免疫球蛋白专业知识讲座培训课件.ppt

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1、免疫球蛋白专业知识讲座,免疫球蛋白专业知识讲座,2,Ig可分为分泌型（sIg）和膜型（mIg）。前者主要存在于血清及其他体液（组织液和外分泌液）中，具有抗体的各种功能，后者分布在B细胞表面，是B细胞表面的抗原识别受体。 血清电泳时，Ig主要分布于区，所以习惯上称为球蛋白或丙种球蛋白。,免疫球蛋白专业知识讲座,2Ig可分为分泌型（sIg）和膜型（mIg）。前者主要存在,免疫球蛋白（Ig）,B淋巴细胞,B淋巴细胞,浆细胞,膜型Ig（BCR）,记忆性B淋巴细胞,分泌型Ig,五种类型： IgG、IgM、IgE、IgA、IgD两种轻链：链和链,3,免疫球蛋白专业知识讲座,免疫球蛋白（Ig）B淋巴细胞B淋

2、巴细胞浆细胞膜型Ig（BCR,4,第一节 免疫球蛋白的结构,免疫球蛋白专业知识讲座,4 第一节 免疫球蛋白专业知识讲座,5,一、基本结构,Ig是由1000个以上的氨基酸组成的大分子，所有的Ig的基本单位都是由两条轻链和两条重链组成的对称结构，Ig单体中四条肽链两端游离的氨基端（N端）或羧基端（C端）的方向是一致的。,重链,轻链,二硫键,N端,C端,免疫球蛋白专业知识讲座,5一、基本结构 Ig是由1000个以上的氨基酸,6,重链,轻链,二硫键,N端,C端,轻链（L链）：每条L链约有214个氨基酸残基，根据结构及抗原性不同分为型及型。,（一）轻链和重链,免疫球蛋白专业知识讲座,6重链轻链二硫键N端

3、C端轻链（L链）：每条L链约有214个氨,7,重链,轻链,二硫键,N端,C端,重链（H链）：每条H链约有450-550个氨基酸残基，根据H链抗原性的差异可将其分为五类，即IgM、IgD 、 IgG、IgA和IgE，其相应的重链分别为链、 链、 链、链和链。,免疫球蛋白专业知识讲座,7重链轻链二硫键N端C端重链（H链）：每条H链约有450-5,8,希腊字母表,免疫球蛋白专业知识讲座,8希腊字母表免疫球蛋白专业知识讲座,9,（二） 可变区和恒定区,免疫球蛋白专业知识讲座,9（二） 可变区和恒定区免疫球蛋白专业知识讲座,10,（二） 可变区和恒定区,1、可变区（V区）：免疫球蛋白轻链和重链中靠近N端

4、氨基酸序列变化较大的区域。 2、高变区（HVR）VH和VL各有三个区域在氨基酸残基的组成和排列次序上都比V区内其他区域更易变化，这些区域称为高变区。,免疫球蛋白专业知识讲座,10（二） 可变区和恒定区 1、可变区（V区）：免疫球,11,图 免疫球蛋白的结构,高变区,铰链区,免疫球蛋白专业知识讲座,11图 免疫球蛋白的结构高变区铰链区免疫球蛋白专业知识讲,12,3、CDR ：VH和VL的HVR区共同构成抗原结合部位，因该部位在空间结构上与表位（抗原决定基）形成精密的互补，故又称为互补决定区（CDR）。,图 抗体高变区与表位结合,免疫球蛋白专业知识讲座,123、CDR ：VH和VL的HVR区共同构

5、成抗原结合部位,13,3、CDR ：VH和VL的HVR区共同构成抗原结合部位，因该部位在空间结构上与表位（抗原决定基）形成精密的互补，故又称为互补决定区（CDR）。4、FR：V区中CDR之外区域的氨基酸组成和排列顺序相对不易变化，称为骨架区（FR）。5、恒定区（C区）：L链羧基末端1/2及H链羧基末端的3/4或4/5肽链，氨基酸数量、种类、排列次序及含糖量都比较稳定，称之。,免疫球蛋白专业知识讲座,133、CDR ：VH和VL的HVR区共同构成抗原结合部位,14,人抗白喉外毒素（IgG),人抗破伤风外毒素（IgG),白喉外毒素,破伤风外毒素,注：人抗白喉外毒素与人抗破伤风外毒素它们的V区不同，

