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1、常见凝血项目检测和临床意义,常见凝血项目检测和临床意义,凝血瀑布学说,凝血瀑布学说激活XII XIIaXI,D-Dimer,E,纤维蛋白凝块,纤维蛋白原,D,E,D,纤维蛋白单体 + 纤维蛋白肽,可溶性纤维蛋白 聚合体,XIIIa,凝血酶,纤溶酶,凝血和纤溶,纤维蛋白降解产物,纤维蛋白原 降解产物,D-DimerE纤维蛋白凝块纤维蛋白原DED纤维蛋白单体 +,凝血,我们实验室凝血检测包括PT、APTT、TT、纤维蛋白原含量、 D-Dimer 、AT-和FDP的测定。现主要用于手术前患者、产前孕妇凝血功能筛查,某些凝血因子异常疾病的检测以及口服抗凝药物的监测等。,凝血 我们实验室凝血检测包括PT
2、、APTT、T,凝血检测的方法学,目前可开展的血栓/止血成分检测主要包括三种方法:凝固法、底物显色法、免疫比浊法。Stago公司:PT、APTT、FIB、TT:凝固法。D-二聚体/ FDP:免疫比浊法。AT-:发色底物速率法。,凝血检测的方法学目前可开展的血栓/止血成分检测主要包括三种方,摆动磁珠法,摆动磁珠法,摆动磁珠法,摆动磁珠法,检测原理,D-二聚体/ FDP检测原理:免疫比浊法。 用光度计检测含有乳胶颗粒的悬浊液吸光度的变化。含有共价包被特异抗体的乳胶颗粒悬浊液与待检样本进行混合。抗原抗体发生反应,导致乳胶颗粒发生凝集,诱导反应介质浊度增加。浊度的增加反映在吸光度的增加上,用来测试样本
3、中D-二聚体/ FDP的水平。 AT-检测原理:发色底物速率法。 AT在肝素存在时是快速有力的凝血酶抑制物。待测血浆与肝素和过量凝血酶(试剂1)共同孵育;剩余凝血酶通过对合成产色底物(试剂2)的酶促反应来定量。由于凝血酶的数量在第一步中被血浆AT成比例地消耗,因此剩余的凝血酶在第二步反应中与血浆AT水平呈反比。此测定不受治疗剂量肝素影响。,检测原理 D-二聚体/ FDP检测原理:免疫比浊法,PT,PT是检查涉及外源性和共同凝血途径的过筛实验,如因子VII,X,V,II和 I。PT同时用于监测口服抗凝剂的用量,是监测口服抗凝剂的首选指标。PT试剂含肝素拮抗剂。,PT PT APTTXIIXIIX
4、VIIIVII X V,PT,一、PT延长:1、先天性因子、缺乏症和低(无)纤 维蛋白原血症;2、获得性凝血因子缺乏:DIC、原发性纤溶亢进、 肝病阻塞性黄疸和维生素K缺乏症;3、血循环中有抗凝物质:口服抗凝剂如肝素和抗凝血因子抗体、抗体。二、PT缩短:先天性因子增多症、口服避孕药、高凝状态和血栓性疾病。三、口服抗凝剂的检测:据报道,在口服抗凝剂过程中,维持PT在正常对照的1-2倍最为适宜。,PT一、PT延长: PT APTTXIIXIIXVIII,APTT,APTT是在体外模拟内源性凝血的全部条件,测定血浆凝固需要的时间,用以反应内源性和共同凝血途径凝血因子(因子XII,XI,IX,VIII
5、,X,V,II 和I)是否异常。,APTT APTT是在体外模拟内源性凝血的全部条件,常见凝血项目检测和临床意义讲义课件,TT,TT是一评估纤维蛋白形成过程的检测项目,TT同样也是一用于补充PT和APTT的筛选实验。原理:在预定量凝血酶作用下,正常血浆会在有限的和稳定的时间内发生凝固。,TTTT是一评估纤维蛋白形成过程的检测项目,TT同样也是一用,TT,TT延长表示FIB异常质量(异常纤维蛋白原血症)数量: 先天性低或无纤维蛋白原血症;获得性低纤维蛋白原血症(肝病,DIC);存在肝素、水蛭素;存在FDP。,TTTT延长表示,FIB,纤维蛋白原在肝脏和巨核细胞内合成,半衰期为3-5d,含量,成人
