第二篇 细菌学各论课件.ppt

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1、,第二篇 细菌学各论,动物医学学院 冯新,了解各种细菌的形态、培养特性、致病因子及微生物学诊断。,第七章 革兰氏阳性球菌,第一节 葡萄球菌属第二节 链球菌属第三节 肠球菌属,淋球菌、脑膜炎球菌,阳性,阴性,第一节 葡萄球菌属（Staphylococcus）,广泛存在于自然界，多数是不致病的腐物寄生菌。 致病性葡萄球菌可引起化脓性炎症、败血症、食物中毒等。,第一节 葡萄球菌属（Staphylococcus）,球形，排列成葡萄串状。用青霉素可诱导成L型。无芽孢，无鞭毛，有的形成荚膜或黏液层。革兰氏阳性。需氧或兼性厌氧，无运动力。,一般特征, 过去按产生的色素分为3种：金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、

2、柠檬色葡萄球菌。 1974年分为3种 ：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。 伯吉氏系统细菌学手册1986年将葡萄球菌属分为20多种 。,二、分类,常见的致病菌多为金黄色葡萄球菌。,金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）,1. 培养及生化特性 在普通琼脂平板形成湿润、光滑、隆起的圆形菌落。菌落颜色依菌株而异，初呈灰白色，继而为金黄色。在血液琼脂平板形成的菌落较大，产溶血素的菌株多为病原菌，在菌落周围呈现明显的溶血。产生金黄色色素。高度耐盐。分解葡、乳、麦、蔗糖， 产酸不产气，致病菌株能分解甘露醇。,第一节 葡萄球菌属（Staphylococcus）,金黄色葡萄球菌

3、普通培养基上菌落形态,金黄色葡萄球的溶血,高盐培养基,2. 抗原及变异 葡萄球菌细胞壁上的抗原构造比较复杂，含有多糖及蛋白质两类抗原。多糖抗原 荚膜多糖，具有型特异性。蛋白抗原 人源菌株都含有葡萄球菌蛋白A(SPA)，来自动物源菌株则少见。 SPA能与多种动物的免疫球蛋白的Fc端结合，结合后的IgG仍能与相应抗原特异性反应。 SPA与IgG结合形成的复合物在机体内具有生物学作用（趋化性、抵抗吞噬、损伤血小板等）。 用于免疫学及诊断技术（协同凝集试验）。,3.抵抗力及药物敏感性 在无芽孢菌中，葡萄球菌的抵抗力较强。 在干燥的脓汁或血液中可存活2-3个月，80 30min 才能杀死。 对磺胺类、青

4、霉素、金霉素、红霉素、新霉素等抗生素敏感，但易产生耐药性。,4.致病性及毒力因子 金色葡萄球菌可产生多种毒素和酶，故致病性强。 化脓性疾病（创伤感染、脓肿、乳腺炎、败血症、脓毒败血症等） 毒素性疾病（被葡萄球菌污染的食物或饲料可引起人或动物的食物中毒性疾病） 。,毒力因子： 毒素 溶血素，与牛羊的坏疽性乳腺炎有关，它还导致白细胞等崩解。毒素是不耐热的蛋白质，对多种哺乳动物红细胞有溶血作用，而从动物分离的菌株常见溶血素。 肠毒素 引致人类食物中毒，表现呕吐、腹泻。耐热抗酸，能经受10030min或胃蛋白酶的水解。,凝固酶 能使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝集的酶类物质。 （1）游离凝固酶:使液态纤

5、维蛋白原变成固态纤维蛋白。 （2）结合凝固酶:使纤维蛋白原与菌体交联而致细菌凝聚。 作用：有助于致病菌株抵抗吞噬细胞和杀菌物质。 检测葡萄球菌的凝固酶是鉴别菌株的重要指标，致病株多数为凝固酶阳性。,耐热核酸酶 100作用15min不失去活性，由致病株产生。此酶能迅速分解核酸，利于病菌扩散。目前将该酶的检测作为鉴定致病菌株的重要指标值之一。此外，还可产生溶纤维蛋白酶、透明质酸酶，又称为扩散因子。,金黄色葡萄球的耐热核酸酶试验,5. 微生物学诊断（1）涂片染色镜检 取脓汁、渗出液、乳汁、血液，中毒症取剩余食物等。将病料涂片染色镜检。（2）分离培养鉴定 将病料划线接种于5绵羊或兔血液琼脂平板，37

