宫颈标本处理的病理学技能课件.ppt

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1、宫颈标本处理的病理学技能,宫颈标本处理的病理学技能,病理技术操作流程,脱 水,包 埋,切 片,HE 染 色,封 片,阅 片,取 材,病理技术操作流程脱 水包 埋切 片HE 染 色封 片,取材,核对病人的姓名,科室,住院号等。核对标本性质,取出的部位,标本数目, 临床诊断是否做标记:如带线、切缘、锥顶等,取材核对病人的姓名,科室,住院号等。,活检标本的取材,活检组织及时固定固定液总量标本5倍以上取材时应描述活检组织大小、颜色、质地固定好的组织应放滤纸包好放入包埋盒,活检标本的取材活检组织及时固定,注意:,较小较碎的组织应用纱布或滤纸包裹,滴入伊红放入包埋盒内直径小于0、1cm的标本,可描述“针尖

2、大小”,直径大于0、1cm的标本应记录实际大小,切忌用“米粒大小”或“绿豆大小”等字样描述。厚度大于0、5cm 的标本,切开描述切面,切开包埋。大体可辨认的息肉样组织,则描述之:如-色息肉状-质地组织-块,大小-,注意:较小较碎的组织应用纱布或滤纸包裹,滴入伊红放入包埋盒内,组织学检查的组织厚度不得超过3mm 同时长短不能超过使用的包埋盒的大小。大多数实体标本应该切成 边长10-15mm 厚2-3mm,大小:,组织学检查的组织厚度不得超过3mm大小:,大体描述,1、_色_(质地)组织1 块,大小为*cm2、_色_(质地)组织2 块,大小分不为*cm 及*cm3、_色_(质地)组织3 块(或3

3、块以上),最大者大小为*cm,最小者大小为*cm,大体描述1、_色_(质地)组织1 块,大小为*cm,阴道镜活检标本的取材方法,用品:装标本用的冻存管/标本瓶,内置固定液。0、5cm的微 孔滤膜小块。牙签、镊子、记号笔与登记本。,阴道镜活检标本的取材方法用品:装标本用的冻存管/标本瓶,内置,方法:用戴有一次性乳胶手套的左手食指紧贴活检钳,右手 持牙签,将活检钳内钳取的标本,拨到食指上摊平,用已备好的滤膜贴附上面,拇指轻压,迅速置于已装好固定液的标本瓶中,固定液的总量必须大于标本块的5倍以上。目的:便于包埋过程中的定位, 防止埋面不当造成组织的平 切。,阴道镜活检标本的取材方法,方法:用戴有一次

4、性乳胶手套的左手食指紧贴活检钳,右手 持牙签,宫颈标本处理的病理学技能-课件,宫颈锥切标本取材,描述锥形体的大小(直径与深度)与形状,应该测量基底宽度及高度,描述颜色、外观、体积(应测量忌用比拟)、质地(软,中等、硬等)上皮:颜色,光滑,糜烂,修复,撕裂,肿块(大小,形状,部位),囊肿(内容物,大小)往常活检的部位,宫颈锥切标本取材描述,宫颈标本处理的病理学技能-课件,宫颈锥切标本,取材1、 新鲜状态下用缝线标记12 点位置2、 将一把锋利的刀尖插入宫颈管在12 点位置纵向剪开 标本(如没有定位,可在任一部位剪开)3、 粘膜面朝上钉于软木板上固定过夜,宫颈锥切标本取材,取材:4、 用墨汁小心涂

5、抹手术切缘5、 间隔23mm 做顺时针方向纵性切面,切取的每一面均应包罗鳞柱交界处上皮,必要时可修剪掉部分间质。 每一个蜡块在3个不同的平面上切片,以观察切缘情况。,宫颈锥切标本,取材:宫颈锥切标本,宫颈锥切标本,宫颈锥切标本,宫颈锥切标本,宫颈锥切标本,宫颈锥切标本的取材,宫颈锥切标本的取材,宫颈锥切标本的取材,宫颈锥切标本的取材,宫颈标本处理的病理学技能-课件,宫颈癌根治标本,子宫切除标本(经腹)1、 测量标本大小并称重2、 辨认子宫的前后壁 腹膜反折 附件,宫颈癌根治标本子宫切除标本(经腹),剖开方式 从前壁宫颈外口处中央向上纵行剪开宫壁至子宫底,然后呈“一”字型切向双侧宫角、 用锋利的

