化妆品微生物五项检测课件.ppt

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1、化妆品微生物五项检验,菌落总数（Aerobic bacterial count）：化妆品检样经过处理，在一定条件下培养后（如培养基成分、培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等），1g（1mL）检样中所含菌落的总数。所得结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中温的需氧性和兼性厌氧菌落总数。,菌落总数检验,菌落总数的测定便于判明样品被细菌污染的程度，是对样品进行卫生学总评价的综合依据。,48小时出结果（30-300）：,测试流程,为便于区别化妆品中的颗粒与菌落，可在每 100mL 卵磷脂吐温 80 营养琼脂中加入 1mL 0.5的 TTC 溶液，如有细菌存在，培养后菌落呈红色，而化妆品的颗粒颜色

2、无变化。,TTC亦不可多加会抑制菌落生长,推荐了解：人员培训能力掌握的检验重要指标。有条件可做视具体样品测试结果。在膏霜类化妆品中,微生物都是吸附或附着于颗粒状的原料中,检测时不易洗脱下来,因此,需要验证检测方法的有效性。,接种阳性菌计算回收率,未检出2天，检出3-4天耐热大肠菌群 Thermotolerant coliform bacteria系一群需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌，在44.5培养24h48h能发酵乳糖产酸并产气。该菌主要来自人和温血动物粪便，可作为粪便污染指标来评价化妆品的卫生质量, 推断化妆品中有否污染肠道致病菌的可能。,耐热大肠菌群检验操作流程,粪大肠菌群检查流程图,

3、镜检,结果报告,根据发酵乳糖产酸产气，平板上有典型菌落，并经证实为革兰氏阴性短杆菌，靛基质试验阳性，则可报告被检样品中检出耐热大肠菌群。,未检出2天，检出4天铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）属于假单胞菌属，为革兰氏阴性杆菌，氧化酶阳性，能产生绿脓菌素。此外还能液化明胶，还原硝酸盐为亚硝酸盐，在 421条件下能生长。,铜绿假单胞菌检验操作流程,该菌对人有致病力，可使伤处化脓，引起败血症等。在自然界中分布甚广，空气、水、土壤,最终结果判断,增菌培养,供试液的制备,书写检验记录单,分离纯化,无菌落或无特征菌落,配培养基和稀释液,铜绿假单胞菌检查流程图,361,1824h,

4、361,1824h,镜检,十六烷三甲基溴化铵平板,SCDLP培养基,黄绿色菌膜,灰白色湿润,氧化酶试验,粉红/紫红色,绿脓菌素试验,盐酸层呈粉紫色氯仿层呈蓝绿色,硝酸盐还原产气试验,N2,明胶液化试验,明胶培养基（高层）,明胶液化,被检样品经增菌分离培养后，经证实为革兰氏阴性杆菌，氧化酶及绿脓菌素试验皆为阳性者，即可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌；如绿脓菌素试验阴性而液化明胶、硝酸盐还原产气和42生长试验三者皆为阳性时，仍可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。,结果报告,未检出2天，检出3天金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）为革兰氏阳性球菌，呈葡萄状排列，无芽胞，无荚膜，

5、能分解甘露醇，血浆凝固酶阳性。,金黄色葡萄球菌检验操作流程,该菌是葡萄球菌中对人类致病力最强的一种，能引起人体局部化脓性病灶，严重时可导致败血症。,革兰染色、镜检 生化试验:血浆凝固酶试验 甘露醇发酵试验,最终结果判断,增菌培养,供试品的处理,书写检验记录单,分离纯化,无菌落或无特征菌落,配培养基和稀释液,361,361,242h,2448h,金黄色葡萄球菌检查流程图,镜检,耐盐分,Baird Parkers平板,灰/黑色,血浆凝固酶试验,血浆凝块,液态血浆,甘露醇高盐琼脂,凡在上述选择平板上有可疑菌落生长，经染色镜检，证明为革兰氏阳性葡萄球菌，并能发酵甘露醇产酸，血浆凝固酶试验阳性者，可报告

6、被检样品检出金黄色葡萄球菌。,结果报告,霉菌和酵母菌数测定（Determination of molds and yeast count）化妆品检样在一定条件下培养后，1g或1mL化妆品中所污染的活的霉菌和酵母菌数量，以判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。本方法根据霉菌和酵母菌特有的形态和培养特性，在虎红培养基上，置282培养5d，计算所生长的霉菌和酵母菌数。（5-50）,霉菌和酵母菌检验操作流程,革兰氏染色操作流程,设备： 恒温培养设备 高压灭菌器（验证） 超净工作台（生物安全柜） 均质器(旋涡混合器) 天平（0.1g） 显微镜（可要可不要无硬性要求）,保证检验结果正确,常规洁

7、净工作台设置,目前大部分微生物实验室布局,人员操作方面： 无菌操作，避免污染； 一定专业技术或工作经验（招聘与外部审核时） 相互协作； 测试结果的证明。,日常维护： 设备的计量与保证； 超净台及时清洁与杀菌（操作前后半小时）； 检验后材料的及时处理； 环境卫生（沉降菌的检测每周）。,油性样品如何处理,稀释液生理盐水-极性溶剂、液体石蜡-非极性溶剂、吐温80-非离子型表面活性剂，分子一端是亲水基团，一端是亲油基团，常用作增溶剂和油/水乳化剂。决定了加入的顺序。,问题2,微生物许可检验项目,问题3, 一个样品包装内有两个以上独立小包装或分隔（如粉饼、眼影、腮红等），且只有一个产品名称，原料成分不同的样品，应当分别检验相应项目；非独立小包装或无分隔部分，且各部分除着色剂以外的其他原料成分相同的样品，应当按说明书使用方法确定是否分别进行检验。,重点,谢 谢 大 家！,