实验诊断学临床课件.pptx

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1、实验诊断学临床,immune response,抗原,B淋巴细胞,吞噬细胞,T淋巴细胞,致敏T淋巴细胞,cytokine,浆细胞,antibody,T 记忆细胞,B 记忆细胞,NK,plement,其它,常用免疫检测,常用免疫检测方法,做免疫学检查考虑点,方法灵敏性(参考值不一致性),第一节:体液免疫检查,体液免疫检查主要包含:免疫球蛋白(immunoglobulin)补体(plement),一、免疫球蛋白测定,免疫球蛋白是一组具有抗体活性的球蛋白,由浆细胞合成分泌。免疫球蛋白基本结构 依照重链抗原性可分为5类(、),每个Ig只能和一种轻链结合( 或)。,IgG IgA IgM IgE特性,免

2、疫球蛋白合成、分泌及主要功能,IgG IgA IgM IgE病理变化,慢性肝炎导致Ig增高机理,随着肝炎病情的加重和时间延长,受损的肝细胞作为自身抗原刺激淋巴系统,分泌大量抗体,使IgG、IgM及IgA同时增高,以IgG增高为主。肝硬化时肝细胞发生片状坏死,造成枯否氏细胞(Kupffer cell)功能失调,不能有效地发挥吞噬滤过作用,失去对抗原的处理能力,使门静脉血中的抗原不能被清除,抗体形成增多。肝脏免疫系统功能严重失调,从而导致B淋巴细胞失控。,二、M蛋白检测,M蛋白(monoclonal immunoglobulins):由一种单克隆B淋巴细胞异常增殖所产生,具有相同结构和电泳迁移率的

3、免疫球蛋白分子或其分子片段(如轻链),一般不具抗体活性。简述免疫球蛋白合成 正常情况合成一条重链需要18分钟,合成一条轻链只需10分钟,组成一条完整的Ig就会有一条多轻链过剩,过剩的轻链分泌到细胞外,10%肾小管内分解代谢,80%重吸收,10%排出体外(20ug/ml)。正常合成Ig,一个Ig分子只能和一种轻链结合,Ig轻链/ 之比为2:1。,M蛋白检测临床意义,阳性主要见于1、多发性骨髓瘤 2、巨球蛋白血症3、重链病 4、半分子病5、恶性淋巴瘤 6、良性M蛋白血症,过敏原检测,吸入性和食入性多项特异性IgE抗体检测(I型过敏反应)特异性IgE指能与过敏原特异性结合的IgE。特异性IgE是寻找

4、型过敏反应变应原、并进行治疗较好方法。原理将各种过敏原(如花粉、牛奶)与患者血清反应,血清中存在特异性IgE则呈阳性反应。 多项食物特异性IgG抗体检测(食入性)(III型过敏反应),其它临床常用检测项目介绍,血液、尿液免疫球蛋白总轻链检测血液、尿液免疫球蛋白游离轻链检测血液免疫球蛋白IgG4检测,二、血清补体检测(plement),补体是主要由巨噬细胞分泌存在于新鲜血液中具有酶样活性的球蛋白,补体不耐热易降解,故补体检测须用新鲜血清。补体有C1-C9(经典途径)及BF、DF、PF、HF、IF(旁路途径)和补体调节因子组成。临床常作总补体活性(CH50)和单一因子C3、C4、BF及C1q检测。

5、,补体两条激活途径区别,经典途径:抗原抗体复合物激活C1和C4、2,形成C3转化酶,然后是C5、6、7、8、9的激活,最后导致靶细胞溶解。 傍路途径:是细菌的内毒素和其它有关因子,直截了当激活C3,再是C5、6、7、8、9的激活,最后导致靶细胞溶解。 不同点是路径不一样,傍路途径可最快地发挥效应,达到溶靶细胞作用。 其次是激活物质不一样,经典路径激活物质是抗原抗体复合物,产生后才能激活C1,因此需要时间长。傍路途经激活物质是内毒素,细菌感染后一经释放内毒素就能激活C3,因此有最快的反应。,总补体溶血活性(CH50)检测,增高 急性感染、急性组织损伤、恶性肿瘤和风湿病早期,补体增高常与其它血浆蛋

