执业兽医资格考试微生物学革兰氏阴性需氧杆菌ppt课件.ppt

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1、1,第一节 鼻疽假单胞菌（Pseudomonas mallei）,鼻疽假单胞菌简称鼻疽杆菌，现在称为鼻疽伯氏菌（Burkholderia mallei），是假单胞菌属中最重要的动物病原菌;主要侵害马属动物，引起急性（多见于骡、驴）或慢性（多见于马）的鼻疽病，偶尔能感染人和一些肉食兽。临床上呈现：鼻鼻疽、肺鼻疽和皮肤鼻疽三种表现型，但共同的病变特征是侵袭部位（皮肤、鼻腔和气管黏膜、肺、淋巴结及其他器官形成特征性的鼻疽结节、溃疡与疤痕。因此本菌主要存在于病马的结节、鼻液与溃疡分泌物中。,2,该属的另二种成员，即绿脓杆菌和伪鼻疽杆菌对动物也有一定的致病性，产生的病变极似鼻疽，但较少见。,3,一、形态

2、特征,鼻疽杆菌为细直或微弯、两端钝圆的G杆菌，无芽胞、无鞭毛、无荚膜，幼龄培养菌形态比较整齐，老龄菌常表现多形。,碱性美兰染色时，此菌尤其是老龄菌体，可见有着色不均的浓淡相间的串珠状颗粒（羟基丁酸盐），或两端浓染，此特点有一定的诊断价值。,4,5,6,二、培养特性,本菌为需氧菌，最适生长温度为37，最适生长pH6.46.8；在普通培养基上能生长，但生长缓慢；在含有35%的甘油或血液、血清、葡萄糖的培养基中生长更好。,7,（1）在甘油琼脂培养基上3724小时的菌落呈细小、光滑、圆形、湿润、粘稠的灰白色渐至灰黄色菌落；（2）在血琼脂平板上不溶血；（3）在马铃薯培养基上生长具有特征性：3748小时可

3、长成蜂蜜状粘稠的菌苔，颜色则由淡黄色淡褐色深褐色；这对鉴定很有价值；（4）在甘油肉汤中培养呈轻度均匀混浊，并逐渐形成灰白色粘稠沉淀；培养日久后（1015天）可形成灰白色菌膜；（5）在孔雀绿酸性复红培养基上，形成淡绿色菌落；（6）本菌在麦康凯培养基上不能生长。,8,三、致病性,本菌不产生外毒素，仅有内毒素（及其耐热）。内毒素对健康动物毒性不强，但注射于已经感染鼻疽杆菌的动物，可引起剧烈的病灶激发反应。,9,四、微生物学诊断,对于鼻疽杆菌的诊断有：细菌学检查血清学检查变态反应检查法等,10,1、细菌学检查：主要是形态学观察、分离培养、生化鉴定、动物试验等；动物试验不仅能用于污染病料中鼻疽杆菌的分离

4、，而且可作为此菌鉴别的一个参考依据，能用作本试验的动物有猫、雄性豚鼠、仓鼠等，但以豚鼠多用。病料或肉汤培养物腹腔或皮下接种雄性豚鼠，在接种后约45天可见豚鼠阴囊红肿、睾丸肿胀，继而化脓破溃，一般在23周左右死亡，此反应称为Straus反应。,11,2、血清学试验：目前主要是补体结合反应，具有很高的特异性。,12,3、变态反应：常用的方法有点眼反应、眼睑试验、皮下试验、皮肤试验和喷雾试验，我国的兽医规程主要采用点眼法。点眼法操作简单，检出率高，该法是将鼻疽菌素滴入待检马的一侧眼结膜囊内，约34滴，分别于点眼后3、6、9、24小时观察；如眼结膜红肿并排出脓性分泌物，即可判为阳性。另外：伪鼻疽杆菌和

5、绿脓杆菌的一些特性请看书自学。,13,第二节 布氏杆菌杆菌属（Brucella）,布氏杆菌能引起人畜共患的慢性传染病，主要侵害生殖器官和关节，主要特征是：生殖器官、胎膜以及多种器官组织发炎、坏死和肉芽肿的形成，引起流产、不孕、睾丸及关节炎症等症状。,14,本属细菌主要分为6个生物种20个生物型，6个种即：,1、马尔他布氏杆菌(Br. melitensis)，也称为羊种；2、猪布氏杆菌(Br. suis)；3、流产布氏杆菌( Br. abortus ) ，也称为牛种；4、沙林鼠布氏杆菌( Br. meotomae ) ；5、绵羊布氏杆菌( Br. ovis ) ；6、犬布氏杆菌( Br. can