6、但C区可相同，具有相同的抗原性。,免疫球蛋白专业知识讲座,14人抗白喉外毒素（IgG)人抗破伤风外毒素（IgG)白喉外,15,（三）铰链区,铰链区,高变区,免疫球蛋白专业知识讲座,15（三）铰链区铰链区高变区免疫球蛋白专业知识讲座,16,（三）铰链区,位于CH1和CH2之间有一个富含脯氨酸、不形成-螺旋、易发生伸展及一定程度的转动的区域称为铰链区。 此区易与各种蛋白酶接近，且对木瓜蛋白酶和胃蛋白酶敏感。,免疫球蛋白专业知识讲座,16（三）铰链区 位于CH1和CH2之间有一个富含脯氨酸,17,免疫球蛋白专业知识讲座,17免疫球蛋白专业知识讲座,18,（四）功能区,1、L链可分为可变区（VL）和恒

7、定区（CL）两个功能区。 2、H链功能区：IgG、IgA和IgD的H链各有一个可变区（VH）和三个恒定区（CH1、CH2、CH3）共四个功能区；IgM和IgE则多有一个CH4共五个功能区。,免疫球蛋白专业知识讲座,18（四）功能区 1、L链可分为可变区（VL）和恒定区（,19,CH4,CH4,免疫球蛋白专业知识讲座,19CH4CH4免疫球蛋白专业知识讲座,20,二、Ig的其它结构,1、接合链（J链）：是连接两个或两个以上Ig单体的成分,存在于二聚体sIgA和五聚体IgM中，IgG、IgD、IgE为单体，无J链。 2、分泌片（SP）：由上皮细胞合成与分泌，与J链共同组成分泌型IgA（ SIgA

8、）。,免疫球蛋白专业知识讲座,20二、Ig的其它结构 1、接合链（J链）：是连,21,免疫球蛋白专业知识讲座,21免疫球蛋白专业知识讲座,22,三、免疫球蛋白的水解片段,（一）木瓜蛋白酶的水解片段 可在铰链区H链间双硫键近N端切断，共得三个片段。 1、Fab段（抗原结合片段）2个 2、Fc段（结晶片段）1个,免疫球蛋白专业知识讲座,22三、免疫球蛋白的水解片段 （一）木瓜蛋白酶的水解,23,免疫球蛋白专业知识讲座,23免疫球蛋白专业知识讲座,24,（二）胃蛋白酶的水解片段 可在铰链区H链间双硫键近C端切断，共得大小两个片段。 1、F（ab）2 1个 2、pFc,免疫球蛋白专业知识讲座,24 （

9、二）胃蛋白酶的水解片段免疫球蛋白专业知识讲座,25,第三节 抗体的生物学功能,免疫球蛋白专业知识讲座,25第三节 抗体的生物学功能免疫球蛋白专业知识,26,一、特异性识别和结合抗原,Ig重要的功能是与相应抗原特异性结合，从而在体内介导多种重要的生理和病理效应（中和毒素，清除病原微生物等）；在体外检测相应的抗原或抗体。这是由其V区的氨基酸种类和空间构型决定的。,免疫球蛋白专业知识讲座,26一、特异性识别和结合抗原 Ig重要的功,27,免疫球蛋白专业知识讲座,27免疫球蛋白专业知识讲座,28,二、激活补体,1、IgG1-3、IgM可通过经典途径激活补体，IgM激活补体能力最强。 2、聚合的IgG4

