药物中特殊杂质的检查方法课件.ppt

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1、沧州医学高等专科学校药学系吴爽,药物的特殊杂质检查方法,特殊杂质检查,特殊杂质 指在该药物的生产或贮存过程中，根据药物的性质、生产方法和工艺条件，有可能引入的杂质。 阿司匹林水杨酸盐酸普鲁卡因对氨基苯甲酸,特殊杂质检查,检查方法：一、利用药物和杂质在物理性质上的差异二、利用药物和杂质在化学性质上的差异三、利用药物和杂质在色谱行为上的差异,（一）臭味及挥发性质的差异 例如：间苯二酚中苯酚检查：本品0.25g，缓缓加热不得有苯酚臭。浓过氧化氢中不挥发性杂质检查：10ml水浴蒸干残渣15mg。（二）颜色差异 例如：磺胺嘧啶中有色偶氮苯化合物的检查：取本品2.0g，加NaOH试液10ml，加水25ml

2、，与黄色3号比色液比，不得更深。,一、利用药物和杂质在物理性质上的差异,（三）溶解行为的差异 例如：葡萄糖中糊精检查：乙醇溶液应澄清。 （四）旋光性质的差异 例如：硫酸阿托品中莨菪碱的检查：本品溶液(50mg/ml)-0.40度。,一、利用药物和杂质在物理性质上的差异,（五）对光吸收性质的差异 1. 紫外分光光度法,当杂质在某一波长处有最大吸收，而药物在此无吸收时，可以通过控制供试品溶液在此波长处的吸收度来控制杂质的量。,一、利用药物和杂质在物理性质上的差异,例: 肾上腺素中肾上腺酮的检查,肾上腺素的盐酸溶液（2mg/ml）在310nm处的吸光度不得过0.05。已知酮体在该波长处的吸收系数为4

3、53，计算出酮体的限量。,有的杂质紫外吸收光谱与药物的紫外吸收光谱重叠，但可以通过控制供试品溶液的吸收度比值来控制杂质的量。 如：苯丙醇中苯丙酮的检查，苯丙醇溶液测定吸收度比值A247nm/A258nm不得大于0.79。,（五）对光吸收性质的差异 1. 紫外分光光度法,2. 原子吸收分光光度法 是通过测定药物中所含待测元素原子蒸气，吸收发自光源的该元素特定波长的程度，以求出药物中待测元素的含量。限量检查时：对照品液 = 供试品 + 限量-a 供试品液 = -b 符合规定时 b (a-b); b (a-b)不合格。,（五）对光吸收性质的差异,3. 红外分光光度法 主要用于药物中无效或低效晶型检查

4、，如甲苯咪唑中A晶型检查,（五）对光吸收性质的差异,A 晶型 C 晶型 在640cm-1 有强吸收 吸收很弱 在662cm-1 吸收很弱 有强吸收 662cm-1 640cm-1 662cm-1 640cm-1 供试品+10%A晶型 D2 D1 供试品 D2 D1 10% R = D1/D2 R = D1/D2,（五）对光吸收性质的差异3. 红外分光光度法,4.荧光分析法 利用物质的激发和发射光谱，对物质进行分析。 药物无荧光，特殊杂质有荧光，可将供试品置紫外灯下检视，不得显明显的荧光。利血平中氧化产物检查： 3,4-二去氢利血平利血平(无荧光) (I)(黄绿色荧光) 3,4,5,6-四去氢利

5、血平 (II)(蓝色荧光),（五）对光吸收性质的差异,二、利用药物和杂质在化学性上的差异,（一）酸碱性的差异 利用杂质的酸、碱性。规定消耗滴定液的体积、规定PH值范围、指示剂法。 例如：乙琥胺中2-甲基-2-乙基丁二酸检查：0.01g/ml pH3.04.5。 例如：苯巴比妥中苯基丙二酰脲检查：其水溶液不得使甲基橙显红色。,（二）氧化还原性的差异 利用药物与杂质之间的氧化还原性的差异进行 检查。,再如：盐酸吗啡中阿朴吗啡的检查：后者可被碘氧化生成水溶性绿色化合物。 因此ChP规定：本品 50mg+4mlH2O+1dI2 +5ml乙醚 乙醚层不得显红色；水层不得显绿色。,二、利用药物和杂质在化学

