实验一水质微生物检测ppt课件.ppt
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1、水微生物检测,南华大学预防医学与放射卫生实验教学中心,教学对象:高等医学院校卫生检验专业学生实验课时:8学时课程类型:专业实验课课程要求:必修每组人数:2人,实验目的与要求,掌握水样采集规则及注意事项。熟悉常用水卫生细菌学指标。熟悉菌落总数、大肠菌群的测定方法及检测意义。学会对所检测的水样作综合分析。,水微生物检测的意义,水体的微生物污染问题日趋严重。在各种水体,特别是污染水体中存在有大量的有机物质,适于各种微生物的生长。水体中微生物污染的来源:土壤,以及人类、动物的排泄物污染。水体中少数致病微生物(主要来自人或动物的粪便污染)可导致某些肠道传染病传播。水微生物检测可用于评价水质情况,预报水质
2、的污染趋势,以保证水质的卫生安全。,在实际工作中,对水质卫生质量的评价和控制,是无法对水体中各种可能存在的致病微生物一一进行检测。一般选择有代表性的一种或一类微生物作为指示菌,通过对指示菌的检测,来了解水体是否受到过的微生物污染,是否有肠道病原微生物存在的可能。,水微生物的检测指标,菌落总数(aerobic bacterial count)是指1ml水样在营养琼脂培养基中,于37经24h培养后,所生长的细菌菌落的总数。检测意义:作为一般性污染的指标,即评价被检样品的微生物污染程度和安全性。水样菌落总数越多,说明水被微生物污染程度越严重,病原微生物存在的可能性越大,但不能说明污染的来源。,水质微
3、生物的检测指标,总大肠菌群(coliform bacteria)是指一群需氧及兼性厌氧的,37生长时能使乳糖发酵,在24h内产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。检测意义:作为粪便污染的指标。水样总大肠菌群数的含量,表明水被粪便污染的程度,而且间接地表明有肠道致病菌存在的可能。,实验内容,水样采集;菌落总数的测定;总大肠菌群的测定。,一、水样采集,采样原则所采集的样品具有代表性。采样容器:选择硼硅玻璃瓶和聚乙烯塑料瓶。不能是新的污染源;不吸收或吸附某些待测组分;不与待测组分发生反应。保证从采样到分析期间,样品各组分的浓度不发生改变。 必须按一般无菌操作的基本要求采集,并保证在运送、贮存过程中不受污染
4、。,自来水水样:先将自来水龙头用火焰烧灼3min灭菌,再开放水龙头使水流5 min(经常用水的水龙头放水13min)后,采集水样于无菌锥形瓶,约占瓶容量80%,以便摇匀水样。水源水水样:选有代表性的地点及可疑地方,一般距水面下1015cm采样。采样后,将瓶塞盖好,再从水中取出。,注意事项严格无菌操作。做好标记:采得水样后应立即记录水样名称、地点、时间等项目。从速送检。水样从采集到检验不应超过2h,在04下保存不应超过24h。,二、菌落总数的测定, 平板菌落计数法,(一)生活饮用水,器材与试剂 无菌1ml吸管1支/组,无菌平皿3个/组,营养琼脂。,方法水样摇匀2025次,使细菌分散。倾注培养:无
5、菌吸取1ml水样分别置于2个空平皿,另一个作空白对照。再倾注15ml琼脂(约45)于平皿中旋转,混匀待琼脂凝固后倒置3724h。菌落计数:用肉眼或放大镜检查,计数平皿内菌落数目。,结果分析与报告计算平均菌落数:报告方式:菌落总数(cfu/ml)。 cfu:colony forming units当检样的菌落数为l100时,按实有数报告;大于100时,采用二位有效数字报告。国家标准(GB5749-2019)规定生活饮用水菌落总数每毫升不得超过100个。,(二)水源水,器材与试剂 无菌1ml吸管6支/组,无菌10ml吸管1支/组。无菌平皿9个/组,营养琼脂。90ml灭菌盐水1瓶(内置适量玻璃珠),
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