公卫实践技能环境样品的采集与现场监测课件.ppt

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1、公共卫生基本操作技能 -环境样品的现场采样与现场检测,2018.3.15,主要内容,生活饮用水样品的采集空气样品的采集公共用品样品的采集,一、生活饮用水样品的采集,生活饮用水标准检验方法 水样的采集与保存 GB/T 5750.2-2006,规范,2007-07-01实施,几个概念：水源水出厂水末梢水二次供水分散式供水,一、水样采集地点和采样方式的选择,水源水指集中式供水水源地的原水,表层水,水库水,井水,出厂水指集中式供水单位水处理工艺过程完成的水采样点应设在出厂进入输送管道以前处,末梢水指出厂水经输水管网输送至终端（用户水龙头）处的水二次供水指集中式供水在入户之前经再度储存、加压和消毒或深度

2、处理，通过管道或容器输送给用户的供水方式分散式供水指用户直接从水源取水，未经任何设施或仅有简易设施的供水方式。,一、水样采集地点和采样方式的选择,1、分散式供水 家庭储水器采样 利用居民使用的取水器取样后,分装到盛水容器中2、集中式供水 采集集中式供水水样时，先打开水龙头，放水3-5分钟，冲洗管道附着物，用盛水容器直接取样,水样采集地点和采样方式的选择,3、出厂水： 在送水泵房（二级泵房）取样或在距送水泵房最近的水龙头采样。 4、末梢水： 在居民家中水龙头采样，用盛水容器直接取样。 5、二次供水： 同末梢水。,二、采样前准备工作,现场检测仪器余氯比色计、笔式酸度计、笔式水温计等采样容器灭菌玻璃

3、瓶、聚乙烯水桶等保存剂详见标准GB/T 5750.2-2006附表其它酒精灯、打火机、采样箱/冷藏箱、标签、采样记录表格、笔、运输工具,三、采样容器的选择,1） 容器必须性质稳定，不能是新的污染源。2） 容器壁不应吸收或吸附某些待测组分。 对测金属的水样多选用聚乙烯瓶，测有机物的水样一般只能用玻璃瓶。3）容器不应与待测组分发生反应。4）用于微生物检验用的容器及瓶塞(瓶盖)应能经受灭菌的温度并且在这个温度下不释放或产生任何能抑制生物活动或导致死亡或促进生长的化学物质。,四、采样容器的洗涤与灭菌,1）测定理化指标盛水容器的清洗 ：、一般理化指标盛水容器的清洗 采样容器在使用前应先用洗涤剂洗去油污，

4、用自来水冲净，再用质量分数10盐酸或硝酸浸泡8h,取出沥干,用自来水冲洗3次，再用纯水淋洗净后备用。 、有机物指标盛水容器的清洗 先用自来水刷洗，尽可能预先除去原来沾污的物质，用重铬酸钾清洁液浸泡24h,用自来水冲洗干净，再用纯水淋洗净后,置烘箱内180 烘4h,冷却后再用纯化过的己烷，石油醚冲洗数次。在采集水样时还需用水样洗涤容器23次（油类除外）。,注意：测汞的容器应采用1+3硝酸充分荡洗后放置数小时，然后依次用自来水和蒸馏水淋洗干净。 测铬的容器瓶不能用铬酸或盐酸洗液泡洗，应用洗涤剂洗涤后用硝酸浸泡洗涤。测铁所用的玻璃仪器不能用铁丝柄毛刷，可用塑料棒栓以泡沫塑料刷洗。测锌、铁用的玻璃仪器

5、用酸洗后不能再用自来水冲洗，必须直接用纯水淋洗。测氨和碘化物用的仪器洗净后应浸泡在纯水中。,采容器的洗涤与灭菌,2） 用于微生物检验水样盛装容器：、容器的洗涤：玻璃容器用自来水和洗涤剂洗涤，然后用自来水彻底冲洗。用质量分数为10的盐酸浸泡过夜，再用自来水，纯水洗净。、容器的灭菌:容器用高压蒸汽灭菌121维持15min；干热灭菌要求160 维持2h。灭菌后容器在2周内使用。,水样采集和保存的主要原则,必须具有足够的代表性。水样中各种组分的含量必须能反映采样水体的真实情况，监测数据能真实代表某种组分在该水体中的存在状态和水质状况，为了得到具有真实代表性的水样，就必须在具有代表性的时间、地点，并按照

