化学性食物中毒的快速检验医学课件.ppt
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1、编辑版ppt,2,复习内容,浸泡试验溶剂选择综合项目,编辑版ppt,3,编辑版ppt,4,化学性食物中毒的快速检验,14.1 概述14.2 水溶性毒物的快速检验14.3 挥发性毒物的快速检验14.4 不挥发性有机毒物的快速检验14.5 有毒元素的快速检验14.6 农药的快速检验14.7 兽药快速检验14.8灭鼠药的快速检验14.9 生物毒素快速检验,食物中毒是什么,凡是吃了“不干净”的食物引起的急性中毒性疾病。 一 般 以 腹 痛、 恶 心、 呕 吐、腹泻、发 热 等 症 状 为 主。,编辑版ppt,6,2013年5月20日晚,7名青岛理工大学琴岛学院的学生相继出现腹痛、腹泻、抽搐等症状,经城
2、阳人民医院急诊内科检查,7名学生均为食物中毒,编辑版ppt,7,编辑版ppt,8,编辑版ppt,9,2011年5月德国暴发肠出血性大肠杆菌(EHEC)疫情,已在德国各州造成1400多例确诊或疑似病例,至少14人因此丧生。瑞典、丹麦、英国、法国、荷兰、瑞士和奥地利等国也发现类似病例。据了解,这些国家的患者大部分曾到过德国。德国流行病预防研究的权威机构罗伯特科赫研究所表示,目前还无法确定大肠杆菌的来源,但呼吁民众尤其是德国北部地区的居民避免生吃黄瓜、番茄和生菜。,编辑版ppt,10,编辑版ppt,11,编辑版ppt,12,编辑版ppt,13,肠出血性大肠杆菌是大肠杆菌的一种,因其能产生志贺样毒素而
3、具有较强的致病性。感染到发病的潜伏期为3至8天,平均为3至4天。临床表现主要有:腹部绞痛和腹泻,一些病例为血便样腹泻。多数病人10天内康复,少数病人特别是幼儿和老年人,可出现严重并发症,如以急性肾功能衰竭、溶血性贫血和血小板减少为特点的溶血尿毒综合症。,编辑版ppt,14,目前正值夏秋季肠道传染病高发季节,更要注意饮食卫生,尽量不要到卫生条件差的街头摊点就餐;易变质的食物(如吃剩的熟食)应冷藏存放;处理熟食时应洗净手或戴上一次性手套;食物煮熟后应尽快食用,剩菜剩饭食用前应彻底加热;不要食用变质的食物。,广州、佛山、中山、江门、惠州等地学校、工厂食堂和酒楼相继发生10起重大食物中毒事故,中毒人数
4、达到709人,死亡2人。(9月26日10:40:10 新快报),广东: 2008年9月8日9月22日 共14天709人食物中毒,1. 8日,广州番禺区沙圹村6人自行加工进食河豚鱼引起的食物中毒,2人死亡。2. 9日中山市嘉华电子有限公司86名员工食堂进食含冷藏鱼类,造成集体高组胺食物中毒事故。3. 15日中山大学北校区第一学生食堂常温存放熟食,造成细菌污染,致199名学生食物中毒。4. 18日惠州艺园学校97名学生因进食农药污染的蔬菜发生食物中毒事故。5. 20日河源市和平县大坝镇龙狮村106人进食老鼠药污染的牛肉造成食物中毒。6. 22日东莞市黄江镇裕元花园酒店63人进食受污染的蛋糕发生细菌
5、性食物中毒。,重大食物中毒事件31起中毒人数近1200人死亡16人造成这些事故的主要原因:集体食堂供餐条件达不到要求不法分子投毒作案误食有毒动植物及食物原料残留有毒物质,2008年1月1日9月22日,编辑版ppt,18,1.化学性污染:农药、有害金属、多环芳族化合物、杂环胺、N-亚硝基化合物、食品添加剂、食品容器、包装材料中的单体、助剂、二恶英。2.生物性污染:黄曲霉毒素、单端孢霉烯族化合物、伏马菌素、椰毒假单孢菌酵米面亚种食物中毒、大肠埃烯氏菌属食物中毒、单核细胞增多性李斯特菌; 食源性寄生虫病: 隐孢子虫、园孢子虫 食源性病毒: 甲型肝炎 疯牛病 3.特殊食品卫生问题 转基因食品的安全性、
6、 肉乳蛋中兽药的残留问题、功能性食品的安全性。,污染因素,编辑版ppt,19,中毒原因 报告起数 中毒人数 死亡人数 细菌性食物中毒 49 7613 20化学性食物中毒 90 6121 81有毒动植物食物中毒 33 1127 35 其他食物中毒 13 854 10 合 计 185 15715 146,中毒原因分类,健康安全,食物中毒预防 三管齐下!,食品,编辑版ppt,21,食物中毒的含义食物中毒的分类中毒食物,14.1 概 述,编辑版ppt,22,化学性食物中毒:是指摄入了含有化学性有毒有害物质的食品或者把有毒有害物质误作食品摄入后,出现的以急性或亚急性中毒症状为主的疾病。,编辑版ppt,2
