紫外分光光度计使用ppt课件.ppt

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1、,紫外分光光度计使用,2013年8月18日,uv-2450紫外可见分光光度计使用一 光谱测定1 打开紫外分光光度计开关，预热30分钟2 打开计算机电源，进入windows主画面，双击UV Probe图标3 点击光度计键中的“连接”，当初始化完成后，“连接”键将显示为“开始”4 选择窗口-光谱，打开光谱模块5 点击光度计键条的“基线”，启动基线校正操作，当基线参数对话框弹出时，在开始波长和结束波长中分别输入700和3006 点击“确定”，注意在基线校正过程中光度计状态窗口的读数变化7 点击方法图标显示光谱方法对话框，设置波长范围，在开始框和结束框中分别输入360和220，在扫描速度列表框中选择“

2、中”,8 在采样间隔目录中选择1.0，扫描方式下选择“单个”9 点击仪器参数标签，在测定方式目录中选择“吸收”10 点击“确定”，将参数传给仪器。在分光光度计中放入待测样品及空白液，点击仪器条中“开始”启动扫描11 扫描完成后，点击“确定”，光谱分析结果二光度测定 1 选择窗口-光度测定，打开光度测定模块，确定仪器已连接，进行基线校正2 选择编辑-方法，打开“光度测定方法”对话框3 点击“波长类型”，选择“点”，在波长输入框内，输入“340”并单击“加入”4 点击校正标签，点击“类型，选择“多点”。点击“仪器参数”标签，在“狭缝宽”下选择“2.0”“测定方式”下选择“吸光值”，关闭对话框5 在

3、样品室中放入比色器，观察比色器是否配对 ，点击自动调零，点击“到波长”在弹出对话框中输入所需波长,6 点击标准表的任何位置激活标准表，在表中样品ID处输入对应的样品标示符，浓度处输入浓度值7 在样品室中放入样品，在标准样品测定时激活标准表，点击“读取std”。在未知样品测定时激活样品表，点击“读取unk”，仪器将读取每个数据8 测定完毕后取出比色器，关闭所显示窗口，返回windous主画面，关闭电脑、紫外光度计电源。入相关内容,722型光栅分光光度计使用,1 接通电源开关，将灵敏度旋钮调置“1”档（放大倍率最小），选择开关置于“T”，波长调置试用波长，仪器预热20分钟2 打开试样室盖（光门自动

4、关闭），调节“0”旋钮，使数字显示为“0.00”，盖上试样室盖，将比色器架处于校正位置，使光电管受光，调节透过率“100%”旋钮，使数字显示为“100.0”3 如果显示不到“100.0”，则可适当增加微电流放大器的倍率档数，但尽可能倍率置低档使用，这样仪器将有更高的稳定性，但改变倍率后必须按上面2步重新校正“0”和“100%”4 按2步连续几次调整“0”和“100%”，仪器即可进行测定工作5 吸光度A的测定按2步调整仪器后，将选择开关从“T”调置“A”，调节吸光度调零旋钮，使得数字显示为“0.00”，然后将被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度的值,6 浓度C的测定，选择开关由“A”调置

5、“C”，将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路，即可读出被测样品的浓度值7 如果大幅度改变测试波长时，在调整“0”和“100%”后稍等片刻（因光能变化急剧，光电管受光后响应缓慢，需一段光响应平衡时间），当稳定后，重新调整“0”和“100%”，即可工作8 测定完毕，关闭电源，清洗比色器，登记仪器使用情况,UV-2102型紫外可见分光光度计,1 连接仪器电源线，确保仪器供电电源有良好的接地性能2 让仪器预热20分钟，若要实现精确测试或安全性能检查，请再执行一次自动校正功能，在仪器和电脑非连接状态时，按“方式”5秒左右，待显示器显示“SELFTESTING

6、FILTER”后松手，至仪器自动校正后，显示器显示“546.0nm 0.000A”即可进行测试3 用“方式”键设置设置测试方式，透射比（T），吸光度（A）4 用“设置”键和（）键或（）键设置所需分析波长5 根据设置的分析波长选择正确的光源。光源的切换位置在340nm处。正常开启后，钨灯和氘灯同时点亮，当分析波长在340nm-1000nm时应选择钨灯。6 将参比样品和被测样品溶液分别倒入比色器中，打开样品室盖，将盛有溶液的比色器分别插入比色器槽中，盖上样品室盖,7 将参比样品推（拉）入光路，按“OABS/100%”键调OABS/100%。此时显示器显示“BLANKING”值至显示“100.0%”

7、或“0.000A”为止8 当仪器显示器显示出“100.0%”或“0.000A”后，将被测样品推（拉）入光路，这时可从显示器上得到被测样品的测试参数。根据设置方式，可以得到样品的投射比或吸光度参数。,常识（一）光源光源的作用是提供辐射连续复合光可见光区 钨灯 320-2500nm 优点：发射强度大、使用寿命长紫外光区 氢灯或氘灯 180-375nm 氘灯的发射强度比氢灯大4倍 玻璃对这一波长有强吸收，必须用石英比色器。（二）溶剂对紫外光谱的影响 溶剂效应1 溶剂极性对紫外光谱的影响。溶剂极性的强弱会影响紫外吸收峰的波长、强度和形状，对于不同的化合物，其影响的程度也各不相同。通常增加溶剂极性，可使化合物的 * 跃迁吸收峰红移、 n * 跃迁的吸收峰蓝移。,2 溶剂对光谱形状的影响。有的化合物（如苯酚）在低压气态下或在非极性溶剂中测定时，其光谱中有精细结构小峰出现，为相应的转动和振动能级跃迁所产生。但是在极性溶剂中，分子的转动、振动受阻，精细结构小峰减弱或消失，使其吸收光谱形状发生变化3 溶剂pH对紫外光谱的影响。在测定酸性或碱性化合物时，溶剂的pH对其吸收光谱有明显的影响。4 溶剂温度对紫外光谱的影响影响紫外光谱的其他因素紫外光谱测量常用溶剂见表4-1。表中的极限波长，是指溶剂在大于此波长时是透明的，而在小于此波长时则会产生明显吸收。,表4-1 紫外光谱测量常用的溶剂,