第21章 螺旋体课件.ppt

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1、第二十一章 螺旋体(spirochete),第一节 钩端螺旋体属第二节 密螺旋体属第三节 疏螺旋体属,螺旋体(spirochete)是一类细长、柔软、螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物；基本结构与细菌相似，有细胞壁、原始核质，以二分裂方式繁殖和对抗生素等药物敏感等。,Syphilis - Treponema pallidumLeptospirosis - Leptospira interrogans Relapsing fever - Borrelia recurrentis Lyme disease - Borrelia burgdorferi,Spirochete diseases of

2、humans,螺旋体目致病性螺旋体的种类,Spirochete structure,protein,fatty acids,Borrelia burgdorferi,Treponema pallidum,Leptospira,病原性螺旋体的特性,第一节 钩端螺旋体属(Leptospira),问号状钩端螺旋体(L.interrogans) 双曲钩端螺旋体(L.biflexa),螺旋细密、规则，形似细小珍珠排列的细链。一端或两端呈钩状。菌体常呈C、S或8字型革兰染色阴性，不易着染Fontana镀银染色法染成棕褐色运动活泼,形态与染色,一、生物学性状,营养要求较高，常用含10兔血清的Korthof培

3、养基适宜生长温度为2830，最适pH7.27.6钩端螺旋体在人工培养基中生长缓慢。在液体培养基中，培养一周左右，呈现为半透明云雾状生长需氧或微需氧,培养特性,Korthof培养基,成分蛋白胨400mg ，氯化钠700mg ，碳酸氢钠10mg，氯化钾20mg，氯化钙20mg，磷酸二氢钾120mg，磷酸氢二钠44Omg ，蒸馏水500ml，无菌兔血清（灭活）8-10ml。将各成分溶于蒸馏水内煮沸20min ，以滤纸滤，调至pH 为7.2 ，分装烧瓶内每瓶100ml，121 灭菌20min ; 无菌采取兔心血分离血清，置56 水浴箱中30min以破坏补体；上述蛋白胨盐溶液每100ml中加入无菌兔血清

4、8-10ml；混合后，用无菌分装中号试管中，每管5ml；置56 水浴箱30min ; 37 温箱中孵育2 天，剔去污染者。,抵抗力: 弱,热抵抗力弱，601min即死亡0.2%来苏、1:2000升汞、1%石炭酸经1030min被杀灭对青霉素敏感在湿土或水中可存活数月,抗原性,属特异性蛋白抗原(genus-specific protein antigen)糖蛋白或脂蛋白群特异性抗原(serogroup-specific antigen)脂多糖复合物型特异性抗原(serovar-specific antigen)菌体表面多糖显微镜凝集试验 (microscopic agglutination te

5、st, MAT)凝集吸收试验(agglutination absorption test, AAT),分 型,全世界已发现及确定有25群和273血清型国内已发现19群和74个血清型，是世界上发现血清型最多的国家，主要菌群：波摩那群(pomona)黄疸出血群(icterohaemorrhagiae)犬群(canicola)流感伤寒群 (grippotyphosa)七日热群(hebdomadis),Leptospirosis is a widely spread disease of global concern. Infection causes flu-like episodes with f

6、requent severe renal and hepatic damage, such as haemorrhage and jaundice. In more severe cases, massive pulmonary haemorrhages, including fatal sudden haemoptysis, can occur. Here we report the complete genomic sequence of a representative virulent serovar type strain (Lai) of Leptospira interrogan

7、s serogroup Icterohaemorrhagiae consisting of a 4.33-megabase large chromosome and a 359-kilobase small chromosome, with a total of 4,768 predicted genes. In terms of the genetic determinants of physiological characteristics, the facultatively parasitic L. interrogans differs extensively from two ot

8、her strictly parasitic pathogenic spirochaetes, Treponema pallidum and Borrelia burgdorferi, although similarities exist in the genes that govern their unique morphological features. A comprehensive analysis of the L. interrogans genes for chemotaxis/motility and lipopolysaccharide synthesis provide

9、s a basis for in-depth studies of virulence and pathogenesis.The discovery of a series of genes possibly related to adhesion, invasion and the haematological changes that characterize leptospirosis has provided clues about how an environmental organism might evolve into an important human pathogen.R

