HPV分型检测的介绍课件.ppt
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1、HPV的分型检测及相关介绍,1,t课件,内容,宫颈癌与HPV,HPV分型检测的意义,HPV检测相关产品介绍,2,t课件,一、宫颈癌与HPV,3,t课件,1.1 宫颈癌的概况,宫颈癌是目前威胁女性健康的主要疾病,在全世界范围内也是导致女性死亡的第二大癌症。 世界上每2分钟就有一位妇女死于宫颈癌。我国宫颈癌两率很高,属于最严重的肿瘤之一。(每年有15万新发病例,每年约有10万名妇女死于宫颈癌)。发病年龄一般在4060岁。与公共卫生状况直接相关。,4,t课件,上世纪70年代末,Harald zur Hausen首先提出人乳头瘤病毒(HPV)可能是宫颈癌的致癌病毒;,1.2 宫颈癌与HPV的研究历程,
2、1977年,Laverty在电镜中观察到宫颈癌活检组织中存在人乳头瘤病毒颗粒;,1989年左右,Keerti Shah等发现99.7%的宫颈癌与HPV感染有关,证实了宫颈癌与HPV感染有直接关系;,HPV的感染使宫颈癌的相对危险性增加250倍,5,t课件,1995年 国际癌症研究机构 (IARC)专题讨论会通过: HPV感染是宫颈癌的主要原因;,2005年 IARC/WHO推荐HPV检测可以用于宫颈癌筛查;,6,t课件,2008年10月6日公布Harald zur Hausen获诺贝尔生理学或医学奖。 哈拉尔德楚尔豪森,7,t课件,1.3 宫颈癌的致病因素,主要致病因素:高危型HPV的持续感染
3、,8,t课件,性接触传播: 丈夫阴茎HPV的存在可使妻子宫颈受染的危险增加9倍;相同的HPV型别可以在性伴侣中检出;与此相反,处女通常是检测不到HPV感染。 非性直接接触感染:通过接触病变部位及病人分泌物感染; 间接接触:通过病人的衣物和用品感染; 母婴传播:在分娩过程中通过产道直接接触传播,还可以通过血液、羊水及胎盘传播,或者可能通过婴儿出生后与携带HPV的母亲密切接触传染。,1.4 HPV的传播途径,9,t课件,高危人群,性行为:过早、过频、多性伴月经及分娩因素:经期卫生不良,经期延长,早婚、早育,多产、密产等 性传播疾病导致的宫颈炎症对宫颈的长期刺激; 吸烟:摄入尼古丁降低机体的免疫力,
4、影响对HPV感染的清除,导致宫颈癌特别是鳞癌的风险增加; 长期服用口服避孕药:服用口服避孕药8年以上宫颈癌特别是腺癌的风险增加两倍 免疫缺陷与抑制:HIV感染导致免疫缺陷和器官移植术后长期服用免疫抑制药物导致宫颈癌的发生率升高 其它病毒感染:疱疹病毒II型(HSV-II)与宫颈癌病因的联系不能排除。,10,t课件,HPV感染潜伏期与发病期,低危型HPV感染平均持续时间是4.8个月高危型HPV感染平均持续时间是8个月HPV感染的最常见的结局是没有明显的临床表现,绝大部分会被机体免疫力自动清除只有持续的高危型的HPV感染才会发生癌前病变或宫颈癌。一般平均8-24月可发生轻度、中度和重度的宫颈癌前病
5、变(CIN1、CIN2和CIN3);再平均5-10年才可发生浸润癌,只要早查早治,是完全可以避免死于宫颈癌的。,唯一病因明确唯一可以早期预防和治疗唯一可以彻底根除的癌症,11,t课件,1.5 HPV病毒学知识,小环状双链DNA病毒,约8Kb颗粒直径为5055nm,无包膜由72个病毒壳粒包被在自然界中稳定性好,广泛分布较高的种依赖性嗜上皮性,在基底层细胞中潜伏在鳞状上皮细胞中复制、转录和翻译、增殖,HPV(human papillomavirus)是一组病毒的总称,12,t课件,早期区(early region, E) 含有E1、E2、E4、E5、E6、E7共6 个基因,是维持病毒复制、编码病毒
6、蛋白、维持细胞内病毒的高拷贝数的基因晚期区(late region, L) 长控制区(long control region, LCR),13,t课件,HPV16,L1: 主要衣壳蛋白,是疫苗研发的主要成分,L2: 次要衣壳蛋白,是抗体的主要识别位点,E4:结合并破坏中表层细胞角蛋白网,形成中表层细胞的挖空外观,HPV 的主要致癌基因 E6 通过抑制p53而阻断凋亡 E7 通过抑制pRB使细胞周期失控,53 是一种核蛋白,负向调节细胞的生长和分化。p53的降解失活阻碍了细胞对DNA损伤的反应,由此导致细胞遗传学性状改变的积累,进而产生恶变的基因型。,RB是重要的抑癌基因,直接参与细胞周期的调控