6、白改变相伴随。降低 自身免疫性疾病SLE的活动期 急性肾小球肾炎 冷球蛋白血症等 严重肝病变 先天性缺乏,SRBC,Ab,c,SRBC,Ab,C3、C4、C1q、B因子检测,第二节 细胞免疫检查,淋巴细胞占外周血白细胞总数的20%40%,是机体免疫系统主要细胞,主要有TLC、BLC、NK、KC,淋巴细胞进一步可分为特别多亚型。,淋巴细胞表面标志检测,簇分化抗原CD(Cluster of differentiation): 细胞在发育分化过程中,细胞表面抗原物质发生变化,CD抗原即指细胞变化过程中不同时期产生的抗原。目前临床CD4(TH)与CD8(TS)检测应用广泛。簇分化抗原检测方法目前较多采

7、纳流式细胞仪技术进行分析,流式细胞免疫分析技术为特异抗体加标记技术加单细胞检测。特点:特异性、灵敏性高、检测周密度均较往常手工操作高特别多。,流式细胞仪检测简介,一、T细胞表面标志检测,CD3(总成熟T细胞)、E玫瑰花试验检测临床意义 增高:甲亢、淋巴细胞性甲状腺炎、重症肌无力、器 官移植后排异反应 减低:AIDS、胸腺发育不良、联合免疫缺陷、也可见 于放疗和化疗及免疫抑制类药物治疗 CD4、CD8检测临床意义 CD4+增高:类风湿关节炎活动期,自身免疫疾病 CD4+减低:AIDS等病毒感染、免疫抑制剂治疗、严重 创伤、大手术等 CD8+增高:传染性单核细胞增多症和巨细胞病毒感染 急性期、慢性

8、乙型肝炎等 CD8+降低:部分自身免疫性疾病、型糖尿病等,T淋巴细胞表面标志检测,E玫瑰花形成实验(细胞表面受体概念),TC,SRBC,SRBC,SRBC,SRBC,SRBC,SRBC,SER,SER,SER,SER,SER,SER,二、B细胞表面标志检测,B细胞表面抗原和表面受体检测临床意义表面抗原CD19、CD20、CD21、CD22CD19增高:B细胞系统恶性肿瘤CD19降低:体液免疫缺陷疾病D20在B细胞激活后逐步降低CD21为EB病毒和CD3受体 CD22在B细胞激活时逐步增高 SmIg B细胞表面特异性标志SmIg增高:B细胞恶性增殖相关疾病,如慢淋、毛细胞白血病、巨球蛋白血症。S

9、mIg降低:体液免疫缺陷相关疾病,CD4/CD8测定临床意义,CD4/CD8测定临床意义增高:多见于自身免疫性疾病,如类风关活动期、多发性硬化症、SLE、器官移植后排异反应、膜性肾小球肾炎等降低:AIDS、瘤型麻风病、恶性肿瘤发作期、传染性单核细胞增多症、巨细胞病毒感染急性期、血吸虫病等。,三、淋巴细胞功能检测,NK细胞活性测定意义目前一般用流式细胞技术NK细胞无需抗原刺激可直截了当杀伤靶细胞,可释放r干扰素(IFN-r)、 肿瘤坏死因子 (TNF-)和集落刺激因子(GM-CSF),在机体抗肿瘤和抗感染免疫中发挥重要作用增高:感染早期,器官移植干扰素等免疫增强剂治疗。降低:恶性肿瘤,免疫缺陷疾

10、病,使用免疫抑制剂。抗体依赖性细胞介导的细胞毒测定(antibody dependent cell mediated cytotoxicity,ADCC)增高:自身免疫性疾病,移植免疫等降低:恶性肿瘤、免疫缺陷、慢性肝炎、肾功能衰竭等,三、细胞因子检查,细胞因子是由免疫细胞及相关细胞产生,特点高活性、多功能,一般为低分子蛋白。细胞因子种类繁多,功能复杂,多种因子可具有相同功能,各种细胞因子间可互相作用,细胞因子功能同时受到细胞因子受体功能影响,因此在选择检测项目和结果分析时要综合考虑。,四、细胞因子检查,细胞因子种类繁多,功能复杂,多种因子可具有相同功能,各种细胞因子间可互相作用,细胞因子功能