10、en SX, Fu G, Jiang XG, Zeng R, Miao YG, Xu H, Zhang YX, Xiong H, Lu G, Lu LF, Jiang HQ, Jia J, Tu YF, Jiang JX, Gu WY, Zhang YQ, Cai Z, Sheng HH, Yin HF, Zhang Y, Zhu GF, Wan M, Huang HL, Qian Z, Wang SY, Ma W, Yao ZJ, Shen Y, Qiang BQ, Xia QC, Guo XK, Danchin A, Saint Girons I, Somerville RL, Wen Y

11、M, Shi MH, Chen Z, Xu JG, Zhao GP. Unique physiological and pathogenic features of Leptospira interrogans revealed by whole-genome sequencing. Nature. 2003 Apr 24;422(6934):888-93.,流行环节,传染源：多种动物，在感染动物肾脏内长期存在，随尿排出传播途径：直接接触传播，带菌尿污染环境，人可通过收割水稻、接触雨水、洪水或其他机会，通过皮肤粘膜细微破损处感染母婴传播人群易感性：人群普遍易感，隐性感染率高,流行特征,流行地区

12、：遍及全世界，以热带及亚热带地区多见。国内26个省市自治区均有本病发生或流行，以长江流域及其以南、东南沿海及西南各省市自治区较严重,近年来发病率有所下降，但在部分地区仍有流行发病季节：多在雨季夏秋季(69月)，8、9月为高峰青壮年、农民、渔民及下水道工人等高发,致病性与免疫性,致病物质-类似细菌内毒素与外毒素,内毒素样物质(ELS)或称脂多糖样物质(LLS) 溶血素: 破坏红细胞膜 细胞毒性因子(CTF) 致细胞病变作用(CPE)物质,所致疾病:,钩端螺旋体病(leptospirosis): 一种人畜共患传染病。,传染源,传播途径,鼠和猪,粘膜或破损皮肤胎盘垂直传播,临床表现,疾病特点,起病急

13、、高热、乏力、全身酸痛、眼结膜充血、腓肠肌压痛、表浅淋巴结肿大,Pathogenesis Leptospira enters the host through mucosa and broken skin, resulting in bacteremia. The spirochetes multiply in organs, most commonly the central nervous system, kidneys, and liver. They are cleared by the immune response from the blood and most tissues b

14、ut persist and multiply for some time in the kidney tubules. Infective bacteria are shed in the urine. The mechanism of tissue damage is not known.,发病机理,钩端螺旋体 皮肤或黏膜 （血流） 全身毛细血管的中毒性损 （早期） （中期） （恢复期） 感染中毒期 器官损害期单纯败血症 (leptospitemia) 迟发型变态反应 肺出血 后发热 内脏损害 肝炎 反应性脑膜炎 间质性肾炎 眼部炎症 脑膜脑炎 闭塞性脑动脉炎,临床表现,潜伏期220日，一

15、般713日。临床分型 1.单纯型：发热、肌肉疼痛（以腓肠肌和腰背肌明显）、结膜充血、腓肠肌压痛、浅表淋巴结肿大及压痛。其它：肝肿大、咽痛、红肿。2. 肺出血型：病程34天， 轻度肺出血-咳嗽、咳血，肺部少许湿罗音，胸片可见散在点状或小片阴影。 肺弥漫性出血：发热及中毒症状加重；气紧、心慌、窒息，胸片双肺广泛点片状阴影或大片状融合；神志恍惚或昏迷、发绀、呼吸不规律，大量咳血，窒息死亡。,轻度 中度 重度消化道症状 较明显 重 出血 无 重度 重度 凝血功能 基本正常 异常 明显异常 尿蛋白 阴性 阳性 （ +）以上 管型 可见 较多 预后 良好 可逐渐恢复 较差,3.黄疸出血型：病程48天,4.