10、、IgA可通过旁路途径激活补体。,免疫球蛋白专业知识讲座,28二、激活补体 1、IgG1-3、IgM可通过经典途,29,三、结合Fc受体,1、调理作用,免疫球蛋白专业知识讲座,29三、结合Fc受体1、调理作用免疫球蛋白专业知识讲座,免疫球蛋白专业知识讲座培训课件,31,三、结合Fc受体,1、调理作用2、抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用3、介导型超敏反应,免疫球蛋白专业知识讲座,31三、结合Fc受体1、调理作用免疫球蛋白专业知识讲座,32,免疫球蛋白专业知识讲座,32免疫球蛋白专业知识讲座,33,四、通过胎盘和粘膜,1、IgG是唯一能从母体胎盘转移到胎儿体内的Ig。 2、IgA 通过消化道和呼吸道

11、粘膜，构成分泌型IgA，是机体粘膜局部免疫的重要因素。,免疫球蛋白专业知识讲座,33四、通过胎盘和粘膜 1、IgG是唯一能从母体,34,第四节 各类抗体的生物学特性,免疫球蛋白专业知识讲座,34第四节 免疫球蛋白专业知识讲座,免疫球蛋白（Ig）,B淋巴细胞,B淋巴细胞,浆细胞,膜型Ig（BCR）,记忆性B淋巴细胞,分泌型Ig,五种类型： IgG、IgM、IgE、IgA、IgD两种轻链：链和链,35,免疫球蛋白专业知识讲座,免疫球蛋白（Ig）B淋巴细胞B淋巴细胞浆细胞膜型Ig（BCR,36,一、IgG,1、 IgG是血清中含量最高的Ig。2、 IgG是唯一能通过胎盘的抗体， 对防 止新生儿感染起

12、重要作用。,免疫球蛋白专业知识讲座,36一、IgG1、 IgG是血清中含量最高的Ig。免疫球蛋白,37,二、IgM,1、IgM由5个单体通过一个J链和二硫键连接成五聚体， 分子量最大，故又称巨球蛋白。 2、在个体发育过程中， IgM是最早出现的Ig。,免疫球蛋白专业知识讲座,37二、IgM 1、IgM由5个单体通过一个,38,三、IgA,IgA分血清型和分泌型两种类型。 血清型IgA 主要为单体，占血清总量的10-20%，在血清中不显示重要的免疫作用。,免疫球蛋白专业知识讲座,38 三、IgA IgA分血清型和分泌型两,39, 分泌型IgA（SIgA ） 1、为二聚体，由两个IgA单体，一个J

13、链和一个分泌片共同组成。 2、婴儿可从初乳中获得SIgA 。出生46个月后开始合成IgA。,免疫球蛋白专业知识讲座,39 分泌型IgA（SIgA ）免疫球蛋白专业知识讲座,40,四、IgE,1、以单体形式存在，在种系进化中最晚出现，并且在血清中含量最低。2、IgE为亲细胞性抗体，是引起型超敏反应的主要抗体。,免疫球蛋白专业知识讲座,40四、IgE1、以单体形式存在，在种系进化中最晚出现，并且,41,五、IgD,主要由扁桃体、脾等处浆细胞产生；以单体形式存在于血清中，含量不到血清总量的1%；膜结合型IgD（SmIgD）构成BCR是B细胞分化成熟的重要表面标志。,免疫球蛋白专业知识讲座,41五、I

14、gD 主要由扁桃体、脾等处浆细胞产生,42,第四节 人工制备抗体,一、多克隆抗体 用天然抗原免疫动物所产生的抗体，是由许多B细胞及其子代即多种纯系细胞所产生的多种抗体的混合物，称之。,免疫球蛋白专业知识讲座,42第四节 人工制备抗体 一、多克隆抗体,43,二、单克隆抗体（McAb） 是应用杂交瘤技术制备的，针对单一抗原表位，由一个B细胞分化增殖的子代细胞集团合成的高特异性和高均一性抗体，称之。,免疫球蛋白专业知识讲座,43 二、单克隆抗体（McAb）免疫球蛋白专,44,本章重点,1、概念：抗体、免疫球蛋白、多克隆抗体、单克隆抗体。2、Ig的基本结构和功能。4、免疫球蛋白的生物学功能。5、各类Ig的主要特征及功能。,免疫球蛋白专业知识讲座,44本章重点1、概念：抗体、免疫球蛋白、多克隆抗体、单克隆抗,