6、刀从宫颈两侧一直打向双侧宫角将子宫分为前后两部分、,剖开方式,宫颈标本处理的病理学技能-课件,宫颈标本处理的病理学技能-课件,子宫切除标本(经腹)3、 如有体积大的肿瘤,平行切开4、 钉于软木板上固定过夜,宫颈癌根治标本,子宫切除标本(经腹)宫颈癌根治标本,子宫切除标本描述,子宫切除术的类型,包罗的器官浆膜面的颜色,纤维性粘连,肿瘤宫颈外口直径,鳞柱状交界处粘膜性状宫颈管长度,粘膜性状,切面囊肿宫体内膜:外观、厚度、出血、息肉、囊肿、肿瘤子宫肌壁:厚度、出血点或斑、肿瘤(部位、数量、大小、 出血、坏死、钙化)输卵管:根部其形状、粗度,作横切面卵巢:大小,质地、颜色,切面,子宫切除标本描述子宫切

7、除术的类型,包罗的器官,子宫切除标本取材,1、 宫颈从宫颈外口以上大约2、5cm 处离断宫颈,以锥切标本方式取材并分不标记部位。宫颈深部浸润性癌:至少取3 块,其中至少有1 块为肿瘤浸润最深处,1 块包罗宫颈全层应取阴道壁切缘与左,右侧宫旁组织,子宫切除标本取材1、 宫颈,2、 宫颈管如有肿瘤则按肿瘤取材原则取材3、 宫体如没有明显的肿瘤:接近宫底处至少取2 块,尽估计包括宫体全层,任何大体异常处另取如有明显的肿瘤:肿瘤至少取3 块,其中至少有1 块为肿瘤浸润最深处1 块包罗宫体全层,非肿瘤性子宫内膜取2 块,宫体与宫颈交界处取1 块,子宫切除标本取材,2、 宫颈管子宫切除标本取材,4、 肌瘤

8、 3 个以下每个肌瘤至少取1 块,体积大者可多至3 块,3 个以上认真观察每个肌瘤的不同切面,切面性状相同或相似者共取34 块即可,任何大体上的异常的区域均分布取材。、宫体肌壁 有出血或灰红色斑点状区域多取6、卵巢与输卵管7、各站淋巴结,子宫切除标本取材,4、 肌瘤子宫切除标本取材,卵巢切除标本描述,_侧卵巢切除标本一件,大小为*cm,表面_色,光滑/凹凸不平,有/无乳头状突起。垂直于卵巢长轴做平行切面,见切面呈_色,可见黄、白体结构。局部见囊腔,大小为*cm,单/多房,内壁光滑/有突起,囊壁厚*cm,内容物淡黄色清亮液体。,卵巢切除标本描述 _侧卵巢切除标本一件,大小为*,单纯或预防性切除标

9、本取12 块囊肿剔除标本至少取3 块,尽量囊壁最厚处,薄壁囊肿最好打卷取材,良性畸胎瘤应取到头节复杂的囊性标本尽量多取乳头处及囊壁较厚处实性肿瘤部分依照实性肿瘤取材,卵巢切除标本取材,单纯或预防性切除标本取12 块卵巢切除标本取材,输卵管处理步骤,切开前固定标本,假如附着在子宫上,则应在原位固定测量输卵管长度与最大直径 假如输卵管大小相对正常,则每隔5mm 连续切开并检查,注意不要完全切断假如输卵管明显增大,则将输卵管完全纵向剖开,如需要再做平行切面,输卵管处理步骤切开前固定标本,假如附着在子宫上,则应在原,输卵管描述,输卵管长度与最大直径浆膜:纤维素,出血,纤维性粘连至卵巢或其她器官壁:厚度