6、培养18-24h，菌落金黄色，周围呈溶血圈者多为致病菌株。进一步鉴定还要做凝固酶试验、分解甘露醇试验，阳性者多为致病菌。必要时可做动物试验。,第二节 链球菌属 (Streptococcus),链球菌种类多、分布广。有些可致人或动物的各种化脓性疾病、肺炎、乳腺炎、败血症等。一、分类 按溶血性分为、 3类。型溶血链球菌 在菌落周围形成不透明的草绿色溶血环，红细胞未完全溶解，血红蛋白变成绿色。此菌致病力不强，多为机会致病菌。型溶血链球菌 菌落周围形成完全透明的溶血环，红细胞完全溶解。这类菌致病力强，常引起人及动物各种疾病。型溶血链球菌 菌落周围无溶血现象。一般为非致病菌。,二、形态与染色 链球菌呈圆

7、形或卵圆形，常排列成链状或成双。肉汤内生长的链球菌常呈长链排列，革兰氏阳性，多有荚膜。,三、培养及生化特性 多为兼性厌氧菌。 致病菌营养要求较高，普通培养基中生长不良，需添加血液、血清、葡萄糖等。 在血液琼脂平板上长成直径0.1-1.0mm，灰白色，表面光滑，边缘整齐的小菌落。 多数致病菌株有溶血性。,化脓性链球菌普通培养基上菌落形态,四、致病性 致病性链球菌可产生多种毒素或酶，可致人及多种动物的很多疾病，化脓感染、肺炎、乳房炎等。溶血素 分为对氧敏感溶血素O(SLO)和对氧稳定溶血素S(SLS)两种，称溶血性。致热外毒素 旧名红疹毒素，主要由A群链球菌产生，致人猩红热，小剂量皮内注射家兔可引

8、起局部红疹，大剂量注射可致全身红疹。其他 不同致病菌株，可产生链激酶（溶纤维蛋白酶），透明质酸酶等，其性质作用类葡萄球菌 。 细胞壁脂磷壁酸(LFA)与菌体吸附于宿主黏膜有关。其荚膜成分、M蛋白等具有抗吞噬作用。,五、抵抗力 本属细菌的抵抗力不强。对青霉素、磺胺类药物敏感，易产生耐药性。六、免疫性 链球菌的抗原结构比较复杂，机体感染后有多种抗体产生，已知抗M蛋白的抗体具有保护作用，M蛋白有多种抗原型，各型间缺乏有效的交叉保护。我国研制的猪、羊链球菌疫苗有较好的免疫效果。,七、微生物学诊断 病料（脓汁、乳汁、血液、组织）涂片染色镜检，见革兰氏阳性、具荚膜、成对或链状排列的球菌，可作初步诊断。 确

9、诊需用血液琼脂平板分离培养，观察菌落、溶血等特征，并进行生理生化试验。用群、型特异性血清作血清学试验，对病原菌定群或定型。,兰氏（Lancefield）用温热的稀盐酸浸出C抗原，与特异性血清作沉淀反应，将链球菌分为20个血清群（A-V，缺I和J）。同群链球菌间，因表面蛋白质抗原不同，又分不同型。,兰氏分群法,乳胶凝集试验,八、主要致病菌,猪链球菌是猪链球菌病的重要致病菌，并可感染人而致死。(一)病原1. 链球菌共有20个群(从A-V)，数百个血清型，主要感染人类的是A.B群和肺炎链球菌；主要感染猪的有D.L.R.S.T.U.V群2. 猪溶血性链球菌2型(Swine streptoo_cosis