7、3,化学性食物中毒的特点:季节不明显不同有毒化学物质表现不同,临床多样化可以由误食引起一般有特效解毒药病死率较高,愈后较差,编辑版ppt,24,化学性食物中毒的分类化学性食物中毒快速检验的程序化学性食物中毒检验的特点,编辑版ppt,25,通常采用快速定性分析和实验室确证分析。快速定性分析适合于可疑目标毒物的快速筛查,通常采用试纸、液体或固体试剂、试剂盒等,通过沉淀反应、颜色反应、免疫学反应、酶抑制率等与标准物质比较定性或半定量。常用的有比色(比浊)法、免疫法以及生物芯片、生物传感器、金(荧光素)标记法等一些现场快速筛选法。目前实验室常用的确证分析方法也可以用于快速检测,如气相色谱法、液相色谱法
8、、气相色谱-质谱法、液相色谱-质谱法等仪器方法,尤其是与相应的质谱数据库配合使用,可以对可疑毒物的进行快速筛查和确证。,化学性食物中毒的快速检验方法,编辑版ppt,26,14.2 水溶性毒物的快速检验,亚硝酸盐的来源,编辑版ppt,27,大量摄入硝酸盐和亚硝酸盐可诱导高铁血红蛋白血症,临床表现为口唇、指甲发绀,皮肤出现紫斑等缺氧症状,可致死亡。主要是由于人体内大量的亚硝酸盐能将血液中的低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白。美蓝硝酸盐的摄入也能减少人体的碘的消化吸收,从而导致甲状腺肿。,中毒机理及症状:,编辑版ppt,28,检验方法(格氏法),原理:,编辑版ppt,29,分光光度法测定食品中环己基氨基
9、磺酸钠;分光光度法测定磺胺类兽药;分光光度法测定亚硝胺总量;粮食中氯化苦的测定;水产品中组胺的测定;,编辑版ppt,30,操作方法,格氏试剂配制:提取:510g样品捣碎,加20ml水+1ml乙酸.检测:,编辑版ppt,31,检验方法(联苯胺-冰乙酸法),原理:亚硝酸盐在酸性溶液中将联苯胺重氮化,然后水解并氧化成红色的联苯醌,可在白色滴板上进行颜色反应,观察有无紫红色产生,以检验亚硝酸盐存在。,编辑版ppt,32,检验方法(联苯胺-冰乙酸法),再与亚硝酸作用生成重氮盐:,重氮盐水解生成联苯二酚:,最后脱氢,氧化成紫红色醌式化合物:,编辑版ppt,33,14.3 挥发性毒物的快速检验,生氰糖苷的毒
10、性甚强,对人的致死量为18mg/kg体重。生氰糖苷的毒性主要是氢氰酸和醛类化合物的毒性。氢氰酸被吸收后,随血液循环进入组织细胞、并透过细胞膜进入线粒体,氰化物通过与线粒体中细胞色素氧化酶的铁离子结合,导致细胞的呼吸链中断。,编辑版ppt,34,生氰糖苷的急性中毒症状包括心智紊乱、肌肉麻痹和呼吸窘迫。氢氰酸的最小致死口服剂量为0.53.5mg/kg体重。氰化钠为0.1g,氰化钾为0.12g。,编辑版ppt,35,处理急性氰化物类物质中毒时,首先应立刻让病人口服亚硝酸盐或亚硝酸酯(如亚硝酸异戊酯),使病人体中的血红蛋白(Fe 2)转变为高铁血红蛋白Fe3),高铁血红蛋白的加速循环可将氰化物从细胞色
11、素氧化酶中脱离出来,使细胞继续呼吸。其后应让病人口服硫代硫酸盐等解毒剂,使氰化物容易形成硫氰化物而随尿排出。,编辑版ppt,37,检验方法(普鲁士蓝法),原理:氰化物在酸性条件下生成HCN气体,可与NaOH-FeSO4生成Na4Fe(CN)6,用盐酸酸化后与部分亚铁离子氧化生成的高价铁离子作用,生成亚铁氰化高铁,即普鲁士蓝。,编辑版ppt,38,HCN NaOH NaCN+H2OFeSO4 6NaCN Na4Fe(CN)6+Na2SO44FeCl3 3Na4Fe(CN)6 Fe4Fe(CN)63+12NaCl,编辑版ppt,39,操作方法,NaOH-FeSO4试纸: 100g/L。步骤: 取5