11、同时受到细胞因子受体功能影响,因此在选择检测项目和结果分析时要综合考虑。,目前诊治常用检查提问,诊断试验评价的几个常用指标,敏感度( Sensitivity)特异度(specificity)受试者工作特征曲线( accuracy operating characteristic),敏感度,Clinical Sensitivity指由标准诊断法(金标准)确诊的病例组中经所选实验查出阳性例数,余下既为假阴性。,100%,特异度,Clinical Specificity指标准诊断方法确诊无病的对比组中经所选实验方法查出阴性例数,余下为假阳性。,100%,试验敏感度和特异度选择,一个理想实验方法,最佳

12、临界值,从理论上讲特异度和敏感度最好都为100%,而实际上是不太估计的。敏感度和特异度一般呈反比关系,通常采纳统计学理论结合具体疾病选择最合适特异度和敏感度。高敏感度实验适用于: 初筛、初步诊断或排除诊断为目的。高特异度试验适用于: 确诊为目的时一般选择高特异度。凡假阳性结果会导致病人精神和肉体上严重危害,例如肿瘤、HIV携带者要选择高特异度。,理想状态试验敏感度和特异度,真阳性,例数,真阴性,假阴性,假阳性,定量试验结果值,金标准+,金标准-,临界值特异度100%敏感度100%(理想),临界值,假设:某项目检测临界值为15ng/ml,真阳性,例数,真阴性,假阴性,假阳性,试验结果值,金标准+

13、,金标准-,临界值15ng/ml,临界值,假设:高敏感度情况(临界值降低为5ng/ml),真阳性,例数,真阴性,假阴性,假阳性,试验结果值,金标准+,金标准-,临界值5ng/ml,临界值,用ROC曲线选择临界值和试验方法,ROC曲线在评价临床检验指标时,可表示该指标敏感度与特异度之间关系。依照曲线不仅可得到决定区分正常与异常临界点的重要信息,还可用于针对同一疾病不同诊断试验间比较。,同一肿瘤二种肿瘤标志物选择,ROC曲线,第三节 肿瘤标志物检测,肿瘤标志物概念:一般而言,TM是指存在于肿瘤细胞内或肿瘤细胞表达及脱落的物质,或是宿主对肿瘤反应而产生的物质。由于肿瘤发生、发展原因至今尚未完全解决,

14、提示肿瘤的标志也并未完全明确,因此肿瘤标志物概念还有待补充和修正。,广义上肿瘤标志物是指与肿瘤发生、发展、消亡相关的各种物质。肿瘤细胞本身产生的肿瘤标志物常分为两类: 1)当理化、病毒、遗传等因素引起正常细胞内基因突变而发生癌变时,癌变细胞内及表达在其表面的蛋白质等成份发生某种变化,形成肿瘤抗原,这种抗原能够表达在正常细胞,而肿瘤细胞表达高。也可因肿瘤导致组织结构变化,肿瘤抗原进入血液,如PSA ;或仅在胚胎组织中表达,正常成人细胞中不表达,在发生肿瘤时又重新表达,如AFP、CEA。,2)由肿瘤细胞产生的特别抗原,这种抗原在性质上与正常细胞所表达的抗原不同。癌基因的发现证明正常细胞有癌基因存在

15、,只是处于不表达状态,其一旦被激活,就失去正常调控,使细胞发生癌变。而由于癌基因表达产物与肿瘤抗原的关系至今未完全清楚,因此目前未发现特别特异的肿瘤抗原。,一般鉴定各种TM的方法为利用所制备的特异Ab从体液或细胞组织中检测各种肿瘤相关抗原。目前也有利用T细胞受体(T cell receptor TCR)识别肿瘤抗原方法。,肿瘤标志物的分类,瘤标志物目前有100多种。尚未有统一全面的分类标准。常分为血清/血浆肿瘤标志物和组织肿瘤标志物。,血清肿瘤标志物,人体器官与肿瘤标志物,理想肿瘤标志物的要求,TM检测临床意义,辅助临床早发现、早诊断帮助区分区分良性与恶性肿瘤协助临床肿瘤类型鉴定及肿瘤部位鉴别