7、。pRB功能失效,改变了细胞生长周期的调控机制,使细胞永生化,并对恶性病变的防御机制进一步影响。,14,t课件,1.6 HPV的侵入、复制和释放,侵入:病毒 微创口 皮肤黏膜表层 感染 (副)基底层细胞 附加体形式 在宿主细胞核内复制复制:依赖于上皮细胞的分化,在基底层上层细胞中开始复制释放:在表皮细胞中完成装配并释放完整病毒颗粒。当表皮细胞脱落时,在皮肤表 面可发现病毒颗粒。,15,t课件,1.7 宫颈组织与宫颈组织病变,16,t课件,轻度不典型增生(CIN):,中度不典型增生(CIN ),重度不典型增生(CIN ),CIN(宫颈上皮内瘤变):是一组病变的统称,包括宫颈不典型增生和原位癌,为
8、宫颈浸润癌的癌前期病变。通常将CIN分为3级,以轻/中/重级不典型增生来区分,17,t课件,18,t课件,19,t课件,1.8 HPV感染引起的疾病,HPV,感染例数,总病,例数,宫颈,咽,肛门,口腔,喉,外阴,阴茎,每年病例数,0,100,000,2,00,000,3,00,000,4,00,000,5,00,000,20,t课件,21,t课件,22,t课件,二、HPV分型检测的意义及应用,23,t课件,2.1 乳头瘤病毒的分类依据,主要以病毒基因组中L1区的DNA同源性作为分类依据:属:病毒全基因组DNA同源性23%43%;同时病毒基因 组L1区DNA同源性在60%以下;种:病毒基因组L1
9、区DNA同源性介于60%70%;型:病毒基因组L1区DNA同源性介于71%89%;亚型及变异株:L1区DNA同源性在90%100%。,24,t课件,HPV的型别,目前已发现超过200种型别的人乳头瘤病毒(HPV)。依据与生殖道肿瘤相关性,将HPV分为: 低危型 常引起外生殖道湿疣等良性病变;6、11、42、43、44等。 高危型 与子宫颈癌及子宫颈上皮内瘤变(CIN2/3)的发生相关;16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68等。中国人常见型别:53、66、CP8304,25,t课件,2.2 HPV分型检测的意义(1)预测受检者发病的风险度,确定筛查间隔,女性
10、感染HPV16或18型患宫颈癌及癌前病变的风险,26,t课件,对丹麦哥本哈根11088名登记在册的妇女进行了为期数年的跟踪随访研究,对受检人群进行了宫颈细胞涂片检查、HPV检测和组织病理检查。 该研究中假定连续两次HPV检测阴性的危险系数为1.0,各种持续感染情况的危险系数是其与1.0的比值。,Susanne K Kjaer,et al. Type specific persistence of high risk human papillomavirus (HPV) as indicator of high grade cervical squamous intraepithelial le
11、sions in young women:population based prospective follow up study. BMJ VOLUME 325 14 SEPTEMBER 2002,(2)区分持续(重复)感染与一过性感染,27,t课件,HPV持续感染的危险性评定,28,t课件,对巴西1611名妇女在4个月间隔2次检测HPV,HPV16、18持续阳性致HSIL风险性大于其他高危型HPV持续阳性。(Nicolas F. Schlecht, et.al. JAMA. 2001; 286(24): 3106-3114. ),宫颈癌的必要条件,高危型的HPV感染,HPV持续感染,29,
12、t课件,(3)区分单一感染和多重感染,早期的文献报道,HPV的多重感染与宫颈癌直接相关。现在越来越多的报道发现,HPV的多重感染与宫颈癌之间,不存在显著性的关系。例如:一个病人的HPV检测结果是18、51的多重感染,但随访后18型被免疫清除了,只有51型,由于51型的风险低,那么继续随访并给予相应的干预即可。如果采用定量的方法,两次结果的载量都很高,没有型别的辅助,很容易就会判读为高危亚型持续感染而给予过度的治疗。,30,t课件,(4)针对不同型别的感染采取不同的处理方案,据统计约有70%以上的生育年龄的妇女都曾有HPV感染90%以上妇女能自动清除HPV感染宫颈癌是一种常见感染的罕见结局相同细
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