10、异常？破裂？如有,则描述位置伞端的外观:开放？闭合？内翻？管腔:明显？扩张？内容物;假如异常增多测量直径粘膜:萎缩？增厚？,输卵管描述输卵管长度与最大直径,分不在峡、壶腹及伞部各取1 块,输卵管取材,分不在峡、壶腹及伞部各取1 块输卵管取材,宫颈标本处理的病理学技能-课件,宫颈标本处理的病理学技能-课件,宫颈标本处理的病理学技能-课件,宫颈标本处理的病理学技能-课件,标本为全切/阴式切除的全子宫,部分阴道壁及左/右/双侧附件。阴道壁长*cm,周径为*cm。子宫大小为*cm,浆膜面_色,光滑/不光滑/粗糙/凸凹不平见多个隆起。子宫颈外口呈_色,粘膜光滑/粗糙/糜烂/中重度糜烂/见一内生性/外生性

11、肿物(肿物大小为*cm,切面呈_色,侵及肌层/外膜层,向上累及/未累及子宫内膜)。,标本为全切/阴式切除的全子宫,部分阴道壁及左/右/双侧附件。,宫颈管长*cm,粘膜呈_色,可见一/多个息肉/小囊肿,大小为*cm,囊内容_,子宫内膜呈_色,光滑/粗糙/见一/多个息肉状突起/见一隆起型肿物(肿物大小为*cm,切面呈灰白/灰红色,侵及肌层/外膜层,向下累及/未累及宫颈)。,宫颈管长*cm,粘膜呈_色,可见一/多个息肉/小囊肿,大小为,子宫内膜厚*cm,子宫体肌壁厚*cm,于内膜下/肌壁间/浆膜下可见一个/多个_色结节状肿物,大者大小为*cm,小者大小为*cm,切面_色,编织状明显/不明显,质地_,

12、与周围肌壁组织分界清楚/不清楚,其余肌壁组织切面可见/未见散在暗红色区域。左侧输卵管长*cm,直径为*cm,卵巢大小为*cm,右侧输卵管长*cm,直径为*cm,卵巢大小为*cm。,子宫内膜厚*cm,子宫体肌壁厚*cm,于内膜下/肌壁间/浆膜,宫颈标本处理的病理学技能-课件,总技术流程(1)固定:(2)脱水:(3)透明:(4)浸蜡:(5)包埋:(6)切片:(7)烤片:(8)HE染色,常规制片技术,总技术流程常规制片技术,二次固定固 定 脱 水 透 明浸 蜡置换作,固 定,常用10%中性甲醛固定液配方: 市售甲醛(40%) 100ml D、W、 900ml 磷酸二氢钠 4g 磷酸氢二钠 6、5g

13、固定时间4h以上,大标本应在24h以上,固 定常用10%中性甲醛固定液配方:,固定是组织制片的基础及关键步骤 固定是否完全,影响着整个制片的过程 是整个标本处理过程的一个主要环节,固 定,固定是组织制片的基础及关键步骤 固 定,固定目的: 1、保持组织形态学特征清楚与稳定2、阻止组织、细胞自溶与腐败3、凝固或沉淀组织细胞内物质 4、保存组织细胞抗原性5、使组织保持一定的硬度与弹性,固 定,固定目的: 固 定,一种好的固定液特性:,1、渗透力相对较强,能迅速渗入组织内部2、组织收缩、膨胀或变硬相对特别小3、能够硬化、固化组织,增加组织硬度4、使得组织对染料产生较强的亲与力,并产生较佳的折光率,一

14、种好的固定液特性:,影响固定因素:,固定液类型及酸碱度 固定液浓度 固定时间与组织体积固定的温度,影响固定因素:固定液类型及酸碱度,固定液浓度,固定液浓度过低达不到固定效果,浓度过高穿透力降低,易引起组织中央固定不良。,福尔马林的浓度大于10%的会增加组织变硬与收缩的程度。,固定液浓度福尔马林的浓度大于10%的会增加组织变硬与收缩的程,甲醛 酒精 冰醋酸 丙酮,甲醛 酒精 冰醋酸 丙酮,宫颈标本处理的病理学技能-课件,宫颈标本处理的病理学技能-课件,固定时间与组织体积,一般4-24小时 组织取材厚度原则在4mm以内 关于免疫组化而言:固定不足,组织抗原弥散,结构不佳,固定过度,抗原破坏。组织固