16、帮助临床对肿瘤病程判断治疗效果观察,提早判断复发,甲胎蛋白,AFP由胚胎卵黄囊、胚胎肝细胞及其他内胚层分化的胃肠组织合成。发生在妊娠12周,出生后降低。当肝细胞或生殖腺胚胎组织发生恶性病变时,相关基因重新被激活,细胞重新合成AFP,血液中含量增加。临床应用: AFP增高为原发性肝癌重要指标之一。特异性强、敏感度高相对较高。AFP常用于原发性肝癌临床检查及普查。大部分患者呈持续性高水平升高,部分患者呈低水平增高。,AFP阴性并不排除原发性肝癌,据统计18%-20%的原发性肝癌患者血清AFP正常。此时需结合临床及其他检测指标来降低假阴性。年龄因素:AFP对原发性肝癌的诊断率随患者年龄的增加而逐渐下

17、降。对老年人AFP正常或轻微升高不能排除肝癌的估计性。预后:原发性肝癌血清AFP水平与预后有关。肝癌切除后AFP能否正常或上升是判断预后的关键因素。,其他肿瘤 部分卵黄囊肿患者血清AFP上升,胃癌、结肠癌等内胚层衍生的组织发生的癌,即使未发生肝转移也合成AFP。而非内胚层衍生组织的癌,即使转移到肝脏也不合成AFP,血清AFP是否上升与癌的原发部位有关。与绒毛膜促性腺激素联合检测有助于生殖细胞肿瘤的分类与分期。,肝脏良性病变 肝脏良性病变时,AFP也可增高。病毒性肝炎患者AFP轻度增高,慢性肝炎患者约有20%AFP增高。暴发性肝炎患者AFP明显增高。病理检查时可发现AFP升高与肝细胞再生,同时肝

18、脏受损有关系。,CEA检测,癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)是一种MW为150K300KD的糖蛋白,1965年Gold和Freedman首先自人结肠癌组织发现,是胚胎性癌抗原。主要存在于胎儿消化道上皮组织、胰脏和肝脏。正常成人血清中CEA含量极低,恶性肿瘤的癌细胞分泌CEA进入血液和淋巴,导致血中CEA水平增高。临床应用: 结肠癌患者70%90%显示CEA高浓度阳性,关于CEA升高的结肠癌患者,血清CEA水平与癌肿大小、有无转移存在一定关系,当发生肝转移时,CEA升高更为明显。,血清CEA水平变化与结肠癌分期紧密相关。明显升高时主要见于中晚期肿瘤,进展期结肠

19、癌(Duke分期 C、D期)时阳性率可达70%以上,而Duke A、B期时敏感性只有30%左右其他肿瘤 其他消化道肿瘤也可检测到CEA阳性,如:大肠癌患者可达65%-75%的阳性。CEA与大肠癌的Duke分期有明确关系,可用于治疗效果的监测;内胚层衍生的癌,如胰腺癌、肺癌以及胃癌可导致CEA水平增高。非内胚层衍生的癌,如乳腺癌和子宫癌也能使CEA水平增高。,良性肿瘤10%-20%,以及某些内胚层发生的重症能够导致CEA增高。CEA检测对肿瘤术后复发敏感性特别高,可达80%以上。往往早于临床、病理检查、X光检查等。非肿瘤疾病 肠道炎症、肾功不全、结肠息肉、肝硬化、慢性肝炎、闭锁性黄疸等也可导致C

