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1、基因工程简介,生物工程,概念:也叫生物技术,是生物科学与工程技术有机结合而兴起的一门综合性科学技术。,特点:以生物科学为基础,运用先进的科学原理和工程技术手段来加工或改造生物材料,如DNA、蛋白质、染色体、细胞等,从而生产出人类所需要的生物或生物制品。,基因工程的基本内容,基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。这种技术是在生物体外,通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生出人类所需要的基因产物。,例:基因工程培育抗虫棉的简要过程,苏云金芽孢杆菌,提取,抗虫基因,与运载体DNA拼接,棉花植株
2、,导入,基因操作的工具,基因的剪刀限制性内切酶(一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子),基因的针线DNA连接酶,基因的运输工具运载体(如质粒、噬菌体和动植物病毒等),限制性内切酶,分布:主要在微生物中。作用特点:特异性,即识别特定核苷酸序列,切割特定切点。结果:产生黏性未端(碱基互补配对)。举例:大肠杆菌的一种限制酶能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开,被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,它们之间正好互补配对,这样的切口叫做黏性末端。,限制性内切酶,限制酶,思考,要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口?可产生几个黏性
3、末端?,要切两个切口,产生四个黏性末端。,如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割,会怎样呢?,会产生相同的黏性末端,然后让两者的黏性末端黏合起来,就可以合成重组的DNA分子了。,DNA连接酶,连接的部位:磷酸二酯键(梯子的扶手),不是氢键(梯子的踏板)。,基因的运载体,运载体必须具备的条件:1、能够在宿主细胞中复制并稳定地保存;2、具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接;3、具有某些标记基因,便于进行筛选。(如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等),外源基因(如抗虫基因)导入受体细胞(如棉花细胞)需要运输工具运载体。,运载体的作用:1、作为运载工具,将外源基因转移到受体细胞中去。
4、2、利用运载体在受体细胞内,对外源基因进行大量复制。,质粒,质粒是基因工程最常用的运载体,它广泛地存在于细菌中,是细菌染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子,大小只有普通细菌拟核DNA的百分之一。,质粒能够“友好”地“借居”在宿主细胞中。一般来说,质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性的作用。但是,质粒的复制则只能在宿主细胞内完成。,基因操作的基本步骤,提取目的基因,目的基因是人们所需要转移或改造的基因。如苏云金芽孢杆菌的抗虫基因,还有植物的抗病(抗病毒、抗细菌)基因、种子贮藏蛋白的基因,以及人的胰岛素基因、干扰素基因等。,目的基因与运载体结合,将目的基因导入受体细胞,目的基因的检测和表达
5、,检测:通过检测标记基因的有无来判断目的基因是否导入。表达:通过特定性状的产生与否来确定目的基因是否表达。,常用的受体细胞有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。,基因操作的基本步骤,目的基因导入受体细胞的方法1、将细菌用CaCl2处理,以增大细菌细胞壁的通透性。2、使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。3、目的基因在受体细胞内,随其繁殖而复制,由于细菌繁殖的速度非常快,在很短的时间内就能获得大量的目的基因。,基因操作的基本步骤,基因操作的基本步骤,基因工程的成果与发展前景,基因工程与医药卫生,生产基因工程药品,用于基因诊断与基因治疗,基因工程与农牧业、食品工业,培育高产、稳产
6、和具有优良品质的动植物新品种,培育具有各种抗逆性的动植物新品种,为人类开辟新的食物来源,基因工程与环境保护,用于环境监测,用于被污染环境的净化,基因工程与医药卫生,我国生产的部分基因工程疫苗和药物,1、基因工程药品的生产,微生物生长迅速,容易控制,适于大规模工业化生产。如利用大肠杆菌生产胰岛素、干扰素、白细胞介素2等。既增加产量,又降低成本。,基因工程与医药卫生,2、基因诊断,基因诊断是用放射性同位素(如32P)、荧光分子等标记的DNA分子做探针,利用DNA分子杂交原理,鉴定被检测标本上的遗传信息,达到检测疾病的目的。,生物芯片 从正常人的基因组中分离出DNA与DNA芯片杂交就可以得出标准图谱
7、。从病人的基因组中分离出DNA与DNA芯片杂交就可以得出病变图谱。通过比较、分析这两种图谱,就可以得出病变的DNA信息。基因芯片诊断技术以其快速、高效、敏感、经济、平行化、自动化等特点,将成为一项现代化诊断新技术。,基因工程与医药卫生,3、基因治疗,基因治疗是把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中,达到治疗疾病的目的。,基因工程与农牧业、食品工业,生长快、肉质好的转基因鱼(中国),乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷),基因工程与农牧业、食品工业,转黄瓜抗青枯病基因的甜椒,转鱼抗寒基因的番茄,基因工程与农牧业、食品工业,基因工程与农牧业、食品工业,基因工程与农牧业、食品工业,基因工程与环境保护,1、环境监测 基因工程做成的DNA探针能够十分灵敏地检测环境中的病毒、细菌等污染。利用基因工程培育的“指示生物”能十分灵敏地反映环境污染的情况,却不易因环境污染而大量死亡,甚至还可以吸收和转化污染物。,2、环境污染治理基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。,1、有些转基因食物含的一些物质,可能会影响人体健康。2、大量的转基因生物进入自然界后很可能会与野生物种进行杂交,产生一些超级生物,从而造成基因污染。3、如有些作物插入抗虫基因,杀死环境中有益的生物。,基因工程的弊端,
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