肿瘤放射生物学课件.ppt

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1、肿瘤放射生物学 (Oncology Radiobiology),放射生物学研究的是辐射对生物体作用及其效应规律的一门科学。电离辐射对生物体的作用电离辐射的细胞效应电离辐射对肿瘤组织的作用正常组织及器官的放射效应分次治疗的生物学基础,放射生物学 由于电离辐射引起损伤，故损伤后有无恢复或修复的可能性，以及怎样减少不必要的损伤等，都是放射生物学研究的内容。因此，确切的说： 研究电离辐射对生物作用的机制、辐射损伤及其修复、放射防护等的综合性科学。,电离辐射的一般概念 电离辐射有粒子辐射和电磁辐射。 1、粒子辐射：射线、射线、带电的质子和中子的辐射； 2、电磁辐射：射线和X射线的辐射，这类辐射是光量子发

2、射的。,电离射线的一般特点：高能、穿透力强。它基本反映在电离射线的射程和电离密度上。 不同电离射线的区别：射线（氦核）、质子（氢核）带电荷，中子则不带电荷；质子、中子、 射线、射线的质量不同。,电离射线与物质的相互作用 在电离射线与物质的相互作用中，电离射线是外因，物质（包括组成生物机体的物质）是内因。外因通过内因起作用。 当运动着的粒子通过物质时，其速度将逐步降低而损失能量；损失的能量主要消耗在物质的电离或激发上。,带电的粒子通过物质时，和物质中原子壳层的电子碰撞，由于静电作用，使壳层电子产生加速运动，因而获得足够的能量而变成游离电子，它与正离子构成一个离子对。这就是电离作用。 离子对是负离

3、子（包括电子e）与正离子的合称。 离子对是电离作用的结果。,带电粒子和光量子对物质作用的区别 1、带电粒子和原子的作用：以原子点外围电子作用的可能性较大。在下例中，H2O+和e合称为离子对。 H2O+ H2O e H2O- 形成离子对需要一定的能量。不达到这个能量水平，就不可能形成离子对。,H2O,通过1V的电位差所获得的能量称为1电子伏特（eV）。在空气中产生一对离子需要的平均能量为32.5eV。 电离作用形成的离子对数量的相关因素： 1）、能量高，则形成的离子对多； 2）、在同一能量水平时，电荷多，形成的离子对就多；反之亦然；无电荷，则不形成离子对。粒子带电荷多，形成的离子对也就多；而射线

4、和射线，由于带电荷少，形成的离子对就少。,3）、粒子（射线）的速度大，电离密度（即离子对/cm，就是在1cm行程所形成的离子对的数量）小；速度小则电离密度大。粒子带电荷多，质量较大，故电离密度大，但它运行路程短，穿透力低，而射线穿透力较强。 当物质中的壳层电子所获得的能量还不足以使它成为游离电子时，电子受激发到更高的能级。即能量足够时发生电离作用，形成粒子对；能量不足时发生激发作用，不形成离子对。 带电粒子通过物质时，因为受到原子核电场的相互作用而改变其运动方向，即所谓散射。,2、中子与物质的相互作用：只有在中子流碰撞到原子的壳层或原子核时才发生作用。中子只有在原子核相碰撞时才能把能量转移给原

5、子核。 1）弹性碰撞：中子具有一个质子的质量而不带电荷。它是在原子核反应时产生的。由于中子与质子的质量相等，中子与质子（氢核，H+）相撞时发生最大的能量损失。这样的质子叫做反冲质子。反冲质子的能量质量都大于原来的质子。因此，中子很容易被许多轻元素物质（如水、石蜡）吸收，但能自由地通过重元素物质（如Pb）。,中子具有一定的能量，中子撞击原子核打出的一部分叫反冲核。反冲核又具有一定的能量，能够打出其它原子，即反冲核在其行程中能使与其相撞的原子都发生电离：,n,A,A,B,2）非弹性碰撞：中子穿入原子核内，交出自己的一部分能量，使核处于激发状态。激发了的核把从中子获得的能量以一个或若干个量子的形式发

6、射出来，随后进入核内的中子就带着较小的能量从核里飞出。通常是由快中子打重元素而得。 由于中子不带电荷，只有在碰撞时才能引起变化。,O,n,n,3）辐射俘获：打进去的是慢中子，放出来的是射线。中子被核所吸收，被激发了的核以量子的形式放出其多余的能量。慢中子的能量与气体的能量差不多，故又叫热中子。它是经一系列碰撞后能量逐渐减低的结果。 4）核反应：快中子打轻元素，打进去的是快中子，打出来的是质子（P）、中子等。,3、光量子与物质的相互作用： 射线和X射线都是光量子。它们的波长更短，能量更高。 射线一般是核衰变的结果，而X射线是认为发射的，是核外产生的。 射线和X射线与物质的作用通常称为电磁辐射。

