实时荧光定量PCR术详解和总结ppt课件.ppt

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2、：Xn=X02n非理想的PCR反应：Xn=X0(1+Ex)n方程式两边同时取对数得: log Xn=log (X0 (1+Ex)n)整理方程式得:log X0= (- log(1+Ex) )n+ log Xn将C(t)和达到C(t)值时终产物的量Xc(t)带入上式得：log X0= (- log(1+Ex) ) C(t)+ log Xc(t) 初始浓度的对数与循环数呈线性关系,n：扩增反应的循环次数Xn：第n次循环后的产物量X0：初始模板量Ex：扩增效率,初始模板量越多，C(t)值越小C(t)与初始模板浓度的对数值成线性关系,实时定量PCR标准曲线,定量原理,浓度的对数值与循环数呈线性关系，根据样品扩增达到域值的循环数（Ct值）就可分析样品中起始模板量,定量PCR的实验步骤,标准菌株DNA的提取QPCR探针和引物的设计阳性克隆质粒的构建荧光定量PCR反应定量标准曲线重复性实验灵敏性实验,实验材料,