20、EA水平增高 CEA并非一种癌的特异性抗原,而是癌的一种相关抗原。缺少特异性,作为筛选指标时应注意。常用于肿瘤患者的监测,疗效的判断。,前列腺特异抗原(PSA),PSA为一种丝氨酸蛋白水解酶,存在于前列腺腺泡和导管上皮细胞胞浆中。在血液中以3种不同分子形式存在,即游离PSA;与a1-抗糜蛋白酶(ACT)结合形成PSA-ACT;与a2-巨球蛋白结合形成PSA-a2M。血液中主要为PSA-ACT。正常情况下前列腺腺泡内容物(富含PSA)与淋巴系统间存在由内皮层、基底细胞层和基底膜构成的屏障相隔。当肿瘤或其他病变破坏了这道屏障时,腺管内容物即可漏入淋巴系统并随之进入血液,导致血中PSA水平增高。,临

21、床意义前列腺癌60-90%血清t-PSA增高术后t-PSA无明显降低或再次增高,提示预后较差或肿瘤转移和复发。前列腺增生、前列腺炎等良性疾病也会有轻度增高。肛门指检、前列腺按摩、前列腺手术等也会引起增高,注意鉴别,必要时数周后进行PSA再次检测。f-PSA/t-PSA检测比值下降时对前列腺癌诊断意义较大。,CA 19-9,CA19-9(carbohydrate antigen 19-9)是一种粘蛋白型的糖类蛋白肿瘤标志物,为细胞膜上的糖脂质,因由鼠单克隆抗体116NS19-9识别而命名。是迄今报道的对胰腺癌敏感性最高的标志物。在血清中它以唾液粘蛋白形式存在,分布于正常胎儿胰腺、胆囊、肝、肠和正

22、常成年人胰腺、胆管上皮等处。,临床应用:消化道恶性肿瘤 胰腺癌、肝胆系癌、胃癌、结直肠癌的CA 19-9水平分别是正常均值的几百倍。而阳性率以胰腺癌为最高,故CA19-9是胰腺癌较好的标志。胰腺癌诊断中的应用: 大部分胰腺癌患者血清CA19-9水平明显增高。假如以正常参考范围上限(37 U / mL)为诊断标准,敏感性和特异性均可达90%以上。CA19-9水平与肿瘤的时期有关,血清中含量的高低提示手术的难易程度,术前CA19-9水平对预后有一定提示作用,低者预后较好,术后CA19-9水平降至正常者生存期长于未下降者。,肿瘤复发时,CA19-9可再度升高,同时发生于影像学诊断之前。因此可用作监测

23、肿瘤的复发。其他恶性肿瘤 卵巢癌、淋巴瘤、胃癌、肝癌、食管癌、乳腺癌的阳性率较低。胃癌的阳性率约为25%-60%,且与肿瘤分期有关。关于胃癌患者,同时检测CEA可提高阳性率。直肠、结肠癌患者,阳性率为18%-58%,与肿瘤分期有关。,同时测定CEA可提高敏感度,假如治疗有效,CA19-9下降速度较CEA快。胆囊癌、胆管癌、胆道癌的CA19-9阳性率较高,使用原则:CA19-9与AFP、CEA联合检查,有助于提高胃肠道肿瘤的诊断效率非肿瘤性疾病 低浓度增高、一过性增高可见于慢性胰腺炎、胆石症、肝硬化、肾功能不全等。,CA 15-3,属于糖蛋白类抗原,主要用于乳腺癌的监测和筛选,以及用于评价患者预

24、后情况的指标。临床应用:乳腺癌:乳腺癌患者30-50%增高,有转移灶者增高可达80%,发现癌转移的敏感性比癌胚抗原和组织多肽抗原高,且早于临床发现转移。 CA15-3是监测病人术后复发情况,特别是癌症转移患者的术后监测的重要指标,血清CA15-3水平增高,提示乳腺癌的局部或全身复发,且增高早于核素检查和临床检查。,可与CA125联合检查,用于卵巢癌复发的早期诊断,与CEA联合检测时,可提高乳腺癌早期诊断的敏感性和特异性。其他恶性肿瘤 肺癌、卵巢癌、结肠癌、肝癌等,也可出现血清CA15-3增高。非恶性肿瘤疾病 良性乳腺疾病、卵巢疾病等可引起CA15-3的水平增高。,2、结直肠癌 结直肠癌在欧美国