6、规定的采样方法采集有效样品 。采集的水样量应满足分析的需要并应该考虑重复测试所需的水样量和留作备份测试的水样用量 不能受到任何意外的污染,五、水样的采集,五、水样的采集（微生物学指标）,选择灭菌玻璃瓶用酒精灯或酒精棉拭子消毒出水口放水数分钟采集水样约占玻璃瓶容积的80%贴标签、写采样记录表低温保存（约4 ）条件下立即送实验室,采样时应注意无菌操作不得用水样刷洗已灭菌的采样瓶，并避免手指和其他物品对瓶口的玷污。采集用于微生物指标检验的样品前应对水龙头进行消毒,注意事项,五、水样的采集（理化指标）,选择正确的采样容器放水数分钟用被采水样荡洗采样容器、塞子23次采集水样约占容器的80%添加保存剂贴标

7、签、写采样记录表低温保存（约4 ）条件下尽快送实验室,采样前应先用水样荡洗采样容器和塞子23次 根据检测项目添加保存剂,重复23次,注意事项,常规检验指标的采样容器、保存方法和体积,填写现场采样记录,基本要求： 在采样现场把采样记录用胶纸粘贴或悬挂标签于水样瓶上，注明水样编号、采样者、日期、时间及地点等。 同时，采样时还应记录所有现场调查及采样情况，包括采样目的、采样地点、样品种类、编号、数量，样品保存方法、采样时的气候条件以及采样点周围环境卫生状况以及水质的表观情况等。,七、注意事项,1采集末梢水样时，取样时应打开水龙头放水3-5分钟，排除沉积物。2同一水源、同一时间采集几类检测指标的水样时

8、，必须先采集供微生物学指标检测的水样。3采集供微生物检检测加氯消毒的水样时，为了除去余氯，在灭菌前向容器里加入硫代硫酸钠以还原余氯（每125mL水样加10g/L的硫代硫酸钠0.1ml ）。,4采集供微生物检测的水样时，应先用酒精灯对取样口进行消毒，然后将水龙头完全打开，放水3-5分钟,以放去管道内的储水后再采样；用灭菌瓶直接采集，不得用水样涮洗采样瓶，采样时握住瓶子下部，避免手指和其他物品对瓶口的沾污。5完成现场测定的水样，不能带回实验室供其它指标测定使用。,八、水样的保存与运输,采集的各种水样从采集地到分析实验室之间有一定距离，运送样品的这段时间里和在水样采集后到进行分析之前这段时间里，由于

9、环境作用，水质可能会发生物理、化学和生物等各种变化，为使这些变化降低到最小程度，需要采取必要的保护性措施（如添加保护性试剂或致冷剂等），并尽可能的缩短运输和保存时间。,影响水质变化的因素：1生物作用：微生物的新陈代谢,会消耗水样中的某些组分，也能改变一些组分的性质。如细菌可还原硝酸盐为氨、还原硫酸盐为硫化物等。2化学作用：测定组分可能发生氧化或还原反应;二价铁可氧化为三价铁;二氧化碳含量的改变，能引起水样pH发生变化;由于铁、锰价态的改变，使沉淀与溶解形态改变，导致测定结果与水样实际情况不符等。,影响水质变化的因素:3物理作用：光照、温度、静置或振动、敞露或密封这些条件及容器材料不同都会影响水

10、样的性质，如二氧化碳、汞。长期静置会使某些组分沉淀析出，容器内壁不可逆地吸咐或吸收一些有机物或金属化合物。,水样的保存,水样保存的基本要求（1）抑制微生物作用；（2）减缓各种待测组分的变化，要求做到减缓水样的生物化学作用、减缓化合物或络合物的水解、解离及氧化-还原作用；（3）尽量减少被测组分的挥发损失,避免沉淀吸附或结晶物析出所引起的组分变化 。,水样的保存,水样保存措施:1） 冷藏 水样冷藏时的温度应低于采样时水样的温度，水样采集后立即冷藏，置于暗处保存，一般于2-5。冷藏并不适用长期保存。2）加入保存剂: 不同的水样、同一水样的不同的监测项目，要求使用的保存药剂不同，保存药剂主要有生物抑制

