基因工程总复习课件.ppt

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1、总复习,总复习,基因工程,1 基因工程概论,2 天然DNA的制备,3 分子克隆工具酶,4 分子克隆载体,5 表达载体,6 PCR技术及其应用,7 目的基因的制备,8 基因克隆的筛选策略,10 细菌基因工程,11 酵母基因工程,12 植物基因工程,13 动物基因工程,14 基因工程的安全,9 转基因及其表达,基因工程1 基因工程概论2 天然DNA的制备3 分子克隆工,1 名词解释 基因工程、遗传工程、DNA重组、基因克隆、基因操作 2 简要回答下列问题 1） 简述基因工程研究发展历史。 2） 简述基因工程研究的主要内容。 3） 说明基因工程的理论基石和技术基础。 4） 简述基因工程的主要应用领域

2、。 5） 用5个词描述基因工程的过程。,第1章 概论,1 名词解释第1章 概论,1 名词解释 DNA变性；DNA复性；Tm值 2 简要回答下列问题 1） 举例说明浓缩DNA或RNA的方法。 2） 简述DNA与基因工程有关的主要特性。 3） 简要说明天然DNA的主要提取过程。,第2章 天然DNA的制备,1 名词解释第2章 天然DNA的制备,1 名词解释 限制性核酸内切酶；同裂酶；同尾酶；限制性核酸内切酶星活性；限制性图谱；平末端；粘性末端；衔接头；连接子 2 简要回答下列问题 1）基因工程中常用的酶有哪些？各有何的用途？ 2）何谓定向克隆？如何进行？ 3）说明限制性核酸内切酶产生Star活性的原

3、因及其克服措施。,第4章 分子克隆工具酶,1 名词解释第4章 分子克隆工具酶,1 名词解释 载体，克隆载体，表达载体, 质粒，cccDNA(scDNA)，松弛型质粒，严谨性质粒，附加体， 选择标记，转化子，重组子，cosmid，噬菌粒载体，YAC，PAC，BAC，MAC，基因打靶，定位整合平台，定位整合克隆载体，穿梭载体，结合型质粒，非结合型质粒，迁移作用，显性质粒，隐蔽质粒，组织特异性表达载体，分泌型表达载体，诱导型表达载体，报告载体，反义表达载体，RNAi2 简要回答下列问题 1）按来源可将基因克隆载体分为哪几类？并说明各自的主要特点。 2）作为克隆载体必须具备的主要条件是什么？ 3）作为

4、表达载体必须具备的主要条件是什么？ 4）如何鉴定转化子、重组子和转基因生物？,第4、5章 分子克隆载体,1 名词解释第4、5章 分子克隆载体,1 名词解释 PCR, RT-PCR, 定量PCE, 反向PCR, RACE, TAIL-PCR, 巢式PCR 2 简要回答问题 特殊PCR主要有那些? 各自的原理是什么? 如何设计PCR引物?3 分析讨论 试述PCR反应的原理与应用.,第6章 PCR技术及其应用,1 名词解释第6章 PCR技术及其应用,1 名词解释 SSH、RDA、DDRT-PCR、ESTs、酵母双杂交、cDNA文库、基因组文库2 简要回答问题 1）简述cDNA文库构建的原理与步骤 2

5、）简述基因组文库构建的原理与步骤 3）简述酵母双杂交的原理与步骤3 分析讨论 试述分离和筛选目的基因的主要方法和原理.,第7、8章 目的基因制备与筛选策略,1 名词解释第7、8章 目的基因制备与筛选策略,一、名词解释 受体细胞、感受态细胞、转化子、重组子、-互补、目的重组子、转基因沉默、启动子、增强子、终止子、绝缘子、反义子、SD序列、外显子、内含子、融合蛋白、表达标签蛋白、包涵体、RNAi、 MicroRNA二、思考题 1 简述转基因的主要方法与原理。 2 简述在基因工程主要表达受体中提高表达效 率的策略。 3 简述重组子的筛选与分子鉴定的主要方法和原理。 4 说明原核与真核生物基因表达调控

6、的特点。 5 说明转基因沉默的机制与克服措施。,第9章 转基因及其表达,一、名词解释第9章 转基因及其表达,1 名词解释 融合表达, 融合蛋白, 分泌表达, 包涵体, 转导, 转化，转染，表面展示.2 简要回答下列问题 试述促进转基因在大肠杆菌中表达的策略。 简述原核生物基因工程常用的载体和受体细胞。 简述细菌基因工程的主要应用。 简述外源基因在细菌中的主要表达形式及优缺点。,第10章 细菌基因工程,1 名词解释第10章 细菌基因工程,1 名词解释 YEp; YIp; YRp; YCp; 营养缺陷型2 简答题 简要描述表面展示和酵母双杂交的原理。 酵母基因工程的主要宿主有哪些 ? 酵母基因工程

7、的载体有哪些 ?各有和特点? 酵母转基因的方法有哪些? 为什么说酵母是一个非常重要的基因工程宿主?3 分析和讨论 如何在酵母中实现高效分泌表达?,第11章 酵母基因工程,1 名词解释第11章 酵母基因工程,1 名词解释 植物整体转化, 全能性, 组成性表达启动子, 组织转星星表达启动子, 诱导表达启动子, 花蕾浸泡转化法, 清洁DNA转化, Ti质粒, 卸甲Ti质粒, 双元载体系统 2 解答题 植物转基因的方法主要有那些? 植物转基因的载体主要有那些? 如何利用农杆菌进行植物遗传转化? 转基因植物的主要成就有哪些?3 分析讨论题 如何控制转基因在转基因植物中的表达?,第12章 植物基因工程,1

8、 名词解释第12章 植物基因工程,1 名词解释 胚胎干细胞, 限制性内切酶介导的整合, 插入载体, 替代载体, 稳定表达，瞬时表达，脂质体转化，乳腺生物反应器 2 简答题 进行动物细胞转基因的目的是什么? 主要载体有哪些？转基因方法有哪些？ 怎样获得转基因老鼠？ 如何获得转基因蛙? 转基因羊乳腺生物反应器是如何获得的?3 分析讨论 如何实现在高等动物中细胞中的高效稳定表达?,第13章 动物基因工程,1 名词解释第13章 动物基因工程,1 名词解释（10个30分）2 填空题（有的话20分）3 载体填图（10分）4 匹配题（10分）5 简答题（10分或30分）6 设计题 （20分）,考试题型,1 名词解释（10个30分）考试题型,1. 酵母2质粒复制原点 2.,3 4.,5. 6.,1. 酵母2质粒复制原点 2.3,1、 启动子 受体细胞 NOS启动子 农杆菌 SV40早期启动子 哺乳动物 玉米ubiquitin-1启动子 高等植物2、选出适合扩增图示序列之间DNA的PCR引物。3、 载体或载体源 受体细胞 Ti质粒 烟草 pYES2 牛 腺病毒 大肠杆菌 pBR322 酵母 人类,1、 启动子,