7、尽管光量子不是粒子，但一般认为它们是有极微小的粒子（光子、量子、光量子、光量子流）组成的。其能量E可由下式求得： E= h，式中， =c/；h为普朗光常数，h=6.625210-34J/s； 为光子频率；c为光在真空中的速度； 为其波长。,光量子的能量很高，从几万电子伏特到几亿电子伏特。它们与物质的主要作用有3个方面： 1）光电效应：当一个光量子和原子相碰撞时，它可能将所有的能量h都交给一个电子，使电子脱离原子而运动，而光子本身被吸收。由于这种作用而释放出来的电子叫光电子。光电效应是在光量子能量较低时发生的。它与吸收体密度、原子质量数和原子序数有关。,X（）,h,e光电子,2）康普敦-吴有训效

8、应：光量子能量中等时发生这个效应。这个效应是光量子和原子中的一个电子发生弹性碰撞相互作用。其特征是碰撞之后，光量子将一部分能量传给电子，电子即从原子空间中以与光量子的起始运动方向成角的方向射出，光量子则朝着与自己初始运动方向成角的方向散射。,原子, 量子（散射）,e 康普敦电子,入射光量子,散射光量子,3）电子对的形成：当光量子的能量大于两个电子的静电能量质量（即1.02MeV)时,形成电子对。在形成电子对时，光量子本身完全消失。 电子和正电子的动能一般是不同的；它们与光量子形成的角度和也不一定相等。,入射光量子,e电子,e +正电子,原子,由于光量子的能量不同，与物质发生的作用类型也不相同，

9、如下图：,光电效应,康-吴效应,电子对形成,光量子能量,低,中,1.02MeV,剂量及其单位 剂量：单位质量的被照射物质所吸收的能量。通常用公式 D=E/M（J/g）表示。剂量单位随所表示的对象不同而异。 1、一般射线：伦琴 R（对X射线、射线）；生物当量伦琴Reb；物理当量伦琴Rep；组织伦琴Rad，Gy）。 吸收剂量与照射剂量不同。吸收剂量过去用rad（拉德）表示，现已改为Gy（戈瑞）表示。 1rad=6.24103eV/g；1Gy=102rad,2、放射性核素：放射性核素的剂量单位，以放射强度表示。单位有居里（Ci），毫居里（mCi）和微居里（Ci）。 上述伦琴、生物当量伦琴、物理当量伦

10、琴等均是照射剂量，它与X射线和射线产生的电离量有关，反映X射线和射线使空气产生电离作用的能力大小。1伦琴是指X射线或射线照射1ml或0.001293g空气，空气中的二级电子在空气中生成带有1静电单位的正负离子对时的照射剂量。但伦琴这个单位不适用于射线、射线和中子等粒子。,组织伦琴，实际上为吸收剂量，常用单位是拉德或戈瑞。不仅使用于X射线和射线，也可用于各种粒子射线。 1964年和1968年国际辐射单位及剂计量委员会建议对照射剂量和吸收剂量做出定义，用dose表示吸收剂量，而用expoure dose或expoure表示照射剂量。,电离辐射的生物学作用 生物机体对电离辐射的反应不同于无生命物质。

11、 1、生物机体对电离辐射的反应特征： 1）敏感 DNA在2.84C/kg(11000R)照射下，才引起结构变化；而在生物体内，若用LD100/30d来照射小鼠，只须几百伦琴就可以引起DNA结构变化。 2）射线对生物机体的作用有潜伏期。 3）生物机体对电离辐射的反应是损伤与修复的矛盾统一。,在照射后，早期以损伤为主，后期则以修复为主。 4）生物机体本身由于其个体发育和系统发育的阶段性不同，也具有特殊性。就放射敏感性而言： 胚胎期成年；高等动物低等动物；动物植物；原生动物病毒；幼体敏感性高；造血器官、胸腺、生殖腺敏感性高。,2、电离辐射形式与生物学效应的关系： 1）不同射线的生物学作用 在生物体吸

12、收能量相等的情况下，不同射线的生物学效应的概略比值（以等效伦琴作统一单位）如下： X射线及射线 1；射线 1；射线 10-20；P（质子）10；n（快、慢中子）5-10。 可见射线有很大的生物效应，但它的穿透能力低。,2）剂量与剂量率 放射生物学效应是一种耗能过程。电离辐射的剂量与生物学效应之间有一定的关系。以射线剂量为横坐标，机体的存活率或存活分数为纵坐标，则可得一剂量-存活曲线。,2）照射方式 照射方式不同，对生物体的影响也不同。 （1）总剂量相同，分次照射没有一次照射那样强烈。这可能与分次照射之间发生的补偿或修复有关； （2）全身照射与局部照射，局部照射机体对射线的忍受量高；全身照射机体

13、对射线的忍受量低。 因此，在肿瘤放射治疗中，多采用局部、分次照射。,（3）内照射与外照射 内照射的情况复杂，涉及放射源、半衰期和半排泄期。内照射对生物机体的危害较大。临床肿瘤放疗中，多采用外照射。,3、外界因素对电离辐射生物学效应的影响： 1）水分 机体水分多，则敏感性高，反之亦然。 2）氧 有氧时，生物机体对射线的敏感性高，死亡率也高。照射时，有氧对生物机体的影响较大。 高LET射线，如快中子、负介子、轻原子核、其生物效应受氧的影响较X射线小。随着LET的增加氧效应降低，因为高LET射线引起的损伤要比低LET射线严重得多。,LET（Linear energy transfer）即传能线密度。