10、)3. 链球菌为G+球菌成对、短链状排列,(二)传播途径1.主要经过破损皮肤传播: 屠宰、加工、饲养、贩运感染/病/死猪过程中,通过破损皮肤接触,感染猪2型链球菌。2.消化道辅助: 食入没有煮烂熟透的病死猪肉感染。,(三)临床表现1.普通型表现:急起高热、畏寒、头痛、头昏、腹痛、 腹泻、乏力、不适。2.可致猪脑膜炎、关节炎、心内膜炎、多发性浆膜炎、流产和局部脓肿。,第八章 肠杆菌科,第一节 埃希菌属第二节 沙门菌属第三节 耶尔森菌属第四节 其他肠道杆菌属 (克雷伯菌属、变形杆菌属、爱德华菌属),本科共同特性为：革兰氏阴性、无芽孢的兼性厌氧菌。共28属、110种。多为正常肠道菌群成员。沙门氏菌属

11、、埃希菌属和耶尔森菌属的部分成员对人和动物有广泛的致病性，在公共卫生和兽医临床有重要意义。,第一节 埃希菌属 (Escherichia),本属现有8个种，其中最重要的种是大肠埃希菌(E.coli)，俗称大肠杆菌，下分血清型。本菌系人和温血动物肠道内正常菌群成员之一。大肠杆菌常被用作粪便直接或间接污染的检测指标。本菌还是分子生物学和基因工程中重要的实验材料和研究对象。,一、形态染色特性 大肠杆菌为革兰氏阴性无芽孢的杆菌，两端钝圆、散在，周生鞭毛可运动，多有菌毛。,E. coli 伊红美蓝琼脂上呈金属绿色,E. coli 麦康基琼脂上呈粉红色菌落,二、培养及生化特性 本菌为兼性厌氧菌，在普通培养基

12、上生长良好，形成圆形凸起、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落；本菌大多可以发酵乳糖产酸产气，麦康凯琼脂上形成红色菌落；在伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属闪光的菌落；一些致病性菌株在绵羊血平板上呈溶血。,二、培养及生化特性致病菌株在绵羊血平板上呈型溶血；生化特性：糖发酵试验（发酵乳糖）和IMViC（+-）试验。 H2S阴性。,三糖铁培养基,I(吲哚)、M（MR）、Vi （VP)、 C（枸橼酸盐利用试验）,三、抗原及血清型,四、致病性 条件性大肠杆菌、病原性大肠杆菌。 与动物疾病有关的病原性大肠杆菌可分为五类：产肠毒素大肠杆菌(ETEC)肠出血性大肠杆菌(EHEC)肠致病性大肠杆菌(EPEC)肠侵袭性大肠

13、杆菌(EIEC)肠聚集型大肠杆菌(EAEC),五、微生物学诊断 分离与鉴定程序可参见图8-1。(PAGE 106)1. 采病料分离培养 败血症病例采集内脏组织（肝脾肾等），对幼畜腹泻及猪水肿病病例应取其各段小肠内容物或黏膜刮取物以及相应肠段的肠系膜淋巴结，分别在麦康凯平板和血平板上划线分离培养。2. 可疑菌落生化鉴定 挑取麦康凯平板上的红色菌落或血平板上呈溶血(仔猪黄痢与水肿病菌株)的典型菌落几个，分别转种三糖铁（TSI）培养基和普通琼脂斜面做初步生化鉴定和纯培养。,3. 纯培养物抗原鉴定 将TSI琼脂反应模式符合埃希氏菌属的生长物或其相应的普通斜面纯培养物做O、K抗原鉴定。4. 检测毒力因子