6、:2-4g/L;新生儿:1.25-3g/L。在过量凝血酶的作用下,稀释血浆的凝固时间与血浆中的纤维蛋白原水平有直接关系。,FIB纤维蛋白原在肝脏和巨核细胞内合成,半衰期为3-5d,含,FIB临床应用,手术前的筛选试验诊断质量缺陷(异常纤维蛋白原血症)数量缺陷(先天性或获得性) FIB水平升高炎性综合征,糖尿病,肥胖,血栓性相关性疾病。,FIB临床应用,D-Dimer,交联纤维蛋白的特异性降解产物(FnDPs) 继发性纤溶特有代谢产物,反映凝血与纤溶激活的标志物。 生理性:抗血栓; 降解纤维蛋白/原; 降解凝血因子( FV、FVIII、FX、FVII、FXI、 FXIII); 病理性:纤溶亢进出
7、血。,D-Dimer交联纤维蛋白的特异性降解产物(FnDPs),FDP,FgDPs和FnDPs( D-Dimer)统称纤维蛋白(原)降解产物(FDPs),具有抗血小板聚集和抗凝作用。FgDPs:Fg降解产物。,FDPFgDPs和FnDPs( D-Dimer)统称纤维蛋白,AT-检测的临床应用,AT-是一种由肝脏合成的分子量约为58000道尔顿的糖蛋白,是一种凝血酶的抑制剂。一、诊断遗传或获得性AT-缺乏症;二、疑难DIC诊断标准;三、监测肝素是否有效:肝素抗凝作用依赖AT;四、肝病(AT合成不足):与肝功能受损程度或病情严重程度相关。,AT-检测的临床应用 AT-是一种由肝脏合成的,影响凝血指
8、标的相关因素,1.放置时间对检测结果的影响与性别和年龄无统计学意义。2.样本量过少2ml, 样本存放时间过长, 采血部位为输液同侧, 标本含有凝块。,影响凝血指标的相关因素1.放置时间对检测结果的影响与性别和年,样本量,结论:血量减少使凝固时间延长,血量增加使凝固时间缩短。,样本量结论:血量减少使凝固时间延,放置时间长短(4),结论:PT在0-8h呈现下降趋势,可能与因子活化有关,PT在24h略有升高;APTT (4h)随时间有逐渐上升的趋势,各时间点的均值均高于基线水平,可能与因子活性逐渐降低有关;TT随时间呈逐渐上升的趋势。FIB 值随时间的增加呈现逐渐下降的趋势,但差异并无统计学意义,P
9、T、APTT与TT在多次测量的时间点上差异均由统计学意义。,放置时间长短(4)结论:PT在0-8h呈现下降趋势,可能与,输液同侧采血,输液同侧采血,凝块,凝块,凝固反应曲线,整个反应过程包括基线期、加速器、减速期和平台期(终点)。基线期代表凝血因子被激活,生成凝血酶的过程,也就是凝血的启动阶段,时间相对较长;加速和减速期代表凝血酶发挥作用,纤维蛋白凝块形成的过程;平台期凝固反应完成。 研究表明:在正常情况下,20%-50%的凝原物质就能满足凝血要求。所以体外实验时,一部分凝血因子消耗在一定范围对凝血影响相对较小。 血液有凝块,反应基线期几乎是没有的,反应开始前,凝血因子大部分已经处于活化状态,缩短的基线期时间可能远远大于因为凝血因子减少而延长的时间。,凝固反应曲线 整个反应过程包括基线期、加速器、减速,样本采集,另外,样本采集时,长时间扎止血带,静脉穿刺不能一次成功,会造成血管损伤,或组织因子进入血液,使凝血酶形成,加速血液凝固,影响检测结果。 血液有凝块,条件允许就会启动继发性纤溶系统, D-Dimer就会形成,必然会有D-Dimer升高。,样本采集 另外,样本采集时,长时间扎止血带,,谢谢大家! 欢迎指教!,谢谢大家!,
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