14、 电离发生在高速运动的带电粒子（如电子）行进的径路中，这些粒子是由于吸收了辐射能量而运动。LET是描述沿着这种粒子的径路产生的电离能量密度的重要参数，即单位长度径迹上传递的能量，它表示在每单位径路长度上，在组织中所沉积的能量的多少。,3）温度 低温对生物机体的辐射损伤有延缓作用。这可能是能量的吸收、传递需要时间和适当的温度等。 4）化学物质 化学物质对电离辐射的生物学效应表现为： （1）可以减轻射线反应 如巯基化合物可以把氢原子交给那些受射线作用的DNA所产生的自由基，从而封闭自由基； （2）可以加重射线反应 能够提高某些肿瘤细胞的放射敏感性。,4、电离辐射对生物体损伤的机制： 1）电离辐射的

15、直接作用和间接作用 辐射导致的DNA分子断裂分为两类：直接作用和间接作用。 直接作用：是指射线直接作用于DNA分子，使DNA分子发生损伤而导致断裂。 间接作用：是指辐射可使水分子产生自由基，自由基作用于DNA分子并使之断裂。,2）电离辐射作用的三个阶段（1）物理阶段:10-1810-12s射线照射路径上的能量释放、激发和电离（2）化学阶段：激发电离，化学键断裂、自由基形成，分子结构破坏和修复正常（3）生物阶段：分子结构破坏 酶反应 修复 基因变异/癌变 DNA不能复制/ 细胞死亡 有丝分裂停止,3）电离辐射对DNA损伤的方式 （1）DNA双链断裂 （2）DNA单链断裂 （3）碱基丢失 （4）形

16、成嘧啶二聚体 （5）DNA交联形成 （6）碱基改变 （7）蛋白交联 （8）氢键断裂）,细胞存活曲线 细胞存活曲线是理解放射生物学许多内容和概念的基础。 肿瘤及正常组织对于电离辐射的生物学效应是受许多因素支配的。 通过电离作用，能量在活组织中沉积，从而引起一系列化学反应，导致细胞损伤并最终出现临床上可观察到的效应。,正常组织和肿瘤对于辐射的反应是极为复杂的生物变化过程，当前只能从经验主义的角度来加以阐述。 电离辐射，无论是电磁波还是粒子辐射，都是在细胞的各个部分沉积其能量的。细胞内部并没有防碍能量沉积的屏障。 每克组织（含有1022个分子所吸收的总能量是极少的，而且只有很少数的分子被电离。例如，

17、400cGy（Gy的百分单位）的辐射只能引起组织吸收约4.1910-3 J/g的能量，仅有1/5107分子被电离。,细胞存活曲线是用来描述辐射吸收剂量与存活细胞数量之间的关系。 细胞存活（Cell survival）和细胞死亡（CellDeath）的放射生物学定义： 电离辐射后，细胞有两种主要的效应，即功能丧失和生殖能力丧失。 对于已分化不再增殖的细胞，如神经细胞、肌肉细胞或分泌细胞，丧失其特殊功能便可认为是死亡；而对于增生细胞，如造血干细胞或离体培养生长的细胞，丧失维持增生的能力，也就是失去完整的增殖能力，便称为死亡，即增殖性死亡（reproductive death）。,这个定义反映了放射

18、生物学对细胞存活的狭义概念。1个细胞表面完整无损，具有生理功能，有能力制造蛋白或合成DNA，甚至还能挣扎着进行一次或两次有丝分裂，但是，由于它已经丧失了无限分裂和产生大量子代的能力，依然是被看成死亡细胞；一个存活的细胞，保持着完整的增生能力，能够持续繁殖，产生大量的克隆或集落，称为“克隆源性细胞”。,这个定义在肿瘤的放射治疗上特殊意义：1）通过测定离体培养细胞的集落生长能力或测量在体内致肿瘤生长的能力，很容易并准确地做出评价；2）在一定意义上，只需“杀死”这些细胞，即使它不能分裂、不能继续生长、不能扩散和转移，就能根治肿瘤。 一般来说，破坏非增殖细胞的功能需要100Gy的剂量，而使细胞丧失增殖

19、能力的平均致死剂量往往比2Gy还少。,1、离体培养细胞存活曲线 单个细胞生长成肉眼可见的大克隆，是细胞保留其完整增生能力的最有力的证明。这种增生能力随辐射剂量呈函数性消退的关系，可用剂量存活曲线描述。 集落和克隆：集落是指一团细胞，克隆是指含50个细胞以上的细胞集落。克隆是集落中的一类，而集落未必是克隆，尽管它们都是由1个细胞持续繁殖形成的细胞团。1个细胞只有经过连续5代以上的繁殖，才能形成一个克隆。,集落形成率（plating efficiency）：就是用来说明种植细胞能生长成集落的百分数。如果接种100个细胞形成70个集落，其集落形成率是70%。将细胞种植在同样的瓶皿中，X线照射以8Gy