14、 确定其属于何类致病性大肠杆菌。六、防治 目前已有菌苗，包括抗粘附素的含单价或多价菌毛抗原的灭活全菌苗或亚单位苗；抗肠毒素的类毒素苗；表达一种或两种粘附素以及同时表达粘附素和肠毒素的基因工程菌苗等。用这些菌苗免疫怀孕母畜后，均能使其后代从初乳中获得抗体而被动保护。,第二节 沙门氏菌属(Salmonella),一、主要特征,沙门氏菌属是一群革兰氏阴性无芽孢杆菌，通常都以周生鞭毛运动。在三糖铁琼脂上常产生H2S，大多沙门氏菌不发酵乳糖。 绝大多数沙门氏菌对人和动物有致病性，能引起人和动物的多种不同临床表现的沙门氏菌病，并为人类食物中毒的主要病原之一，在医学、兽医和公共卫生上均十分重要。 沙门氏菌血

15、清型复杂，有2 500种以上。,一、形态及染色特性 形态染色特性与同科其他菌属相似，呈杆状，0.7-1.5umX2.0-5.0um，革兰氏阴性。除雏沙门氏菌和鸡沙门氏菌无鞭毛不运动外，其余均有周生鞭毛可运动，大多数有菌毛。,二、培养及生化特性 本属大多数细菌的培养特性与埃希氏菌属相似。沙门氏菌在肉汤琼脂上生长贫瘠，形成较小的菌落。在肠道菌鉴别或选择性培养基上，大多数菌株因不发酵乳糖而形成无色菌落。,Salmonella on S.S. Agar,Salmonella on麦康基琼脂上为无色菌落,三、抗原及变异,四、致病性类型 根据对宿主嗜性不同，可将沙门氏菌分成三群。第一群具有高度专嗜性沙门氏

16、菌，它们只对人或某种动物产生特定的疾病。例如鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌仅使鸡和火鸡发病，马流产、牛流产和羊流产等沙门氏菌；猪伤寒沙门氏菌仅侵害猪。第二群是在一定程度适应于特定动物的偏嗜性沙门氏菌，如猪霍乱和都柏林沙门氏菌，分别是猪和牛羊的致病菌。第三群是泛嗜性沙门氏菌，它们有广泛宿主谱，能引起人和各种动物的沙门氏菌病，具有重要的公共卫生意义。如鼠伤寒和肠炎沙门氏菌等。,六、毒力因子 沙门氏菌毒力因子有多种，主要有脂多糖(LPS) 、肠毒素、细胞毒素及毒力基因。七、免疫性 体液抗体与细胞免疫在抗沙门氏菌感染中都很重要。 认为细胞免疫在抗沙门氏菌感染中具有重要作用。八、微生物学诊断 未污染病料 直接接

17、种普通琼脂、血琼脂或鉴别培养基平板分离细菌； 污染材料 如饮水、粪便、饲料、肠内容物和已败坏组织等，常需要增菌培养基增菌后再行分离。,九、防制 目前的疫苗多限于预防各种家畜特有的沙门氏菌病，例如猪副伤寒、马流产以及牛、羊的都柏林等沙门氏菌的灭活菌苗。,第三节 耶尔森菌属(Yersinia),本菌属由革兰氏阴性、运动或不运动的多形性短小杆菌组成。除鼠疫菌无鞭毛外，其余成员在22-28培养时有动力，但37培养则无动力。代表菌种为鼠疫耶尔森菌，简称鼠疫杆菌。 本菌属现有11个种，对人和动物有致病性的主要有三个种：鼠疫耶尔森菌、假结核耶尔森菌、小肠结肠炎耶尔森菌。,耶尔森菌电镜照片,第九章 弧菌科（V

18、ibrionaceae）,第一节 弧菌属第二节 气单胞菌属,第一节 弧菌属（Vibrio）,副溶血性弧菌 本菌具嗜盐性，存在于海产品，人食用污染本菌的鱼、贝类引致食物中毒。一、形态及培养特性 菌体多形性，可为弧状、杆状或丝状。一端有鞭毛，革兰氏染色阴性。菌落中等大小，培养24h时直径约2mm。嗜Na+，可在含7.5NaCl的培养基生长。,亚洲霍乱分离的逗点状弧菌,二、致病性 本菌的致病株绝大多数能产生溶血毒素，裂解人、兔等红细胞，因此可用溶血反应区分致病株与非致病株，称之为神奈川试验。人食用本菌污染的海鱼、贝类等常引致食物中毒，潜伏期2-36h，表现为水样腹泻、呕吐及发热，一般能很快康复。近年

