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1、红外线 CO2气体分析仪器的结构、原理、使用及在植物生理研究中的应用,一、引言,植物在生命活动过程中,常伴有CO2的释放与吸收。CO2量的变化能标志植物生理生化活性的强弱。 光 CO2+H2O (CH2O)+O2 光合细胞,1.光合作用测定方法,改良半叶法PH比色法氧电极法红外线CO2气体分析仪法,2. 红外线CO2气体分析仪法的优点,迅速而准确简单而方便整体而连续智能化,二、仪器的基本组成,主要由光源、气室和检测器组成,CO2,12,红外光源,气室,检测器,三、仪器的工作原理,红外线(infrared)是波长在0.75400 m范围内的电磁波。红外线按其波长长度划分:25400 m为远红外线
2、;2.525 m为中红外线;0.752.5 m为近红外线。不同气体对红外线的吸收不同。由同种原子组成的气体分子如N2、H2、O2等均不吸收红外线。只有由异种原子组成的气体分子如CO、CO2、CH4、H2O等可以吸收红外线。,三、仪器的工作原理,CO2气体能吸收红外线四个区段的能量,吸收峰的波长分别在:2.66 m、2.77 m、4.26 m、14.99 m,其吸收率分别为0.54、0.31、23.2、3.1。峰值为4.26 m的吸收率最高,在CO2浓度较低时,在特性波长(4.26 m)下,被CO2气体吸收的红外线辐射能量与CO2气体的浓度呈线性关系。,三、仪器的工作原理,红外线经过CO2气体分
3、子时,其辐射能量减少,被吸收的红外线辐射能量的多少与该气体的吸收系数(K)、气体浓度(C)和气体层的厚度(L)有关,并符合朗伯比尔定律,可以用下式表示:E=E0eKCL式中:E0入射红外线的辐射能量; E透过的红外线的辐射能量。,四、 IRGA检测原理,CO2浓度红外线辐射能量电容变化当在半导体外加一个稳定电流时,由于受电阻变化的影响,输出的信号电压值也随CO2浓度而变化。,检测器是光电导型锑化铟半导体元件。,参比气室 红外线辐射能量不变分析气室 红外线辐射能量减少半导体 的电阻下降,参比室 300,分析室 330,12,30,显示器,四、仪器的标定,绝对值标定法差分值标定法,绝对值标定法,参
4、比室 0,分析室 0,12,0,显示器,调零,绝对值标定法,参比室 0,分析室 330,12,330,显示器,调满刻度,差分值标定法,参比室 300,分析室 300,12,0,显示器,调零,差分值标定法,参比室 300,分析室 330,12,30,显示器,调满刻度,五、IRGA法测定光合速率 的气路系统,开放式气路系统 密闭式气路系统,1.开放式气路系统,该系统用双气室IRGA,以气泵为动力,将流经同化室前的空气(参比气体)泵入参比气室,流经同化室后的空气(样本气体)泵入分析气室,最后将气体排出,由仪器测出参比气体和样本气体的CO2浓度差,根据气体流量、同化室中叶片的面积,求出叶片的光合速率。
5、,开放式气路系统 P. 气泵 F. 流量计 C. 同化室 D. 干燥器 A. 红外线CO2分析仪,P,P,F,D,D,C,F,A,光合速率计算,式中:Pn光合速率,mol CO2(m2s)。 CCO2浓度落差C1C2,mol/mol。 S叶片面积,m2。 F气体流量,L/s。 t同化室的温度, P为气压,MPa。,2.密闭式气路系统,被测植物或叶片密闭在同化室中,不与同化室外发生任何的气体交换,同化室内的CO2浓度因光合作用而下降,可用IRGA测定同化室内CO2浓度的下降值,计算光合速率。,密闭式气路系统 P. 气泵 C. 同化室 D. 干燥器 A. 红外线CO2分析仪,C,A,P,D,光,3
6、30,光合速率计算,式中:Pn光合速率,mol CO2(m2s)。 CCO2浓度落差C1C2,mol/mol。 t测定时间,s。 S叶片面积,m2。 V同化室(包括气路系统)体积,L。 t同化室的温度,。 P为气压,MPa。,六、在植物生理研究中的应用,测定光合速率测定呼吸速率作光光合作用曲线:光补偿点,光饱和点,表观量子产额,量子效率作CO2光合作用曲线:CO2补偿点,CO2饱和点作温度光合作用曲线:光合作用最低温度,最适温度,最高温度测定光呼吸速率:零气法;外推法测定蒸腾速率;气孔导度等,LI-6400便携式光合作用测定系统,一、仪器,二、仪器的优点,1、叶室环境可以调控。如可以测在不同温
7、度、光强、CO2浓度下的光合作用。2、测定参数多。3、数据可存储,可与计算机连接。4、反应灵敏。5、固定叶面积,仪器自动计算各参数结果。,三、可测定的主要参数,Photosynthetic rate (mol CO 2 m -2 s -1 )Conductance to H 2 O (mol H 2 O m -2 s -1 )Reference cell CO 2 (mol CO 2 mol -1 )Sample cell CO 2 (mol CO 2 mol -1 )Intercellular CO 2 concentration (mol CO 2 mol -1 )Transpiratio
8、n rate (mmol H 2 O m -2 s -1 ),Reference cell H 2 O (mmol H 2 O mol -1 ) Sample cell H 2 O (mmol H 2 O mol -1 )Relative humidity in the sample cell (%)Flow rate to the sample cell (mol s -1 ) T leaf Temperature of leaf thermocouple (C)External quantum sensor (mol m -2 s -1 ),四、仪器原理,1、开放式气路连接系统 (1)LI
9、-6400领先于传统开放系统的地方在于它将气体分析器安装于传感器头上。这样节省了气流到达传感器的时间,并且,严格准确地反映出叶子的变化。 (2)开放系统的另一特点是可以通过各种方式改变入室气体的条件,如:湿度、CO2浓度、温度等等。,传感头与气体分析仪和叶室集于一体,具体的气体连接示意图,2、仪器通过公式自动计算各参数的值,(1)自动记录结果(2)叶面积固定=6cm2(3)如叶面积不足6,可改变叶面积的输入。,五、简单介绍主要操作流程,1、仪器连接,数据线和气路与主机连接,数据线和气路与感应头叶室的连接,连接好以后应该是这样,2、开机,电源开关,3、程序自动启动,4、启动后的主菜单,新的测定,功能键分别对应上面的小黑框中的英文,键盘与计算机相似,主界面,5、校正仪器,(1)流量校准(2)零点校准(3)红蓝光源校准,校准时H2O 和CO2的控制旋扭要放到Bypass位置,6、数据测量,F4是最常用的,测量按F4,测定时H2O 和CO2的控制旋扭要放到Bypass位置,按F1打开一个保存数据的文件,文件命名,夹住叶片,输入叶面积,数据自动与手动保存,关闭文件及保存数据,7、关机,(1)一定要退到主菜单下关闭电源。(2)关机后CO2和H2O的控制旋扭要放到中间位置。,CO2和H2O的控制旋扭,
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