，自己动手，独立思考。5.上课要准时，不得无故缺席、迟到或早退。遵守课堂纪律。6.严格遵守生物安全规定。动物尸体、玻片、器皿、垃圾应按要求放到指定地点。7.值日生应负责搞好实验室的清洁卫生，离开实验室前应关好水、电、门窗及签名。,34.实验操作时要耐心细致，自己动手，独立思考。,4,1.每位

2、同学：离开实验室之前按顺序放好玻片标 本；放好显微镜；整理好自己的台 面和清洁实验用具。动物尸体、玻片、器皿、垃圾应按 要求放到指定地点。2.值日生:抹实验台、黑板、整理桌面等；拖地、倒垃圾；值日组长签名；关好水、电、门窗。,清洁与值日,4清洁与值日,5,二、赔偿制度,1.损坏公物要赔偿 2.重点为玻片标本，损坏要登记赔偿（蠕虫标本每人一盒，每盒18张玻片标本）。3.要求课前课后检查标本 课前：上课前检查或老师课前讲话后5min 内检查 课后：离开实验室之前 4.标本损坏赔偿：（206室登记，）,5二、赔偿制度 1.损坏公物要赔偿,6,三、显微镜的使用,1.搬动显微镜时要轻，对号使用，对号放回

3、。2.插、拔电源前要检查显微镜灯泡的亮度是否已拨至最低处，开关是否关了。3.看玻片标本要注意的问题(1)成虫玻片标本：用肉眼、解剖镜、低倍镜(2)虫卵玻片标本：用低倍镜、高倍镜 虫卵玻片标本的特点及对焦方法 低倍对焦对靶高倍(3)原虫玻片标本：高倍镜油镜,6三、显微镜的使用1.搬动显微镜时要轻，对号使用，对号放回,7,虫卵玻片标本的对焦方法,低倍对焦对靶高倍,7虫卵玻片标本的对焦方法低倍对焦对靶高倍,显微镜故障处理,1.放在边台桌面，无需放入柜内,2.写张小纸条注明故障情况夹于玻片夹处,3.可取无人使用的后备显微镜使用，用完后放回原处。,显微镜故障处理1.放在边台桌面，无需放入柜内 2.写张小

4、纸条,9,四、实验安排,操作：自己用显微镜看小组操作：一般4人一组小班示教：在小班实验室看示教：分两组，到208示教室和大厅看。每组12分钟，带上实验指导 示教时间：15:00-15:25,9四、实验安排操作：自己用显微镜看组别 12345678,10,五、作业要求,在每次作业首页的左上角写上“报告日期：2012年月日”标注图：用平行线标注各部位的名称绘图：用铅笔描绘，点、线图 绘虫卵图要求：1.外形特征,内含物结构特点 2.卵壳用双线表示厚薄、是否均匀等特征 3.标注主要结构 生活史线条图：简答题：简明扼要，或用表格列出 报告：写目的原理、方法（步骤）、结果、分析,10五、作业要求在每次作业

5、首页的左上角写上“报告日期：20,11,实验课的总目的和要求,1.掌握常见人体寄生虫的辨认，掌握具有诊断价值的寄生虫形态特征和常见寄生虫的病原学检查方法，了解免疫学诊断技术及高新技术诊断方法。2.培养动手能力、分析问题和解决问题的能力及创新能力。3.验证理论课中所学的基本理论，对重要理论内容加深理解。,11实验课的总目的和要求1.掌握常见人体寄生虫的辨认，掌握具,12,实验一,华支睾吸虫（Clonorchis sinensis）布氏姜片虫（Fasciolopsis buski）,12实验一华支睾吸虫（Clonorchis sinensis,13,实验目的和要求,1.以华支睾吸虫为代表，掌握吸虫

6、基本形态和生活史的基本特点。2.掌握两种吸虫的虫卵形态特征和病原学诊断方法。3.熟悉两种吸虫的感染途径、感染方式、寄生部位与致病作用及防治要点。,13实验目的和要求 1.以华支睾吸虫为代表，掌握吸虫基本形,14,实验内容,一、操作 1.华支睾吸虫(成虫、虫卵)2.布氏姜片虫(成虫、虫卵)二、小组操作 1.检查猫肝（找华支睾吸虫成虫,注意病理变化）2.ELISA法检测待测血清中的抗华支睾吸虫抗体三、示教：成虫液浸标本、中间宿主（淡水螺、淡水鱼）、植物媒介、生活史各期、病理标本四、录像：华支睾吸虫五、作业六、小结,14实验内容一、操作,15,华支睾吸虫成虫,注意观察：外形口、腹吸盘（位置和大小比例

7、）生殖系统消化系统,15华支睾吸虫成虫注意观察：,16,华支睾吸虫卵,大小：2917m形状：芝麻状（或灯泡状）颜色：黄褐色内含物：毛蚴其它：卵盖疣状突起（小瘤）,小瘤,16 华支睾吸虫卵大小：2917,17,布氏姜片虫成虫,腹吸盘,口吸盘,睾丸,卵巢,注意观察：外形口、腹吸盘生殖系统消化系统,17布氏姜片虫成虫腹吸盘口吸盘睾丸卵巢注意观察：外形,18,布氏姜片虫卵,大小：人体吸虫中最大者 形态：长椭圆形 颜色：淡黄色 内含物：一个卵细胞 许多卵黄细胞 其它：卵壳薄 卵盖不明显,卵盖,卵细胞,卵黄细胞,18布氏姜片虫卵 大小：人体吸虫中最大者卵盖卵细胞卵黄细胞,ELISA法检测待测血清中抗 华支