16、 肾功能衰竭型: 常与黄疸出血型合并出现，主要表现为蛋白尿及少量细胞和管型；严重可出现尿毒症、急性肾衰的表现。5. 脑膜脑炎型: 发热34天后出现脑膜脑炎的临床表现。死亡率：肾衰 70%肝功能衰竭 20%严重出血10%,后发症,后发热：经治疗或自愈后再度发热，1-3天可自退，不需治疗反应性脑膜炎：在后发热时或稍后出现，钩体培养阴性，预后良好眼的后发症：退热1W1M，虹膜睫状体炎、脉络炎或葡萄膜炎等闭塞性脑动脉炎：波摩那型钩体病流行后2-5月，变态反应所致。脑基底部多发动脉炎导致脑缺血，引起偏瘫、失语等，大多可恢复,免疫性: 特异性体液免疫为主, 感染后及病后仅获同型免疫力, 故可二次感染发病,

17、微生物学检查法,发病10天内取血液,2周后取尿液,有脑膜刺激者取脑脊液 直接镜检 分离与鉴定 接种至Korthof培养基，置28孵育 阳性标本:在2周内可见培养液呈轻度混浊暗视野显微镜检查有则用已知诊断血清鉴定其血清群和血清型。 阴性标本:分离培养应连续观察4个月，仍无生长者 动物接种 幼龄豚鼠或金地鼠腹腔接种 DNA探针杂交及PCR法检测钩体DNA,血清学诊断,病初和发病后第34周各采血清一次。有脑膜刺激 症状者采取脑脊液方法: 显微镜凝集试验(MAT) 间接凝集试验 以乳胶 (聚苯乙烯)或活性炭微粒为载体， 吸附钩端螺旋体可溶性抗原作为指示物,防治原则消灭传染源：大力灭鼠，加强病畜管理切断

18、传播途径：保护好水源，避免或减少与疫水接触提高易感人群免疫力：对流行区的居民、矿工、饲养员及外来易感人员进行多价钩体死疫苗接种治疗：钩体对多种抗生素敏感，但以青霉素效果最好，对过敏者可用庆大霉素或金霉素,第二节 密螺旋体属 (Treponema),人类致病的密螺旋体有四种:梅毒螺旋体(T. pallidum): 梅毒(syphilis)雅司螺旋体(T. pertenue): 雅司病(yaws)地方性螺旋体(T. endemicum): 地方性梅毒(endemic syphilis)品他螺旋体(T. carateum): 品他(pinta),生物学性状,814个致密而规则的小螺旋，两端尖直 运动

19、活泼 革兰染色阴性，不易着染 Fontana镀银染色法染成棕褐色,形态与染色,OM, outer membrane Ef (endoflagella or periplasmic flagella) LP1, 2, lipoproteins pg, peptidoglycan CM, cytoplasmic membrane BF, body fibrils WM, cell wall membrane,不能在无活细胞的人工培养基中生长繁殖在家兔上皮细胞培养中能有限生长，繁殖慢,培养,抵抗力极弱,对温度和干燥特别敏感对常用化学消毒剂敏感，1%2%石炭酸数分钟死亡对青霉素、四环素、红霉素或砷剂均

20、敏感,致病性与免疫性,致病物质 荚膜样物质：菌体表面的黏多糖和唾液酸,免疫抑制 透明质酸酶：有利于扩散 所致疾病-梅毒 人是梅毒的唯一传染源 获得性：性接触传播 先天性：母体胎盘胎儿 免疫性,感染性免疫细胞免疫比体液免疫重要,获得性梅毒(syphilis ),期（初期）梅毒：感染性极强，破坏性小 感染后3周左右局部出现无痛性硬下疳，多见于外生殖器，一般48周后，常自愈期梅毒：感染性强，破坏性小 发生于硬下疳出现后28周。苍白亚种螺旋体血症，全身皮肤、粘膜常有梅毒疹，全身淋巴结肿大，有时亦累及骨、关节、眼及其他脏器期(晚期)梅毒：感染性小，破坏性大 发生于感染2年以后，亦可长达1015年的。病变

21、可波及全身组织和器官。基本损害为慢性肉芽肿，局部组织坏死。损害常进展和消退交替出现。皮肤、肝、脾和骨骼常被累及。可危及生命,Development of the clinical stages of syphilis over time.,Chancre of primary syphilis,Primary Syphilis- Penile Chancre,Source: CDC/ NCHSTP/ Division of STD Prevention, STD Clinical Slides,Primary Syphilis Labial Chancre,Source: CDC/ NCHST

22、P/ Division of STD Prevention, STD Clinical Slides,Secondary syphilis: a sample of skin manifestations,Secondary Syphilis: Palmar/Plantar Rash,Source: Seattle STD/HIV Prevention Training Center at the University of Washington, UW HSCER Slide Bank,Source: CDC/NCHSTP/Division of STD Prevention, STD Cl