25、家发病率较高。在我国随着人民生活水平提高,结直肠癌发病率也呈增高趋势。主要肿瘤标志物有:(1)CEA:局限性或早期可手术根治的结直肠癌CEA升高低于10%,而在远处转移的患者中CEA增高者可达90%。(2)CA19-9(3)CA72-4(4)CA242(5)组织多肽抗原(TPS),肿瘤标志物的选择建议,几种肿瘤标志物检测意义,几种肿瘤标志物检测意义,肿瘤标志物作为体检项目问题,恶性肿瘤呈上升趋势的今天,迫切需要简便、廉价、适用于肿瘤初筛及大规模人群普查的肿瘤指标。遗憾的是目前实验室开展的肿瘤标志物检测项目,普遍不适合于肿瘤普查。因此要幸免盲目、随意、无依照的挑选肿瘤标志物进行筛查。针对特定区域

26、某种肿瘤高危人群的检查,也要选择特异度及敏感度相对较好肿瘤标志物。也可在体检其它检查可疑的基础上,再以肿瘤标志物检测。 用蛋白芯片技术注意特异性较差,需用其它方法复查。,目前诊治常用检查提问,人类具有完善的免疫系统,正常情况下,免疫系统具有识别自我与异己的功能,因而能够防御异物入侵,而对自身组织不产生或产生极微弱的免疫应答反应,称自身耐受。一旦机体外部或内部因素发生改变,可使免疫耐受受到影响,导致免疫系统对自身组织产生明显的免疫应答反应。如是低限度和非持久性,一般影响不大,高限度和持久存在则引起自身免疫性疾病。自身免疫性疾病血清学检测方法特别多,特异性较差,动态检测可帮助临床对预后及疗效观察。

27、,第四节: 自身抗体检测,荧光免疫技术,目前常用于免疫组化和自身抗体检测,特点可用于定位。,细胞核,细胞核,荧光标记抗人Ig,自身抗体,免疫印迹试验抗核抗体检测,2、可提取核抗原抗体检测 免疫印迹试验抗核抗体检测,自身抗体,酶标记抗人Ig,E,E,底物,E,抗核抗体检测,1、间接免疫荧光抗体法检测抗核抗体特点:敏感度高、特异性差,常用于筛查自身免疫性疾病 原理:以Hep-2和鼠肝作为抗原,固定于载玻片上,与受检者血清反应,血清中抗体与载玻片上抗原结合,再加入荧光标记抗人Ig。在荧光显微镜下观察细胞核上荧光模型。荧光模型主要有:(1)核均质型:相关抗体为抗ds-DNA,抗组蛋白和核小体抗体(2)

28、核膜型:抗核孔复合物和抗板层素(3)颗粒型:抗U1-PNP、抗Sm、抗SS-A、抗SS-B(4)核点型:P80盘曲蛋白抗体、Sp100抗体、(5)着丝点型:与着丝点抗体相关(6)核仁型:RNP抗体、抗Scl70抗体等相关,ENA自身抗体谱免疫印迹检测,常见可提取核抗原抗体双链DNASm核糖体Scl-70Jo-1SS-BSS-ARNP,常见自身抗体检测及临床意义,名称 临床意义类风湿因子(RF)类风湿性关节炎及其它免疫性疾病抗ds-DNA抗体 SLE的较特异性抗体抗Smith抗体 SLE的较特异性抗体抗组蛋白抗体 药物性狼疮及其它免疫性疾病抗核糖核蛋白抗体 混合结缔组织病、SLE等抗SS-A和S