19、来从我国人工养殖发病死亡的海鱼、贝类等也分离到本菌。三、微生物学诊断 取病人粪便或可疑食品接种嗜盐菌选择培养基或SS平板。挑取可疑菌落进一步作生化试验，最后检测其毒素作神奈川试验等，也可用PCR等技术在基因水平检测毒素。,第二节 气单胞菌属（Aeromonas）,本属一些种类细菌对鱼类、禽类、哺乳动物及人类有致病性，是鱼类最常见的致病菌。,类志贺气单胞菌,气单胞菌引起的鱼病,第十章 巴氏杆菌科及相关属,第一节 巴氏杆菌属第二节 曼氏杆菌属第三节 里氏杆菌属第四节 放线杆菌属第五节 嗜血杆菌属第六节 泰勒菌属,第一节 巴氏杆菌属（Pasteurella）,本属细菌已报道有20多种，多杀性巴氏杆菌

20、是本属中最重要的畜禽致病菌。 多杀性巴氏杆菌 本菌是引起多种畜禽巴氏杆菌病(亦称出血性败血症)的病原体，主要使动物发生出血性败血病或传染性肺炎。一、形态及染色 为球杆状或短杆状菌，两端钝圆，大小为0.25-0.4um *0.5-2.5um。单个存在，有时成双排列。,病料涂片用瑞氏染色或美蓝染色时，可见典型的两极着色，即菌体两端染 色深中间浅，无鞭毛，不形成芽孢，新分离的强毒菌株有荚膜。革兰氏染色阴性。二、培养及生化特性 需氧或兼性厌氧菌。对营养要求较严格。在普通培养基上生长贫瘠，在麦康凯培养上不生长。在加有血液、血清或微量血红素的培养基中生长良好。最适温度为37，pH7.2-7.4。,在血清琼

21、脂乎板上培养24h，可长成淡灰白色、闪光的露珠状小菌落。在血琼脂平板上，长成水滴样小菌落，无溶血现象。,多杀性巴氏杆菌血琼脂平板培养菌落形态,三、血清型 本菌主要以其菌体抗原和荚膜抗原区分血清型，前者有6个型，后者分为16个型。我国分离的禽多杀性巴氏杆菌以5:A为多，其次为8:A。四、抵抗力 本菌抵抗力不强。在阳光中暴晒1min，或在5615min或 60 10min，可被杀死。厩肥中可存活1个月，埋入地下的病死鸡尸，经4个月仍残留活菌。在空气干燥中2-3d可死亡。对青霉素、链霉素、磺胺类及许多新的抗菌药物敏感。 冻干菌种在低温中可保存长达26年。,五、致病性与免疫性 本菌是多种动物的重要病原

22、菌。对鸡、鸭、鹅、野禽，猪、牛、羊、马、兔等都可致病，急性型呈出血性败血症迅速死亡；亚急性型呈出血性炎症见于黏膜关节等部位；慢性型呈萎缩性鼻炎(猪、羊)、关节炎及局部化脓性炎症等。实验动物中小鼠极易感染。可致禽霍乱、猪肺疫等病。 D血清型的某些菌株能产生一种耐热的外毒素，用此毒素接种猪可复制典型的猪萎缩性鼻炎(AR)，证明AR由产毒素的本菌与波氏杆菌混合感染所致，本菌起主导作用。,杀禽亚种的致病力与其内毒素有关，可致禽霍乱，表现出血性败血症状。 动物患病痊愈后，可获得较强的免疫。国内外已研制出多种灭活、弱毒菌苗。该菌的高免多价血清具有良好的紧急预防和治疗作用。六、微生物学诊断1显微镜检查 采取