20、，孵育1-2周，固定、染色，可观察到下列几种情况： 1）一些种植的单个细胞依然以单个形式存在，并不分裂； 2）一些细胞挣扎着完成一次或两次分裂，形成很小的发育不全的集落； 3）另外一些细胞长成大集落。这些细胞称为“存活细胞”，因为它们在平皿中保持了完整的增殖能力。,若平皿中接种2000个细胞，用8GyX射线照射。在未照射前，由于PE是70%，2000个贴壁细胞中只有1400个能形成集落，而照射后只有32个集落，所以受8GyX射线照射后的细胞存活率是： （32/1400）100%=0.023% 因此,可以按下式得出细胞存活率: 细胞存活率=(所计数的集落数/细胞接种数PE) 100%,2、细胞存

21、活曲线的形式 电离辐射对细胞群体的效应，即照射剂量与细胞群体的存活能力之间的剂量-反应关系，可借细胞存活曲线得到定量表达。 细胞存活曲线又称剂量-存活曲线，是绘制在半对数坐标纸上的。横坐标为算术刻度，从原点向右表示各单次照射剂量的增大；纵坐标为对数刻度，表示细胞群体受不同剂量照射后的细胞存活率。,对于致密的电离辐射（高LET辐射），如粒子或低能中子，存活数据从一开始就非常趋近为一条直线，受这种性质射线照射的特殊细胞，只用一个参数就完全能描述存活曲线，即直线的斜率。这个斜率用使成集落的细胞数下降到37%所需要的剂量来表达，称为37%剂量斜率，定名为D0。实际D0是在剂量-效应曲线的直线部分，使细

22、胞存活率下降到原来的37%处（如从0.1到0.037）所需要的照射剂量。,D0的定量是使平均每个细胞发生一次失活事件所需要剂量。 电离辐射照射后，典型的哺乳动物细胞存活曲线是由“肩部”（低剂量范围内的弯曲部分）和“指数部”（较高剂量范围内的直线部分）组成的。曲线中有3个必不可少的参数： 1）将指数部的直线向左方延伸，直到与纵轴相交，交点处的纵轴上的数据被成为外推值n。n。表达细胞被射线杀死时需要击中的细胞的靶数或击中数，简称为细胞核内的靶数。,2）由细胞存活率为100处向右方引一条与横轴相平行的直线，直至与直线部分的延长线相交。与这一线段相当的横轴上剂量的大小，被称为准阈剂量Dq。Dq表达该细

23、胞修复亚致死性损伤的能力，也可以理解为“无效”的照射剂量。实际上，Dq是表示细胞辐射耐性的参数。,3）在指数部直线上的任何一点向下方绘制一条与纵轴平行的垂直线段，使其长度达到相当于起始点值的37%的那一点为止。然后再由此垂线终点处向右方引一平行于横轴的水平线，直到与指数部的直线相交。这一水平线的长度所相当的剂量，为平均致死剂量，也就是指数部直线的斜率D0。 D0表示平均致死剂量，表达细胞群体的放射敏感性。,随细胞群体的放射生物学特性不同，其存活曲线的形状也各异，从而这3个参数的数值也不相同。 一般来讲，不少细胞群体，包括正常组织的和肿瘤的，其存活曲线中的D0值相差不大，有些还很接近，但Dq值却

24、有较大差别。 有些肿瘤的肩部较宽，因而放疗效果不佳。正常小、大肠隐窝干细胞存活曲线中的Dq值较高，说明对放疗有抗拒性。,3、影响细胞存活曲线形状的因素 D0值可以作为表示细胞放射敏感性的一个指标。因此，影响细胞存活曲线形状的因素，一般也是影响放射效应的因素，在制订放射计划时应加以注意。 1）细胞周期的时相 处于细胞周期中不同时期的细胞，其放射敏感性互不相同的情况，称为对细胞周期的依赖性。细胞对辐射的反应随受照射当时所处的时相的不同而异。处于M期的细胞对辐射最敏感，而处于晚S期的细胞敏感性最低，两者的放射敏感性可相差2.5倍。,细胞群体在第一次照射后，剩余的存活细胞再分布于细胞周期中对辐射敏感的

25、时相，则易于被再次的照射所杀伤。 2）氧效应 细胞氧分压的大小能影响细胞的放射敏感性。在无氧状态下，细胞的放射敏感性约为有氧状态下的1/3。氧分压不同时，D0值有变化。 氧通过辐射所诱发的自由基而增加细胞的损伤，造成不可修复的生物化学变化，引起了加强放射效应的作用。而在乏氧状态下细胞受照射时，可通过电子俘获造成修复的可能性增加，放射效应也会随之减弱。,已知一些肿瘤中含有10%-20%氧分压低的细胞（即乏氧细胞）这些乏氧细胞的存在是肿瘤放射治疗的一大难题。 在所有的存活水平要达到同一生物效应，乏氧时所需要的射线剂量为有氧时的3倍。这种比例相当恒定。由于氧被称为剂量改变剂（dose-modifyi

