大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响课件.ppt
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1、,大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响,主讲:房向东,The effect of Emodin on the human renal tubular epithelial to mesenchymal transition induced by albumin,大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响,1,大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响主讲:房向东T,概 要,大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响,2,研究背景1技术路线与方法2结 果3讨 论4结 论,蛋白尿不仅仅是肾脏损伤的生物学标志,还是加速肾脏疾病向终末期肾衰进展的主要危险因素之一。,研究背景,大黄
2、素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响,3,研究背景大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞,肾脏损伤,蛋白尿,临床表现,反作用,物理损伤,诱导化学趋化因子、炎症因子,激活补体,促进细胞凋亡,损伤及加速纤维化机制,大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响,4,肾脏损伤蛋白尿临床表现反作用物理损伤诱导化学趋化因子、炎症因,病理变化,肾脏纤维化,研究背景,大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响,5,1、正常肾单位的丢失和肾结构的破坏 2、成纤维细胞及肌成纤维,肾脏纤维化,肾间质纤维化是关键!,间质纤维化的程度更能预测肾功能的变化!,研究背景,大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影
3、响,6,肾间质纤维化肾小球硬化肾脏纤维化肾间质纤维化是关键!间质纤维,肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(TEMT) 在肾间质纤维化的发生发展中有着重要的作用,它被定义为肾小管上皮细胞丢失了上皮表型,而获得新的肌成纤维细胞特征的过程。,研究背景,上皮细胞,肌成纤维细胞,大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响,7,肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(TEMT)研究背景,化学名:3-甲基-1,3,8-三羟基蒽醌,大黄素,传统的生物学作用:抗菌消炎、抗肿瘤、免疫抑制、保肝、护肾,研究背景,大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响,8,化学名:3-甲基-1,3,8-三羟基蒽醌大黄素传统的
4、生物学作,体内外研究发现大黄素可延缓糖尿病肾病、梗阻性肾病等肾脏纤维化发生,其中阻滞TEMT过程发挥重要地位。,研究背景,大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响,9,体内外研究发现大黄素可延缓糖尿病肾病、梗阻性肾病等肾脏,研究目的,白蛋白能否诱导HK-2细胞转发生转分化过程、促进细胞外基质合成,大黄素对白蛋白产生的上述过程是否产生影响,大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响,10,研究目的白蛋白能否诱导HK-2细胞转发生转分化过程 大黄素对,技术路线与分组,空白对照组,大黄素对照组,大黄素干预组,白蛋白诱导组,HK-2细胞,无处理因素,20g/ml大黄素作用0、12、24、48
5、h,5mg/ml白蛋白刺激时同时加入20g/ml大黄素作用0、12、24、48h,观察各组细胞形态学变化,收集细胞总RNA半定量检测-SMA、E-cadherin、FNmRNA的表达,5mg/ml白蛋白作用0、12、24、48h,大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响,11,技术路线与分组空白对照组 大黄素对照组大黄素干预组白蛋白诱,各组实验重复3次,所有数据以xs表示,行方差齐性检验,多组间计量资料采用单因素方差分析用SPSS12.0软件对数据进行处理以P0.05为有显著性差异, P0.01有非常显著性差异,统计方法,大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响,12,各组实验重复
6、3次,所有数据以xs表示,行方差齐性检验,多组,RT-PCR,正常HK-2细胞仅表达少量的-SMA、FNmRNA,而E-cadherinmRNA的表达较强。,E-cadherin,-SMA,FN,M 0 12 24 48h,大黄素对照组上述因子的表达与正常对照组无差异,结 果,大黄素对白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响,13,RT-PCR正常HK-2细胞仅表达少量的-SMA、FNmR,白蛋白可诱导HK-2细胞发生表型转化,即E-CadherinmRNA的表达下调,-SMAmRNA的表达上调,与0h比较,12h后即有差异,48h后差异显著,p0.01。而同时加入20g/ml大黄素作用后,其变
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