23、渗出液、心血、肝、脾、淋巴结、骨髓等新鲜病料涂片或触片，以碱性美蓝液或瑞氏染色液染色，显微镜检查，如发现典型的两极着色的短杆菌，结合流行病学及剖检，可作初步诊断。,2分离培养 用血琼脂平板和麦康凯琼脂同时进行分离培养，麦康扎培养基上不生长，在血琼脂上生长良好，菌落不溶血，革兰氏染色为阴性球杆菌。必要时进一步做生化试验。3动物试验 用病料研磨制成悬液，或用分离培养菌，皮下注射小鼠、 家兔或鸽，动物多在2448h内死亡。 可用抗血清或单克隆抗体进行血清学试验鉴定荚膜抗原和菌体抗原型。,七、防治 猪群检测血清抗体，淘汰阳性猪，建立净化猪群。鸡猪均可注射灭活疫苗预防。也可用抗菌素防治。,第十一章 革兰

24、氏阴性需氧杆菌,第一节 布氏杆菌属第二节 假单胞菌属第三节 伯氏菌属第四节 波氏菌属第五节 军团菌属第六节 弗朗西斯菌属第七节 摩拉菌属第八节 不动杆菌属,第一节 布氏杆菌属(Brucella),布氏杆菌又名布鲁氏菌，是多种动物和人布氏杆菌病的病原，不仅危害畜牧生产，而且危害人类健康。一、形态及染色特性 细菌呈球形、球杆形或短杆形，新分离者趋向球形。0.5-0.7um*0.6-1.5um，多单在。不形成芽孢和荚膜，无鞭毛不运动，革兰氏阴性。经柯氏或改良Z-N、改良K氏等鉴别染色法染成红色，可与其他细菌相区别。,布氏杆菌,二、培养及生化特性 此属细菌专性需氧，在初代分离培养时尚需5-10CO2。

25、最适生长温度37，最适pH为6.6-7.4。血清和血液可促进其生长 。三、种和生物型 该属包括6个种20个生物型，即马尔他布氏杆菌生物型1-3 、流产布氏杆菌生物型1-9 、猪布氏杆菌生物型1-5、绵羊布氏杆菌、沙林鼠布氏杆菌和犬布氏杆菌。四、抗原性 分为属内抗原与属外抗原，属内抗原包括A、M及R抗原等表面抗原。属内抗原： A抗原与M抗原 其抗原决定簇位于细胞壁的脂多糖蛋白复合物上，为外露的多糖链部分。光滑型布氏杆菌具有A和M两种表面抗原。 R抗原 为细胞壁低蛋白含量的脂多糖复合物，是大多数非光滑型布氏杆菌的共同抗原决定簇。,五、变异性 绵羊种和犬种布氏杆菌是天然的R型种，其他种为S型。布氏杆

26、菌最常见的变异是S-R变异，此种变异很少发生回变。六、抵抗力 本菌对外界环境的抵抗力较强，在污染的土壤和水中可存活1- 4个月，皮毛2 - 4个月，乳、肉食品中约2个月，粪便中120d，流产胎儿中至少75d，子宫渗出物中200d。 但对湿热的抵抗力不强，60加热30min或70 5min即杀死，煮沸立即死亡。对消毒剂的抵抗力也不强。七、致病性 本菌不产生外毒素，但有毒性较强的内毒素。此内毒素是细胞壁的脂多糖(LPS)成分。,本属细菌可感染的动物种类极多，目前查知者已有60多种，包括马、牛、猪、绵羊、山羊、骆驼、鹿、兔、犬等各种家畜、野生哺乳动物、啮齿动物、鸟类、爬虫类、两栖类和鱼类。可引起人和

