免疫血清制备培训课件.ppt
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1、免疫血清制备,免疫血清制备,实验目的和要求,了解影响机体免疫应答强度的因素;明确初次应答和再次应答抗体产生的规律;制备牛血清白蛋白(BSA)的抗血清;熟悉佐剂的制备和动物免疫的常用方法;了解抗体检测的常用方法。,2,免疫血清制备,实验目的和要求了解影响机体免疫应答强度的因素;2免疫血清制备,在免疫学实验中,为制备抗体通常以抗原性物质给动物注射,经一定时间后,动物血清中可产生大量特异性抗体,这种含有特异性抗体的血清称免疫血清。,实验原理,3,免疫血清制备,在免疫学实验中,为制备抗体通常以抗原性物质给动物注射,经,免疫应答的影响因素,抗体的产生通常与抗原的质和量、动物种类以及接种的途径有密切关系。
2、一、抗原分子的结构和性质 1.分子量:分子量越大,免疫原性越强。 2.化学组成及结构 (1)蛋白质 (2)多糖:具有免疫原性, 较蛋白质弱。 (3)核酸:多无免疫原性。 3.结构的复杂性 4.分子构象 5.易接近性 6.物理状态,4,免疫血清制备,免疫应答的影响因素 抗体的产生通常与抗原的质和量、动物,二、宿主方面的因素 1.遗传因素 同种动物不同品系及不同个体对同种抗原产生不同强度的免疫应答。 2.其他因素 年龄、性别与健康状态。 三、免疫原的剂量及进入途径 (1)剂量 1)剂量不足或过多均不引起免疫应答。 2)重复进入引起强免疫应答。 (2)途径:皮内、皮下、肌肉、静脉、腹腔、呼吸道和口服
3、免疫应答水平依次降低。,5,免疫血清制备,二、宿主方面的因素5免疫血清制备,抗体产生的一般规律,初次应答和再次应答规律。 抗体产生的顺序规律:IgM - IgG - IgA - IgD - IgE,6,免疫血清制备,抗体产生的一般规律初次应答和再次应答规律。 6免疫血清制备,7,免疫血清制备,7免疫血清制备,初次应答和再次应答抗体产生比较,8,免疫血清制备,初次应答和再次应答抗体产生比较8免疫血清制备,实验方案,免疫佐剂制备及动物初次免疫(第一周)再次免疫及血清采集(第二周)血清采集及抗体检测(第三周),W1,W2,W3,未免疫血清采集,再次免疫血清采集,初次免疫血清采集,初次免疫,再次免疫,
4、9,免疫血清制备,实验方案免疫佐剂制备及动物初次免疫(第一周)W1W2W3未免,免疫血清制备培训课件,实验流程,12只小鼠,小鼠眼眶取血制备血清,2只,2只,8只,W1,W3,W2,初次免疫(1只/组),再次 免疫,11,免疫血清制备,实验流程12只小鼠小鼠眼眶取血制备血清2只2只8只W1W3W,1.5mlBSA,1.5ml完全福氏佐剂,搅拌,完全乳化,第一周实验步骤,1.抗原制备,滴于水中经久不散,12,免疫血清制备,1.5mlBSA1.5ml完全搅拌完全乳化第一周实验步骤 1,2.动物免疫用1ml注射器12针头吸出完全乳化的抗原1ml;换4针头双后足垫和背部皮下接种,每处约10-20ul。
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