15、定后如不能及时进入脱水,可置70%酒精中进行适度保存。,固定时间与组织体积 一般4-24小时,固定温度,温度降低,减慢了固定液渗透速度;温度升高,分子弥散增加,分子活动加快,渗透速度加快。大多数组织适宜的固定温度为25C,全自动脱水机温度一般控制在35C左右 。一般不建议加热固定,固定温度,脱水原则: 1、将组织内水分脱干净但又不使组织过度脱水 2、酒精脱水应由低浓度至高浓度进行 脱水剂特性及要求: 1、能与水、透明剂在任何比例下混合 2、对组织的穿透性能良好 3、脱水速度快 4、对组织有一定硬化作用,脱水,脱水原则: 脱水,酒精: 最常用脱水剂,具有亲水性,能溶于水与其她有机 溶剂,脱水力强

16、,能硬化组织。 能特别好与透明剂混溶 易使组织收缩、变脆,导致透明剂难进入组织 从低浓度开始逐级增加浓度,脱水,酒精: 脱水,低浓度酒精在组织中穿透力特别强,比高浓度更易渗透到组织内部组织在低浓度酒精中脱水充分,高浓度只是脱去从低浓度到高浓度之间的水分 高浓度酒精渗透力不强,延长时间意义不大,反而 会使得组织收缩、变脆,脱水,低浓度酒精在组织中穿透力特别强,比高浓度更易渗透到组织内部脱,75%酒精(1h)85%酒精(1h)95%酒精(1h30)95% 酒精 (1h)100%酒精 (1h30)100% 酒精(1h),脱水,75%酒精(1h)85%酒精(1h)95%酒精(1h,二甲苯(1h)二甲苯

17、(1h) 脱水 蜡(1h30)58-60蜡(1h30)58-60 蜡(1h) 58-60 蜡温过高可降低浸蜡时间,浸蜡用的石蜡要定期更新,保持纯度,透明,二甲苯(1h)二甲苯(1h)透明,透明剂在脱水剂与石蜡之间起着桥梁作用 它能与两种溶液相溶 在此过程中,因组织块中的水分被透明剂取代,其 折射指数接近于组织蛋白的折光指数,组织块变得 透亮。,透明,透明剂在脱水剂与石蜡之间起着桥梁作用 透明,二甲苯: 最常用的透明剂 无色透明、有毒性,不溶于水、易挥发 透明力强容易使得组织收缩、变形、变脆 长期接触会呼吸道黏膜有刺激作用,透明,二甲苯: 透明,置换组织中的透明剂,石蜡渗入组织 组织浸蜡、包埋,

18、实质上一个目的两个步骤 石蜡是最常用的浸润剂与包埋剂 一般用于浸蜡的石蜡熔点为56-58C 浸蜡温度应高于石蜡熔点2-4C,浸蜡,置换组织中的透明剂,石蜡渗入组织 浸蜡,采纳石蜡包埋法镊子夹取组织薄片,立埋(切记不能平埋)于包埋模中(埋鳞状上皮的那面)。把包埋修好的蜡块按号顺序排列。放入4冰箱中保存待切片,包埋,采纳石蜡包埋法包埋,宫颈标本处理的病理学技能-课件,宫颈标本处理的病理学技能-课件,注意调节组织平面,使之保持垂直,并与刀刃平行。切片机的切片厚度标尺,一般34nm 活检组织需连续切片,每张切片上4-8张组织片。,切片,注意调节组织平面,使之保持垂直,并与刀刃平行。切片,宫颈标本处理的

19、病理学技能-课件,宫颈标本处理的病理学技能-课件,宫颈标本处理的病理学技能-课件,石蜡切片烤后从温箱中拿出应迅速浸入二甲苯洗去切片中的石蜡。时间宁长勿短,否则脱蜡不尽无法着色。,HE染色,HE染色,宫颈标本处理的病理学技能-课件,各级酒精洗去切片中的二甲苯,使切片逐级酒精入水。,HE染色,各级酒精洗去切片中的二甲苯,使切片逐级酒精入水。HE染色,苏木精染色时间:依染液的新旧与着色能力强弱有关,染色时间应随时观察切片着色程度伊红染色时间:染色程度应以苏木精对核的着色程度为参照标准,以求达到对比鲜明。,HE染色,苏木精染色时间:依染液的新旧与着色能力强弱有关,染色时间应随,宫颈标本处理的病理学技能