8、睾吸虫抗体（小组操作）,实验原理：特异性抗原与特异性抗体反应,包埋已知抗原（GST2，基因工程重组抗原）,抗原抗体复合物,底物的显色反应,加待测血清,酶标记的二抗,实验目的：熟悉免疫学诊断方法和意义,终止反应,ELISA法检测待测血清中抗 实验原理：特异性抗原,ELISA法检测待测血清中抗华支睾吸虫抗体（小组操作）,操作步骤,100ul,100ul,100ul,1.加样,待测样品1或2,2.温育,封板，3725分钟,3.洗涤,洗涤液3次，200ul，拍干,4.加酶标记二抗,100ul，封板，3720分钟,5.洗涤,洗涤液4次，拍干,6.显色、加终止液&结果判定,显色液A、B各加一滴,3710分

9、钟；加终止液一滴,ELISA法检测待测血清中抗操作步骤100ul100ul,操作注意事项:1.每一步的反应液要垂直滴入反应孔,加样后轻轻 摇匀；2.每一步反应完后都要抛尽，并注意抛尽的方向 以防交叉反应；3.每次冲洗、抛尽后要在吸水纸上拍干。,实验报告:实验目的/原理 实验方法（步骤）实验结果 实验结果分析,操作注意事项:实验报告:实验目的/原理,22,22,23,23,24,24,人体寄生虫学实验课件,26,26,27,27,28,在鱼肉中的囊蚴(0.138-0.15mm),28在鱼肉中的囊蚴(0.138-0.15mm),29,1.绘虫卵图（华支睾吸虫、布氏姜片虫）2.标注成虫形态图（华支睾

10、吸虫、布氏姜片虫）3.绘华支睾吸虫生活史线条图4.写出ELISA法检测待测血清中抗华支睾吸虫抗体的实验报告（实验目的/原理、实验方法/步骤、实验结果/实验结果分析）,作业,291.绘虫卵图（华支睾吸虫、布氏姜片虫）作业,30,小结,一、虫卵的鉴别及病原学诊断方法 大小、形状、颜色、内含物、卵壳、其他（卵盖）,30小结一、虫卵的鉴别及病原学诊断方法,31,两种虫卵的鉴别要点,31 两种虫卵的鉴别要点华支睾吸虫卵布氏姜片虫卵卵盖有,32,二、成虫的鉴别,外形口、腹吸盘生殖系统消化系统寄生部位,32二、成虫的鉴别外形,33,33,34,两种成虫鉴别要点,34两种成虫鉴别要点华支睾吸虫成虫布氏姜片虫成

11、虫吸盘口吸,35,三、生活史,寄生虫完成一代的生长、发育及繁殖的整个过程。终宿主 保虫宿主宿主第一中间宿主第二中间宿主植物媒介感染期感染途径、感染方式 定居部位致病 离开人体的时期诊断,35 三、生活史 寄生虫完成一代的生长、发育及繁殖的整,36,华支睾吸虫生活史：虫卵 毛蚴 胞蚴 雷蚴 尾蚴 囊蚴 成虫 虫卵粪便 水 淡水螺（纹沼螺等）淡水鱼虾 人 粪便 哺乳动物肝胆管 第一中间宿主第二中间宿主终宿主（1M）布氏姜片吸虫生活史：虫卵毛蚴胞蚴母雷蚴子雷蚴尾蚴囊蚴 成虫 虫卵粪便水淡水螺（扁卷螺）水生植物 人 粪便 猪、野猪小肠 中间宿主 植物媒介终宿主(1-3M),（感染期）,（感染期）,36

12、华支睾吸虫生活史：（感染期）（感染期）,37,两种吸虫生活史鉴别要点,37两种吸虫生活史鉴别要点 华支睾吸虫,38,四、ELISA法检测华支睾吸虫感染的结果分析,应结合病史，临床症状等综合判断。,血清中无特异性抗体未感染华支睾吸虫感染早期，特异性抗体未出现病人已治愈，无抗体存在假阴性,血清中有特异性抗体已感染华支睾吸虫曾感染经治疗未治愈经治疗病人已治愈，抗体仍存在假阳性,阳性,阴性,38四、ELISA法检测华支睾吸虫感染的结果分析,39,五、复习名词慨念,1.寄生虫（parasite）2.宿主（host）3.中间宿主（intermediate host）4.终宿主（definitive host）5.保虫宿主（储蓄宿主）（reservoir host）6.感染期（infective stage）7.生活史（life cycle）8.媒介植物(vector)9.人兽共患寄生虫病（parasitic zoonoses）10.雌雄同体（hermaphrodite）,39五、复习名词慨念 1.寄生虫（parasi,