11、剂、pH值调节剂、氧化或还原剂等类型,水样的保存条件保存期限的长短主要取决于待测物的浓度、化学组成和物理化学性质。 一般说来，待测物浓度越高保存时间越长；清洁水样保存时间长；稳定性好的成分保存时间长，而不稳定的成分保存时间短，甚至不能保存必须立即分析或现场测定。现场测定指标： 水温、pH，游离余氯、电导率、浊度、色度等,水质全分析采样体积、保存条件,PS:放射性指标、两虫指标不要求做,样品的运输过程中的基本要求:1盛水容器应当妥善包装，以免它们的外部受到污染，特别是水样瓶颈部和瓶塞在运送过程中不应破损或丢失。 2为避免样品容器在运输过程中因震动碰撞而破损，最好将样品瓶装箱并采用泡沫塑料减震或碰

12、撞。,水样的运输,水样的运输,样品的运输过程中的基本要求:3需要冷藏的样品必须达到冷藏的要求 。水样存放点要尽量远离热源，不要放在可能导致水温升高的地方（如汽车发动机旁），避免阳光直射。冬季采集的水样可能结冰，如果盛水容器用的是玻璃瓶，则应采取保温措施以免破裂。4根据所检测的项目要求，水样要在保存时间内送到检测室,并同时考虑检测准备工作所需要的时间。如测定微生物指标样品应在4h内送达实验室。,九、水样采集的质量控制,1、现场空白 在现场以纯水作样品，同样品一样进行处理。2、运输空白 以纯水作样品，从实验室到采样现场又返回实验室3、现场平行样 采样的10%，但要保证每批至少2组平行样4、现场加标

13、样或质控样 样品总量的10%，但要保证每批至少2个,二、空气样品的现场采样,2.1 采集空气样品的种类,一氧化碳、二氧化碳甲醛、氨气、二氧化硫苯、甲苯、二甲苯、挥发性有机物PM10、PM2.5、TSP微生物（菌落总数）,2.2空气样品采集工用具：,采样仪：大气采样器（单泵或双泵）、粉尘采样仪、六级筛孔微生物采样器、三角架、二联球； 采集器：液体吸收管、固体吸附管 、采气袋、平皿等；工用具：温湿度计、空盒气压表、采样记录单、皿桶 和记号笔等。,2.3 空气样品采集方法：,直接采样法：一氧化碳、二氧化碳液体吸收法：甲醛、氨、二氧化硫等固体吸附法：苯、甲苯、二甲苯、挥发性有机化合物滤膜采样法：PM2

14、.5、PM10、TSP自然沉降法：公共场所空气中菌落总数（还可用撞击法）,富集气体采样,2.3.1.直接采样法：,工具：采气袋、二联球、 标签纸、记录笔、 采样记录单；检查：气袋密闭性；（充气后加紧进气口将采样袋至于水中观察）采样：连接、采样；（3-5次）记录：编号、贴标贴、填写采样记录单。,样品采集技能（空气）,注意： 采集二氧化碳样品时需要使用铝箔复合薄膜采样袋，一氧化碳样品采集时两种气袋均可。,2.3. 2.液体吸收法和固体吸附法（富集采集）,设备：大气采样器、三脚架、液体吸收管、固体 吸附管、缓冲瓶、温湿度计、空盒气压表、 采样单、记号笔；准备：检查仪器、连接仪器设备、仪器流量校准。采

15、样：设定采样时间、采样；记录：编号、填写采样单。,样品采集技能（液体吸附法）,样品采集技能（空气）,样品采集技能（空气）,注意：用胶管将缓冲瓶侧方扣与大气采样器连接，大泡吸收管侧方口与缓冲瓶方口相接，大气采样器与采样管连接时不要与进气口连接，否则会开机后吸收液倒吸采样器内，造成腐蚀。,样品采集技能（固体吸附法）,注意：活性炭管或其他采样管的箭头，将有箭头指向的一端与采样器相连；采样管上未标明箭头，采样后应标明进气方向。,样品采集技能（空气环境）,在气体采样时要同时测量温度和压强。用于计算污染物浓度时的标准体积的计算。,2.3. 3.滤膜采样法,设备：粉尘采样器、三脚架、滤膜、温湿度计、 空盒气