26、ngAgent），乏氧时所需要射线剂量与有氧时所需要射线剂量之比称为氧增强比（Oxygen enhancement ratio OER）。简言之，氧可以增加细胞的放射敏感性，其增加的比值为OER。,增加放射敏感性与减少放射剂量是一致的。因此，以细胞存活率表示： 乏氧 100% 37% 有氧 100% 37% OER= 3/1=3 OER以同一水平的细胞存活率为比较前提。若OER为1，则说明无氧效应。,3Gy,1Gy,放射敏感性与细胞存活曲线的D0值的倒数成比例。放射敏感性与氧浓度的关系是：氧分压从0增加到大约4.0kPa（30mmHg）时，放射敏感性增加很迅速，氧张力进一步增加到1个大气压的纯

27、氧时，其增敏作用的增加并不明显。 致密电离辐射时的存活曲线是指数型的，没有起始的肩段。此时，在有氧和乏氧情况下，其存活曲线重合。OER是1，即没有氧效应。对于介于致密、稀疏之间的中间型电离辐射（如中子），存活曲线有一小的肩段。在这种情况下，氧效应是明显的。,对于稀疏电离辐射如X射线，其氧效应大而重要。对于象粒子那样的致密电离辐射，无氧效应；氧效应关系可以表示为： 氧效应 稀疏电离辐射中间型电离辐射致密电离辐射 X射线 快中子 粒子 OER 2.53.0 1.6 1.0,3）LET 高LET的辐射照射可使细胞存活曲线的肩部变小甚至消失，同时指数部的斜率变小，即直线变陡。在临床肿瘤放疗中，现在除了

28、常规使用的X射线和射线外，已逐渐使用了快中子、负介子、质子等高LET的辐射，以便对肿瘤细胞产生更大的杀灭作用。 4）剂量率 当减低辐射照射剂量时，以同一剂量照射后，存活的细胞数就明显增多。这是由于在照射过程中，亚致死性损伤得到恢复，以及未受损伤的或仍有活力的细胞在极低剂量率的条件下发生了增生的缘故。,亚致死性损伤（SLD）是指能被细胞正常修复的损伤，往往在照射后2-6小时便得到恢复。根据定义，SLD不是直接导致细胞死亡的，然而它却能使细胞对再次受到照射时的敏感性提高。 如果继一个辐射剂量照射后，相隔一段时间，再受到第二个剂量的照射，由于SLD尚未得到恢复，这种损伤就可以成为致死性损伤。 细胞存

29、活曲线中的肩部就是反映SLD的积累过程及细胞修复SLD的能力的。 常规放疗中所使用的辐射源，多具100cGy/min的剂量率。每个分次剂量的给予只需几分钟，故在,每分次实际放疗中恢复是很少的。 5）温度效应 细胞的放射敏感性随照射过程中的温度变化而变化。温度升高时，敏感性增加；温度降低时，敏感性降低。和OER一样，热增强比（heat enhancement ratio，HER）也是一个比值。 6）防护剂与增敏剂,7）分次照射 将总剂量分次施予，能对正常组织有较好的容让效应（sparing effect），而仍对肿瘤有致死效应。 使用多分次照射，就会在每一次分次照射之后都重建一个肩部。总剂量相同

30、，但分次照射的次数不同，所达到的生物学效应相差很大。例如，10200cGy只有5 400cGy效应的1/90；而6 200cGy只有3 400cGy的1/15。,两个细胞群对于一定剂量的单次X射线照射，存活分数如果只有微小的差别，那么这种差别在分次剂量照射后便被放大。 许多肿瘤细胞是乏氧的，其修复SLD的能力降低。因此，分次照射所致的辐射损伤，在肿瘤细胞中累积的要比在周围正常组织细胞中积累的大；另外，肿瘤和正常组织的有效倍增时间，可能由于照射后细胞的丢失等影响因素而表现出显著的差别，也即正常组织在起初遭受辐射损伤以后增生速率可能会大大增快，而肿瘤则在每次分裂之后有很高程度的细胞丢失。因此，分次

31、照射可增加治疗比。,4、放射损伤的修复 从分子水平到细胞水平，有8种以上的放射损伤修复，且分别和癌细胞照射后出现的种种现象有关。 目前，在放射治疗中最需要注意的是Elkind修复亚致死性损伤的修复和PLD修复潜在致死性损伤修复。,1、Elkind修复 细胞照射后出现损伤，有的细胞失去无限生长能力而死亡，有的能从损伤中逐渐修复，并可保持无限增生的能力。 1959年，Elkind发现，当细胞受照射产生亚致死性损伤（SLD）而保持修复的能力时，细胞能在3h完成这种修复，即称为Elkind修复。如若以11.2Gy一次照射，细胞的存活率为0.001%；而先以5.05Gy照射，经过18.1h间隔再以6.1

