细胞DNA倍体定量分析课件.ppt

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1、.,1,细胞DNA倍体定量分析,能更早发现癌细胞 405医院病理科 陈为国,.,2,癌症不可怕，就怕发现晚！,.,3,细胞学的发展,活检、尸检和细胞学是病理学的三大分支细胞学有取材方便，痛苦小或无痛苦的先天优势过去，由于细胞学诊断准确率低，一直不太受重视，后来由于制片技术不断改进，新技术、新方法的不断涌现，特别是液基细胞制片技术的出现，细胞学近几年有了翻天覆地的变化。目前除了传统细胞学，还出现了流式细胞学、穿刺细胞学、细胞免疫组织化学、细胞DNA倍体定量分析等新的诊断技术。,.,4,.,5,宫颈液基制片,.,6,什么是细胞DNA倍体定量分析系统？,它是由加拿大BC肿瘤实验室研发的能够准确测量细

2、胞核内DNA倍体含量的检测系统。是细胞学中一种新的诊断方法。它主要用于筛查早期癌及癌前病变。,.,7,DNA倍体定量分析原理,双链DNA缠绕成染色体,.,8,正常人细胞核内均有23对染色体，即二倍体。,.,9,细胞的癌变过程,DNA改变在前，细胞形态改变在后,液基和DNA都-,液基-，DNA+,液基和DNA都+,.,10,癌变细胞核内染色体数量发生异常改变DNA倍体5,.,11,*正常细胞(即DNA二倍体细胞，2C细胞)及肿瘤细胞在生长增 殖时,细胞核内DNA结构及含量都会发生变化。正常细胞增 殖周期DNA倍体的改变在2C-4C之间。*炎症也可以引起细胞DNA含量增加，但一般5C。*而肿瘤细胞

3、DNA含量常5C。*有些肿瘤DNA倍体不发生变化，仍然是二倍体，比如某些白血病和鼻咽癌，这些肿瘤用DNA倍体分析的方法检查不出来*我们发现乳腺小管癌也是阴性。,.,12,自动扫描,.,13,分析结果,.,14,生成报告,.,15,.,16,出现细胞DNA倍体异常情况 ：,肿 瘤 ：基因改变 病毒感染：DNA病毒整合 放疗和维生素B12缺乏,.,17,只要5C就是癌细胞吗？,显然不是，因为还有病毒感染，放疗等也可以有5C的细胞。排除以上干扰因素，只有5C的细胞在两个以上才考虑肿瘤。研究认为排除干扰因素，9C的细胞，就可以认为是癌细胞,.,18,小结,少量5C的细胞（12个），不能肯定是肿瘤，需要

4、观察，并定期复查。排除干扰因素，只要有9C的细胞，就要考虑癌。阴性不能完全排除癌（有少数二倍体肿瘤）。,.,19,常规细胞学与细胞DNA定量分析敏感性和特异性的比较,敏感性：DNA液基,特异性：液基DNA,两者结合效果更佳,.,20,细胞学筛查制片技术诊断敏感性比较,.,21,DNA定量分析在癌症普查中的优势,.,22,细胞DNA定量分析应用范围,表面刮取标本涂片：例如阴道、宫颈、口腔、肛管、鼻咽部、眼结膜、体表病灶溃疡面等处。分泌物或排泄物涂片：例如痰液、尿液、前列腺液、肛肠脓血排泄物、肿瘤之漏管分泌物、乳头溢液等。体表、体部和体腔内和液体或肿瘤实体的针吸穿刺检查：例如胸腔、腹腔、四肢、躯干

5、、肺、肝脾、肾等器官。内镜直视下的刷片和组织印片：例如食管、胃、支气管、泌尿道、结肠、直肠等。,.,23,其他应用,肿瘤预后：已经确诊的恶性肿瘤，可以用DNA倍体分析来判断肿瘤的预后。二倍体肿瘤的预后要好于非整倍体肿瘤。肿瘤恶性程度判断：非整倍体肿瘤恶性程度高,.,24,DNA倍体分析系统的优点总结,电脑全自动扫描，自动对焦，准确识别每一个细胞，不容易遗漏。每一个视野、每一个细胞都有详细记录，每个细胞都标有DNA含量数值。每个细胞都能准确定位，方便进行人工复查。每个细胞都有78个特征值，全面而精确。比传统细胞学发现癌或癌前病变更早。,.,25,DNA倍体分析系统的缺点总结,1、无法观察整个细胞

6、的形态，所以不能区分肿瘤的具体类型。2、无法识别真菌、滴虫、细菌、病毒等致病微生物。3、有些二倍体肿瘤检测不出来，所以阴性不能完全排除肿瘤。4、容易受病毒、放疗等干扰。,.,26,筛查癌细胞的黄金组合,液基细胞+DNA倍体定量分析,.,27,正常,.,28,我院病例,.,29,.,30,.,31,.,32,.,33,.,34,.,35,.,36,.,37,当宫颈液基细胞学诊断为ASCUS时，DNA倍体分析就能很好的区分是反应性的还是肿瘤性的。从而给临床医生的下一步处理提供了依据。,.,38,细胞DNA和HPV病毒DNA检查,前者是检测人体细胞核内的DNA含量的后者是检测HPV病毒的细胞DNA阳

7、性，并且液基发现Hsil提示肿瘤存在，需要临床干预高危型HPV DNA+，也只能说明病毒感染，大部分能自我清除，不发展成宫颈癌，只有少数持续感染者才能发展成癌所以高危型HPV DNA+，不能盲目处理，要结合液基细胞的情况酌情处理。,.,39,.,40,宫颈管腺癌,.,41,.,42,.,43,.,44,.,45,.,46,.,47,下面是一些网上的病例,.,48,浆膜腔积液A007腹水,.,49,肺部组织印片 136297KY015肺癌,.,50,甲状腺组织印片294374KY016甲状腺乳头状癌,.,51,乳腺组织印片362528KY018乳腺小叶癌,.,52,拇指肿物印片136369KY019恶黑,.,53,刮宫组织印片KY051,.,54,尿A108364666赵寿年常规：可见成团肿瘤细胞,.,55,睾丸肿瘤组织印片病理：腺瘤样瘤,.,56,Thank you！,/10/29,.,57,