12、10g样品粉碎,放入100ml锥形瓶,加20ml水+10ml 100g/L酒石酸,立即在瓶口盖上NaOH-FeSO4试纸,缓慢加热,待瓶内溶液沸腾后停止加热,取下试纸浸入10盐酸。,编辑版ppt,40,苦味酸试纸法硫化物、亚硫酸盐或硫代硫酸盐 红色对硝基苯甲醛法缩合反应 红色气-质联用(GC-MS)法 样品在酸性条件下蒸馏出无机氰化物,将氰根离子衍生化,用气相毛细管色谱柱分离,以离子阱质谱检测器检测,为快速检验氰化物是否存在的确证方法,,编辑版ppt,41,14.3 挥发性酚类快速检验,1溴化法 苯酚与溴水反应,能生成三溴苯酚的白色沉淀或浑浊,借以检出苯酚的存在。 2三氯化铁法 三氯化铁能与酚
13、类物质形成蓝紫色化合物,借以检出酚类物质的存在。水杨酸3气相色谱法 食物中毒样品经蒸馏提取挥发性酚类物质后,通过固相萃取柱净化、浓缩后进行气相色谱分离,常用的色谱柱为含硝基对苯二酸改性聚乙二醇的不锈钢色谱柱,或经溴化或酯化后注入毛细管色谱柱(5%苯基甲基硅氧烷),用火焰离子化检测器(溴化时采用ECD检测器)检测,,编辑版ppt,42,14.4 不挥发性有机毒物的快速检验,不挥发性有机毒物:相对分子量较大、结构复杂、不易挥发。酸性有机毒物碱性有机毒物两性有机毒物中性有机毒物,编辑版ppt,43,斯-奥氏法(乙醇-乙醚提取法),编辑版ppt,44,巴比妥类安眠药的快速检验,理化性质:巴比妥酸的衍生
14、物。白色结晶粉末,呈弱酸性。难溶于水,易溶于乙醇、乙醚、三氯甲烷等有机溶剂。加碱成盐后易溶于水。,编辑版ppt,45,巴比妥类安眠药的快速检验,硝酸钴法原理:巴比妥类药物分子结构中的环酰脲,在碱性条件下与钴盐作用生成紫堇色络合物。与米龙试剂中汞盐生成沉淀,沉淀溶于过量米龙试剂中。,编辑版ppt,46,编辑版ppt,47,米龙试剂配制:取汞1ml,加硝酸9ml溶解,再以等量水稀释。,编辑版ppt,48,操作步骤,1.样品提取简易提取法:取样品50g捣碎,加入浓盐酸5ml研磨,再加硫酸铵30g,研磨后加入乙醇50ml和三氯甲烷50ml,过滤,滤渣用三氯甲烷淋洗。分离有机相并水浴挥干,残渣用热水溶解
15、过滤,取滤液备用。,编辑版ppt,49,2.硝酸钴反应:取样品提取液少许,于蒸发皿上挥干,加数滴10g/L硝酸钴无水乙醇溶液,在浓氨水瓶口熏片刻,阳性显紫堇色,阴性显污绿色。,编辑版ppt,50,3.米龙试剂反应:取残渣少许溶于少量水中,呈饱和溶液,滴加米龙试剂12滴,则产生灰白色沉淀,继续滴加米龙试剂,沉淀溶解,表示有巴比妥类药物存在。,编辑版ppt,51,生物碱类的快速检验,生物碱:一类含氮杂环结构的碱性有机化合物。1. 沉淀反应2. 颜色反应3. TLC,编辑版ppt,52,14.5 有毒元素的快速检验,雷因许氏预试验原理:金属铜在酸性条件下,能使砷、汞、银、锑、铋等金属还原成元素状态或
16、生成铜的合金而沉积于铜的表面,显示出不同的颜色及光泽。,编辑版ppt,53,操作方法,1.铜片处理:将铜片或铜丝置于试管中,加入2mol/L硝酸处理,除去酸液水洗,再用乙醇洗涤,后用乙醚洗涤。,编辑版ppt,54,2.取20ml样品于50ml烧杯中,加入5ml盐酸(28)和1ml氯化亚锡盐酸溶液,记录液面位置,加热微沸10min,加入2片铜片,保持20min。,编辑版ppt,55,3.取出铜片,用水洗涤,检查铜片颜色变化情况(大量的汞或铋需要长时间加热)。可初步判断可能有何种金属毒物存在。,编辑版ppt,56,编辑版ppt,57,砷的确证试验,升华法:将预试验变色的铜丝放入一端封口的毛细管,小
17、火加热使铜丝变红色。显微镜下观察,如有正四面体或八面体闪光的结晶,可确定砷化物存在。,编辑版ppt,58,砷的确证试验,砷斑法原理:又称古蔡法,在酸性条件下,五价砷化物可被碘化钾或氯化亚锡还原为三价砷化物,然后与新生态的氢反应生成砷化氢,砷化氢遇溴化汞试纸能产生黄色至棕色的斑点。,编辑版ppt,59,汞的确证试验,升华法:将预试验变色的铜丝放入一端封口的毛细管,小火加热使铜丝变红色。显微镜下观察,如呈现黑色光亮小球,表示有汞存在。,编辑版ppt,60,汞的确证试验(碘化亚铜法),实验原理:碘化亚铜与汞作用,生成红色碘化亚铜汞沉淀。操作:将银白色铜片放入白瓷板凹穴中,加少许碘化亚铜粉将铜片掩盖,
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