29、S-B抗体 干燥综合症、SLE、RA等抗Scl-70抗体 系统性硬化症等抗线粒体抗体 与自身免疫性肝病相关,常见自身抗体检测及临床意义,名称 临床意义Jo-1抗体 肌炎和间质性肺纤维化抗中性粒细胞胞浆抗体 血管炎症、自身免疫 性肝病等抗血小板抗体 血小板减少症抗平滑肌抗体 自身免疫性肝病抗精子抗体 男子不育症抗心磷脂抗体 SLE、RA等疾病HLA-B27 强直性脊椎炎等,常见自身抗体检测及临床意义,名称 临床意义抗肌动蛋白抗体: 自身免疫性肝炎、原发性胆汁性肝硬化抗肾小球基底膜抗体: 为抗基底膜抗体肾小球肾炎特异抗体抗中性粒细胞胞浆抗体: 主要见于血管炎症坏死相关的系列疾病抗心磷脂抗体检测:与

30、SLE相关,并与血小板减低和自发性流产相关抗平滑肌抗体检测: 主要见于自身免疫性肝病抗甲状腺球蛋白抗体(TgAb):本氏甲状腺炎、Graves病等促甲状腺激素受体抗体(TRAb):Graves病等甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb): 本氏甲状腺炎等甲状腺自身抗体检测要结合激素测定和影像学,第五节: 感染免疫检查,人体感染病原体后经过一段时间产生抗体一般可持续数月或数年,因此抗体检测可判断现症感染和既往感染情况。,风湿热是一种变态结缔组织疾病,常见有风湿性心脏病、风湿性关节炎等。风湿热常由A 组溶血性链球菌引起,此菌可产生一种“O”溶血素具有抗原性,ASLO就是检测机体产生的抗溶血素“O”抗体。

31、链球菌感染后抗“O”的产生一般在一周左右,4-6周达高峰。可见于风湿性心脏病、风湿性关节炎、急性肾小球肾炎、呼吸道感染等。ASLO动态检测对病程及疗效观察意义较大,结合CRP和ESR检测临床意义更大。,抗链球菌溶血素“O”检测(anti-streptolysin O ASLO),伤寒是由伤寒杆菌引起的急性肠道传染病。伤寒杆菌有两种抗原,即菌体抗原“O”抗原和鞭毛抗“H”原。肥达氏反应就是检测由上述两种抗原刺激机体产生的抗体。 肥达氏反应用于辅助诊断伤寒和副伤寒感染,由于抗体产生需要一定时间,故第一周阳性率10%,第二周达60%-70%,第四周达90%。临床常以二次标本(早期和中期或恢复期)的凝

32、集效价变化来判断是否感染。伤寒病人的“O”抗体较“H”出现早,存在时间短,“H”相反。预防接种可引起“H”增高,“O”正常。,伤寒和副伤寒沙门氏菌免疫检测,肥达氏试验,流行性脑脊髓膜炎免疫学检测,流行性脑脊髓膜炎由脑膜炎奈瑟菌所致。检测脑脊液、血清、尿液中抗原或抗体可辅助流脑的临床诊断。如检测到脑膜炎奈瑟菌抗原可作为流脑确诊,抗体在感染一周后出现,二月后逐渐下降。接种疫苗抗体可维持一年以上。,结核分枝杆菌主要引起细胞免疫,但也可引起体液免疫产生特异性IgG抗体,临床常用ELISA方法检测特异性IgG抗体,PCR方法检测结核DNA,但两种方法均存在部分假阳性,样本找结核杆菌方法最为经典。结核菌培

33、养时间长,敏感度低,目前T-SPOT试验认为对诊断结核敏感度和特异性均较高。,结核抗体和DNA检测,幽门螺杆菌检测,幽门螺杆菌(Hp)感染是人类最常见的慢性感染之一,与胃十二指肠等消化系统疾病紧密相关。由于HP感染具较大危害性,故近几年HP检测方法被高度重视,也取得飞速发展。目前诊断幽门螺杆菌感染的方法特别多,依据是否需做内窥镜检查分为侵入性和非侵入性两大类 。侵入性常做尿素酶试验。非侵入性试验除C13或C14 呼气试验外,目前血清学HP是诊断现症感染较好方法,易于儿童HP感染检测和体检普查,现症感染特异性抗体检测意义较大。,布氏杆菌病凝集试验 布氏杆菌感染病。牧区多见柯萨奇病毒抗体检测 心肌