27、多种动物的布病（子宫炎、输卵管炎、睾丸炎、关节炎等），是一种重要的人兽共患病，病理过程慢长，经济危害极大。布氏杆菌可引起豚鼠、小鼠和家兔等实验动物感染，豚鼠最为易感。,光滑型的流产布氏杆菌入侵机体黏膜屏障后，被吞噬细胞吞噬成为胞内寄生菌，并在淋巴结生长繁殖形成感染灶。一旦侵入血流，则出现菌血症。 在不同种别和生物型，甚至同型细菌的不同菌株之间，毒力可有相当差异。对豚鼠致病性顺序是马尔他布氏杆菌猪布氏杆菌流产布氏杆菌沙林鼠布氏杆菌犬布氏杆菌绵羊布氏 杆菌。八、微生物学诊断 布氏杆菌病常表现为慢性或隐性感染，其诊断和检疫主要依靠血清学检查及变态反应检查。,1. 细菌学检查 病料最好用流产胎儿的胃内

28、容物、肺、肝和脾以及流产胎盘和羊水等。也可采用阴道分泌物、乳汁、血液、精液、尿液以及急宰病畜的子宫、乳房、精囊、睾丸、附睾、淋巴结、骨髓和其他与局部病变的器官。 显微镜检查 病料直接涂片，作革兰氏和柯兹洛夫斯基染色镜检。若发现革兰氏阴性、鉴别染色为红色的球状杆菌或短小杆菌，即可作出初步的疑似诊断。,分离培养鉴定 无污染病料可直接划线接种于适宜培养基，5-10CO2环境，37培养。每3d观察1次，如有细菌生长，可挑选可疑菌落细菌鉴定。2.血清学检查 有多种检查方法，血清中布氏杆菌抗体检查和病料中布氏杆菌检查两类方法。 检测细菌 用已知抗体可检查病料中是否存在布氏杆菌，或分离培养物是否为布氏杆菌，

29、比细菌学检查法简便快速，因而具有较大实用价值。常用方法有荧光抗体技术、反向间接血凝试验、间接炭凝集试验以及免疫酶组化法染色等。,检测抗体 动物在感染布氏杆菌7-15d可出现抗体，检测血清中的抗体是布氏杆菌病诊断和检疫的主要手段。在实际工作中，最好用一种以上的方法相互配合。国内常用玻板凝集试验、虎红平板凝集试验、乳汁环状试验进行现场或牧区大群检疫，以试管凝集试验和补体结合试验进行实验室最后确诊。3变态反应检查 皮肤变态反应一般在感染后的2025d出现，因此不宜作早期诊断。本法适于动物的大群检疫，主要用于绵羊和山羊，其次为猪。,检测时，将布氏杆菌水解素0.2m1注射于羊尾根皱襞部或猪耳根部皮内，2

30、4及48h后各观察反应一次。若注射部发生红肿，即判为阳性反应。此法对慢性病例的检出率较高，且注射水解素后无抗体产生，不妨碍以后扒血清学检查。 凝集反应、补体结合反应和变态反应出现的时间各有特点。即动物感染布氏杆菌后，首先出现凝集反应，消失较早；其次出现补体结合反应，消失较晚；最后出现变态反应，保抖时间也较长。为了彻底消除各类病畜，应同时使用三种方法进行综合诊断。,九、免疫防治 菌苗接种虽有显著效果，但欲根除此病，则尚须严格执行畜群全面检疫及淘汰病畜的措施。已有的菌苗种类很多，我国创制和应用的菌苗有羊型和猪型两种弱毒菌苗。 羊型5号(M5)弱毒活菌苗 对牛、山羊、绵羊和鹿布氏杆菌病的预防没果较好。采取皮下注射或气雾方式，免疫期可达1-1.5年。其缺点为对怀孕动物可致流产而禁用，对接触气雾的人员可引起较严重反应。培育出M590株，具有良好的安全性和优秀的免疫原性。,猪型2号(S2)弱毒活菌苗 毒力弱，生物性状稳定，免疫原性好，对猪、绵羊、山羊、牦牛、牛等较好的免疫效果，可接种任何年龄的动物，甚至可以接种怀孕动物而不引起流产。免疫方法有口服(饮水)、气雾和皮下注射(羊也可作肌肉注射)3种。免疫期为1-2年。,