6、is ) 。,15,其中1、2、3三个种危害最大，羊种天然感染羊、猪种天然干扰猪、牛种感染牛，但1、2、3可相互感染，同时对人、马等动物都能致病，人类对布氏杆菌的感染以羊种最多见，且毒力最强，猪种次之，牛种最弱；人感染后表现波浪热、高烧、疲劳等。布氏杆菌病原体可通过胎盘、羊水、流产胎儿、乳汁、阴道分泌物、精液等排出体外，通过皮肤伤口、消化道、呼吸道、眼结膜、交配等途径感染。,16,一、形态学特征,布氏杆菌常用的染色方法是柯兹罗夫斯基染色法（即柯氏染色法）；本菌为球杆状或短杆状细小的G菌，多单在，短链较少，无芽胞、无荚膜、无鞭毛。通常，病料中或初次分离的细菌形态较小，但经过继代培养后，猪种和牛种

7、逐渐变为杆状，而羊种仍呈球杆状。经柯氏染色后，本菌可染成红色，而其他组织细胞与杂菌均呈绿色或兰色。,17,Brucella abortus - Gram-negative, coccobacillus prokaryote; causes bovine spontaneous abortion due to its rapid growth in the presence of erythritol (produced in the plancenta). SEM x 29,650,18,Brucella ovis in epididymis,19,20,二、培养特性,本菌为需氧菌，最适生长温

8、度为37，最适生长pH是6.67.2；本菌对营养要求较高，在普通培养基上生长贫瘠，通常用肝汤琼脂、马铃薯浸汁琼脂或胰蛋白胨琼脂，或加上一些营养如马血清、血液、葡萄糖、甘油、胰化酪蛋白大豆胨等，都可促进本菌生长。初次分离时，牛布氏杆菌必须在含有510%CO2环境中才能生长，但在人工培养基上移种几代后就不需要CO2。,21,菌落特性：,在肝汤琼脂或胰蛋白胨琼脂上，培养4天后，呈细小、柔软、湿润、圆形隆起、透明和闪光的露滴状菌落，菌落大小不等，小的0.050.1mm，大的0.510.mm。在血琼脂平板上产生灰白色、隆起的细小圆形菌落，无溶血性。本属细菌不能在麦康凯上生长。必须注意的是：布氏杆菌常易发

9、生光滑型粗糙型变异（即SR变异），有时还会出现过度型（I型菌落）。,22,三、抵抗力,本属菌在自然条件下的抵抗力较强，但在阳光直射和干燥的条件下抵抗力较弱，对湿热很敏感，100很快即被杀死，对一些消毒剂也很敏感。,23,四、抗原性,主要有属内抗原和属外抗原。1、属内抗原：包括A、M、R等表面抗原。A抗原和M抗原是细胞壁表面的脂多糖蛋白复合物；R抗原是细胞壁中的低蛋白含量的脂多糖复合物，为R型菌的共同抗原决定簇，当光滑型菌株发生SR变异后，丧失A、M抗原，即可暴露R抗原。2、属外抗原：是指布氏杆菌能与巴氏杆菌、变形杆菌、弗朗西斯菌、弧菌、弯曲杆菌、钩端螺旋体、假单胞菌、沙门氏菌、耶尔森氏菌以及大

10、肠杆菌等菌属发生交叉凝集反应的抗原。,24,五、致病性,本菌不产生外毒素，仅有内毒素，且毒性很强。内毒素是细胞壁内的一种磷脂多糖。本属菌通常可被吞噬细胞吞噬成为细胞内寄生菌，可在淋巴结中生长繁殖；由于赤藓醇可促进本菌的生长，因此布氏杆菌对动物的睾丸组织有一定的嗜性。由布氏杆菌引起的疾病称为“布氏杆菌病”，母畜通常表现为不孕、流产，公畜主要发生附睾炎。,25,六、微生物学诊断,检定程序如下：,26,用于本菌血清学检查的方法很多，通常有凝集试验、补体结合试验、荧光抗体染色等。例如：对于微生物诊断中分离的细菌可用已知的诊断血清，通过凝集试验来检测；在临床上可已知的诊断抗原通过凝集试验检测家畜的血清中

11、是否存在有布氏杆菌的抗体。临床上还可用变态反应协助诊断。,27,28,第三节 波氏菌属（Bordetella）,本菌属有3个正式种：支气管败血波氏菌（B. bronchiseptica）百日咳波氏菌（B. pertussis）副百日咳波氏菌（B. parapertussis）另外还有一个不定位的“支气管败血样波氏菌”（B. bronchiseptica-like）现定名为“禽波氏菌”（B. avium）。支气管败血波氏菌主要引起动物的疾病，在兽医中比较重要；百日咳波氏菌、副百日咳波氏菌主要对人致病，引起人的百日咳。,29,本节主要讲述：支气管败血波氏菌。,30,一、形态特征,支气管败血波氏菌为G细小球杆菌，具有周身鞭毛能运动，无芽胞，表面有微荚膜存在，单在或成双，很少成链。,31,二、培养特性,本菌为严格需氧菌，最适生长温度为37。在普通琼脂培养基上生长良好，形成圆形、隆起、光滑、闪光的细小菌落；在血琼脂平板上出现溶血；在马铃薯培养基上生长较好，形成湿润、闪光、牛奶咖啡样融合性菌苔，并使马铃薯变成棕黑色；能在麦康凯上生长。,