23、inical Slides,Secondary Syphilis - Papulosquamous Rash,Source: CDC/ NCHSTP/ Division of STD Prevention, STD Clinical Slides,Secondary Syphilis: Generalized Body Rash,Source: Cincinnati STD/HIV Prevention Training Center,Source: CDC/NCHSTP/Division of STD Prevention, STD Clinical Slides,Secondary Syp

24、hilis - Condylomata lata,Source: CDC/ NCHSTP/ Division of STD Prevention, STD Clinical Slides,Neurosyphilis - Spirochetes in Neural Tissue,Source: CDC/ NCHSTP/ Division of STD Prevention, STD Clinical Slides,Silver stain, 950 x,Late Syphilis - Ulcerating Gumma,Source: CDC/ NCHSTP/ Division of STD Pr

25、evention, STD Clinical Slides,先天性梅毒（胎传梅毒）,多发生于妊娠4个月之后引起胎儿的全身性感染，导致流产、早产或死胎出生梅毒儿，呈现马鞍鼻、锯齿形牙、间质性角膜炎、先天性耳聋等特殊体征,Saddleback nose,Congenital syphilis can produce tell-tale signs in infected persons: a sample,Congenital Syphilis - Hutchinsons Teeth,Source: CDC/ NCHSTP/ Division of STD Prevention, STD Clin

26、ical Slides,Congenital Syphilis - Mucous Patches,Source: CDC/ NCHSTP/ Division of STD Prevention, STD Clinical Slides,Congenital Syphilis - Perforation of Palate,Source: CDC/ NCHSTP/ Division of STD Prevention, STD Clinical Slides,微生物学检查法,1.标本期梅毒-硬下疳渗出液期梅毒-梅毒疹渗出液或局部淋巴结抽出液2.显微镜检查3.血清学诊断,非特异性：非螺旋体抗原试验

27、 抗原(正常牛心肌的心脂质)血清中的反应素(抗脂质抗体) 方法: USR(unheated serum reagin test) RPR(rapid plasma reagin test)。适用于大量过筛 特异性：密螺旋体抗原试验 抗原（Nichols株螺旋体）螺旋体特异抗体 优点：特异性强，可用作梅毒证实试验 常用方法：荧光螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS) 梅毒螺旋体制动试验(TPI) 梅毒螺旋体血凝试验(TPHA) 捕获ELISA法,防治原则,加强性卫生教育和严格社会管理梅毒确诊后，青霉素等及早予以彻底治疗治疗3个月至1年后血清学转阴者为治愈,第三节 疏螺旋体,伯氏疏螺旋体(B.bur

28、gdorferi)：莱姆病回归热疏螺旋体( B.recurrentis)：回归热奋森疏螺旋体(B.vincentii)：口腔感染,形态：疏螺旋体，两端稍尖，运动活泼,生物学性状,致病性与免疫性,莱姆病是一种自然疫源性传染病。储存宿主主要是野生和驯养的哺乳动物。白足鼠，鹿主要传播媒介是硬蜱,致病物质有粘附素等侵袭力和内毒素。,莱姆病,经330d潜伏期，在叮咬部位可出现一个或数个慢性移行性红斑(ECM)。晚期主要表现为慢性关节炎、慢性神经系统或皮肤异常,回归热疏螺旋体 (B.recurrentis),回归热是由多种疏螺旋体引起的急性传染病。其临床特点为急起急退的高热，全身肌肉酸痛，1次或多次复发，肝、脾肿大，重症可出现黄疸和出血倾向 回归热疏螺旋体引起虱传回归热(流行性回归热),奋森疏螺旋体(B.vincentii),与梭形梭杆菌寄居于人类口腔牙龈部。当机体免疫功能下降，则这两种菌大量繁殖，协同引起奋森咽峡炎、牙龈炎、口腔坏疽等。,考纲要求,关键问题,1名词解释：spirochete (螺旋体) 2简答题：（1）简述具有致病性的螺旋体种类。（2）简述钩端螺旋体、梅毒螺旋体的形态染色特征。（3）简述钩端螺旋体、梅毒螺旋体的流行环节。（4）简述钩端螺旋体、梅毒螺旋体病的防治原则。,