34、炎、手足口病轮状病毒抗体检测 婴幼儿腹泻嗜异体凝集试验 EB病毒检测取代,传染性单核细胞增多症汉坦病毒IgM抗体 肾综合症出血热,TORCH感染免疫学检测,梅毒血请学检测,当机体感染梅毒螺旋体后,会产生二种抗体,一种为抗类脂抗体,另一种为抗螺旋体抗原抗体,后者较前者特异性强。由于目前螺旋体体外培养较难,故血清学检测是目前临床常用检查方法。常用方法有快速血浆素反应(RPR)和梅毒螺旋体血凝试验(TPPA),后者特异性高一般用于确定试验,RPR一般作为现症感染标志。,梅毒血清学检测,非特异性与特异性梅毒螺旋体血清学试验 感染梅毒螺旋体后,人体能够产生两类抗体,即非特异性抗体和特异性梅毒螺旋体抗体。

35、 机体产生的非特异性抗体叫反应素(reagin),是梅毒螺旋体破坏人体组织过程中释放出的一种抗原性心磷脂刺激机体所产生的抗体。一般在感染后57周产生,经正规治疗后可逐渐消失。另一种为特异性抗体,既抗梅毒螺旋体抗体,感染两周后即可测出,IgG类抗体可维持特别长时间,有些可终身阳性。梅毒血清学试验依照抗原不同分为两类,一类是非梅毒螺旋体抗原血清试验,如快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)等。另一类为特异性梅毒螺旋体抗体检测,目前常用实验为梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA) 。,轮状病毒抗体或RNA检测,轮状病毒分为7组,A组主要引起婴幼儿腹泻,B组引起成人腹

36、泻。快速金标记法粪便中轮状病毒检测应用最为广泛。轮状病毒IgM抗体检测,阳性可提示现症感染。IgG抗体阳性表示既往感染。PCR检测RNA特异性强,但时间长,影响治疗。,传染性单核细胞增多症检测,传染性单核细胞增多症由EB病毒感染所致。目前临床应用EBV-IgM检测替代嗜异体凝集实验,特异性较强。少儿期一般都曾经感染EBV,在机体抵抗力下降时,或应用免疫抑制剂时会导致EBV复燃,引发传染性单核细胞增多症。,日本血吸虫抗体检测机体感染血吸虫后可产生特异抗体,可作血清IgG、IgM、IgE检测,帮助临床诊断和流行病调查。常用方法:环卵沉淀试验, ELISA法特异抗体检测血吸虫感染早期引起肝、脾肿大,

37、晚期发展为门脉高压、巨脾和腹水。简介囊虫抗体检测 猪肉绦虫的幼虫寄生人体,机体产生特异抗体、,寄生虫感染免疫学检测,CRP是一种急性时相蛋白,由肝脏合成,能激活补体促进细胞吞噬等免疫功能。近年来CRP检测被广泛应用。CRP增高特点为:急性期增高明显,预后降低迅速,且受其它因素影响特别小,特异性较差。明显增高:急性细菌性感染、严重创伤、烧伤、大手术、风湿病活动期等。轻度增高:病毒感染、恶性肿瘤、心血管疾 病、肝炎、移植等。 降钙素原:,丙反应蛋白和冷球蛋白及循环复合物检测,艾滋病血清血检查,艾滋病又称获得性免疫缺陷综合症(acquired immunodeficiency syndrome ADIS)机体感染艾滋病病毒后血清中产生抗体,实验室一般首先用过筛试验进行检测,发现阳性再作确诊试验。过筛试验常用酶免疫法,要求敏感性高,不能有假阴性,允许少量假阳性。确定试验一般用蛋白印迹法,要求敏感性高、特异性高。遇到可疑标本,一般病人三月后复查,我国感染HIV较多为型。RNA检测用于检测病毒载量。,HIV病毒检测目前主要为二类:HIV抗体检测和HIV病毒核酸检测。筛查试验:ELISA试验确诊试验:免疫印迹试验核酸检测:PCR,感谢您的聆听！,