16、压表、采样单、记号笔；准备：检查仪器、装入滤膜采样盒；采样：设定采样时间、调整流量、采样；记录：编号、填写采样单。,样品采集技能（空气）,注意点：根据要求选择合适的切割器；合适的滤膜。玻璃纤维或石英滤膜放置时一定要毛面朝上。,样品采集技能（空气）,2.3. 4.自然沉降法和冲击法,设备：营养琼脂平皿、温湿度计、采样记录单、 记号笔；准备：设定采样点和采样高度；采样：暴露平皿5分钟；记录：编号、填写采样记录单。,样品采集技能（空气微生物-自然沉降法）,空气菌落总数采样平皿,六级筛孔微生物采样器,撞击法：通过六级筛孔微生物采样器采样,三、公共用品用具微生物采样方法,GB/T18204.4-2013

17、,一.现场采样,公共用品微生物的采样考核要点：注意数量、部位、全程无菌操作；考核样品： 茶具、餐具、脸盆、脚盆、浴盆、理发工具、 拖鞋、毛巾、枕巾、枕套、被单、被套,公共用品的数量是：抽取每类样品的3%-5%，每类至少1件,一.现场采样,2.3.2.所需工用具：容器：灭菌试管，10mL生理盐水 工具：无菌棉拭子、灭菌剪刀、规格板、 酒精灯、酒精棉球、灭菌镊子；工服：白大衣、帽子、口罩；用具：记号笔、采样记录单。,公共用品涂抹设备,公共用品涂抹用棉拭子,公共用品涂抹用规格板,一.现场采样,采样前准备：穿戴：穿衣、戴帽、戴口罩；点灯：点燃酒精灯；消毒：用75%酒精棉球消毒手。,指对公共用品的监测，

18、采样点为使用该物品时接触频率较高的部位 要素： 无菌操作（手套、工作服、口罩） 采样部位 采样面积 彻底浸湿棉签 用力、均匀、涂抹,公共物品采样,采样前准备采样箱（生理盐水管、平板培养基、无菌规格板、酒精灯、剪刀、消毒棉签、消毒手套、无菌瓶）,一般要求：随机抽取清洗消毒后准备使用的公共用品用具，无菌操作，使用灭菌干燥棉拭子，于10mL灭菌生理盐水内 浸润（吸取约1mL）后，在用品用具的适当部位来回均匀涂抹进行样品采集，再使用灭菌剪刀剪去棉签手接触的部分，将棉拭子放入剩余的9mL生里盐水内，4h内送检。,公共物品的采样方法,杯（茶）具采样： 在茶具内、外源与口唇接触处1-5cm高处的一圈采样。采

19、样面积为50cm2,毛巾、枕巾、浴巾采样：应在毛巾、枕巾、浴巾对折后两面的中央5cm5cm（25cm2）面积上均匀涂抹5次。每25cm2采样面积为1份样品，每件用品共采集2份样品。,床单、被单采样：在床单、被单的上下两部即与颈部、脚部接触部位5cm5cm（25cm2)面积范围内分别均匀涂抹5次，每25cm2采样面积为1份样品，每件用品共采集2份样品。,睡衣、睡裤采样：随机选择2个5cm5cm（25cm2) 面积范围内分别均匀涂抹5次，每25cm2采样面积为1份样品，每件用品共采集2份样品。,脸（脚）盆：在盆内二分之一高度相对两侧壁5cm5cm（25cm2)面积范围内分别均匀涂抹采样，每25cm

20、2采样面积为1份样品，每件用品共采集2份样品。,浴盆：在盆内一侧壁二分之一高度及盆地中央5cm5cm（25cm2)面积范围内分别均匀涂抹采样，每25cm2采样面积为1份样品，每件用品共采集2份样品。,坐便器：在坐便圈前部弯曲处选择2个5cm5cm（25cm2)面积范围内分别均匀涂抹采样，每25cm2采样面积为1份样品，每件用品共采集2份样品。,按摩床（椅）：在床（椅）面中部位选择2个5cm5cm（25cm2)面积范围内分别均匀涂抹采样，每25cm2采样面积为1份样品，每件用品共采集2份样品。,鞋类采样：应在每只鞋的鞋内与脚趾接触处5*5cm面积范围内分别涂抹5次。一双拖鞋为一份样品。,购物车（