32、5Gy照射，细胞存活率变为0.0051%。也就是说，在18.1h内第一次照射造成损伤的细胞经过修复，使细胞存活率提高了5倍以上。,若两次照射的存活曲线完全相似，可以重合，即两者n值和D0值都相同，这表示第一次照射时受到SLD的细胞在接受第二次照射之前，即在18.1h的间隔之内已经完成修复。所以，在需要进行分次照射的放射治疗中，这种修复是制定治疗方案时必须考虑的重要因素。 2次分次照射所引起的最初存活率增高与SLD的修复有关，其修复与两次照射的间隔时间密切相关。,2、PLD修复 是指潜在致死损伤修复（repair of Potentially lethal damage）。首先使用这个名词的是加

33、拿大人Whitmore。 PLD是指正常状态下照射后应死亡的细胞，由于在照射后置于适当的条件，进行了损伤修复而存活的现象。 若用X射线以20Gy对荷瘤小鼠进行照射，照射后再隔不同时间取出肿瘤进行移植。结果是取出的时间越迟，存活率越高。存活率的升高常在照射后第6h达到最高值。,这种条件下由于20Gy照射几乎可使肿瘤组织内有氧细胞全部死亡，所以，可以认为与PLD修复有关的细胞几乎均为乏氧细胞。 PLD修复常见于饱和密度生长期的细胞和乏氧细胞。如果认为PLD修复是乏氧细胞特有的一种修复，就要把PLD修复看作是应当特别注意的现象。 对于PLD修复是否和Elkind修复性质不同这一点是有争议的，也许没什

34、么不同，只是由于照射后所处的条件不同而产生的现象不同而已。,综上所述，Elkind修复和PLD修复都发生在第一次剂量照射后的最初几个小时内。 SLD的大小是由第一次剂量后不同时间给予的第二次剂量的反应来测量的，重要的是第一次剂量和引起更多细胞分裂的某种刺激之间的时间间隔。 在高LET射线作用后SLD和PLD都不那么明显。,组织水平的细胞动力学,组织在受到照射后出现的效应与培养细胞出现的效应不同。 在组织效应的表现中，由于组织受神经和内分泌系统的影响以及这些系统在射线的作用下产生变化的影响，所以不是单一的效应。如照射肿瘤时，同时也破坏肿瘤周围的血管，结果使得肿瘤及邻近组织的血流量减少，既可使肿瘤

35、和组织出现放射抗拒性，也可由于血运停止，引起肿瘤和组织死亡的继发改变。,影响组织放射效应的主要因素 1、射线使细胞死亡而形成的存活率，或致死率 2、射线作用后残存于组织内的细胞的增殖能力和修复能力； 3、被破坏的组织及脏器的再生能力； 4、利于细胞增殖及组织再生的环境因素，例如血管系统的保存情况。,肿瘤组织中细胞的构成 肿瘤组织由肿瘤细胞及其作为支持组织的间质组成，通常只有肿瘤细胞进行增殖。 1）P细胞/增殖细胞 肿瘤体积增长的主要来源,占整个肿瘤细胞群体的比例称为生长比例； 2）Q细胞/静止细胞 由静止或G0期细胞组成,其中一些细胞是克隆源性,有能力再群体化出一个肿瘤 3）分化终末期细胞 不

36、再具有分裂能力 4）死亡和正在死亡的细胞,肿瘤的生长速度决定于生长分数和肿瘤细胞的生成与丢失之比，而与倍增时间关系不大。 影响肿瘤的生长速度的因素：1）肿瘤细胞倍增时间：肿瘤群体的细胞周期也分为G0、G1、S、G2和M期。多数恶性肿瘤细胞的倍增时间并不比正常细胞更快，而是与正常细胞相似或比正常细胞更慢。,2）生长分数：指肿瘤细胞群体中处于增殖阶段（S期+G2期）的细胞的比例。恶性转化初期，生长分数较高，但是随着肿瘤的持续增长，多数肿瘤细胞处于G0期，即使是生长迅速的肿瘤生长分数也只有20%。3）瘤细胞的生长与丢失：营养供应不足、坏死脱落、机体抗肿瘤反应等因素会使肿瘤细胞丢失，肿瘤细胞的生成与丢

37、失共同影响着肿瘤能否进行性长大及其长大速度。,肿瘤生长的一些参数 1）肿瘤体积倍增时间（tumor volume doubling time, Td）：指肿瘤体积增加一倍的时间，表示肿瘤生长速度的参数；在肿瘤生长的初期，Td值是固定的；但随着肿瘤的增长，Td值也延长。Td与Tc比较，增殖初期时Td=Tc，后来则TdTc。其原因可能与肿瘤增殖有关的细胞群的部分和细胞不再分裂的静止部分的比例有关。 Td的决定因素：细胞周期时间、生长比例和细胞丢失率。,2）潜在倍增时间（potential doubling time，Tpot：是一个理论值，假设在没有细胞丢失的情况下肿瘤细胞群体增加一倍所需要的时间

38、。 Tpot的决定因素：细胞周期时间和生长比例。 3）细胞丢失因子（cell lose factor）： 细胞丢失因子或系数=1-（Tpot/Td） 如果丢失系数为零，那么Tpot就等于Td。平均Tc小于Tpot，因为静止期细胞的存在导致生长分数小于100 。这些因数的关系可由方程式： Tpot=0.693TC/ln （1+GF）得出。,对于实体肿瘤，其Tpot小于Td，因为细胞丢失系数通常是相当高的。在确定Tpot时已经考虑到GF，所以不会影响Tpot和Td间的关系。Tpot可以由标记指数（LI）和S期的持续时间（Ts），用方程式Tpot=Ts /LI计算出。已有提示，虽然临床试验不支持，但