20、-课件,脱水、透明,HE染色,脱水、透明HE染色,中性树胶浓度适宜。过浓气泡不易扩散,不易排出。过稀易溢出玻片,胶内二甲苯挥发后产生气泡不便观察。,封固,中性树胶浓度适宜。封固,建议每个实施单位,有2名病理医师阅片,假如诊断一致,确定诊断,假如不一致,应增加第三位医师阅片,对确实有争议的病例,可请上级专家阅片诊断。,病理阅片,病理阅片,鳞状细胞癌的组织学报告内容包括以下几个方面:1、组织学类型及分级2、肿瘤部位3、浸润深度或厚度4、肿瘤大小5、血管淋巴管浸润6、淋巴结状况7、切缘状况,诊断报告,鳞状细胞癌的组织学报告内容诊断报告,宫颈癌 微浸润癌 病理报告模板,宫颈,LEEP,宫颈锥切,宫颈切

21、除术,子宫切除术浸润性癌浸润深度:mm浸润横径:mm淋巴管/血管间隙受累:切缘 宫颈内口: 宫颈外口: 深部:其她,宫颈癌 微浸润癌 病理报告模板宫颈,LEEP,宫颈锥切,宫颈微浸润癌诊断模板 范例,宫颈LEEP活检:1、子宫颈微小浸润性鳞状细胞癌,位于前唇(0点至3点) 浸润深度:3mm,可见两处病灶浸润深度:5mm 淋巴管/血管间隙受累:未查见2、切缘: 宫颈内口切缘:4点处可见浸润癌 宫颈外口切缘:未查见癌组织 深切缘:阴性3、其她:子宫颈多灶性鳞状上皮内瘤变3级,并见一处原位腺癌,宫颈微浸润癌诊断模板 范例宫颈LEEP活检:,以上格式在国内估计被简化为如下报告,宫颈LEEP活检标本1、

22、子宫颈微小浸润性鳞状细胞癌,位于前唇(0点至3点),间质浸润深度3mm,最大宽度5mm,可见两处病灶2、宫颈LEEP标本的内口切缘在4点处可见癌组织,其余切缘阴性,未见淋巴/血管间隙受累3、子宫颈多灶性鳞状上皮内瘤变3级,一处见原位腺癌。,以上格式在国内估计被简化为如下报告宫颈LEEP活检标本,宫颈浸润性癌诊断模板,子宫,宫颈,卵巢,输卵管,筋膜内/筋膜外次全/次广/广泛全子宫根除术,双侧附件切除术: 浸润性癌 肿瘤部位:(以12点为准) 组织学分级:(FIGO1,2,3级,如适用的话) 肿瘤大小:cmXcmXcm 浸润深度:mm,占子宫颈壁厚度的% 淋巴管/血管间隙受累: 阴道壁断端:;切缘阳性/阴性 阴性切缘与肿瘤的最近距离:mm 宫旁组织:(如有累及,标明哪一侧) 子宫内膜: 子宫肌层: 子宫浆膜层: 左右卵巢: 左右输卵管:,宫颈浸润性癌诊断模板 子宫,宫颈,卵巢,输卵管,筋膜内/筋,注意:,锥切或根治标本要报切缘及锥顶或者颈管根治标本要报宫旁,注意:锥切或根治标本要报切缘及锥顶或者颈管,学习要点:,1、宫颈锥切标本的取材2、宫颈癌根治标本的取材3、宫颈病变的报告模式,学习要点:1、宫颈锥切标本的取材,考虑,1、宫颈锥切组织的取材注意事项？2、宫颈病变诊断报告如何才完整？,考虑1、宫颈锥切组织的取材注意事项？,感谢您的聆听！,感谢您的聆听！,