21、筐）：在车（筐）把手处选择2个5cm5cm（25cm2) 面积范围内分别均匀涂抹5次，1件物品为1份样品，采样总面积为50cm2.,理发推子采样：应在推子前部上下均匀各涂抹3次。采样面积达到25cm2为一份样品。,美容美甲用品：与人体接触处涂抹采样，采样面积达到25cm2为一份样品,公共物品的采样,其他用品：在用品与人体接触处选择2个5cm *5cm面积范围内分别采样，每25cm2采样面积为一份样品，每件用品采集2份样品。,公共用品用具微生物采样视频,一.现场采样,注意点：1、整个过程在酒精灯旁按无菌操作；2、记录：编号、填写采样单。,现场采样操作的体会淡定有礼、注意仪表、认真审题、示意开始、

22、选对容器、取齐工具、联接设备、做好准备、示范操作、口述补充、步骤不漏、流程合理、取样有量、取点有限、取时有控、保存有剂、无菌操作、紧记全程、两人配合、环境条件、贴上标签、保存条件、填写采单、运输送检。,二.现场检测,1.认识现场检测仪器CO分析仪CO2分析仪,CO仪,一氧化碳检测仪的使用,1、检查设备电压。将BAT.EXT电源转换键拨到BAT处，按下电源开关键，指示灯亮，将TEST测试开关键向上扳动，检查电源电压，电量应符合说明书要求，检查完毕，扳下TEST测试键。2、仪器预热5-20分钟。3、零点校准：将仪器侧面测量调零切换器旋钮放到调零处，按下pump泵开关，指示灯亮或可听见泵的声音，此时

23、说明泵在工作，约两分钟稳定后，显示屏显示0.5时即可；若超出范围，调节仪器面板零点电位器至0-0.5稳定即可。,一氧化碳检测仪的使用,4、终点校准；应在有通风的条件下进行。将仪器侧面测量调零切换器旋钮放到测量位置，关闭pump泵开关，从in进气孔通入一氧化碳标准气体，稳定约3分钟后，调SPAN旋钮，使显示值与标准气值相同，关闭钢瓶阀门，取下标气，打开泵开关，将残余在仪器内的标气排除，当显示值小于2.0时，将切换器旋钮放到调零处。5、现场测定：按相关标准或现场需要设置采样点和采样高度，仪器预热5-20分钟，并重新对零点进行校准。将测量调零切换器旋钮放到测量位置，接好取样器，待显示值稳定后记录结果

24、。6、检测完毕关闭pump泵开关及电源，将仪器收好。,二.现场检测,2.5.CO测定仪简答题(1)如仪器显示值是2.0ppm，如何换算成/m3？(2)简述国标方法中规定的co现场气体分析仪原理。(3)地下车库中的主要污染物是CO还是CO2？简答题 答案(1)浓度换算：2.0 28/22.4 = 2.0 1.25 = 2.5。(2)分析仪原理： CO对不分光红外线具有选择性的吸收， 在一定范围内，吸收值与CO浓度呈线性关系，因此 可根据吸收值确定样品中CO的浓度。 (3)主要污染物是CO。,二.现场检测,2.5.CO测定仪步骤 操作要点 分点（1）检查电量，电量充足可正常工作，否则应预先充电；

25、*（2）打开仪器电源，预热10-30分钟； *（3）用零空气（霍加拉特氧化管）调节仪器零点； *（4）用标准气体调节仪器终点； *（5）打开仪器泵开关，将气体抽入仪器内测定； *（6）正确读出仪器响应值。 *（7）关闭电源，断开连线，并收回。 *,二.现场检测,2.6.CO2测定仪简答题：（1）公共场所空气中CO2卫生标准的浓度表示单位？（2）仪器显示3000ppm，如何换算成百分浓度？（3）简述国标方法中规定的二氧化碳现场气体分析仪原理。（4）请说出仪器零点校准的方法。简答题 答案（1）浓度表示单位为%；（2） 3000/1000000 100%=0.3% ppm数值/10000（3）现场分析仪原理：二氧化碳对不分光红外线具有选择性的吸收，在一定范围内，吸收值与二氧化碳浓度呈线性关系，因此可根据吸收值确定样品中二氧化碳的浓度。 （4）通入高纯N2调节仪器零点。,二.现场检测,2.6.CO2测定仪步骤 操作要点 分点（1）检查电量，电量充足可正常工作，否则应预先充电； *（2）打开仪器电源，预热10-30分钟； *（3）用零空气（ 通入高纯N2 ）调节仪器； *（4）用标准气体调节仪器终点； *（5）打开仪器泵开关，将气体抽入仪器内测定； *（6）正确读出仪器响应值； *（7）关闭电源，断开连线，并收回。 *,考出好成绩！,