39、治疗前Tpot短的肿瘤，（提示存在快速增殖细胞和高增长分数），最有可能得益于加速放射治疗。,在放射治疗开始后几周，细胞丢失系数（）减小，其具有减缓肿瘤消退（缩小）的净效应。生长分数是增殖细胞数与增殖细胞数和静止期细胞数的总和之比。如果肿瘤倍增时间（Td），即观察的肿瘤体积倍增时间是60天，以及由细胞周期时间和生长分数计算的潜在倍增时间（Tpot）是3天，那么细胞丢失系数是95 。,虽然Tpot还未被证明是一个加速放射治疗后远期效果的强有力的预测因素，但它对预选最有可能受益于加速治疗的病人仍是有用的。至少对于肿瘤来说，细胞丢失系数通常是肿瘤潜在倍增时间和总体积倍增时间之间差异的主要决定性因素。,

40、人类肿瘤典型的动力学参数 细胞周期： 约2天 生长因数： 约40% 丢失率： 约90% 癌细胞潜在倍增时间： 约5天 体积倍增时间： 约60天,乏氧细胞与肿瘤组织 肿瘤组织中有处于各种状态的肿瘤细胞。从氧分压高低来考虑时，可以分为有氧细胞（Oxic cell）和乏氧细胞（Hypoxic cell）。 人类肿瘤中乏氧细胞的比例大约为30%-40%。 有氧细胞和乏氧细胞在肿瘤中的分布，是通过测量肿瘤内毛细血管到坏死部位的距离，一般为150-170m，最远不超过180 m。,肿瘤结构模式图：,毛细血管,坏死层,有氧细胞层,145-150m,15-20m,乏氧细胞层,肿瘤细胞以血管为中心作同心圆排列，

41、距离毛细血管一定部位变为乏氧细胞层，再向外则为坏死层。Thomlinson把这种排列称为肿瘤索（TumorCord），并认为肿瘤索是构成肿瘤组织的最小单位，肿瘤索大量聚集形成肿瘤组织。 当肿瘤越增大时，未出现损害的细胞的比例会越少。坏死的部位是距毛细血管远的部位，可以说大部分是氧分压为0的部位。 放射敏感性沿毛细血管到坏死层的径线逐渐改变，细胞的增生能力也自中心沿直径向外逐渐减弱。,肿瘤对放射的反应,电离辐射作用的必然结果是受照射区域的生命物质的破坏。在肿瘤放射治疗中，肿瘤照射剂量受到多方面的限制： 1）正常组织的立即反应； 2）某一组织的早期反应； 3）很大体积被照射； 4）产生远期损伤的危

42、险。 但是，控制肿瘤是放射治疗的主要目标。,肿瘤的剂量效应关系 临床上肿瘤的治疗成功，是指射线彻底破坏的肿瘤组织中肿瘤细胞一个也不残存，或者肿瘤细胞即使残存下来，但受到抑制而不能再发挥其机能。然而，临床上所谓获得基本治愈的局部是否就不复发呢？ TCD50是指受照射的肿瘤中50%的肿瘤治愈时所需要的放射剂量。TCD是肿瘤控制剂量（TumorControl Dose）的缩写。,把接种肿瘤的动物分为若干组，各组给予不同剂量照射后观察90-120天，分析各组的治愈率，由此求出使50%的肿瘤获得治愈所必需的照射剂量。 照射时肿瘤体积与TCD50之间的关系：一般而言，肿瘤体积增大时， TCD50也随之增大

43、。,影响放射效应的生物学因素 目前，肿瘤的放射治疗还未完全与肿瘤放射生物学的研究相结合，几乎所有的放射治疗的临床医师都按过去的工作经验来进行眼前的治疗。 肿瘤的放射生物学刚刚开始作为肿瘤放射治疗的基础医学的一部分。 目前还没有一个客观指标来说明肿瘤的照射剂量-效应关系。,肿瘤接受照射后会出现各种反应和现象。如果能更深入地理解并利用这些现象，就有可能进一步提高放射治疗的效果。仔细分析放射治疗中出现的现象，主要有4个方面： 1）肿瘤细胞放射损伤的修复（recovery）； 2）肿瘤组织的再生和再增殖（regeneration orrepopulation）； 3）肿瘤组织中乏氧细胞的再氧合（reo

44、xygenation） 4）照射后肿瘤细胞的同步化（redistribution of cellsThrough the division cycle）。 Withers把这4个方面称为放射生物的“4R”。,对于放射生物的“4R”，有人认为它分别是： 1）亚致死损伤修复（repair）； 2）再氧合（reoxygenation），用于由一次辐射剂量引起紊乱后，肿瘤乏氧细胞比例往往恢复到它原有数量的过程； 3）再增殖（repopulation），指放射治疗后细胞的分裂和再生； 4）细胞周期内的细胞再分布（redistribution）。,亚致死损伤修复 亚致死损伤（SLD），指能被细胞正常修复的