6、性上的差异,（三）杂质与一定试剂反应产生沉淀：如氯化钠中 钡盐的检查。（四）杂质与一定试剂反应产生颜色：阿司匹林中 游离水杨酸的测定。（五）杂质与一定试剂反应产生气体：盐酸乙基吗 啡中铵盐检查。,二、利用药物和杂质在化学性上的差异,（六）药物经有机破坏后检查杂质 含环状结构的有机药物中磷、硫、卤素及硒等杂质；不溶药物等。需进行有机破坏后检查，各国药典所采用的方法为氧瓶燃烧法。,二、利用药物和杂质在化学性上的差异,例如： 有机氟药物 F- + 茜素氟蓝+ 硝酸亚铈 紫色配位化合物（610nm）,O,pH4.3,返 回,（六）药物经有机破坏后检查杂质,二、利用药物和杂质在化学性上的差异,（一）薄层

7、色谱法（二）纸色谱法（三）高效液相色谱法（四）气相色谱法,三、利用药物和杂质在色谱行为上的差异,（一）薄层色谱法,根据药物与杂质对吸附剂的吸附或对展开剂的解析能力不同（Rf值的差异），加以分离和检查。本法灵敏、简便、快速；不需特殊的设备、费用低；分离和鉴别同步进行。,（1）杂质对照品法,适用于已知杂质并能制备杂质对照品的情况。要求供试品中所检杂质斑点的大小与颜色，不得超过相应杂质的对照斑点。 方法：根据限量，取供试品溶液和限度量的杂质对照品溶液，分别点样于同一薄层板上，展开、定位、检查。,（一）薄层色谱法,供试品 杂质对照品,（2）供试品自身对照法,适用于杂质的结构不能确定，或无杂质对照品的情

8、况。 方法：将供试品溶液按限量要求稀释至一定浓度作为对照溶液，与供试品溶液分别点加于同一薄层板上，展开、定位、检查。供试品溶液所显杂质斑点不得深于对照溶液所显示斑点颜色。,（一）薄层色谱法,对照液(稀释液),供试品液,（3）对照药物法,当无适合的杂质对照品，尤其是供试品显示的杂质斑点颜色与主成分斑点颜色有差异，难以判断限量时，可用与供试品相同的药物作为对照品，此对照物中所含待检杂质需符合限量要求，且稳定性好。,（一）薄层色谱法,供试品 符合要求药物,2、灵敏度法,少数药物还利用试验条件下显色剂对杂质的检测限来控制其限量。 盐酸阿米替林，一定浓度点样于硅胶G薄层板上，以氯仿：甲苯展开，喷甲醛-硫

9、酸显色，紫外灯下检视，除主斑点外，不得显其他斑点。,（一）薄层色谱法,（二）纸色谱法 用于极性较大物质的分离、分析。有时也用于检查放射性药物注射液中的放射化学杂质。,（三）高效液相色谱法(HPLC),分离效能高，专属性强和检测灵敏度高，根据供试品和杂质对照品保留时间相同测定各杂质峰面积。1）峰面积归一化法（粗略测量杂质的含量）2）不加校正因子的主成分自身对照法（无杂质对照品）3）加校正因子的内标法（有杂质对照品）4）外标法（有杂质对照品）,高效液相色谱法工作流程,峰面积归一化法：杂质峰占所有峰总面积中比例不超过一定数值来限量。杂质含量=（杂质峰面积/总峰面积） 100%,样品,流动相,（6mg

10、/ml）,溶液,取10l,记录图谱,进样,规定 杂质峰面积总和/总峰面积20%合格,例：中国药典阿司帕坦中有关物质的检查,不加校正因子的主成分自身对照法：无杂质对照品，以供试品稀溶液为对照溶液，比较杂质峰与对照液中主峰面积。,例：中国药典中吉非罗齐的有关杂质检查：,供试品,流动相,（10mg/ml）,待测液,对照液,色图谱(1),进样,规定 所有杂质峰的面积和不得大于对照液主峰的面积,取5l,精密定量,（0.2mg/ml）,内标法加校正因子：,AR：待测物对照品峰面积 AS：内标峰面积CR：待测物对照品浓度 CS：内标浓度,第一步：先用待测物对照品（已知CR）和内标（已知CS）混样进入仪器，求出,杂质对照品峰,内标物峰,6min 8min,第二步：再用待测物（未知CX）和内标（已知CS）混样进入仪器代入上公式：,内标物峰,杂质峰,4min 6min 8min,外标法：,待测物 称量 配成溶液 注入仪器 色谱图 AX,精密,对照品 称量 配成溶液(CR) 注入仪器 色谱图 AR,精密,（四）气相色谱法(GC) 主要用于药物中挥发性的杂质检查（如药物中残留溶剂、农药残留量等），其检查方法与HPLC法相同。,