45、损伤，往往在照射后2-6h完成。SLD不是直接导致细胞死亡，而是能使细胞对再次照射敏感性提高。 如果继1个辐射剂量照射之后，相隔一段时间，再受到第二个剂量的照射，由于SLD尚未来得及恢复，这种损伤就可能成为致死性的，即一个SLD能与另一个SLD相互作用或累积在一起而成为致死性损伤。存活曲线的肩部就是反映SLD的累积过程和细胞SLD修复的能力。,X射线照射的细胞存活曲线是一种阈值型的反应， 提示在致死效应能反映出来以前有一个损伤积累的过程。它表现为在细胞丧失增殖能力以前必须有一定数量的损伤关键点。 假设考虑一个受小剂量照射的细胞群，在这群体内的细胞将进入下列三个方面之一： （1）任何一个关键靶点

46、都没有发生电离事件，因此细胞没有受到损伤； （2）细胞内所有的关键靶点都发生了电离事件。细胞丧失了完整的再繁殖能力，即细胞死亡或致死损伤；,（3）一个细胞的有些而不是所有的关键靶点可能发生电离事件。这一细胞被认为受到SLD，即细胞受到损伤但没有被杀死，只要给细胞足够的时间它就有能力修复SLD而完全恢复。 SLD是在分次剂量实验中发现的。这种修复现象在临床放射治疗中，通常采用的多次照射方案让正常组织起到保护作用。 大部分情况下，SLDR的程度和存活曲线肩段的大小有相当好的相互关系。,Dq作为衡量修复的标准：通过比较产生相同生物损伤的一次及分次剂量而测得Dq，如两次剂量间隔足够的时间进行SLDR，

47、则需要总剂量D2才能与一次剂量D1产生一样的生物损伤；而D2- D1的量等于Dq，也就意味着由于分次照射而“丢失”或“浪费”的剂量。这个定量在整体内的许多肿瘤及正常组织中可以测得。,剂量率效应： 象X射线或射线这样电离密度低的射线，剂量率是决定特定吸收剂量的生物学后果的主要因素之一。 剂量率是指某种放射源在单位时间内使组织吸收的剂量.分三类：低剂量率治疗042Gyh.中剂量率治疗212Gyh.高剂量率治疗12Gyh 一般当剂量率低而延长照射时间时，一个特定的生物效应就减少。其中包括两个相当不同的过程：（1）在照射期间有SLDR；（2）在一个延长时间的照射中，由于细胞分裂而出现再增殖。,随着剂量

48、率的降低，存活曲线的斜率变得较平及外推值趋向于1，反映出照射期进行了SLDR。 放射治疗中很重要的、典型的剂量率效应产生于延长的照射过程中出现的SLDR。如果将一次急性照射的剂量用一系列小分次剂量照射，且分次间的时间又足以让SLD进行修复，那么，许多小分次照射近似于连续低剂量率照射。在每个分次剂量间生物体有足够的时间完成SLD修复，即每个分次照射都有存活曲线中的肩段再现。如将连续低剂量率照射作为无穷数量的小剂量分次，那么是没有肩段的，其斜率比一次急性照射的小。,细胞周期内的细胞再分布 原先成为细胞的同步化，在最新的术语中，这种细胞的部分同步化被称为细胞周期内细胞的再分布，所以细胞同步化与细胞再

49、分布完全是一回事。 细胞群体同步化程度数量的定义规定，从处于对数生长的细胞群体为0%到完全同步化为100%。 对于非同步化细胞群体，即细胞分布在周期的各个时相中的群体进行一次照射，不同时相的细胞对这次照射的反应也不相同，周期中放射敏感时相的细胞会被杀死并占较大部分。,照射后的总效应在一定程度上使细胞群体同步化。如果在第一次照射之后，细胞群体立即便进入细胞增殖周期，那么就完全有理由认为，第二次照射的效果确定于首次照射的时间间隔。 放射治疗的主要方式是分次照射。那么预期治疗方案的成效完全取决于分次照射的时间间隔，因为照射会引起细胞同步化，而这个同步化作用在多大程度上影响放射治疗效果，目前尚不清楚。

50、,已经研究许多分次放疗方案，如逐日放疗、隔日放疗、1周1次照射，在某些时候还1d照射3次等各种分次治疗方式，但从没有看到不同分次方案之间的显著差别，也可能是细胞同步效果没有差别。 细胞同步化这个题目更引人注意的是考虑使用适当的药物使肿瘤细胞同步化，随后合理地设计出分次治疗方案，使肿瘤细胞总是处于细胞周期最敏感的时相进行照射。,药物同步化作用难点： 1）要求所用的药物能被肿瘤吸收，但肿瘤的血运供应差，药物不能充分吸收； 2）如果药物对肿瘤邻近的正常组织也有较好的同步效应，即使对肿瘤细胞的同步效果好，也没什么用途。如果肿瘤细胞与正常细胞的周期时间差别较大，或者有关联的正常组织细胞都不在细胞增殖周期